液相色谱-串联质谱法测定饲料中的血根碱和白屈菜红碱

研究旨在建立液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)检测饲料中血根碱和白屈菜红碱含量的分析方法。饲料样品用15 mL、0.2%盐酸乙腈溶液超声提取2次,每次20 min,提取液使用HLB固相萃取柱净化、微孔滤膜过滤后进行液相色谱-串联质谱法测定,用外标法定量,对检测方法进行验证。结果显示:在质量浓度为1~100 ng/mL范围内其线性相关系数≥0.999,定量限为0.005 mg/kg,回收率为91.9%~101.0%,相对标准偏差为2.00%~7.96%。表明所建立的液相色谱-串联质谱法结果准确、重复性好,适用于饲料中血根碱和白屈菜红碱的测定。

乙氧基血根碱改善血管紧张素Ⅱ诱导的小鼠心肌纤维化的实验研究

目的 探讨乙氧基血根碱对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的小鼠心肌纤维化的影响及作用机制。方法 构建AngⅡ诱导的高血压小鼠心肌纤维化模型,根据小鼠的基线血压随机分为空白组、模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组、阳性药组。除空白组之外的其余各组小鼠皮下以500 ng/(kg·min)的速率释放AngⅡ,空白组在泵内注入等量体积生理盐水,持续4周;低、中、高剂量组从术后第1天起分别给予0.1、1、10 mg/(kg·d)乙氧基血根碱灌胃,空白组和模型组给予等体积生理盐水,阳性药组给予10 mg/(kg·d)缬沙坦,连续灌胃给药28 d。采用Masson染色及天狼星红染色法检测6组小鼠心肌纤维化及胶原沉积情况;Western blot检测Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、增殖细胞核抗原(PCNA)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤维连接蛋白(FN)及TGF-β1/smad2/3信号通路相关蛋白TGF-β1、p-smad2/3、smad2/3的蛋白表达量。结果 与空白组比较,模型组小鼠心肌细胞出现明显纤维化及胶原沉积,心脏组织中Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、PCNA、α-SMA及FN的蛋白表达显著增加(P<0.05),通路相关蛋白TGF-β1表达、p-smad2/smad2比值及p-smad3/smad3比值显著上调(P<0.05),而乙氧基血根碱给药后,心肌的纤维化及胶原沉积情况均明显改善,Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、PCNA、α-SMA、FN、TGF-β1等蛋白表达及p-smad2/smad2和p-smad3/smad3比值均显著下调(P<0.05),且乙氧基血根碱对小鼠心肌纤维化改善的作用呈剂量依赖性(P<0.05)。结论 乙氧基血根碱可改善AngⅡ诱导的心肌纤维化,通过抑制TGF-β/smad2/3通路的活化可能是其发挥作用的机制之一。

血根碱对腰椎间盘突出症大鼠炎性疼痛的改善作用及机制

目的研究血根碱(SG)对腰椎间盘突出症(LDH)大鼠炎性疼痛的改善作用及机制。方法制备LDH模型大鼠,然后分为模型组和SG低、中、高剂量组(1.00、2.50、6.25 mg/kg)以及SG高剂量+Anisomycin[丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)激活剂]组(6.25 mg/kg SG+5 mg/kg Anisomycin),每组10只;另取10只大鼠作为对照组。各组大鼠腹腔注射相应药物,对照组和模型组大鼠腹腔注射等体积生理盐水,每天1次,连续7 d。观察大鼠一般情况及神经功能变化;测定大鼠疼痛阈值[包括机械刺激缩足反射阈值(PWMT)和热刺激缩足反射潜伏期(PWTL)];观察大鼠背根神经节(DRG)组织病理变化;检测大鼠血清中炎症因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)]和疼痛因子[神经肽Y(NPY)、5羟色胺(5-HT)]水平;观察脊髓小胶质细胞中离子钙接头蛋白1(Iba-1)和星形胶质细胞中胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)的阳性表达;检测大鼠DRG组织中MAPK/胞外信号调节激酶(ERK)/核因子κB(NF-κB)信号通路相关蛋白和TNF-α、IL-1β蛋白的表达。结果与对照组相比,模型组大鼠精神食欲不振,后肢运动障碍,DRG椎间盘神经元细胞排列紊乱;神经功能评分,血清中TNF-α、IL-1β、NPY水平,Iba-1、GFAP阳性表达,DRG组织中p38 MAPK、ERK1/2、NF-κB p65蛋白磷酸化水平和TNF-α、IL-1β蛋白表达水平均显著升高(P<0.05);PWMT、PWTL和血清中5-HT水平均显著降低(P<0.05)。与模型组相比,SG各剂量组大鼠精神食欲好转,后肢运动障碍缓解,DRG椎间盘神经元结构改善,上述定量指标水平均显著逆转(P<0.05)。Anisomycin可逆转SG对LDH大鼠炎性疼痛的改善作用。结论SG可通过抑制LDH大鼠DRG组织中小胶质细胞活化,减少炎症因子释放,提高疼痛阈值,从而改善炎性疼痛;其作用机制可能与抑制MAPK/ERK/NF-κB信号通路有关。

血根碱对膀胱癌T24细胞增殖迁移的调控作用及其机制

目的 观察血根碱对膀胱癌T24细胞增殖迁移的调控作用,并探索可能的作用靶基因及作用机制。方法 培养膀胱癌T24细胞和人正常膀胱上皮细胞SV-HUC-1,分别分为实验组和对照组,实验组分别加入0.012 5、0.025、0.05、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6μmol/L的血根碱,对照组培养基中不加血根碱,采用CCK-8试剂盒检测细胞增殖能力,并计算半数抑制浓度(IC_(50))。将T24细胞分为实验组和对照组,实验组给予血根碱,对照组不进行血根碱处理,采用Transwell小室实验检测细胞迁移能力。分别基于BATMAN、SwissTargetPrediction网络药理学数据库、TCGA数据库分析并筛选得到血根碱作用靶基因和膀胱癌治疗靶基因的交集靶基因,进行GO分析和KEGG功能富集分析,绘制蛋白质相互作用网络,筛选血根碱调控T24细胞的靶基因。采用GSEA_4.2.3进行靶基因集富集分析,以确定靶基因富集的相关通路。基于GEPIA网站和“survival”R软件包评估靶基因高表达组和低表达组的无进展间隔期、疾病特异性生存期、总生存期差异。将血根碱和靶基因蛋白结构进行分子对接,并计算结合能。采用实时荧光定量PCR法检测实验组和对照组细胞中的靶基因。结果 实验组T24细胞增殖能力和穿膜细胞数低于对照组(P均<0.05)。血根碱对T24细胞的IC_(50)为0.200 3μmol/L、对SV-HUC-1细胞的IC_(50)为0.709 9μmol/L。筛选出血根碱调控T24细胞的靶基因为基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、前列腺素—内过氧化物合酶2(PTGS2)。MMP-2、MMP-9、PTGS2与调节上皮细胞增殖的通路有关。MMP-9高表达者疾病特异性生存期和总生存期低于低表达者(P均<0.05)。血根碱与MMP-2、MMP-9、PTGS2结合能分别为-8.8、-8.6、-10.0 kcal/mol。实验组PTGS2、MMP-2、MMP-9 mRNA表达低于对照组(P均<0.05)。结论 血根碱可在不影响SV-HUC-1细胞的浓度下抑制膀胱癌T24细胞的增殖迁移能力。血根碱对膀胱癌细胞增殖迁移能力的调控作用可能与调控MMP-2、MMP-9、PTGS2表达并影响上皮细胞增殖相关通路有关。

基于网络药理学和分子对接分析二氢血根碱抗氧化的作用机制

目的:检测多刺绿绒蒿中二氢血根碱的含量并探索其抗氧化活性,利用网络药理学和分子对接技术探索二氢血根碱通过抗氧化作用对治疗阿尔茨海默病(AD)、甲状腺相关性眼病(TAO)、放射性肺损伤(RILI)、帕金森病(PD)和支气管肺发育不良(BPD)的作用机制。方法:采用高效液相色谱法对多刺绿绒蒿中二氢血根碱的含量进行测定;通过薄层层析-生物自显影法判定其抗氧化活性;综合利用SuperPred、Genecards和OMIM等在线数据库搜集二氢血根碱的靶点和治疗AD、TAO、RILI、PD、BPD的靶点,构建二氢血根碱治疗疾病的“化合物-靶点-疾病”和蛋白互作网络;基于Metascape数据库及CytoNCA插件进行KEGG通路富集分析;采用Discovery Studio 2019 Client软件对活性成分与潜在靶点进行分子对接验证结合活性。结果:研究显示多刺绿绒蒿中二氢血根碱的含量为0.50 mg/g;薄层层析-生物自显影结果显示二氢血根碱具有抗氧化活性;通过网络药理学分析获得二氢血根碱治疗以上五种疾病的29个核心靶点;KEGG通路结果显示参与癌症途径、PI3K-Akt信号通路等116条KEGG通路;分子对接结果显示二氢血根碱与PTPN11、CSK、NOS2等蛋白结合稳定。结论:多刺绿绒蒿中二氢血根碱含量相对较高,通过网络药理学和分子对接分析得出其通过作用于多靶点、多途径发挥抗氧化的作用。

乙氧基二氢血根碱靶向EGFR抑制结直肠癌细胞恶性生物学行为并诱导凋亡的机制研究

目的 探讨乙氧基二氢血根碱(ethoxydihydrosanguinarine, ESG)对结直肠癌细胞的抑制及具体分子机制。方法 选用结直肠癌细胞系RKO和HRT-18。实验分为空白对照组和加药组(1.0、1.5、2.0μmol/L ESG)。通过CCK-8法、实时无标记细胞分析技术(real time cellular analysis, RTCA)及克隆形成实验检测ESG对细胞增殖能力的影响;以流式细胞术、DAPI染色、JC-1线粒体膜电位和活性氧检测试剂盒检测ESG对细胞凋亡的影响;通过高内涵成像分析技术及Transwell侵袭实验检测ESG对细胞侵袭、迁移的影响;Western blot检测细胞凋亡及侵袭、迁移相关蛋白的表达,表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)以及下游Akt/ERK信号通路蛋白的表达及磷酸化水平;通过过表达EGFR和敲低EGFR探讨EGFR在ESG诱导结直肠癌细胞凋亡、抑制细胞增殖及侵袭迁移过程中的作用;通过分子对接、靶点稳定性药物亲和反应实验以及微量热泳动实验检测ESG与EGFR的直接结合作用。结果 ESG显著抑制结直肠癌细胞的增殖及克隆形成能力;ESG诱导结直肠癌细胞发生线粒体途径凋亡并抑制其侵袭、迁移能力;ESG直接结合EGFR的激酶活性区而抑制其活性,进而下调其下游与肿瘤恶性进展相关的信号分子Akt、ERK的磷酸化水平。结论 ESG靶向结合并抑制EGFR,进而通过其下游Akt/ERK信号通路抑制结直肠癌细胞侵袭、迁移并诱导线粒体途径的细胞凋亡,有望成为靶向EGFR治疗结直肠癌的新型靶向药物。

血根碱壳聚糖微球的制备工艺优化及体内外性能研究

本研究旨在探讨血根碱壳聚糖微球的最优制备方法,并对微球进行外观粒径表征和体内外研究。本研究建立了血根碱含量测定的HPLC法,运用乳化交联法制备血根碱壳聚糖微球,以载药量、包封率和平均粒径为评价指标,应用单因素试验和星点设计-响应面法优化制备处方。利用显微镜和扫描电镜观察微球外观形态,通过激光粒度仪测定微球粒径及其分布。采用动态透析法取不同时间点的血根碱原料药溶液和血根碱壳聚糖微球溶液,并考察两种溶液的体外释放度,最后进行药动学方程拟合。对不同组小鼠注射血根碱原料液和血根碱微球液,不同时间取组织血测定,观察体内分布及靶向性。结果表明:血根碱HPLC含量测定得曲线方程y=2.530 0x+43.323 1(R^(2)=0.999 8,线性范围为10.0~50.0μg/mL)。单因素试验和星点设计-响应面法得最优处方:血根碱投药量60 mg,壳聚糖用量70mg,乳化剂用量5%,戊二醇用量0.25mL、水油体积比3:10,醋酸浓度2%、搅拌速度500r/min和交联时间3.5h。观察到血根碱壳聚糖微球形态近似球形及表面较光滑,测定得平均粒径(8.17±0.16)μm,粒径分布为2~20μm。体外释放显示,血根碱壳聚糖微球较血根碱原料药释放缓慢,Ritger-Peppas方程拟合效果较好(R^(2)=0.980 8)。血根碱微球在小鼠体内有明显缓释作用,在肺部和肝脏存在不同程度靶向性。血根碱壳聚糖微球体外释放具有明显的缓释作用,在小鼠体内分布具有一定靶向性和缓释性。

血根碱的药理作用及其在动物保健中的应用

随着国家全面禁用促生长抗生素以来,植物提取物因其安全、无耐药性等优点,成为动物保健行业中理想的替抗产品。血根碱是一种主要存在于罂粟科植物中的含氮有机化合物,具有抗菌消炎、提高免疫力等作用。本文通过对血根碱的提取方法、主要性质、药理作用及其在动物保健行业中的应用现状进行综述,以期为血根碱在养殖生产中的应用和产品升级提供参考依据。

血根碱栓剂的制备及工艺优化

为优选血根碱栓剂的成型工艺,本研究以血根碱为原料药,以聚乙二醇6 000、聚乙二醇400、甘油(4:1:1)为基质,在70℃温度下,采用热熔法溶解基质,以乙醇为助溶剂溶解血根碱,制备血根碱栓剂。采用对比实验,以血根碱栓剂的硬度、外观形态及释放度实验为综合指标,在单因素实验的基础上进行正交试验,优选出血根碱栓剂的最佳成型工艺。结果显示,最佳成型工艺的基质组成为聚乙二醇4 000:聚乙二醇400:甘油为6:5:1,基质最佳融化温度为65℃,最佳主药与基质比例为0.01:1,主药溶解最佳助溶剂为0.8 g乙醇。优选的成型工艺和制剂工艺稳定可行,栓剂在室温下硬度良好,外观光滑整洁,含量均匀度、重量差异、释放度符合2020年版《中国药典》四部通则栓剂的质量要求。

血根碱对患者源性结直肠癌类器官生长的影响

目的探讨血根碱(sanguinarine,SNG)对患者源性结直肠癌类器官生长的影响及相关分子机制。方法体外构建结直肠癌类器官,光镜下观察类器官形态变化,HE染色观察肿瘤细胞间结构,免疫组化染色观察肿瘤标志物的表达。用不同浓度的SNG(0.1、0.3、1、3、9、27μmol·L^(-1))处理类器官,CCK-8法测细胞活性并计算药物半数抑制浓度(IC 50),Western blot检测SNG对类器官蛋白表达影响,ATP含量检测SNG联合结直肠癌临床化疗药对类器官协同效果。结果48~72 h形成囊样和实质样的三维细胞团,提示类器官构建成功。免疫组化结果,类器官中肿瘤标志物Ki67、CK20、CK7、Ep-CAM表达,进一步证实结直肠癌类器官形成。CCK-8结果显示,相比对照组,SNG组类器官数量和细胞活性降低。Western blot结果显示,p-AMPK表达含量明显上升,而mTOR和p-mTOR表达降低,自噬相关蛋白p62、Beclin1蛋白表达也发生明显变化(P<0.05)。ATP含量检测,SNG与临床化疗药联合抑制结直肠癌细胞的增殖明显强于化疗药单药组(P<0.05)。结论SNG可以抑制结直肠癌类器官生长并诱导自噬,协同化疗药奥沙利铂、伊立替康、5-氟尿嘧啶抑制肿瘤细胞增殖,其作用机制可能与调控AMPK/mTOR信号通路有关。

血根碱通过调控STUB1/GPX4诱导直肠癌细胞发生铁死亡

目的探究血根碱(SAN)对结直肠癌细胞增殖及铁死亡的影响。方法SW620和HCT-116细胞体外培养,在SW620细胞加入浓度分别为0、0.5、1、1.5、2、2.5、3μmol/L的SAN,HCT-116细胞加入0、0.5、0.75、1、1.25、1.5、1.75、2μmol/L的SAN。采用CCK8法检测检测细胞活力,并计算出IC50;检测SAN对细胞的增殖抑制作用采用集落克隆实验;Transwell实验观测SAN对细胞侵袭迁移力的影响;ROS检测试剂盒通过流式细胞仪分析细胞ROS含量的变化;丙二醛(MDA)检测盒来检测脂质过氧化物的产生。氧化型谷胱甘肽/还原型谷胱甘肽定量试剂盒测定谷胱甘肽(GSH)水平。Western blotting法检测铁死亡相关蛋白(STUB1、GPX4)的表达。结果CCK8、集落克隆的结果显示,SAN可显著抑制SW620和HCT-116细胞增殖(P<0.05);Transwell实验结果显示,SAN可抑制SW620和HCT-116细胞侵袭迁移能力(P<0.05);流式细胞术检测显示:SAN显著促进SW620和HCT-116细胞内ROS的产生(P<0.05);MDA检测结果显示,SAN可使SW620和HCT-116细胞内MDA含量增加(P<0.05);GSH检测结果显示,SAN使SW620和HCT-116细胞内GSH下降(P<0.05);Western blotting结果显示,SAN可通过调控STUB1下游蛋白GPX4的下调(P<0.05)。结论SAN可通过调节STUB1/GPX4诱导结直肠癌细胞发生依赖性铁死亡,提供了新治疗结直肠癌的靶点以及实验依据。

血根碱通过调控Nrf2/NF-κB通路缓解小鼠溃疡性结肠炎

目的探讨血根碱(SA)对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的溃疡性结肠炎(UC)的作用机制。方法随机将56只雄性C57BL/6小鼠分为空白对照组、模型组(DSS组)、SA低剂量组(DSS+SA-L,SA 1 mg/kg)、SA中剂量组(DSS+SA-M,SA 5 mg/kg)、SA高剂量组(DSS+SA-H,SA 10 mg/kg)、柳氮磺吡啶组(DSS+SASP,SASP 400 mg/kg)、SA高剂量组+Nrf2抑制剂ML385组(DSS+SA-H+ML385,SA 10 mg/kg+ML38530 mg/kg),8只/组。除空白对照组外,均采用3.5%DSS诱导建立UC模型,SA干预组和柳氮磺吡啶组给与对应药物灌胃治疗,通路抑制剂组SA 10 mg/kg灌胃同时腹腔注射ML38530 mg/kg。通过监测小鼠体质量变化、疾病活动指数(DAI)评分、结肠长度测量、HE染色评估小鼠炎症;检测结肠组织中活性氧(ROS)水平;比色法检测结肠组织中丙二醛含量(MDA);RT-qPCR检测结肠组织中炎性因子;Western blotting法检测结肠组织中核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶1(HO-1)、Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap-1)、磷酸化p65蛋白(p-p65)、p65、紧密连接蛋白(occludin、ZO-1)蛋白表达。结果与DSS组相比,SA治疗可缓解DSS组小鼠体质量下降、结肠长度缩短、DAI评分升高(P<0.05)。HE染色显示,DSS组结肠腺体结构破坏,SA可明显改善结肠隐窝结构。RT-qPCR显示,SA干预组结肠组织中TNF-α、IL-1β和IL-6水平下降(P<0.05),ROS、MDA下降(P<0.05)。Western blotting结果显示,结肠组织中Nrf2、HO-1、occludin、ZO-1蛋白表达上升(P<0.05),Keap-1、p-p65蛋白表达下降(P<0.05),p65无明显变化(P>0.05),且DSS+SA-L、DSS+SA-M、DSS+SA-H组各指标变化呈剂量依赖性。Nrf2通路抑制剂ML385降低高剂量组SA对UC小鼠结肠黏膜的改善作用。结论SA可改善UC样小鼠肠炎,作用机制可能与激活Nrf2通路,抑制Nrf2介导的NF-κB通路有关。

基于HPLC检测市售博落回注射液中血根碱和白屈菜红碱的成分含量

试验旨在评估博落回注射剂产品的质量。试验采用高效液相色谱法,建立了博落回注射剂产品中血根碱和白屈菜红碱的同步测定方法。采用Agilent色谱柱,流动相为乙腈-0.1%磷酸,进行梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,柱温30℃,检测波长为270 nm,进样量5μL。结果显示,博落回注射液中血根碱和白屈菜红碱的HPLC测定方法专属性高,线性范围良好,重复性较好。血根碱和白屈菜红碱精密度RSD分别为0.45%、0.09%,稳定性的RSD分别为0.60%和0.39%,回收率范围分别为99.83%~101.79%、103.47%~105.56%。研究表明,该方法稳定可靠,具有较高的精密度和准确性,可用于评价市售博落回注射液的质量。

血根碱在癌症治疗中的抗肿瘤机制研究进展

随着癌症发病率的持续升高,开发新型抗肿瘤药物已成为科研领域的关键方向。血根碱(sanguinarine),一种来源于传统中药如白屈菜(Chelidonium majus L.)、博落回[Macleaya cordata(Willd.)R.Br]、血水草(Eomecon chionantha Hance)和美洲传统草药血根草(Sanguinaria canadensis L.)等植物的天然生物碱,由于其在抗肿瘤研究中所展现的显著活性,已广受学术界关注。本综述文章旨在梳理血根碱在癌症治疗领域内的研究进展,尤其聚焦其抑制肿瘤增殖、侵袭与转移,并促进肿瘤细胞凋亡的作用机制。研究显示,血根碱通过作用于多条信号传导途径及多种分子靶点,包括Bcl-2、MAPKs、Akt、NF-κB、ROS及微小RNA等,从而发挥其抑制肿瘤的效用。此外,文章还探讨了血根碱针对乳腺癌、肺癌、肝癌及结直肠癌等多种癌症类型的应用研究。据此,开发新的给药策略以提升血根碱的临床应用潜力,成为当前研究的重要课题。未来研究需进一步深化对血根碱抗肿瘤机制的理解,并通过临床前研究及早期临床试验验证其治疗效果与安全性,以期为癌症治疗开辟新路径。

血根碱调节HMGB1/RAGE信号通路对慢性心力衰竭大鼠心肌炎症及细胞凋亡的影响

目的探讨血根碱调节高迁移率族蛋白B1(HMGB1)/晚期糖基化终末产物受体(RAGE)信号通路对慢性心力衰竭(CHF)大鼠心肌炎症及细胞凋亡的影响。方法通过结扎冠状动脉的左前降支建立CHF大鼠模型,随机分为CHF组、血根碱低剂量组(血根碱-L组,1.00 mg/kg血根碱)、血根碱中剂量组(血根碱-M组,2.50 mg/kg血根碱)、血根碱高剂量组(血根碱-H组,6.25 mg/kg血根碱)以及血根碱-H+rHMGB1组(6.25 mg/kg血根碱+8μg/kg rHMGB1),并以仅开胸的正常大鼠作为假手术组,每组10只大鼠。干预结束后,进行超声心动图指标[缩短分数(FS)、左室射血分数(LVEF)、室间隔厚度(IVS)以及舒张末期左心室内径(LVIDD)]检测;称取心脏质量,计算心脏指数;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组血清中白细胞介素(IL)-1β、IL-10、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;分别采用苏木精-伊红(HE)染色、缺口末端标记(TUNEL)染色观察心脏组织病理学变化及细胞凋亡变化;采用蛋白质免疫印迹技术检测心脏组织中HMGB1、RAGE蛋白表达。结果与假手术组相比,CHF组LVIDD、心脏指数、细胞凋亡率及IL-1β、TNF-α、HMGB1蛋白、RAGE蛋白水平明显增加(P<0.05),FS、IVS、LVEF及IL-10水平明显降低(P<0.05);与CHF组相比,血根碱不同剂量组LVIDD、心脏指数、细胞凋亡率及IL-1β、TNF-α、HMGB1蛋白、RAGE蛋白水平明显降低(P<0.05),FS、IVS、LVEF及IL-10水平明显增加(P<0.05);在血根碱不同剂量组中,LVIDD、心脏指数、细胞凋亡率及IL-1β、TNF-α、HMGB1蛋白、RAGE蛋白水平均为血根碱-L组>血根碱-M组>血根碱-H组,FS、IVS、LVEF及IL-10水平均为血根碱-L组<血根碱-M组<血根碱-H组,任意两组间比较,差异均有统计学意义(P<0.05);与血根碱-H组相比,血根碱-H+rHMGB1组LVIDD、心脏指数、细胞凋亡率及IL-1β、TNF-α、HMGB1蛋白、RAGE蛋白水平均明显增加(P<0.05),FS、IVS、LVEF及IL-10水平均明显降低(P<0.05)。结论血根碱可改善CHF大鼠心功能,抑制其心肌炎症及细胞凋亡,以高剂量血根碱效果最佳,可能与调节HMGB1/RAGE信号通路有关。

HPLC-MS/MS法检测血根碱在鸡体内的药代动力学研究

为了建立给鸡灌胃血根碱后同时测定鸡血浆中血根碱及二氢血根碱浓度的HP LC－MS／MS检测方法，并评价血根碱在鸡体内的药代动力学特征，采用甲醇提取鸡血浆中的血根碱及代谢物二氢血根碱，以0．2％甲酸水（A）－乙腈（B）为流动相，选用Agilent Poroshell 120 EC C18（2．1 mm＆#215;150 mm，2．7μm）色谱柱进行色谱分离，采用电喷雾离子源（ ESI）三重四极杆串联质谱进行分析，多重反应监测（ MRM）方式进行检测。血根碱及代谢产物二氢血根碱均在0．1～50．0 ng／mL浓度范围内与色谱峰面积呈良好线性关系，提取回收率分别为88．95％～95．81％和82．00％～87．00％；日内及日间精密度（RSD）均小于15％；血根碱在鸡体内的药代动力学参数Cmax，Tmax，MRT，CL分别为0．90±1．053 ng／mL、0．38±0．30 h、5．11±0．74 h和44．09±3．05 h。血根碱在鸡体内血药达峰时间以及滞留在体内的平均时间较短，代谢物二氢血根碱的血药浓度是血根碱的血药浓度5．74倍，说明代谢物二氢血根碱的血药浓度远大于血根碱的血药浓度。该方法具有快速、灵敏度高、专属性强等特点，适用于同时测定鸡血浆中血根碱和二氢血根碱的血药浓度。

白藜芦醇和血根碱对2~6月龄犊牛生长性能和血清生化指标的影响

旨在研究白藜芦醇(resveratrol,RES)和血根碱(sanguinarine,SAG)对2~6月龄犊牛生长性能和血清生化指标的影响。本研究选用54头5日龄,体重为42kg左右的荷斯坦母犊牛,随机分成3个处理,每个处理18头。处理分别为:代乳粉(milk replacer,MR)组(MR组),作为基础饲粮;血根碱组(基础饲粮+SAG 0.05mg·(kg BW)-1,SAG组)和白藜芦醇组(基础饲粮+RES 4mg·(kg BW)-1,RES组)。在56、90、120、150和180日龄测定犊牛体重和体尺;在60和180日龄采集血液,测定血清生化指标。结果表明:1)与MR组相比,添加RES显著提高180日龄犊牛体重(P<0.05),SAG对180日龄犊牛体重的提高达到显著的趋势(P=0.081 2);2)体尺方面,SAG对150和180日龄犊牛体高有显著增加作用(P<0.05),对180日龄犊牛十字部高也有显著增加作用(P<0.05);3)与MR组相比,60日龄时,RES和SAG显著降低犊牛血清游离脂肪酸(FFA)和胰岛素(INS)浓度(P<0.05);RES显著提高60日龄犊牛血清生长激素(GH)、表皮生长因子(EGF)和类胰岛素生长因子-1(IGF-Ⅰ)浓度(P<0.05);SAG和RES显著提高60日龄犊牛免疫球蛋白A的浓度(P<0.05);SAG和RES对免疫球蛋白G(IgG)影响不显著(P>0.05);60日龄,SAG组犊牛血清丙二醛(MDA)浓度显著高于MR组(P<0.05);RES和SAG对犊牛血清超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和总抗氧化力(T-AOC)没有显著影响(P>0.05)。研究结果表明,犊牛饲粮中添加RES和SAG分别提高了犊牛180日龄体重和体高,均具有改善犊牛血清抗氧化指标的效果。

RP-HPLC法同时测定小果博落回中血根碱和白屈菜红碱的含量

目的 :测定小果博落回中血根碱和白屈菜红碱的含量。方法 :反相高效液相色谱法。色谱柱 :KromasilC18柱 ,流动相 :乙腈 0 .1%磷酸水溶液 ( 2 5∶75 ) ,检测波长 :2 70nm ,流速 1.0ml·min-1。结果 :白屈菜红碱、血根碱的回收率分别为90 .2 % ,92 .8% ;RSD分别为 1.5 % ,2 .4 %。结论 :为测定小果博落回中生物碱含量提供了准确、灵敏、可靠的分析方法。

RP—HPLC法同时测定白屈菜药材中血根碱、小檗碱和白屈菜红碱的含量

目的:建立白屈菜药材的质量标准。方法:采用高效液相色谱法,用 Diamonsil C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-1%三乙胺水溶液(25:75,三乙胺水溶液用磷酸调 pH 3)为流动相,流速:1 mL·min^(-1),检测波长263 nm,柱温:30℃。结果:血根碱在60～1200μg范围内线性良好,r=0.9996,平均加样回收率(n=3)为96.6%～99.9%,RSD 为0.6%～2.0%;小檗碱在30～600μg范围内线性良好,r=0.9999,平均加样回收率(n=3)为99.0%～104.1%,RSD 为0.8%～1.3%;白屈菜红碱在100～2000μg范围内线性良好,r=0.9998,平均加样回收率(n=3)为97.3%～100.8%,RSD 为0.7%～1 4%。结论:本试验同时测定白屈菜药材中血根碱、小檗碱、白屈菜红碱的含量,方法准确,灵敏,可靠。

血根碱对断奶仔猪生长性能、肠道形态结构及小肠黏膜免疫功能的影响

本试验旨在研究血根碱(SAN)对断奶仔猪生长性能、肠道形态结构及小肠黏膜免疫功能的影响。试验选取23日龄平均体重为(6.55±0.18)kg的健康"杜×长×白"三元杂交断奶仔猪36头,按体重相近、性别比例相同原则随机分为3组,分别饲喂基础饲粮(对照组)、基础饲粮+75 mg/kg金霉素(抗生素组)、基础饲粮+50 mg/kg SAN(SAN组),每组12个重复,每个重复1头猪,试验期21 d。结果表明:1)与对照组相比,SAN组和抗生素组的平均日增重和平均日采食量显著提高(P<0.05),料重比和腹泻率显著降低(P<0.05);但SAN组与抗生素组间以上生长性能指标均无显著性差异(P>0.05)。2)与对照组相比,SAN组和抗生素组的十二指肠和空肠绒毛高度、绒毛高度/隐窝深度(V/C)值显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01),但SAN组和抗生素组间以上指标均无显著差异(P>0.05);而SAN组回肠绒毛高度、V/C值显著高于其他2组(P<0.05)。3)与对照组相比,SAN和抗生素组的十二指肠、空肠和回肠黏膜免疫球蛋白A、免疫球蛋白G和免疫球蛋白M含量均显著或极显著升高(除十二指肠黏膜免疫球蛋白G和空肠黏膜免疫球蛋白M外)(P<0.05或P<0.01);但SAN组和抗生素组间以上指标均无显著差异(P>0.05)。由此可见,饲粮中添加SAN可以改善肠黏膜形态,提高小肠黏膜免疫功能,从而提高断奶仔猪的生长性能,达到与添加抗生素相当的效果。