血小板源性生长因子-BB对缺氧性肺动脉高压新生大鼠肺血管重塑的影响及机制研究

目的探讨血小板源性生长因子-BB(platelet-derived growth factor-BB,PDGF-BB)对缺氧性肺动脉高压(hypoxia pulmonary hypertension,HPH)新生大鼠肺血管重塑的影响。方法128只新生大鼠随机分为:PDGF-BB+HPH组、HPH组、PDGF-BB+常氧组、常氧组(各组n=32)。PDGF-BB+HPH组、PDGF-BB+常氧组经尾静脉注射13μL 6×1010 PFU/mL携带PDGF-BB基因的腺病毒载体。转染腺病毒载体24 h后,HPH组和PDGF-BB+HPH组建立HPH新生大鼠模型。缺氧3、7、14、21 d检测右心室收缩压(right ventricular systolic pressure,RVSP),苏木精-伊红染色后光学显微镜下观察肺血管形态学变化及血管重塑指标(MA%、MT%),免疫组化法检测肺组织中PDGF-BB、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达水平。结果PDGF-BB+HPH组和HPH组RVSP在各时间点均高于同日龄常氧组(P<0.05)。PDGF-BB+HPH组缺氧3 d出现血管重塑,HPH组缺氧7 d开始出现血管重塑;缺氧3 d时,PDGF-BB+HPH组MA%、MT%高于HPH组、PDGF-BB+常氧组、常氧组(P<0.05);缺氧7、14、21 d时,PDGF-BB+HPH组和HPH组MA%、MT%均高于PDGF-BB+常氧组、常氧组(P<0.05)。PDGF-BB+HPH组、HPH组在各时间点PDGF-BB、PCNA表达均高于常氧组(P<0.05),缺氧3、7、14 d时,PDGF-BB+HPH组PDGF-BB、PCNA表达高于HPH组(P<0.05),PDGF-BB+常氧组PDGF-BB、PCNA表达较常氧组高(P<0.05)。结论外源性给予HPH新生大鼠PDGF-BB,可上调PCNA表达,促进肺血管重塑,提高肺动脉压力。

血小板源性生长因子-BB对SD大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞表型转化影响的初步研究

目的:研究血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)对SD大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞(CCSMC)表型转化的影响。方法:改良组织块法原代培养大鼠CCSMC,并进行细胞免疫荧光鉴定。实验分为空白对照组和不同浓度(5、10、20、40 ng/ml)PDGF-BB组,处理24 h;以及空白对照组和20 ng/ml PDGF-BB作用细胞不同时间(24、48、72 h)组,利用qRT-PCR检测各组细胞α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、平滑肌肌球蛋白重链(SMMHC)、碱性调宁蛋白和骨桥蛋白(OPN)mRNA的表达。结果:原代培养CCSMCα-SMA阳性细胞率达95%以上。与空白对照组比较,不同浓度PDGF-BB作用大鼠CCSMC后α-SMA、SMMHC、碱性调宁蛋白的mRNA表达显著减少(P均<0.05);OPN mRNA表达水平显著上调(P<0.05)。与空白对照组比较,随20 ng/ml PDGF-BB作用细胞时间的延长,α-SMA、SMMHC、碱性调宁蛋白的mRNA表达显著减少,OPN mRNA表达水平上调,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论:PDGF-BB可促使SD大鼠CCSMC表型从收缩型向合成型转化。

缺氧及小干扰RNA转染对人RPE细胞增生及血小板源性生长因子-BB表达的影响

背景 增生性玻璃体视网膜病变（PVR）为视网膜表面发生无血管、纤维细胞性增生膜,其发生和发展的具体机制尚未完全阐明.人视网膜色素上皮（hRPE）及血小板源性生长因子（PDGF）在PVR发展中的作用是近几年研究的热点. 目的 探讨缺氧对体外培养hRPE细胞PDGF-BB表达及增生的影响. 方法 hRPE细胞在6孔板中培养,实验组用10、15、20、30、40 μmol/L CoCl2模拟体外培养hRPE细胞的缺氧环境,对照组用未加CoCl2的培养液培养hRPE细胞,采用逆转录PCR（RT-PCR）与ELISA法检测PDGF-BB mRNA和蛋白的表达,采用MTT法检测hRPE细胞增生率.依据转染siRNA的不同将细胞分为PDGF-BB siRNA1组、PDGF-BB siRNA2组、PDGF-BB siRNA3组（为针对PDGF-BB的3条不同的siRNA,其中有一条为有效siRNA）、β-actin siRNA组、无关siRNA组和只加Lip2000的空白对照组.转染4～6h后,除空白对照组外,其余各组加入对细胞PDGF-BB mRNA和蛋白及对hRPE细胞增生影响最明显的15 μmol/L CoCl2模拟细胞缺氧环境24 h,检测PDGF-BB mRNA和蛋白及hRPE细胞增生率. 结果 未加CoCl2的对照组未检测出PDGF-BBmRNA和蛋白的表达,不同浓度CoCl2培养hRPE细胞PDGF-BB mRNA和蛋白的表达量不同,差异均有统计学意义（F=43.737,P＜0.01;F=54.612,P＜0.05）,15μmol/L CoCl2组PDGF-BB的表达量最多,与其他各组比较差异均有统计学意义（P＜0.05）.MTT检测结果显示,不同浓度CoCl2处理后PDGF-BB蛋白表达及hRPE细胞增生率明显不同,差异均有统计学意义（F=95.379,P＜0.01;F=63.375,P＜0.05）,15 μmol/L CoCl2组hRPE细胞增生率明显高于其他浓度组,差异均有统计学意义（P＜0.05）,PDGF-BB蛋白表达量与hRPE细胞增生率呈线性正相关（r=0.994,P＜0.05）.各细胞转染组hRPE细胞中PDGF-BB mRNA及蛋白的表达整体比较,差异均有统计学意义（F=156.330、125.650,P＜0.01）,且PDGF-BB siRNA2组PDGF-BB mRNA较其他各组明显下降,差异均有统计学意义（P＜0.01）.MTT检测结果显示,各细胞转染组PDGF-BB蛋白的表达及hRPE细胞增生率明显不同,差异均有统计学意义（F=73.131、98.564,P＜0.01）,PDGF-BB siRNA2组PDGF-BB蛋白的表达及细胞增生率与其他各组比较明显下降,差异均有统计学意义（P＜0.05）,PDGF-BB蛋白表达与hRPE细胞增生率呈线性正相关（r=0.996,P＜0.05）.结论 缺氧能够促进PDGF-BB的表达,PDGF-BB的表达上调可显著促进hRPE细胞的增生.在转染靶向PDGF-BB siRNA后,PDGF-BB的表达受到抑制,可有效降低hRPE细胞的增生率.

负载优化配比血小板源性生长因子-BB和胰岛素样生长因子-1纳米微球脱细胞人工真皮用于小鼠皮肤创面修复的研究

目的构建负载不同配比血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)和胰岛素样生长因子-1(IGF-1)纳米微球的脱细胞人工真皮,用于裸鼠皮肤缺损的修复,探索PDGF-BB和IGF-1联合用于创面修复的最佳配比。方法用聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物(PLGA)包被不同配比的PDGF-BB和IGF-1制成纳米缓释微球,并使纳米微球结合于脱细胞人工真皮。将负载纳米微球的脱细胞人工真皮移植至裸鼠创面动物模型中,通过记录创面愈合速度和愈合时间,检测局部组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和白介素-2(IL-2)的蛋白表达,观察PDGF-BB和IGF-1不同质量配比(1∶4、1∶2、1∶1、2∶1、4∶1)组(n=5)的纳米微球脱细胞人工真皮对小鼠皮肤创面修复的作用效果,另设空白对照组。结果当纳米微球脱细胞人工真皮负载PDGF-BB和IGF-1的质量配比为2∶1时,小鼠皮肤修复创面愈合速度较其他配比组及空白对照组更快(P<0.05),愈合时间更短(P<0.05),局部组织中α-SMA和IL-2蛋白表达量更高(P<0.05)。结论脱细胞人工真皮结合含PDGF-BB和IGF-1的纳米微球用于创面修复时,PDGF-BB和IGF-1的最佳配比为2∶1。

原发性肝细胞癌患者TACE治疗前后血清血小板源性生长因子-BB水平变化及其临床意义

目的探讨原发性肝细胞癌(HCC)患者经皮肝动脉化疗栓塞(TACE)治疗前后血清血小板源性生长因子(PDGF)-BB的变化情况及其与近期疗效的关系。方法选取2016年1月~2018年10月采用TACE治疗的172例HCC患者为观察组,另选取同期80例健康体检者作为对照组,采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测血清中PDGFBB水平。结果观察组患者术前、术后1天、1周和1月的血清PDGF-BB水平均显著高于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.01)。TACE术前观察组患者的血清PDGF-BB水平与肿瘤数目、肿瘤大小和有无癌栓相关(P<0.05)。TACE术后观察组患者的疗效与肿瘤数目、肿瘤大小、有无癌栓、术前血清AFP水平和术后1周血清PDGF-BB水平显著相关(均P<0.05)。Logistic多因素分析结果显示术后1周血清PDGF-BB(OR=2.665, 95%CI:1.231~5.769, P=0.000)和肿瘤数目(OR=1.904, 95%CI:1.023~3.544, P=0.005)均是影响TACE术后疗效的因素。结论血清中PDGF-BB水平与TACE术后HCC患者的短期疗效密切相关。

血小板源性生长因子-BB对大鼠血管平滑肌细胞表皮调节素表达的影响

目的:研究表皮调节素(epiregulin)在血小板源性生长因子-BB(platelet-derived growth factor-BB,PDGF-BB)促进大鼠血管平滑肌CS-54细胞株增殖中的作用。方法:针对大鼠表皮调节素基因的mRNA序列合成siRNA,采用脂质体转染法将其转染CS-54细胞;用蛋白质印迹检测PDGF-BB及siRNA转染对CS-54细胞表皮调节素蛋白表达的影响;用MTT法分析干扰表皮调节素表达对PDGF促进CS-54细胞增殖效应的影响。结果:PDGF-BB促进细胞增殖,效应具有浓度和时间依赖性,在50 ng/ml PDGF-BB作用24 h时其效果最为明显;PDGF-BB可以刺激CS-54细胞表皮调节素蛋白的表达;表皮调节素siRNA转染细胞,可使表皮调节素蛋白表达水平明显降低,并明显阻断PDGF-BB对CS-54细胞增殖的促进作用(P<0.05)。结论:PDGF-BB刺激CS-54细胞增殖的作用是通过诱导CS-54细胞表达表皮调节素蛋白实现的。

血小板源性生长因子-BB在肺癌患者中的表达及意义

目的探讨肺癌患者血清及外周血单个核细胞中血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)的表达水平及其意义。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测30名肺癌患者和20名正常对照者外周血血清中PDGF-BB的水平,用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测受试者外周血单个核细胞(PBMCs)中PDGF-B链mRNA的表达水平。结果肺癌患者和正常对照者血清PDGF-BB水平分别为(389.64±36.42)、(28.36±8.35)pg/ml,外周血单个核细胞PDGF-B链mRNA的表达水平分别为(0.9287±0.0942)、(0.2275±0.0384)灰度比值,比较差异有统计学的意义(P<0.01)。结论检测血清PDGF-BB及PBMCs中PDGF-B链mRNA表达水平可能对肺癌诊断具有一定临床指导意义。

血小板源性生长因子-BB对体外培养的牛眼小梁细胞中基质金属蛋白酶-2表达的影响

背景目前在青光眼的治疗研究中，血小板源性生长因子-BB（PDGF—BB）作为直接作用于小梁网的药物手术刀正处于研究中，期望药物成分能直接作用于小梁网，在不破坏正常房角生理结构的前提下，疏通小梁网房水流出通道，从而达到降眼压的目的。目的探讨PDGF—BB对体外培养的牛眼小梁细胞中基质金属蛋白酶．2（MMP-2）表达的影响及其意义。方法取新鲜牛眼球的小梁组织，以组织块培养法培养小梁细胞，通过形态学观察和神经元特异性烯醇化酶（NSE）染色对培养的细胞进行鉴定。将第3代小梁细胞接种于6孔培养板，在培养基中加入不同质量浓度（0、5．0、12．5、25．0μg／L）的PDGF-BB培养2h，分别采用逆转录PCR（RT—PCR）法和免疫组织化学法观察PDGF—BB对牛眼小梁细胞MMP．2mRNA（相对值）和蛋白在小梁细胞中的表达水平，分析各组培养细胞中阳性信号的吸光度（A）值。结果牛眼小梁组织块培养5～9d时可见细胞游出，第3代小梁细胞可见较多突起，细胞核居中，NSE染色细胞基质中呈绿色荧光。RT—PCR检测结果发现，0、5．0、12．5、25．0Ixg／LPDGF—BB组小梁细胞中MMP-2mRNA／β-actin的A值分别为0．127-＋0．026、0．147-＋0．045、0．178-＋0．053和0．222±0．062，差异有统计学意义（F=56．71，P〈0．05），其中5．0、12．5、25．0μg／LPDGF—BB组小梁细胞中MMP-2mRNA表达量明显高于0μg／LPDGF—BB组，差异均有统计学意义（P〈0．05）。免疫组织化学检测发现，0、5．0、12．5、25．0μg／LPDGF—BB组小梁细胞中MMP-2蛋白表达量（A值）分别为446．12±13．81、1444．65±54．64、2086．18±73．18和3488．65±25．98，差异有统计学意义（F=213．12，P〈0．01），各组间两两比较，差异均有统计学意义（P〈O．05）。结论在体外培养的条件下，PDGF—BB可促进牛眼小梁细胞中MMP-2的表达，其作用呈剂量依赖的方式。

卡托普利对肝纤维化大鼠转化生长因子β1及血小板源性生长因子-BB的影响

目的观察卡托普利抗大鼠肝纤维化的疗效。方法60只Wistar大鼠随机平均分为3组:正常组、模型组和治疗组。四氯化碳(CCl4)诱导大鼠肝纤维化模型,治疗组于造模第4周开始予以卡托普利。免疫组化法检测大鼠肝组织中转化生长因子β1(TGFβ1)、血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB);肝组织HE染色检测病理改变。结果与模型组大鼠比较,治疗组TGFβ1与PDGF-BB在肝组织表达明显降低;卡托普利治疗后肝小叶均趋于正常,纤维间隔明显变薄。结论卡托普利能有效地减轻肝纤维化大鼠的肝脏损伤及纤维化程度,其机制可能与直接或间接抑制TGFβ1与PDGF-BB生成有关。

异丹叶大黄素对血小板源性生长因子-BB诱导的肺动脉平滑肌细增殖的影响研究

目的:观察异丹叶大黄素(Isorhapontigenin,ISO)对血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)诱导的SD大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖的影响,并探讨其机制。方法:本研究采用20 ng·ml^(-1)PDGF-BB刺激SD大鼠原代PASMCs建立细胞增殖模型,通过不同浓度的ISO(5,10,20μmol·L^(-1))干预,分别在12,24,48 h后通过CCK-8和Brd U试剂盒检测细胞增殖与DNA合成,筛选ISO抑制PASMCs增殖的最适浓度,不同浓度的ISO孵育PASMCs后于12,24,48 h后通过0.4%台盼蓝染色法检测PASMCs存活率;选择20μmol·L^(-1)ISO与PDGF-BB共同孵育PASMCs 24 h后,通过流式细胞仪分析细胞周期,荧光酶标仪检测细胞内活性氧族(ROS)产生,采用超氧化物歧化酶(SOD)活性检测试剂盒测定的SOD的含量,细胞丙二醛(MDA)检测试剂盒检测MDA的含量,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)与Western Blot检测细胞内还原型辅酶Ⅱ氧化酶1(Nox1)、细胞内还原型辅酶Ⅱ氧化酶4(Nox4)m RNA与蛋白的表达。结果:CCK-8和Brd U检测结果表明ISO可浓度及时间依赖性抑制PDGF-BB刺激的PASMCs增殖及DNA合成(P<0.05);流式细胞仪检测检测结果表明ISO可抑制PDGF-BB诱导的PASMCs分裂,阻滞PASMCs细胞周期于G0/G1期(P<0.05);荧光酶标仪检测结果表明ISO可抑制PDGF-BB诱导PASMCs内ROS的产生(P<0.05);SOD和MDA活性检测试剂盒检测结果表明ISO能够拮抗PDGF-BB诱导PASMCs内SOD的表达下调以及MDA的表达上调(P<0.05);RT-PCR与Western Blot显示ISO能够抑制PASMCs内Nox1/4 m RNA和蛋白的表达(P<0.05)。结论:ISO能够抑制PDGF-BB诱导的PASMCs增值,其机制可能与抑制氧化应激有关。

血小板源性生长因子-BB在鼻咽癌患者中的表达及临床意义

目的探讨鼻咽癌患者血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)的表达水平及其临床意义。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测45例鼻咽癌患者和20例正常对照者外周血血清中PDGF-BB的水平,用半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测受试者外周血单个核细胞(PBMCs)中PDGF-B mRNA的表达水平。结果鼻咽癌患者和正常对照组血清PDGF-BB水平分别为(401±74)、(28±8)ng/L,外周血单个核细胞PDGF-BmRNA的表达水平分别为(0.835±0.078)、(0.228±0.038)相对灰度值,差异均有统计学的意义(P<0.05)。结论PDGF-BB在鼻咽癌的发生发展中可能起着重要作用,检测血清PDGF-BB及PBMCs中PDGF-BmRNA表达水平可能对鼻咽癌诊断具有一定临床指导意义。

慢性丙型肝炎患者血清血小板源性生长因子-BB水平与血清透明质酸及D-二聚体关系的研究

目的探讨慢性丙型肝炎患者血清血小板源性生长因子(PDGF)-BB水平及其与血清透明质酸(HA)、D-二聚体的关系。方法采用免疫分析法对46例慢性丙型肝炎患者进行血清PDGF-BB和HA、D-二聚体含量测定,并与39例健康人作比较。结果慢性丙型肝炎患者血清PDGF-BB和HA、D-二聚体水平均明显高于健康对照组(P<0.01),且血清PDGF-BB水平与HA、D-二聚体水平呈明显正相关(r=0.801 8,0.712 6,P<0.01)。结论检测慢性丙型肝炎患者血清PDGF-BB和HA、D-二聚体水平的变化对疾病的诊断、治疗是一个十分有用的临床检测指标。

EGCG对血小板源性生长因子-BB诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖和迁移的影响

目的研究表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)对血小板源性生长因子-BB(platelet-derived growth factor BB,PDGF-BB)诱导的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)增殖和迁移的影响并探讨其可能的机制。方法组织块贴壁法培养SD大鼠胸主动脉VSMC,用RTCA(real time cellular analysis)仪器检测EGCG(10、50、100μmol/L)和Jak2特异性抑制剂AG490(50μmol/L)对PDGF-BB(10 ng/mL)诱导的VSMC增殖和迁移的影响;运用Western blot检测Jak2、Stat3、Cyclin D1蛋白质水平及Stat3磷酸化水平。结果 RTCA检测结果显示,10~100μmol/L的EGCG及50μmol/L的AG490均能抑制PDGF-BB诱导的VSMC的增殖和迁移(P<0.001)。Western blot检测结果显示,50μmol/L的EGCG能明显下调PDGF-BB刺激上调的VSMC的Jak2、Stat3、Cyclin D1蛋白质水平及Stat3磷酸化(p-Stat3)水平(P<0.001),且与其他两个浓度组相比较下调更为明显(P<0.001);50μmol/L的AG490也能明显下调上述蛋白质水平(P<0.001),且50μmol/L的EGCG下调Jak2、Stat3、p-Stat3蛋白质水平与AG490组比较无明显差异。结论 EGCG抑制PDGF-BB诱导的VSMC增殖和迁移可能通过抑制Jak2/Stat3信号转导通路而实现。

靶向血小板源性生长因子-BB的抗肝纤维化药物筛选研究

目的基于表面等离子体共振(SPR)技术寻找以血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)为直接靶点的候选药物,为抗肝纤维化药物的开发提供基础。方法利用SPR分子相互作用检测系统,使用His-tagged人源重组PDGF-BB蛋白建立SPR高通量筛选方法,通过对1760个FDA批准上市的药物及640个天然产物进行筛选及结合特异性验证,初步得到能够与PDGF-BB结合的化合物。进一步在PDGF-BB诱导人肝星状细胞(LX-2细胞)中对筛选得到的化合物的抗纤维化作用进行生物学验证。最后,利用分子对接技术预测化合物与PDGF-BB的可能结合位点及模式。结果建立了良好的靶向PDGF-BB的SPR高通量筛选模型,发现洛美沙星、茶碱乙酸、洛伐他汀、丹酚酸C、硝酸毛果芸香碱和达比加群酯都能与PDGF-BB结合形成复合体。体外实验结果证实以上6种化合物可不同程度降低LX-2细胞中纤维化标志基因COL1A1 mRNA水平,其中洛美沙星可显著降低PDGF-BB诱导的纤维化因子COL1A1、α-SMA(ACTA2)及PDGF-BB受体PDGFRβ的mRNA及蛋白水平。分子对接结果表明洛美沙星与PDGF-BB蛋白的Asn34形成氢键,进而促进两者形成复合体。结论建立了一种靶向PDGF-BB的SPR药物高通量筛选模型,并首次发现洛美沙星是一种以PDGF-BB为直接靶点的潜在抗肝纤维化药物,为其新用途的开发提供了参考。

血小板源性生长因子在湿性年龄相关性黄斑变性新生血管及纤维化中的作用研究进展

黄斑区脉络膜新生血管及视网膜下纤维化(SRFi)是湿性年龄相关性黄斑变性最常见的病理机制,常导致50岁以上人群不可逆性的视力丧失。尽管目前抗血管内皮生长因子已经成为临床主要有效的一线用药,但仍有近50%的病例因SRFi产生的瘢痕而最终视力丧失。血小板源性生长因子家族是从人血小板中分离出来的一类促血管生成因子,目前已证实其参与了黄斑区脉络膜新生血管形成的过程,但具体作用机制仍不清楚。本文将血小板源性生长因子在年龄相关性黄斑变性新生血管以及SRFi形成的作用机制作一综述,为未来开发新型诊疗方式提供资料支持。

血小板源性生长因子联合同种异体骨移植治疗脊柱结核疗效观察

目的探讨血小板源性生长因子(PDGF)联合同种异体骨移植治疗脊柱结核的疗效及安全性。方法选择2018年8月至2023年8月青海省第四人民医院收治的177例腰椎结核患者为研究对象。根据移植骨来源将患者分为对照组(n=49)和观察组(n=128)。患者术前均进行至少2周的正规四联抗结核化学治疗。对照组患者给予PDGF联合自体骨移植,观察组患者给予PDGF联合同种异体骨移植。记录2组患者的手术时间、术中出血量、住院时间;比较2组患者术前及术后1、3、6个月的全血红细胞沉降率(ESR)、血清C-反应蛋白(CRP)水平;术前进行CT及核磁共振成像(MRI)检查,术后待骨融合完成后复查CT及MRI,比较术前与术后Cobb角变化;术前及术后1、3、6个月,采用视觉模拟评分法(VAS)评估腰椎区域的疼痛程度,比较2组患者术前、术后VAS评分,并比较2组男性患者术前、术后VAS评分以及2组女性患者术前、术后VAS评分。结果观察组与对照组患者手术时间、住院时间比较差异无统计学意义(P>0.05)。观察组患者术中出血量显著少于对照组(P<0.05)。观察组与对照组患者术前、术后Cobb角比较差异均无统计学意义(P>0.05)。2组患者术后Cobb角与术前比较均显著降低(P<0.05)。2组患者术前及术后1、3、6个月的VAS评分均依次降低,组内两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。2组男性患者术前及术后1、3、6个月的VAS评分均依次降低,组内两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。2组女性患者术前及术后1、3、6个月的VAS评分均依次降低,组内两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。术前及术后1、6个月时,观察组与对照组患者VAS评分比较差异无统计学意义(P>0.05);术后3个月,观察组患者VAS评分显著低于对照组(P<0.05)。观察组男性患者术前及术后1、6个月的VAS评分与对照组男性患者比较差异无统计学意义(P>0.05);观察组男性患者术后3个月的VAS评分显著低于对照组男性患者(P<0.05)。观察组女性患者术前及术后1、6个月的VAS评分与对照组女性患者比较差异无统计学意义(P>0.05);观察组女性患者术后3个月的VAS评分显著低于对照组女性患者(P<0.05)。2组患者术前及术后1、3、6个月的ESR均依次降低,组内两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。2组患者术前及术后1、3、6个月的血清CRP水平均依次降低,组内两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。术前及术后1、3、6个月,观察组与对照组患者ESR比较差异均无统计学意义(P>0.05)。术前及术后1、6个月,观察组与对照组患者血清CRP水平比较差异无统计学意义(P>0.05);观察组患者术后3个月的血清CRP水平显著高于对照组(P<0.05)。结论PDGF联合同种异体骨移植治疗脊柱结核的效果与自体骨移植相当,但PDGF联合同种异体骨移植可显著减轻患者术后疼痛程度,提高患者的舒适度,避免自体骨移植带来的额外损伤,减轻患者的身体负担,可作为腰椎结核手术植骨一种安全、可靠的手术方式。

血小板衍生生长因子对脉络膜黑色素瘤细胞活性及侵袭能力的影响

目的探讨血小板衍生生长因子(PDGF)对脉络膜黑色素瘤(choroidal melanoma,CM)细胞活性及侵袭能力的影响。方法将CM细胞分为A、B组,分别转染空载体和敲降PDGF的慢病毒,采用RT-qPCR技术检测两组细胞中PDGF mRNA相对表达量,采用XTT实验检测两组细胞活性,采用Transwell实验检测两组细胞侵袭能力,采用Western blot实验检测两组细胞上皮-间质转化(EMT)及基质金属蛋白酶(MMPs)相关标志物蛋白的相对表达量。GEPIA数据库分析PDGF水平与CM患者预后的关系。结果与A组比较,B组细胞中PDGF RNA相对表达量下降(t=176.30,P<0.05),细胞存活数目下降及侵袭能力减弱(F=57.21,t=14.10,P<0.05)。Western blot实验结果显示,与A组相比,B组细胞中E-cadherin相对表达量升高,N-cadherin、Snail、Vimentin、MMP9及MT1 MMP的相对表达量下降(t=4.13~14.14,P<0.05)。GEPIA数据库分析显示,PDGF-A、PDGF-B高表达与CM患者的不良预后有关(P<0.05)。结论PDGF具有增强CM细胞活性,促进CM细胞侵袭的作用,其机制可能与诱导细胞EMT的发生有关。

血管内皮生长因子、血小板源性生长因子-BB与2型糖尿病患者血糖波动及微血管病变的关系

目的观察糖化血红蛋白（HbAlC）〈7．0％的2型糖尿病患者血糖波动与糖尿病微血管病变（视网膜病变、糖尿病肾病）及血清血管内皮生长因子（VEGF）、血小板源性生长因子-BB（PDGF—BB）水平之间的关系，探讨其在HbAlC达标患者中的相互影响机制。方法选取2010年10月至2012年8月在黑龙江省医院内分泌科就诊的2型糖尿病患者100例，其中男52例、女48例，年龄40～66岁。根据是否合并糖尿病微血管病变分为单纯2型糖尿病组[A组，n=30，男14例，女16例，年龄（50±11）岁]，糖尿病肾病组[B组，n=38，男20例，女18例，年龄（52±10）岁]和糖尿病视网膜病变组[C组，n=32，男18例，女14例，年龄（53±13）岁]。另以同期于黑龙江省医院进行体检的25名健康者为正常对照组[Con组，n=25，男12例，女13例，年龄（48±9）岁]。人院前糖尿病患者均使用药物治疗。所有参试者均测定空腹血糖浓度（FPG）、总胆固醇（TC）、甘油i酯（TG）、低密度脂蛋白胆同醇（LDL—C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL—C）、餐后2h血糖浓度（2hPG）、24h尿微量白蛋白（24h尿ALB）和HbAlc。应用动态血糖监测系统连续监测血糖3d，计算平均血糖（MBG）、平均血糖标准差（SDBG）、平均血糖波动幅度（MAGE）、日内最大血糖波动幅度（LAGE）、日间血糖平均绝对差（MODD）和曲线下面积（AUC）。采用酶联免疫吸附法分别检测血清中VEGF和PDGF—BB水平。计量资料组间比较采用t检验，多组间比较采用单因素方差分析，糖尿病微血管并发症的影响因素采用logistic回归分析，PDGF．BB、VEGF相关因素采用多元线性回归分析。结果（1）B组PDGF—BB水平高于A组和Con组[分别为（53±12）、（31±6）、（26±4）μg／ml，F=9．56，P〈0．05]；C组VEGF水平高于A组和Con组[分别为（217±57）、（105±12）、（74±10）μg／ml，F=8．13，P〈0．05]。（2）动态血糖监测指标B组与A组比较，SDBG、LAGF、MAGE、MODD、AUC明显升高（t=2．57、3．46、5．75、3．59、4．28，均P〈0．05），C组与A组比较，SDBG、LAGF、MAGE、MODD、AUC明显升高（t=3．29、3．77、5．38、4．54、3．16，均P〈0．05），而MBG在3组间的差异无统计学意义，均P〉0．05。（3）logistic回归分析显示PDGF-BB、VEGF及血糖波动是糖尿病微血管并发症独立危险因素。分别以PDGF-BB、VEGF为因变量，以血糖波动指标SDBG、LAGF、MAGE、MODD、AUC及2hPG为自变量，采用多元线性回归分析可能影响PDGF-BB、VEGF的相关因素，结果显示，MAGE、SDBG和2hPG对PDGF-BB、VEGF影响最大。结论2型糖尿病患者微血管病变的发生发展与血糖波动具有明显相关性，血糖波动可导致血清血管内皮生长因子和血小板源性生长因子-BB水平增高，从而参与糖尿病视网膜病变、糖尿病肾病等微血管病变的进展。

血小板源性生长因子-BB及肝细胞生长因子对体外培养子宫内膜腺上皮细胞增殖及整合素αⅤβ3表达的影响

目的探讨血小板源性生长因子(PDGF)-BB及肝细胞生长因子(HGF)对体外培养的人子宫内膜腺上皮细胞增殖的影响及其最佳剂量,以及PDGF-BB及HGF对子宫内膜腺上皮细胞整合素αⅤβ3表达的影响。方法 2009年10月至2010年12月在中国医科大学附属盛京医院分离人子宫内膜腺上皮细胞及基质细胞,分别在体外培养。用特异性抗体鉴定细胞纯度,用MTT法检测PDGF-BB及HGF对子宫内膜腺上皮细胞增殖的影响,并用免疫组化方法检测子宫内膜腺上皮细胞整合素αⅤβ3的表达。结果分离的子宫内膜腺上皮细胞及基质细胞纯度高,特异性抗体鉴定细胞纯度分别为95%和97%。不同质量浓度的PDGF-BB及HGF作用后吸光度值均增加。PDGF-BB组吸光度值随着质量浓度的升高而升高,HGF组在质量浓度为20μg/L时为峰值。质量浓度为10μg/L的PDGF及20μg/L的HGF作用后子宫内膜腺上皮细胞整合素αⅤβ3的表达最强。结论 PDGF-BB及HGF均能促进体外培养的人子宫内膜腺上皮细胞增殖,并能促进子宫内膜腺上皮细胞整合素αⅤβ3的表达。

乳腺浸润性导管癌血小板源性生长因子-BB与超声造影特征的相关性分析

目的探讨血小板源性生长因子-BB(platelet-derived growth factor-BB,PDGF-BB)在乳腺浸润性导管癌中的表达情况及其与临床病理特征及微血管密度的关系。方法行超声造影的80例乳腺癌手术患者,术前通过超声造影的时间-强度曲线得到乳腺癌灶区组织峰值强度、AUC、达峰时间、上升支斜率、梯度等血流灌注参数;采用实时荧光定量PCR法检测癌组织及癌旁正常乳腺组织PDGF-BB mRNA相对表达量,分析PDGF-BB mRNA与超声造影血流灌注参数及临床病理特征的关系。结果乳腺浸润性导管癌组织PDGF-BB mRNA相对表达量(3.926±3.647)高于癌旁正常组织(2.763±2.699)(P<0.05);PDGF-BB mRNA相对表达量与超声造影组织峰值强度(r=0.337,P=0.002)、AUC(r=0.322,P=0.004)和梯度(r=0.300,P=0.007)呈正相关,与达峰时间呈负相关(r=-0.350,P=0.001),与上升支斜率无相关性(r=0.198,P=0.079);有淋巴结转移患者组织中PDGF-BB mRNA相对表达量(5.630±4.399)高于无淋巴结转移患者(3.239±3.083)(P<0.05),不同年龄、月经状态、肿瘤直径以及雌激素受体、孕激素受体、人表皮生长因子受体-2状态患者PDGF-BB mRNA相对表达量比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论PDGF-BB在乳腺浸润性导管癌中高表达并与淋巴结转移相关;超声造影血流灌注参数可作为评价PDGF-BB表达的影像学指标,PDGF-BB具有诱导肿瘤微血管形成能力。