补体因子H相关蛋白1促进巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子-α调控足细胞增殖和迁移实验研究

目的:探讨补体因子H相关蛋白1(CFHR1)通过巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)调控足细胞增殖和迁移的作用。方法:体外培养人单核巨噬细胞和人肾足细胞。巨噬细胞分为对照组和CFHR1干预组,分别进行牛血清白蛋白或CFHR1重组蛋白干预24 h,ELISA法测定上清液TNF-α水平。足细胞分为空白组、TNF-α干预组、对照上清液干预组、CFHR1上清液干预组、CFHR1上清液+TNF-α中和抗体干预组。CCK8法检测各组细胞增殖。Transwell法检测各组细胞迁移。Wb法检测各组细胞中相关蛋白变化。结果:巨噬细胞的CFHR1干预组上清液中TNF-α含量显著增加(P<0.05)。与空白组比较,TNF-α干预组、CFHR1上清液干预组的细胞增殖比率和迁移数量均显著降低(均P<0.05)。与CFHR1上清液干预组比较,CFHR1上清液+TNF-α中和抗体干预组的细胞增殖比率和迁移数量均显著提高(均P<0.05)。与空白组比较,TNF-α干预组、CFHR1上清液干预组的足细胞裂孔膜蛋白(Nephrin)、足突蛋白(Podocin)、纤维状肌动蛋白(F-Actin)、整合素α3β1蛋白(α3β1)表达均显著降低(均P<0.05)。与CFHR1上清液干预组比较,CFHR1上清液+TNF-α中和抗体干预组的Nephrin、Podocin、F-actin、α3β1蛋白表达均显著增多(均P<0.05)。结论:CFHR1促进巨噬细胞分泌的TNF-α可显著抑制足细胞增殖水平和迁移能力,这可能是高浓度CFHR1促进肾病综合征发展的途径。

补体因子H相关蛋白1在足细胞疾病中的研究进展

足细胞疾病(podocytopathies)是指直接或间接的足细胞损伤导致蛋白尿的肾脏疾病。国内外许多学者发现补体系统与足细胞损伤相关,补体因子H (complement factor H, CFH)及补体因子H相关蛋白1 (complement factor H-related 1, CFHR1)是补体替代途径激活过程中起重要调节作用的血浆蛋白。CFHR1在足细胞疾病中的发病机制至今仍不清楚,目前研究发现补体替代途径所介导的炎症反应可能起到关键作用,而CFHR1是补体替代途径激活过程中重要的调节物质。本文对CFHR1在足细胞疾病中的作用进行综述,以期为相关足细胞疾疾病的诊断和治疗提供参考。

MASP-2和补体因子H在自身免疫性肝炎患者中的表达意义

目的分析自身免疫性肝炎患者甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶2(MASP-2)和补体因子H水平与疾病严重程度及复发的关系。方法回顾性分析2020年2月至2021年2月在延安市人民医院诊治的60例自身免疫性肝炎患者的临床资料,将其作为观察组,其中男性17例,女性43例,年龄(52.71±3.58)岁,根据Child-Pugh分级将其分为A级组(26例)、B级组(22例)、C级组(12例),另根据随访1年结果将其分为复发组(15例)和未复发组(45例)。并选取同期60例在延安市人民医院体检的健康人群作为对照组,其中男性13例,女性47例,年龄(52.64±3.62)岁。采用t检验或重复测量方差分析比较不同组别之间的MASP-2、补体因子H水平差异;采用Spearman相关性分析MASP-2、补体因子H水平与Child-Pugh分级之间的相关性,采用受试者操作特征曲线(ROC)分析MASP-2、补体因子H水平预测自身免疫性肝炎患者复发的价值。结果观察组MASP-2、补体因子H水平分别为(91.89±15.74)μg/L、(66.28±12.58)mg/L,均低于对照组的(262.93±35.63)μg/L、(145.31±25.71)mg/L,差异均有统计学意义(t=31.013、21.387,均P<0.001)。A级、B级组MASP-2、补体因子H水平分别为(106.72±16.52)μg/L、(84.94±14.73)μg/L、(76.87±12.46)mg/L、(61.66±9.38)mg/L,均高于C级组的(72.80±12.59)μg/L、(52.12±8.89)mg/L,且A级组均高于B级组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。复发组MASP-2、补体因子H水平分别为(78.30±13.66)μg/L、(56.20±8.53)mg/L,均低于未复发组的(96.48±15.57)μg/L、(69.61±7.36)mg/L,差异均有统计学意义(t=4.030、5.893,均P<0.001)。Spearman相关性分析显示,MASP-2、补体因子H水平与Child-Pugh分级均呈负相关(r=-0.721、-0.748,均P<0.05)。ROC分析结果显示,MASP-2、补体因子H水平在预测自身免疫性肝炎患者复发中具有较高的价值,曲线下面积(AUC)分别为0.823、0.877。结论随着病情加重,自身免疫性肝炎患者MASP-2、补体因子H水平均降低,该两项指标在预测自身免疫性肝炎患者病情复发中具有较高的价值,可用于评估病情严重程度和预后情况。

补体因子H和补体因子H相关蛋白1、2、3和5与IgA肾病的关联性

目的研究血浆和尿液中补体因子H(CFH)及补体因子H相关蛋白(CFHRP)1、2、3和5与IgA肾病的关联性。方法纳入新疆维吾尔自治区人民医院肾病科经肾活检术诊断为IgA肾病的患者153例和健康体检的志愿者150例,采用酶联免疫吸附方法检测血浆和尿液中CFH和CFHRP 1、2、3和5的浓度水平,同时记录患者基线数据、临床及病理资料信息。结果血浆中CFH浓度水平与血肌酐、尿素氮和尿蛋白定量成反比,而与血清白蛋白是正比的。牛津分级MEST评分和慢性肾脏病分期等级越高,IgA肾病患者血浆中CFH浓度水平越低,而尿液中CFH和CFHRP 5浓度水平越高。结论血浆和尿液中CFH和CFHRP1和5的浓度水平与IgA肾病的临床病理等具有一定的关联性。

补体因子H、补体因子H相关蛋白在IgA肾病诊断中的应用价值

目的探讨血浆补体因子H(CFH)和补体因子H相关蛋白(CFHRP) 1、CFHRP 5在Ig A肾病(Ig AN)诊断中的价值。方法选取疑似Ig AN患者157例,另选取60例健康体检者作健康对照组。对157例疑似Ig AN患者均在B超引导下行肾活检术,以肾组织病理检查结果为确诊Ig AN的金标准。收集受试者晨血2 m L,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血浆CFH、CFHRP1、CFHRP5水平。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,计算血浆CFH、CFHRP1、CFHRP5诊断灵敏度和特异度,通过比较ROC曲线下面积(AUC)来判断上述三种指标对Ig AN的诊断价值。结果经肾组织病理检查,确诊Ig AN(Ig AN组) 89例、其他肾脏疾病(其他肾脏疾病组) 68例。Ig AN组血浆CFH水平低于其他两组,血浆CFHRP1、CFHRP5水平均高于其他两组(P均<0. 05)。血浆CFH、CFHRP1、CFHRP5诊断Ig AN的灵敏度分别为85%、69%、60%,特异度分别为71%、77%、71%; ROC曲线显示上述三种指标的AUC均大于0. 7,其中CFH的AUC最大(0. 862)。结论血浆CFH、CFHRP1、CFHRP5对诊断Ig A肾病均具有一定价值,其中CFH的诊断价值较高。

血浆超敏C反应蛋白和补体因子H浓度与冠心病的关系研究

目的：研究血浆超敏C反应蛋白（hsCRP）和补体因子H（CFH）浓度与冠心病（CAD）的关系。方法：采用Judkins法进行冠状动脉造影。应用酶联免疫法测定血浆hsCRP和CFH浓度。冠状动脉病变分为1、2和3支病变，采用病例对照的方法进行研究。结果：hsCRP对CAD易感性预测的ROC曲线下面积为0．607（95％CI为0．540—0．675，P=0．002），敏感性72％，特异性59％。CFH对CAD易感性预测的ROC曲线下面积为0．483（95％CI为0．414～0．552，P=O．624），敏感性52％，特异性48．7％。2支病变组hsCRP水平较对照组差别有统计学意义（P〈0．05）。血浆CFH浓度在不同血管病变支数组间无统计学差异（P〉0．05）。校正性别、糖尿病、高脂血症等参数后，吸烟和高血压仍然是CAD的独立危险因子，hsCRP与CAD无关。结论：hsCRP和CFH与CAD之间无相关性，hsCRP与冠状动脉病变程度弱相关。

补体因子H 1277T>C多态性与不稳定型心绞痛的相关性

目的研究补体因子H基因1277T〉C多态性与不稳定型心绞痛发病的相关性。方法运用聚合酶链反应限制片长多态性检测补体因子H 1277T〉C单核苷酸多态性位点基因型,观察其多态性的基因型及等位基因在湖南籍汉族150例不稳定型心绞痛患者和146例健康对照者中的分布频率。结果不稳定型心绞痛组与健康对照组TT、TC基因型和T、C等位基因频率分布差异显著（P〈0.05）,TC＋CC基因型频率分布差异亦有显著性（OR为3.06,95%C I为1.60-5.86,P〈0.01）。结论湖南汉族人群中补体因子H 1277T〉C多态性与不稳定型心绞痛有明显相关性,该基因多态性可能是冠心病遗传易感标志。

瑞舒伐他汀对动脉粥样硬化斑块中补体因子H表达的影响

目的研究瑞舒伐他汀对载脂蛋白E基因缺陷小鼠(ApoE-/-小鼠)动脉粥样硬化处补体因子H(CFH)表达的影响。方法 8周龄ApoE-/-小鼠随机分为4组:模型组Ⅰ(高脂饲料喂养10周)、模型组Ⅱ(高脂饲料喂养20周)、预防组(在给予高脂饲料的同时予瑞舒伐他汀预防性给药10周)和治疗组(于高脂饲料喂养10周后,给予瑞舒伐他汀,喂至20周)。阶段试验结束时取主动脉做HE染色及免疫组化,检测CFH mRNA转录和蛋白表达水平;检测血脂及血清hsCRP、C3a水平。结果与模型组Ⅰ和模型组Ⅱ比较,预防组及治疗组ApoE-/-小鼠主动脉内膜和斑块内CFH表达增多;CFH的mRNA转录水平和蛋白表达水平升高;血脂、hsCRP、C3a水降低(P<0.01或0.05)。结论瑞舒伐他汀降低血脂水平,降低动脉粥样硬化的炎症免疫反应,增加CFH表达。

2型糖尿病患者血清补体因子H与胰岛素抵抗相关性研究

目的探讨体液循环中血清补体因子H的表达与糖脂代谢和胰岛素抵抗之间的相关性。方法将60例2型糖尿病患者按体质指数(BMI)分为肥胖组(BMI≥25 kg/m2)32例与非肥胖组(BMI﹤25 kg/m2)28例;30例同期健康体检正常者为对照组。采用酶联免疫吸附试验法检测血清补体因子H,放射免疫法测定胰岛素,全自动生化分析检测空腹血糖、血脂,全自动糖化分析仪测糖化血红蛋白(HbA1c);同时测量身高、体质量、血压、腰围、臀围、收缩压、舒张压,计算BMI和腰臀比(WHR),并计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。结果 3组受检者血清补体因子H比较,差异有统计学意义(P<0.05)。补体因子H水平与BMI、空腹血糖、HOMA-IR、HbA1c、空腹胰岛素、三酰甘油水平均呈正相关(P<0.01)。结论 2型糖尿病血清中补体因子H水平的升高,尤其是肥胖的2型糖尿病患者更明显,血清补体因子H可能参与了2型糖尿病肥胖患者的胰岛素抵抗的形成。2型糖尿病患者血清补体因子H水平均与胰岛素抵抗有关,表明在一定程度上,补体因子H水平可成为预测肥胖者发展为糖耐量异常的因子。

补体因子H Y402H基因多态性与动脉粥样硬化性脑梗死的关系

目的探讨补体因子H Y402H基因多态性与动脉粥样硬化性脑梗死发病的关系及其对颈总动脉内膜-中膜厚度的影响。方法选择190例动脉粥样硬化性脑梗死患者,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测补体因子H Y402H基因多态性,彩色多普勒超声技术检测颈总动脉内膜-中膜厚度,并与200名健康对照比较。结果在脑梗死组中CC基因型和TC基因型颈总动脉内膜-中膜厚度明显高于TT基因型,而各基因型频率与健康对照组比较差异无统计学意义。结论补体因子H Y402H基因多态性可能不是动脉粥样硬化性脑梗死的遗传易感因素,但可能与动脉粥样硬化有关。

国人年龄相关性黄斑变性与补体因子H Y402H相关性研究的Meta分析

目的:评价国人年龄相关性黄斑变性(AMD)与补体因子H(CFH)Y402H相关性。方法:计算机检索中国数字医院图书馆全文数据库、中国生物医学文献光盘数据库和MEDLINE(1995年1月～2008年10月),手工检索国内外相关教科书、杂志、会议论文等及其参考文献,所有研究对象均为中国人。两名评价者独立对纳入文献进行质量评价、提取资料。采用RevMan5进行Meta分析,并根据异质性检验结果采用相应模型进行合并。结果:10篇文献、共2459人符合纳入标准,均为高质量研究。Meta分析结果显示:等位基因频率C/T的比值比(OR)为2.39,95%可信区间(95%CI)为1.96～2.90,P<0.00001,表明在中国人中C基因型频率分布与AMD的关联有统计学意义,基因型CC和CT对基因型TT的OR值分别是5.49(95%CI3.20～9.45,P<0.00001)和1.91(95%CI1.47～2.50,P<0.00001)。结论:目前研究结果的Meta分析显示,CFH的单核苷酸多态性Y402H与AMD的发病率有明显的相关性,但从现有临床证据来看,还需高质量的随机对照试验来进一步验证、支持。

补体因子H基因^(1277)T/C多态性与早发冠心病的相关性研究

目的:探讨补体因子H(CFH)基因1277T/C多态性与早发冠心病的相关性。方法:选择早发冠心病患者(男<55岁,女<60岁)125例、非冠心病对照组126例,收集研究对象临床资料,检测生化指标。采用聚合酶链反应-连接酶检测反应(PCR-LDR)分析CFH基因1277T/C多态性。结果:早发冠心病组吸烟、高血压病及糖尿病比例较对照组明显增多(P<0.05)。早发冠心病组与对照组CFH基因1277T/C中TT、TC、CC基因型频率分布差异无统计学意义(χ2=0.081,P>0.05)。结论:CFH基因1277T/C多态性可能与早发冠心病的易感性无关。

2型糖尿病患者血清补体因子H与胰岛素抵抗相关性研究

目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者糖脂代谢和胰岛素抵抗的变化情况,分析其与患者血清补体因子H表达之间的相关性。方法选择2015年1月至2016年2月期间T2DM的患者120例为研究对象,根据亚太地区2000年的肥胖标准分为肥胖组(64例)和非肥胖组(56例),另选择同期体检的健康人群60例为对照组。比较各组患者的血清补体因子H表达情况及空腹胰岛素、空腹血糖、血脂水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),分析各指标与补体因子H表达的相关性。结果肥胖组、非肥胖组、对照组血清补体因子水平分别为(196.38±23.49)mg/L、(184.34±21.48)mg/L和(173.26±18.37)mg/L,肥胖组>非肥胖组>对照组,组间比较差异有显著的统计学意义(P<0.01);T2DM患者血清补体因子H与体质指数(BMI)、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、甘油三酯(TG)、空腹血糖(FBG)水平均呈正相关(r=0.397、0.601、0.333、0.312、0.524,P均<0.01),与高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)呈负相关(r=-0.588,P<0.01)。结论补体因子H可能参与了肥胖及T2DM的发病过程,临床上有望将补体系统作为T2DM的治疗靶点。

补体因子H与非典型性溶血性尿毒综合征

溶血性尿毒综合征以微血管溶血性贫血、血小板减少和急性肾功能衰竭为临床特征。基因分析研究表明补体因子H与非典型性溶血性尿毒综合征的发病密切相关 ,并且发现突变大多丛集在补体因子H的C 末端 ,被称为“突变焦点”。

补体因子H基因与老年性黄斑变性风险的相关性

老年性黄斑变性( AMD )是一种影响中心视力的复杂不可逆的脉络膜视网膜退行性疾病〔1〕.AMD可分为干性AMD(表现为地图样萎缩、光感受器减少、广泛的视网膜色素上皮细胞萎缩简称萎缩)和湿性AMD (新生血管性或渗出性).基于眼底的表现, AMD 可分为早期、中期、晚期 3 个阶段〔2〕.

补体因子H关键结构域野生型及突变型克隆载体的构建表达与功能初探

目的构建并表达补体因子H(complement factor H,CFH)关键结构域蛋白,即野生型短同源重复序列(short consensus repeats,SCR)7和SCR19-20,突变型SCR7 Y402H、SCR19-20 R1210C、SCR19-20 R1215Q,探讨CFH基因突变导致补体过度激活疾病的可能机制。方法采用In-Fusion反应,将编码SCR7(386~446位氨基酸)和SCR19-20(1107~1231位氨基酸)的cDNA序列分别克隆入pET-47b(+)载体,定点突变引入3个预期突变位点Y402H、R1210C和R1215Q,再将携带pET-47b(+)载体6-His纯化标签的CFH-SCR7和CFH-SCR19-20野生型和突变型重组质粒导入穿梭载体pNCMO2,在短芽孢杆菌中进行上述蛋白结构域的表达、Ni-NTA树脂纯化、SDS-PAGE电泳和蛋白质印迹法鉴定。通过检测其与肝素的亲和能力初步鉴定野生型与突变型的功能差异。结果成功构建了CFH关键结构域SCR7和SCR19-20的野生型和突变型重组表达载体pNCMO2-SCR7、pNCMO2-SCR19-20、pNCMO2-SCR7 Y402H、pNCMO2-SCR19-20 R1210C、pNCMO2-SCR19-20 R1215Q。5种重组体均高效表达且经抗6-His抗体和特异性抗CFH单克隆抗体进行蛋白质印迹法实验验证均为相应正确蛋白。SCR7 Y402H比野生型的肝素亲和力强,R1210C和R1215Q均比SCR19-20野生型亲和力弱。结论成功构建并表达了CFH SCR7和SCR19-20突变体,初步鉴定了突变蛋白结构域的功能,为体外进一步研究CFH基因突变致补体过度激活类疾病发生的可能机制奠定了实验基础。

补体因子H多态性在年龄相关性黄斑变性发病中的作用机制

目的:探讨补体H因子的多态性在年龄相关性黄斑变性疾病发生中的作用机制。资料来源:应用计算机检索PubMed数据库1983-01/2006-12相关年龄相关性黄斑变性及补体H因子多态性方面的文献,检索词"Age-related macular degeneration,complement factor H,polymorphism,epidemiology,etiology",限定文献语言种类为Engllish。资料选择:对资料进行初审,选取包括年龄相关性黄斑变性流行病学、病因学以及补体H因子多态性方面的文献,开始查找全文。纳入标准:文章所述内容与年龄相关性黄斑变性或补体H因子相关。排除标准:临床诊断及治疗。资料提炼:共检索到176篇相关文献,最终纳入38篇符合标准的文献。资料综合:年龄相关性黄斑变性的发病机制十分复杂,至今尚不清楚。最近研究发现,补体因子H在年龄相关性黄斑变性的发生、发展中起着相当重要的作用,如果补体因子H功能下降,补体被异常激活,导致补体成分C3b、C5b-9产生增多,C5b-9(膜攻击复合体)沉积于视网膜色素上皮细胞基底层,促进玻璃膜疣的形成并沉积于视网膜色素上皮层与Bruch膜之间,引起视网膜色素上皮层-Bruch膜-脉络膜毛细血管复合体变性,黄斑区和后极部萎缩,进而Bruch膜内胶原增厚,弹力纤维层断裂,脉络膜毛细血管进入视网膜色素上皮层下及视网膜神经上皮层下,最终导致视网膜下新生血管的形成,年龄相关性黄斑变性的发生。结论:补体因子H多态性在年龄相关性黄斑变性的发生中起着非常重要的作用,这为今后采取新的早期干预措施、寻求更为有效的治疗方法提供了新的方向。

冠心病患者血浆补体因子H浓度检测及其临床意义

目的：本研究通过对冠心病患者血浆中补体因子H（CFH）的定量分析,探讨CFH与冠心病的相关性。方法：冠心病组40例,正常对照组40例,采用ELISA方法检测CFH的浓度。结果：冠心病组CFH浓度为513.6±231.75ng/ml,而正常对照组CFH浓度为665.2±138.06ng/ml,冠心病组CFH浓度明显低于正常对照组（P〈0.01）。结论：CFH是反映冠心病的敏感标志物。