海岛地区建立HLA基因配合血小板供者库的意义

血小板输注无效(platelet transfusion refractori⁃ness,PTR)是临床较难解决的问题,免疫性PTR由人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)抗体、血小板同种抗原(human platelet allo antigen,HPA)抗体、ABO血型抗体、糖蛋白自身抗体等因素引起,其中HLA抗体为主要因素[1~3]。解决免疫性PTR的方法为供受者之间的血小板配型,包括血清学配型和基因配型[4,5]。基因配型是在前期建设一定库容量的血小板供者库后,对于每次的PTR患者输血,只需进行供受者之间虚拟电子配型.

HPA和HLA已知型的血小板供者库建立及应用

目的开展血小板同型或配合性输注是预防和治疗免疫性血小板输注无效(PTR)的良策。为此建立一定规模的HPA和HLA已知型血小板资料库,为临床提供匹配的单采血小板,是血小板输注安全有效的保障。方法对所有供者库单采血小板进行ABO、HLA-A、B及HPA1-6,15基因分型。根据ABO、HPA同型和HLA同型或HLA交叉反应组相同(CREG)配型策略,编制数据库软件,建立上海市单采血小板供者资料库。结果上海市血小板供者库至今已接受80人/次患者查询,共有78名患者找到合适的供者。HPA和HLA的CREG相同配合率为97.5%。其中50名患者接受了单采血小板的同型(或配合型)输注,47名输注有效(24 h血小板回收率>20%)。其中更有15名患者同型输注疗效明显,24 h回收率>80%。结论建立血小板供者HPA和HLAⅠ类抗原基因分型资料库,为患者提供HLA和HPA、ABO匹配的单采血小板,可以降低PTR的发生率,是解决免疫性PTR的根本手段。

郑州地区固定单采血小板捐献人群血小板供者库建立分析

目的建立郑州地区固定单采血小板捐献人群血小板供者库,并分析人类白细胞抗原(HLA)I类基因、人类血小板抗原(HPA)基因多态性特征。方法分析河南省郑州地区2014年1585名无偿固定单采血小板捐献者的人群分布情况,并对其中500名予以HLA I类基因、HPA基因的分型检测,建立血小板基因频率数据库和已知基因型供者库。结果1585名献血者中,男性(76.47%)、36~55岁(69.78%)、农民(34.01%)、捐献3~9次(78.87%)者占比较多,血型AB型(11.86%)者占比较少;HLA-A位点基因频率前5位为A*1101(16.6%)、A*0201(16.3%)、A*2402(16.3%)、A*3001(8.2%)、A*3303(8.0%);HLA-B位点前5位为B*1302(7.90%)、B*4001(7.4%)、B*5101(6.4%)、B*4601(6.2%)和B*0702(5.1%);HPA-4、7、8、9、10、11、12、13、14、16、17系统基因型呈单态性,只检测到a等位基因,其a/a基因频率为100%;HPA-1、2、3、5、6、15系统具有多态性,HPA-3与HPA-15杂合度(a/b杂合子基因型)最高,分别为57.00%和49.80%;HPA-1、2、5、6以a/a纯合子基因型为主,分别为99.2%,94.8%,98.4%,99.4%,无b/b纯合子基因型。结论郑州地区固定单采血小板捐献人群HLA-A、B等位基因与HPA1-17基因呈现区域性特征,构建HLA-A、B以及HPA1-17基因分型库,能够为患者提供这两种抗原相容或相合血小板资源,减少输注无效事件。

中国汉族人群HPA分型单采血小板供者库的建立模式与库容

本研究探讨建立中国汉族人群HPA分型单采血小板供者库的模式和合适的库容水平。研究方法为合并分析公开发表的中国16个省份的汉族血小板献血者人群人类血小板抗原(human platelet antigen,HPA)分布多态性群体调查数据。对HPA多态性群体调查数据进行Hardy-Weinberg平衡检验。结果表明,HPA-1、-4、-6、-10未检出bb纯合子,HPA-7—9,11—14、-16未检出b基因。HPA1-16系统相互独立存在于血小板表面。中国汉族人群中发现了648种HPA组合,其中42种频率高于0.001的组合的累积频率达0.9763,频率最高(0.2012)的组合为:HPA-(7-8-9-11-12-13-14-16)aa-(1-4-5-6-10)aa-2aa-3ab-15ab。HPA对偶抗原不配合概率高于0.1的系统有HPA-15、-3和-2,对偶抗原不配合概率介于0.01-0.1的系统有HPA-1、-5和-6。中国汉族人群供受者间随机输血HPA1-16系统对偶抗原全匹配概率为0.3195。根据库容(N)随频率(F)变化的曲线,推导得到在P=95%时的回归方程LogN=-0.4394×Ln(F)+0.4324。使用该公式推测综合频率(HPA和ABO的频率乘积)为0.005的库容至少需要为576.07人。结论:中国汉族人群HPA分型单采血小板供者库应采用单库容600名供者的区域多中心联合建库模式,它既能解决当地主要的HPA-15、3和2系统不配合造成的血小板输注无效(platelet transfusion refractoriness,PTR),还可以在遗传背景相近的区域有效地扩大建库规模以解决HPA低频抗原的不配合问题。在评估HPA分型血小板供者库容时不仅要考虑HPA的频率还同时要考虑ABO血型分布频率对库容的影响。

南昌地区血小板HLA/HPA供者库的建立及库容状况分析

目的建立南昌地区血小板供者库,通过收集已知人类血小板抗原(HPA)和人类白细胞抗原(HLA)基因型的供者信息进行数字配型,为输注无效患者提供匹配的血小板,并分析现有库容水平,根据需要进行调整和改进。方法研究南昌地区无偿献血者的HPA-(1~6、10、15、21)和HLA-A/B基因分型情况,采用多重荧光PCR方法对361名献血者进行基因分型,并计算基因频率和单体型频率。推导得出找到≥1例HLA/HPA基因型匹配供者的回归方程。结果经统计分析,南昌地区361名血小板供者资料库中,约有92%患者能够找到合适的HPA基因型全匹配供者,大约26%的患者可以找到≥1例相同HLA-A/B供者。此外,通过回归方程分析,得出库容水平与献血者数量、基因型匹配程度等因素有关,需要进一步扩大献血者招募和筛选范围,以降低建库成本并扩充库容。结论由于不同地区人群的HLA/HPA分布存在差异,需要根据实际情况和需求制定合适的血小板供者库建设方案和最佳库容。

陕西地区血小板供者基因数据库拓展性应用的研究

目的通过分析本地区无偿献血与造血干细胞捐献群体之间的共性和特性,挖掘包括血小板基因供者库在内的无偿献血者与造血干细胞捐献者资料库间的融合潜力,提高招募成功率和已知结果库存率。方法应用数据库建模和比对方法对本市近10年无偿献血者与中华骨髓库陕西分库造血干细胞捐献者之间的匹配度和融合度进行筛选分层,采用Arlequin 3.5.2.2软件计算HLA、HPA基因频率及单体型频率,并根据表型频率计算不同血小板供者后备库中找到HLA、HPA全匹配供者概率。结果在本地区已入库造血干细胞志愿捐献者中,依据其献血行为挖掘出的活跃献血者分别划分为血小板供者库后备一、二、三、四梯队,分别为696名、2752名、9092名和12028名捐献者。第一梯队具有10~50次血小板捐献经历和10~20次全血捐献经历的占比最高,分别为13.65%和26.01%;第二梯队具有10~20次全血捐献经历和10~50次血小板捐献经历者占比分别为15.04%和1.38%,与其他梯队献血特征有差异(P<0.05)。在现有血小板库+一二梯队的核心库容中(n=4955),患者找到至少1名HLA-A,B表型相同的供者的概率可达69.02%;当考虑到ABO和HPA同型时,找到至少1名HLA、HPA全相合且ABO同型供者概率(B型为例)为48.73%。结论西安地区全血捐献、单采血小板捐献和造血干细胞捐献这3类群体存在较大交叉分布性,与从头开始扩充库容相比,造血干细胞捐献者资料库中的活跃献血者是血小板供者库的后备有声力量,在扩大有效库容的同时能够最大限度降低建库成本和资源需求。

献血者血小板1-16抗原基因遗传多态性分析及已知HPA型供者数据库的建立

本研究的目的是分析人类血小板抗原(humanplateletantigen,HPA)基因多态性,根据分布频率来判断HPA抗原不配合比率以及抗体产生的机会,确定有临床意义的血小板抗原系统,并建立邯郸地区血小板基因频率数据库和供者库。采用SSPPCR方法对邯郸地区148名随机献血者进行HPA116抗原32个等位基因的检测分析,并与不同人群的分布频率进行比较。结果表明:每个样本均检测到HPA1a、2a、4a14a、16a基因;HPA4a、7a14a、16a呈现单态性,未检测出相应的等位基因HPAb;对于HPA1、2、5、6主要以a/a纯合子为多,a/a基因型频率分别是0.9595、0.8108、0.9865、0.9797,没有b/b纯合子出现。在HPA116中,具有最高杂合度的是HPA15,基因型HPA15a/15a、HPA15a/15b、HPA15b/15b频率分别是0.2230、0.5270、0.2500;HPA3在其次,基因型HPA3a/3a、HPA3a/3b、HPA3b/3b频率分别是0.3851、0.5135、0.1014。经χ2检验,结果符合HardyWeinberg遗传平衡定律。邯郸地区随机献血者HPA15系统基因频率与石家庄地区相似(P>0.05);与我国台湾人群进行HPA113、HPA15的比较,HPA1、2、6具有明显的不同(P<0.05),其它相似(P>0.05);与韩国人群进行HPA18的比较,除HPA3具有明显不同外(P<0.05),其余均相似(P>0.05);与美国黑人进行HPA15的比较,HPA1、2、5具有明显的差异(P<0.05);与英国人进行HPA111的比较,HPA1、5具有明显的不同(P<0.05)。结论:北方地区中国人群HPA2、3、5、15系统具有多态性,且HPA抗原分布不配合比率较高,这必然造成免疫暴露的机会增加,提示在临床上可能具有重要的免疫学意义。同时,在此次研究数据的基础上建立了邯郸地区血小板基因频率数据库和血小板已知型供者库。

岳阳地区无偿单采血小板捐献现状调查和血小板供者库扩容

目的调查岳阳地区无偿单采血小板捐献者的性别,职业,血型等分布情况,更好的动员和招募无偿单采血小板捐献者,及针对患者已产生HPA抗体发生的输注无效,为捐献者做HPA基因分型给患者提供配合型血小板输注。方法根据自愿无偿单采血小板捐献者填报的《无偿献血登记表》资料内容,通过海默科技NBSSS系统软件自动统计、分析捐献者性别、捐献量、采集次数、职业分布等。结果岳阳地区无偿机采捐献者中女性多于男性,血型分布情况O>A>B>AB,适合临床医院的需求,在职业分布中自由职业者比例最高,其次是其他职业和职员居多。结论加强男性单采血小板捐献者的招募,加强高校学生,公务员及医务人员单采血小板捐献者的招募,为了患者更安全、更有效输注的输注,扩大捐献者HPA基因分型,扩大本地区血小板供者库。

中国牡丹江地区献血人群HPA基因分布特征的研究及数据库的建立

本研究旨在探讨中国牡丹江地区献血人群HPA基因及其多态性分布特征,判断HPA抗原不配合比率,确定有临床意义的抗原系统,建立已知HPA基因型血小板献血者数据库。采用PCR-SSP方法对154名无血缘关系的献血者做HPA基因分型,计算基因频率与基因型频率,并与国内外不同人群进行比较。结果表明,154名健康、无血缘关系的献血者均表达出HPA-a基因中的1a-17a基因;仅表达HPA-b基因中的1b、2b、3b、5b、6b和15b,未表达HPA4b、7b-14b、16b和17b;在基因型中主要以aa纯合子表达为多,具有最高杂合度的为HPA15,其次为HPA3。HPA基因组合型有23种组合型,其中5种频率>10%,其余18种频率<8%,经χ2检验验证本地区HPA基因频率分布符合Hardy-Weinberg遗传定律。结论:本研究已确立牡丹江地区154人的HPA血型分布遗传特征,与其他地区和国家相比具有本地区人群特点,由此建立了牡丹江地区已知HPA基因型的血小板供者数据库,可为临床血小板输注无效者提供相匹配的供者,在临床上具有重要的免疫学意义。

乌鲁木齐地区无偿献血者HPA1~17基因多态性分析

目的分析乌鲁木齐地区献血者HPA1~17基因多态性。方法采用PCR-SSP方法对605名无血缘关系的无偿献血者进行HPA1~17系统基因分型,计算基因频率与基因型频率,并与不同人群进行比较分析。结果每份标本均表达出HPA-a基因的1a^17a基因;仅表达HPA-b基因中的1b^6b和15b;HPA7a^14a、16a、17a呈单态性;对于HPA-1、-2、-4、-5、-6主要以aa纯合子表达为多;在HPA1~17中,具有最高杂合度的是HPA-15,基因型HPA15a/15a、HPA15a/15b、HPA15b/15b频率分别是0.2760、0.5438、0.1802,其次是HPA-3,基因型HPA3a/3a、HPA3a/3b、HPA3b/3b频率分别是0.3471、0.4760、0.1769。经χ2检验,结果符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律。结论乌鲁木齐地区HPA基因分布具有自身特点,其中HPA-15和HPA-3抗原不配合率较高。同时在此次研究数据的基础上建立了乌鲁木齐地区已知HPA基因型血小板供者数据库。

乌鲁木齐地区哈萨克族献血人群HPA-1-17基因多态性分析

目的分析乌鲁木齐地区哈萨克族献血人群HPA 1-17系统基因多态性分布特点。方法采用PCR-SSP对乌鲁木齐地区无血缘关系的哈萨克族献血人群100例血液标本进行HPA1-17系统基因分型,计算基因型频率和基因频率。结果哈萨克族献血人群HPA的基因频率分别为:HPA-1a 0.995、-1b 0.005、-2a 0.95、-2b 0.05、-3a 0.52、-3b 0.48、-4a 0.995、-4b 0.005、-5a 0.99、-5b 0.01、-6a 0.99、-6b 0.01、-15a 0.475、-15b 0.525;HPA-3和15系统表现出较高的杂合度,其中3a/3a、3a/3b、3b/3b基因型频率分别为0.3、0.44、0.26;15a/15a、15a/15b、15b/15b基因型频率分别为0.21、0.53、0.26;HPA-7-14、16、17系统只检出a基因,呈单特异性。结论乌鲁木齐地区哈萨克族HPA基因分布具有自身特点,数据分布符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律,其中HPA-3和HPA-15抗原不配合率较高。

HPA1-6,15基因遗传多态性在血小板输注中的应用研究

目的:调查浙江地区人群HPA系统遗传多态性特点,探讨临床血小板输注中HPA配型输注的应用效果。方法:采用PCR-SSP方法对400例献血员及54例血小板抗体筛检阳性患者进行血小板抗原HPA1-6,15系统基因分型,对54例患者进行分组血小板输注治疗效果分析。结果:血小板抗原HPA1-6,15系统中HPA-3的b基因频率0.51,系统b基因最高,HPA-15的杂合度0.33,系统杂合度最高,其余系统均以aa纯合子基因分型占绝对优势,超过90%。血小板HPA配型输注组CCI、PPR均明显优于ABO随机输注组。结论:在血小板临床输注治疗中应用HPA配型血小板可防止输注无效的发生率,从而有效提高血小板输注疗效和安全性,值得推广和应用。