血卟啉光动力学疗法治疗光化性角化病的疗效及安全性

目的研究血卟啉光动力学疗法治疗光化性角化病的疗效及安全性。方法择取2020年10月至2022年10月在本院就诊的40例光化性角化病患者,随机分组,对照组纳入实施常规治疗的20例患者,观察组则纳入施以血卟啉光动力学疗法治疗的20例患者。将两组的治疗效果进行比对。结果观察组的疾病总缓解率高于对照组,复发率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);不良反应发生率组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论对光化性角化病患者实施血卟啉光动力学疗法安全有效,还可降低复发率。

血卟啉衍生物在3种肺癌细胞系中的细胞摄取和定位

目的以支气管上皮BEAS-2B细胞系为对照,比较不同肺癌细胞系(肺腺癌A549、肺鳞癌H520、肺小细胞癌H446细胞)之间血卟啉衍生物(HPD)的细胞摄取和定位差异。方法用不同浓度HPD测得的荧光值绘制HPD荧光值的标准曲线。将4种细胞分别与HPD孵育不同时间后,用多功能酶标仪检测荧光强度。进一步用流式细胞仪量化细胞摄取,比较4种细胞HPD摄取差异。用激光扫描共聚焦显微镜观察比较细胞内HPD摄取和分布情况。结果4种细胞系摄取HPD随着时间增加而增加,但HPD的累积速率有所差异。5 mg/L的HPD孵育细胞24、48 h,4种细胞内平均荧光强度差异有统计学意义(F=199.00、71.15,P<0.001),其中A549细胞内平均荧光强度显著高于H446、BEAS-2B、H520细胞,H446和BEAS-2B细胞内平均荧光强度显著高于H520细胞(P<0.05)。15 mg/L的HPD孵育细胞48 h,4种细胞内呈现出强度不等的红色荧光信号,均呈点状分布于细胞质内。结论不同类型肺癌细胞系摄取HPD存在差异,其中肺腺癌A549细胞摄取HPD的能力最强,支气管上皮BEAS-2B细胞与肺小细胞癌H446细胞次之,肺鳞癌H520细胞摄取能力最弱;HPD细胞内定位均位于细胞质内,呈点状分布。

非肌层浸润性膀胱癌卡介苗治疗复发后增加膀胱内血卟啉灌注光动力治疗预防复发的初步研究结果

目的探索非肌层浸润性膀胱癌(NMIBC)卡介苗(BCG)灌注治疗复发后增加血卟啉膀胱内灌注光动力治疗预防复发的有效性及安全性。方法回顾性分析2016年8月至2021年9月北京市朝阳区桓兴肿瘤医院和中国医院科学院肿瘤医院深圳医院共19例NMIBC行BCG灌注治疗复发且拒绝膀胱全切的患者,其中T1N0M010例,TaN0M08例,T1N0M0/Tis 1例,高级别尿路上皮癌13例,高级别尿路上皮癌合并原位癌1例,低级别尿路上皮癌5例。所有患者先行经尿道膀胱肿瘤切除(TURBT),术后即刻或4周后予以光敏剂血卟啉50 mg+30 ml生理盐水膀胱内灌注并保留60~120 min,再行膀胱内光动力治疗,光照剂量为20 J/cm^(2);TURBT术后2~4周恢复BCG灌注治疗,每3个月复查膀胱镜、CT/MRI和尿细胞学,主要观察指标为1年无复发生存率、1年膀胱保留率和无复发生存时间。结果13例患者无复发状态接受1次光动力治疗,6例无复发状态接受2次治疗。患者的中位随访时间为26.0个月(14.3~77.6个月),共出现5例复发,其中2例患者出现膀胱癌进展转移,1例膀胱癌特异性死亡;1年内无复发生存率为78.9%。1年内膀胱保留率94.7%;中位无复发生存时间(RFS)17个月。在无复发状态连续光动力治疗2次组6个月和12个月无复发生存率均为100%,高于无复发状态单次光动力治疗组6个月(76.9%)和12个月(61.5%)无复发生存率(均P<0.03)。光动力治疗后5例患者出现尿路不适症状(26.3%),主要表现为尿痛、尿频,对症治疗后均缓解,无严重膀胱痉挛及全身光过敏反应发生。结论对BCG灌注治疗失败的NMIBC患者,采用膀胱内灌注血卟啉灌注光动力疗法联合BCG灌注治疗初步显示较好的疗效和安全性,值得进一步研究。

咪喹莫特联合血卟啉光动力治疗光化性角化病的临床效果

目的:探讨光化性角化病患者采用咪喹莫特联合血卟啉光动力治疗的临床效果。方法:按照随机数字表法将2020年10月—2022年10月宜春市人民医院收治的60例光化性角化病患者分为对照组与观察组,各30例。对照组采用咪喹莫特乳膏外涂,观察组采用咪喹莫特联合血卟啉光动力方法治疗。比较两组的临床效果,治疗前后的皮损面积、VISIA皮肤检测,治疗后的复发情况,以及治疗期间不良反应发生情况。结果:观察组患者临床总有效率为93.33%,显著高于对照组的73.33%(P<0.05)。与治疗前比较,治疗后两组患者皮损面积均缩小,且观察组显著小于对照组(P<0.05)。观察组患者复发率为0,显著低于对照组的30.00%(P<0.05)。与治疗前比较,治疗后两组患者VISIA皮肤检测各项指标均升高,且观察组均高于对照组(P<0.05)。两组患者不良反应总发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:咪喹莫特联合血卟啉光动力治疗光化性角化病效果确切,能改善皮损情况,降低患者复发风险,同时不增加不良反应发生。

血卟啉类化合物在肿瘤诊疗应用的研究进展

综述了近年来国内外关于血卟啉类化合物在肿瘤诊疗应用的研究进展,包括对肿瘤的诊断、光动力学治疗、声动力学治疗、放射治疗及其它治疗手段。

两亲性光敏剂血卟啉单甲醚在不同溶液体系中的存在状态

目的测定血卟啉单甲醚(HMME)在不同浓度、不同溶液体系中的存在状态,以分析其对HMME-光动力学疗法(PDT)的影响.方法按所用溶剂实验分为以下4种溶液体系:HMME-磷酸盐缓冲液(PBS)、HMME-二甲基亚砜(DMSO)、HMME-白蛋白缓冲液和HMME-细胞悬液,每种溶液配成2、4、8、10、20、40、60、80和100 μmol/L等9个浓度.首先分别测定其吸收光谱和荧光激发光谱,根据光谱形态特征定性分析HMME在前述9个浓度的4种溶液体系中的存在状态,然后对形成聚集体的溶液利用公式定量分析HMME的缔合数、聚集平衡常数及各浓度下的缔合度.结果通过光谱特征的定性分析发现,浓度为2～10 μmol/L时,HMME在DMSO、白蛋白缓冲液、PBS和细胞悬液中均以单体为主;浓度为20～100 μmol/L时,除DMSO溶液外在其他3种溶液中都有HMME聚集体出现.通过绘制浓度为20～100 μmol/L的HMME在PBS、白蛋白缓冲液和细胞悬液中的状态图,聚集数取2时,状态图线性关系较好,HMME在此3种溶液中形成二聚体.缔合度计算结果显示:浓度为20 μrmol/L的PBS、细胞悬液和白蛋白缓冲液中部分HMME分子开始形成聚集体,但整个溶液仍以单体为主(HMME单体百分数分别为92.3%、90.7%和95.5%);40～100 μmol/L溶液中HMME单体含量随浓度增加而减少,100μmol/L的PBS溶液和细胞悬液中70%～75%HMME为单体,近30%的HMME分子发生了聚集,而白蛋白缓冲液中83%的HMME为单体,20%的HMME分子发生了聚集.HMME在PBS和细胞悬液中的聚集平衡常数近似,而且大于在白蛋白缓冲液中的聚集平衡常数,说明HMME的聚集程度在PBS溶液和细胞悬液中比在白蛋白缓冲液中大.与疏水性血卟啉衍生物(HpD)比较结果显示,在PBS溶液中HMME在60 μmol/L开始出现明显聚集,而疏水性HpD在20μmol/L即开始出现明显聚集;定量比较各溶液体系中HpD的聚集平衡常数均明显大于HMME,且各浓度时的单体含量明显小于HMME,说明HMME在PBS、蛋白缓冲液和细胞悬液中的聚集趋势明显小于HpD.结论两亲性光敏剂HMME在PBS、蛋白缓冲液和细胞悬液中聚集性显著低于疏水性的HpD.浓度低于20μmol/L HMME在4种溶液中均以单体为主,HMME在40～100μmol/L的白蛋白缓冲液、PBS和细胞悬液中都有不同比例HMME分子发生聚集,且都形成二聚体.HMME在不同溶液中的聚集程度不同,按由难到易依次为:DMSO、白蛋白缓冲液、PBS≈细胞悬液.在常规给药条件下,HMME在体液中的存在形式以单体为主,但在高浓度给药时,部分HMME会聚合成聚集体,应注意聚集对HMME-PDT的影响.

N-甲基血卟啉化合物的合成及抗癌性质

合成一种Ｎ－甲基血卟啉，并通过紫外可见光谱、红外光谱和元素分析等手段进行表征．研究它在金属离子存在条件下甲基自由基的性质．经过细胞培养实验证明，该化合物对癌细胞有良好的杀伤作用．对白血病的抑制率可达６３％以上．

血卟啉及金属血卟啉对嘌呤衍生物识别作用的研究

采用紫外光谱法、荧光光谱法和核磁共振谱法研究了嘌呤与血卟啉及金属血卟啉的作用情况 ,并对影响因素 (酸度和离子强度等 )进行了试验。结果表明在 pH 11 2的Kolthoff缓冲溶液中 ,嘌呤有很强的荧光峰 ,且血卟啉及金属血卟啉对嘌呤有明显的识别作用 ,结合常数在 10 4～ 10 5,结合比均为 1∶1。金属血卟啉的结合常数 :KNi(Ⅱ ) HP>KCo(Ⅱ ) HP>KZn(Ⅱ ) HP>KCu(Ⅱ ) HP,同时对识别机理进行了讨论 。

血卟啉类化合物诊治肿瘤的研究进展及应用

综述了血卟啉类化合物在肿瘤诊断和治疗方面的研究进展。

血卟啉单甲醚光动力治疗

血卟啉单甲醚（hematoporphyrinmonomethyle—ther，HMME）是一种纯化的单体卟啉，其主要成分为相对疏水性卟啉，较第一代光敏剂血卟啉衍生物（hematoporphyrinderivative，HpD）具有成分单一、组成稳定、组织选择性好、易被血管内皮吸收、光漂白速率高及治疗后的避光时间短等显著优点．在临床上可用于肺癌、膀胱癌等肿瘤的诊断．以及鲜红斑痣、脑胶质瘤的治疗。

血卟啉衍生物光动力效应对体外培养人鼻咽癌细胞株的杀伤作用

目的:通过探讨血卟啉衍生物光动力学效应对人鼻咽癌细胞株CNE2的生物作用,为光动力治疗放、化疗效果较差的鼻咽癌提供理论依据。方法:实验于2005-10/2006-06在南方医科大学南方医院肿瘤生物治疗中心实验室完成。对体外培养的人鼻咽癌细胞株CNE2分为光处理和无光处理各8个实验组及各分别设对照组和空白对照组,实验组分别加入0.5,1.0,1.5,2.0,2.5,3.0,3.5,4.0mg/L血卟啉衍生物100μL,每组设7个复孔;孵育4h,对照组除不加光敏剂外其他与实验组相同,空白对照组只加培养基不加细胞和光敏剂。光处理实验组给予波长为630nm的半导体激光进行照射,照射的功率密度为20mW/cm2,照射能量密度分别为20,10,5,2J/cm2,继续孵育24h,用四唑盐(MTT)比色法测定细胞存活率。细胞存活率(%)=(实验组A值-空白对照组A值)/(对照组A值-空白对照组A值)×100%。每次实验重复3次,取平均值。结果:①血卟啉衍生物与CNE2细胞共同孵育后,采用630nm的半导体激光照射可对其产生杀伤作用,杀伤作用大小与血卟啉衍生物的浓度和激光剂量成正相关(P<0.01),但血卟啉衍生物浓度达2.5mg/L以上时杀伤细胞作用无显著增加。激光能量为20J/cm2,血卟啉衍生物的浓度为2.5mg/L时,其杀伤CNE2细胞的作用最明显。②在加入血卟啉衍生物而无激发光的情况下,血卟啉衍生物对鼻咽癌细胞生存不产生明显影响(P>0.05)。结论:血卟啉衍生物介导的光动力在体外可以对CNE2细胞产生杀伤效应,在一定范围内杀伤作用大小与血卟啉衍生物的浓度和激光剂量成正相关。

声化学激活血卟啉诱导艾氏腹水肿瘤细胞凋亡

本实验采用频率为 2 0MHz,声强分别为 1 0W/cm2 、 1 5W /cm2 、 2 0W /cm2 等不同参数 ,研究超声激活血卟啉对艾氏腹水肿瘤细胞的杀伤作用和诱导肿瘤细胞凋亡现象。通过扫描电镜、透射电镜以及荧光显微镜观察受损后细胞形态结构的变化 ,主要表现为细胞微绒毛的减少 ,胞膜结构和通透性的改变 ,细胞器的受损以及核物质的分解、丢失 ;同时发现处理后的肿瘤细胞有核物质凝集、趋边排列以及凋亡小体的形成等细胞凋亡特征。研究中首次发现声化学激活血卟啉在对艾氏腹水肿瘤细胞杀伤的同时 ,也能诱导艾氏腹水肿瘤细胞发生凋亡 。

光动力疗法治疗鲜红斑痣的基础研究——血啉甲醚与血卟啉衍生物吸收特性的比较

目的 观察新型光敏剂———血啉甲醚 (HMME)在鸡冠皮肤组织和血管内皮细胞 (EC)的吸收特点。方法 莱亨鸡 12只 ,分为HMME组和血卟啉衍生物 (HpD)组 ,每组 6只。分别静脉注射HMME或HpD10mg kg ,每隔 10min取血 2 5ml和鸡冠皮肤组织 2 5g。培养新生儿脐带EC ,培养液中加入HMME或HpD ,孵育浓度分别为 2 0、40、6 0、80和 10 0μg ml,孵育时间为即刻、15、30、6 0、12 0、180和 2 40min。采用荧光分析法测定光敏剂含量 ,并绘制EC吸收光敏剂的浓度—含量和时间—含量关系曲线。结果 静脉注射HMME或HpD后 ,其血清浓度的峰值出现在注射后 10min ,以后随时间迅速下降 ,二者的曲线形态基本一致。HMME在鸡冠组织中的含量于注射后 10min显著高于HpD(P <0 0 1) ,以后虽然下降速率较快 ,但在注射后 80min仍显著高于HpD(P <0 0 5 )。培养EC可迅速吸收HMME和HpD ,30min达峰值的 89%以上 ;其吸收量与孵育浓度呈线性关系 ,对HMME的吸收量显著高于HpD(P <0 0 1)。结论 HMME较HpD更容易被皮肤微血管EC摄取 。

血卟啉与人血清白蛋白结合作用特征的热力学研究

采用荧光光谱法和紫外-可见吸收光谱法研究了在模拟人体生理条件下不同温度时,血卟啉与人血清白蛋白结合反应的荧光猝灭光谱行为,根据Stern-Volmer方程和Lineweaver-Burk双倒数函数曲线计算了其结合常数在高温时要比低温时小;根据Fφster能量传递原理计算出结合位点r=4.36,并根据热力学参数确定了它们之间的作用力类型主要为氢键和VanderWaals力,HP进入了HSA的疏水腔。

载血卟啉PLGA微泡用于声动力治疗小鼠H22肝癌移植瘤

目的研究超声联合载血卟啉PLGA造影剂对小鼠H22肝癌皮下移植瘤的声动力治疗作用。方法自制载血卟啉高分子材料PLGA造影剂并检测其基本特性。选择30只荷H22肝癌皮下移植瘤小鼠,随机平均分为5组进行治疗,绘制治疗后15天内肿瘤体积生长曲线,比较其质量抑瘤率,并采用TUNEL和PCNA检测各组小鼠肿瘤细胞凋亡情况及增殖活性。结果自制的载血卟啉PLGA微泡造影剂平均粒径为602.3nm,分布均匀,包封率63.50%,载药量2.15%。治疗后,与其他各组比较,超声加载药微泡治疗组肿瘤生长曲线最平缓,质量抑瘤率及凋亡指数均显著高于其他4组(P<0.05),而增殖指数明显低于其他各组(P<0.05)。结论超声联合载血卟啉高分子纳米造影剂能够抑制小鼠H22肝癌移植瘤生长,促进其凋亡。

新型光敏剂——血卟啉单甲醚临床应用研究的初步报道

光动力治疗恶性肿瘤的研究已取得了令人信服的成果,光动力疗法已逐渐成为肿瘤治疗领域中的一种新的手段。然而,目前临床使用的光敏剂HpD和photofrinⅡ等都存在着肿瘤特异性摄入率不够高、持续较长时间的皮肤光毒反应,以及光敏剂本身为多种成分的混合物组成不稳定、含有相当比例对肿瘤无特异性摄入作用的成分、且有效成分结构不明确等不足。这对于深入研究肿瘤光动力治疗的作用机制和进一步发展商品成药带来很大困难,以致至今国内外所用的光敏剂仍处于临床研究阶段。针对上述情况。

血啉甲醚与血卟啉衍生物对鸡冠皮肤光敏损伤特点的比较研究

目的 采用形态学方法观察比较国产新型光敏剂———血啉甲醚 (HMME)与传统光敏剂———血卟啉衍生物 (HpD)对鸡冠表皮层、真皮乳头层毛细血管网、乳头下网状层和真皮深层组织的光敏损伤特点。方法 成年莱亨鸡 2 34只 ,随机分为对照组 42只 ,实验组 192只。实验组动物静脉注射HMME或HpD 1、5、10或 2 0mg/kg ,于给药后即刻、1、2、3或 4h对鸡冠进行激光照射 ,波长为 488 0和 5 14 5、5 10 6、5 78 2或 6 2 7 8nm ,功率密度为 5 0、10 0或 15 0mW/cm2 ,能量密度为 30、6 0、90、12 0、15 0、180或 2 70J/cm2 ,于照射后即刻、1、3、7、14和 2 8天取材 ,进行大体和光镜观察。结果 PDT作用区的红色鸡冠完全变白 ,乳头层毛细血管网内皮细胞 (EC)坏死、管壁破坏及血管数量减少 ,其作用程度与光敏剂给药量和激光照射量相关。HMME和HpD对乳头层毛细血管网的损伤程度相似 ;HMME组未见表皮及乳头下各层损伤 ,而部分HpD组见表皮基底细胞层有局灶性坏死、乳头下网状层有微血管及结缔组织损伤和淋巴细胞浸润。结论 HMME和HpD对鸡冠真皮乳头层毛细血管网的损伤程度相似 ,但HMME的组织选择性优于HpD。

超声激活血卟啉抗癌作用的实验研究

本文介绍了利用超声波激活血卟啉治疗癌肿瘤的设备、方法、离体及活体实验结果。实验表明，超声激活血卟啉具有明显的抗肿瘤作用。当血卟啉浓度为５０μｇ／ｍｌ时。用超声激活后，对Ｓ１８０细胞的杀伤率可达９５％以上，同样强度的超声作用相同时间后，对Ｓ１８０细胞的杀伤率只有３．６７％。含有血卟啉的肿瘤细胞经二次超声照射后，对Ｓ１８０实体肿瘤增长的抑制率可达５７．５２％。文中还给出了声参量与肿瘤细胞杀伤率之间的关系曲线，并用荧光分析仪对肿瘤细胞损伤作用进行了定量测定，给出了结果。

大肠早癌自体荧光检测系统研究 Ⅱ.大肠癌自体荧光物质——血卟啉研究

血卟啉为存在于肿瘤组织中的自体荧光物质,它在诱导组织自体荧光法诊断肿瘤中起着较为重要的作用。本研究通过对36例大肠癌患者的癌组织、癌旁与远癌组织中血卟啉含量采用化学抽提与荧光分析法进行定量分析,结果显示:血卟啉含量(ng/g组织)大肠癌组织(39.01±14.49)>癌旁组织(29.16±9.78)>远癌组织(23.16±9.04);而对于癌组织之间比较:大肠癌各病理类型之间血卟啉含量无明显差异,直肠癌与结肠癌组织之间也无显著差异。因此我们认为大肠癌组织能特异积聚内源性血卟啉,为自体荧光诊断大肠癌提供理论依据。