山东汉族人群血小板特异性抗原基因的多态性研究

目的 研究山东汉族人群血小板特异性抗原（HPA）1～5和15系统基因多态性分布特点。方法 采用PCR-序列特异性引物（PCR-SSP）技术对234例无血缘关系，汉族，血小板志愿捐献者进行HPA-1～5和HPA-15系统基因分型，计算等位基因频率、基因型频率并与其他种族、地区人群相关资料比较。结果 等位基因频率由高到低依次为HPA-4a、-1a、-5a、-2a、-3a、-15a、-15b、-3b、-2b、-5b、-1b，未检到HPA-4b。基因型频率由高到低依次为HPA-4a4a、-1a1a、-5a5a、-2a2a、-15a15b、-3a3b、-3a3a、-15a15a、-363b、-15b15b、-2a2b、-5a5b、-1a1b，未检到HPA-1b1b、-5b5b和HPA-2b2b。与报道的东方人群比较，有显著性差异的系统有HPA-2、-3,-5（P〈0．005）；与西方人群比较，HPA-1、-2、-3、-5系统有显著性差异（P〈0．005），HPA-4无种族间显著性差异。HPA-15系统的基因分布与越南、德国、奥地利人近似，而与印地安人有较大差异（P〈0．005）。结论 HPA存在明显的种族和地域性差异。山东汉族人发生HPA同种免疫的可能风险抗原基因主要有HPA-3a，-3b，-2b，-5b，-1b，其次为HPA-15a、-15b。

安徽汉族人血小板特异性抗原1-17多态性分布调查

目的研究安徽汉族人群人类血小板特异性抗原(HPA)1-17多态性分布特点,为临床进行血小板相容性输注提供实验依据。方法随机选取150例健康安徽汉族献血者,分别采集2 ml全血提取DNA后采用序列特异性引物聚合酶链式反应(SSP-PCR)方法进行HPA1-17基因分型。结果安徽汉族人HPA-1 a、2 a、3 a、4 a、5 a、6 a、15 a基因频率分别为0.996 6、0.880 0、0.626 7、0.996 6、0.970 0、0.953 3、0.483 3;HPA-1 b、2 b、3 b、4 b、5 b、6 b、15 b基因频率分别为0.003 4、0.120 0、0.373 3、0.003 4、0.030 0、0.046 7、0.516 7;HPA-7 a、8 a、9 a、10 a、11 a、12 a、13 a、14a、16 a、17 a基因频率为1.000 0;HPA-7 b、8 b、9 b、10 b、11b、12 b、13 b、14 b、16 b、17 b未在本次调查中检出。结论安徽汉族人群HPA1-17多态性分布显示出自身特点,HPA-2、HPA-3、HPA-15具有较高的遗传多态性。

中国山东地区汉族人群血小板特异性抗原-15基因多态性分析

目的:分析山东地区汉族人群血小板特异性抗原(HPA)15基因多态性分布特点。方法:采用PCR-序列特异性引物(PCR-SSP)技术对108例无血缘关系汉族人进行HPA-15基因分型,计算等位基因频率、基因型频率并与其他种族、地区人群相关资料比较。结果:等位基因HPA-15a和HPA-15b分布频率分别为0.5139和0.4861;基因型HPA-15a15b、-15a15a、-15b15b频率依次为0.2407、0.2130、0.5463;HPA-15基因分布与越南、德国、奥地利人近似,而与印地安人差异有显著性(P<0.05)。结论:山东地区汉族人HPA-15基因存在多态性,并具有明显的种族和地域性差异。

血小板特异性抗原HPA-17bw基因分型及基因频率调查

目的对HPA-17bw基因分型并调查其在部分汉族人群中的分布。方法采用PCR-SSP方法对无亲缘关系的健康无偿献血者HPA-17bw进行基因分型,采用基因计数法进行基因频率、基因型频率的计算。结果259名正常人的HPA-17bw基因频率为0.000;HPA-17bw/bw的基因型频率为0.000。结论HPA-17bw为低频抗原,259份汉族样本中尚检测不出HPA-17bw。

献血者血小板特异性抗原1～5和15系统基因型研究

采用PCR-SSP方法对血小板志愿捐献者进行血小板特异性抗原基因定型,计算基因型频率,共检出血小板特异性抗原1～5和15系统基因型22种,频率超过10.00%者3种,低于0.50%者6种。认为由血小板特异性抗原引起的血小板输注无效患者,具有高频基因型者更易找到配型相合的血小板供者。

血小板特异性抗原基因与职业性慢性苯中毒的相关性分析

目的探讨血小板特异性抗原HPA-1-6,15基因多态性与职业性慢性苯中毒的相关性。方法采用FLOW-SSO法和PCR-SSP法对32名职业性慢性苯中毒患者(病例组)做HPA-1-6,15基因分型,并将之与中国汉族人群(对照组,n=245 8)的数据比较。结果 HPA-3b等位基因频率、HPA-3基因型分布,病例组与对照组分别为0.593 7 vs 0.441 4(P<0.05)及0.750 0 vs 0.506 9(P<0.01);HPA-3b等位基因相关ab/bb基因型,实验组与对照组分别为96.88%(31/32)vs 69.49%(1 708/2 458)(P<0.01)。HPA-1,2,4,5,6,15等位基因频率和基因型分布,2组比较均无明显差异(P>0.05)。结论职业性慢性苯中毒可能与HPA-3基因多态性有关。

徐州地区人群血小板特异性抗原基因与不同地区及民族的差异研究

目的 调查分析徐州地区汉族人群与我国不同地区和民族的血小板特异性抗原(HPA)基因多态性分布特点。方法 采用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)方法对徐州地区汉族人群进行HPA系统基因频率调查。在中国知网搜索国内不同地区和民族有关HPA基因频率文献报道16篇,进行比对分析。结果 徐州地区汉族人群HPA基因频率分别为1a 0.995,1b 0.005;2a 0.935,2b 0.065;3a 0.590,3b 0.410;4a 0.995,4b 0.005;5a 0.980,5b 0.020;6a 0.975;6b 0.025;15a 0.575;15b 0.425;HPA6-14,HPA16-1711个系统只有a基因,未见b基因。与武汉地区在HPA-2、HPA-5系统基因频率比较差异有统计学意义(P<0.05);与广州肇庆地区在HPA-3、HPA-5、HPA-6、HPA-15比较存差异有统计学意义(P<0.05);与湖南岳阳、南昌、长沙地区在HPA-5、HPA-15系统差异有统计学意义(P<0.001)。与少数民族比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 徐州地区汉族人群与国内不同地区汉族人群HPA基因存在地区间差异,尤其是南北方地区和东西方地区差异较大;与我国少数民族HPA基因都存在较大差异。

周期蛋白D_3异常表达使1例粒单系白血病原始细胞表达血小板特异性抗原

为探讨1例急性粒单核细胞白血病原始细胞表达血小板特异性抗原的机制,分离外周血或骨髓单个核细胞,采用常规染色和普通细胞化学染色观察其形态学特性,采用流式细胞仪双荧光分析免疫表型,单荧光胞浆蛋白标记分析周期蛋白表达和免疫印迹进一步证实周期蛋白D_3的表达情况,采用周期蛋白和DNA双标记分析周期蛋白D_3表达与细胞周期的关系。结果表明,在白血病原始细胞中CD_(13)^++HLA-DR^+细胞为94.69%,CD_(13)^++CD_(34)^+细胞为96.86%,CD_(41a)^++CD_(34)^+细胞为41.6%,CD_(13)^++CD_(41a)^+细胞为40.0%;周期蛋白D_3表达明显升高,大部分细胞表达周期蛋白D_3,周期蛋白D_3阳性细胞在细胞周期各时段所占的比例分别为:G_1期52.1%,S期9.9%,G_2+M期38.0%。结论:周期蛋白D_3的异常表达导致此白血病细胞表达血小板特异性抗原,可能在白血病的发生中起重要的作用。

粒单系白血病原始细胞表达血小板特异性抗原与周期蛋白D_3异常表达关系的研究

目的 :探讨急性单核细胞白血病原始细胞表达血小板特异性抗原的机制。方法 :分离外周血或骨髓单个核细胞 ,采用常规染色和普通细胞化学染色观察其形态学特性 ,采用流式细胞仪双荧光分析免疫表型 ,单荧光胞浆蛋白标记分析周期蛋白表达和免疫印迹进一步证实周期蛋白 D3的表达情况。采用周期蛋白和 DNA双标记分析周期蛋白 D3表达与细胞周期的关系。结果 :白血病原始细胞中 CD1 3 + + HL A- DR+细胞为 94.6 9% ,CD1 3+ + CD34+细胞为 96 .86 % ,CD41 a+ + CD34+ 细胞为 41.6 0 % ,CD1 3 + + CD41 a+ 细胞为 40 .0 0 % ,免疫印迹和流式细胞仪单参数分析证实周期蛋白 D3表达明显升高 ,周期蛋白 D3阳性细胞在细胞周期各时段所占的比例分别为 :G1 期 5 2 .10 % ,S期9.90 % ,G2 + M期 38.0 0 %。结论 :周期蛋白 D3的异常表达导致单核系白血病细胞表达血小板特异性抗原 ,同时也可能在白血病的发生中起重要作用。

山西省吕梁地区汉族人群血小板特异性抗原遗传多态性研究

目的研究山西省吕梁地区汉族人群血小板特异性抗原(HPA)基因多态性分布特点,为该地区患者的血小板配型及输注提供理论依据。方法本研究使用序列特异性引物聚合酶链式反应(SSP-PCR)方法,对山西省吕梁市400例汉族成年人进行血小板特异性抗原基因分型检测。结果吕梁汉族人群血小板特异性抗原HPA 1-17位点中,HPA 1-6,15呈现多态性,基因频率分别是1a 0.990、1b 0.010、2a 0.965、2b 0.035、3a 0.583、3b 0.417、4a 0.983、4b 0.017、5a 0.963、5b 0.037、6a 0.985、6b 0.015、15a 0.575、15b 0.425。结论山西省吕梁市汉族人群HPA有其特有的地域特点,血小板特异性抗原基因具有明显的多态性分布规律。

应用实时荧光PCR法建立献血者血小板特异性抗原HPA-1~6/10/15/21基因分型资料库

目的研究中山地区单采血小板献血者人类血小板特异性抗原HPA-1~6/10/15/21共9对抗原基因多态性区域分布特点,建立中山地区血小板献血者HPA基因分型资料库。方法用实时荧光定量PCR-TaqMan探针法对中山地区192名单采血小板献血者进行HPA-1~6/10/15/21基因分型,计算基因型频率、基因频率。结果HPA-1~6/10/15/21中,HPA-4、10系统呈单特异性,只检测出aa基因型,未检出等位基因HPA-b;HPA-1、2、5、6、21基因型以aa占绝大多数;HPA-3、15具有较高的杂合度,基因型HPA-3aa、HPA-3ab、HPA-3bb频率分别是0.3073、0.4948、0.1979;基因型HPA-15aa、HPA-15ab、HPA-15bb频率分别是0.2708、0.5052、0.2240。结论中山地区血小板献血者HPA-1~6/10/15/21基因与其他地区的同类资料相比显示出地域差异性,建立HPA基因分型资料库有助于解决血小板不配合输注产生同种免疫的问题。

山西省部分地区汉族人群血小板特异性抗原基因多态性研究

目的研究山西省汉族人群血小板特异性抗原(HPA)基因多态性分布特点,丰富血小板人类遗传学资料,同时为山西地区患者血小板配型提供参考依据。方法本研究使用序列特异性引物-聚合酶链式反应(SSP-PCR)方法,对山西150例汉族成年人进行血小板特异性抗原基因分型检测。结果山西汉族人群血小板特异性抗原HPA 1-17位点中,HPA 1-6,157个位点呈现多态性,基因频率分别是1a 0.997、1b 0.003、2a 0.980、2b 0.020、3a 0.563、3b 0.437、4a0.997、4b 0.003、5a 0.960、5b 0.040、6a 0.970、6b 0.030、15a 0.490、15b 0.510。结论山西省汉族人群血小板特异性抗原有其特有的地域特点,人类血小板特异性抗原基因有明显的地域种族多态性分布规律。

人血小板特异性抗原基因多态性与儿童慢性特发性血小板减少性紫癜的相关性

目的探讨人血小板特异性抗原基因多态性与本地区儿童慢性特发性血小板减少性紫癜的相关性。方法收集2015年1月至2017年6月在鹤壁市人民医院儿科住院和门诊治疗的儿童慢性特发性血小板减少性紫癜患儿血液标本31份为研究组,同期在本院健康体检的同年龄段儿童血液标本35份为对照组,使用PCR结合直接测序法进行人血小板特异性抗原1~6、15共7个系统基因的分型。结果研究组人血小板特异性抗原2A、15A等位基因频率均明显低于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05);人血小板特异性抗原2B、15B等位基因频率均明显高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。研究组与对照组人血小板特异性抗原1、3、4、5、6的等位基因频率之间差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论人血小板特异性抗原2B、15B等位基因与本地区儿童慢性特发性血小板减少性紫癜的易感性有关。

人类血小板同种特异性抗原系统

在血小板同种抗原中,有些是其他细胞或组织共有的,如ABO血型抗原、HLA-Ⅰ类抗原;另外一些则仅表达或主要表达于血小板,由血小板特有的抗原决定簇组成,表现血小板独特的遗传多态性,被称为血小板同种特异性抗原(human plateletaloantigens,HPAs).因其能够介导同种抗体的产生,引发同种免疫性血小板减少,如:新生儿同种免疫血小板减少症(neonatalalloimmune thrombocytopenia,NATP)、输血后紫癜(post-transfusionpurpmra,PTP)以及血小板输注无效(post-transfusion refractoriness,PTR).因此,研究HPAs具有重要的临床意义.

国际各类品种血小板膜糖蛋白单克隆抗体试剂对血小板抗原单克隆抗体特异性免疫固定检测技术的影响

本研究按国际输血学会第14届国际血小板免疫学研讨会和合作研究项目的要求,分析比较国际常用血小板膜糖蛋白单克隆抗体(McAb)各类品种对血小板抗原McAb特异性免疫固定检测技术(MAIPA)检测血小板抗体结果的影响。向参加该研究的30个实验室发放10份含已知血小板抗体特异性的血清和1份阴性对照血清样本,以及9份不同类别(GPⅡb/Ⅲa、GPⅠa/Ⅱa、GPⅠb/Ⅸ及GPⅣ)及克隆编号的血小板膜糖蛋白McAb和统一的实验研究技术方案,各参加实验室按方案进行检测并反馈结果数据,比较同一糖蛋白种类不同的McAb对MAIPA检测结果的影响。结果表明:GPⅡb/Ⅲa中AP2,Gi-5,PL2-73等几种McAb的平均S/CO值较高;GPⅠa/Ⅱa的McAb中MBC202.2和143.1的平均S/CO值较高;GPⅠb/Ⅸ的McAb中142.11和CLB-MB45(CD42b)的平均S/CO值较高;GPⅣ的McAb中131.4的平均S/CO值较高。结论不同的McAb品种对样本的检测结果存在差异,McAb对MAIPA的灵敏度有重要影响。用MAIPA法检测血小板抗体时应同时使用相同糖蛋白种类而不同克隆号的McAb,以防止血小板抗体的漏检。

肇庆地区普通人群血小板基因HPA1～6和15基因多态性及CD36抗原缺失分析

目的对肇庆地区普通人群进行血小板特异性抗原(HPA)1～6、15基因多态性和CD36抗原缺失调查,评估其对临床上血小板输注疗效以及相关疾病的风险度。方法通过采用PCR-SSP方法对肇庆地区100例体检和血小板捐献者样本进行HPA1～6、15系统分型,同时检测CD36抗原缺失相关的10种基因突变,并统计其频率。结果 95例标本CD36基因无异常,5例(5%)标本检测出可致CD36抗原缺失的基因突变,3例为329delGC,1例为C268T,1例同时出现329 delGC和C268T。初步得出肇庆地区普通人群CD36抗原缺失率(5%);HPA3、15基因多态性较普遍,杂合程度高,其中3a、3b、15Gova、15Govb的等位基因频率分别为0.45、0.55、0.47和0.52。结论肇庆地区的HPA3、15基因频率多态性较普遍,CD36抗原缺失率和突变点与广州地区较一致,是本地区在临床输血实践中是较为重要的血小板抗原系统。

南京地区HPA、HLA已知基因型血小板供者资料库的建立与库容分析

目的建立南京地区人群HPA、HLA已知基因型血小板供者资料库,从群体资料分析本地人群血小板HPA-1~6w、-15和HLA-A、-B的等位基因多态性,推算患者基因配合的匹配概率与适宜本地的库容水平。方法分别采用PCR-SSP和PCR-SBT方法对HPA-1~6w、-15和HLA-A、-B进行基因分型;应用SHEsis在线软件统计分析HPA-1~6w、-15和HLA-A、-B的等位基因频率与单倍型频率;依次推算找到HPA、HLA匹配供者的概率与适宜的库容大小。结果获得了南京地区HPA-1~6w、-15和HLA-A、-B群体多态性资料;根据统计结果评估,在不考虑ABO同型的情况下,当血小板供者库容为527人时,单倍型频率>0.001的患者有95%的概率在库中找到至少1例HPA-1~6w、-15相匹配的供者。建立1个库容为1875人的血小板供者库可满足单倍型>0.001的患者有95%的可能找到至少1例HLA-A、-B相合的供者。结论建立了本地区血小板献血者HPA、HLA基因资料库,为后续血小板库的扩建、维护与临床应用提供了重要的数据支持。

人类血小板抗原基础与临床研究进展

人类血小板抗原(HPA)是血小板特有的抗原决定簇,具有独特的遗传多态性,可介导同种免疫性抗体的产生,导致同种免疫性血小板减少症的发生。本文着重对HPA分子生物学特征、检测方法、分型及其临床意义等方面进行阐述。

HCV感染献血者的血小板抗原(HPA)1-18等位基因多态性初步分析

目的探讨HCV感染与血小板抗原基因之间的关系。方法提取114例抗-HCV ELISA双试剂检测均有反应性的献血者血清标本的RNA,做HCV RNA荧光定量检测,随访后将其分为HCV持续感染组(39例)和HCV自限清除组(75例);提取人基因组,用PCR-SSP方法对人血小板抗原(HPA)基因进行分型;比较HCV感染献血者与本地合格献血者和其他地区合格献血者HPA基因分型情况,分析HCV感染与HPA分型之间的关联性。结果与合格献血者相比,HCV感染献血者的HPA分型有不同表现(P>0.05);HPA基因多态性在HCV感染不同转归献血者中明显不同(P<0.05)。HCV持续感染组和对照组相比,HPA等位基因多态性有明显差异(P>0.05);HCV自限清除组和对照组的HPA-3a和HPA-3b基因频率分别为:40.70%vs 61.00%和59.30%vs 39.00%(P<0.01)。结论HPA-3的基因多态性与HCV易感性和自限清除是否具有一定的关联性,值得进一步研究。