尿补体因子D联合子宫动脉血流对PE的临床初探

目的探讨尿补体因子D联合子宫动脉搏动指数(PI)、阻力指数(RI)对高危孕妇先兆子痫(PE)筛查的临床应用价值。方法调取2021年9月至2022年9月在新疆克拉玛依市中心医院定期保健并分娩的102例先兆子痫患者为病例组,血压正常148例为对照组。采用成都创宜生物科技有限公司研发的安宜康在孕11周-20周进行尿液检测,并于孕20周-24周接受子宫动脉血流参数PI、RI检测。比较两组孕妇妊娠结局、尿液补体因子D及PI、RI值,分析各指标预测PE的效能。结果1.病例组确诊时孕前体重指数、血压值、尿蛋白定量、血尿酸、血肌酐、血尿素氮均高于血压正常组,空腹血糖值二者相比无差异。胎儿分娩孕周,胎盘质量及新生儿出生体重均低于对照组(均P=0.000)。2.尿液补体因子D检测阳性患者中,病例组占比远高于对照组。超声子宫动脉血流参数PI、RI水平,病例组均高于对照组(P<0.05)。3.尿液补体因子D、PI、RI预测先兆子痫,AUC分别为0.748(95%CI:0.686~0.812)、0.714(95%CI:0.648~0.781)、0.680(95%CI:0.614~0.747)。三者联合预测先兆子痫的曲线下面积高于单独预测先兆子痫的曲线下面积:AUC为:0.862,(95%CI:0.817~0.908)。结论尿补体因子D与子宫动脉PI和RI值的异常与先兆子痫患者存在一定的相关性,但是否能够预测先兆子痫还需要进一步深入的研究。

基于补体D因子介导的自噬探讨平喘颗粒抑制巨噬细胞M2型极化的机制

目的:观察平喘颗粒对巨噬细胞补体D因子(CF D)表达水平及其介导的自噬的影响,从而明确其抑制巨噬细胞M2型极化的作用机制。方法:采用白介素-4诱导U937细胞构建M2型巨噬细胞模型并给予平喘颗粒含药血清进行干预,分别以Western blot、RT-qPCR及免疫荧光法检测CFD的表达水平。以慢病毒转染CFD-shRNA及自噬诱导剂雷帕霉素作为对照,分别采用Western blot、RT-qPCR和流式细胞术巨噬细胞中M2型极化标记分子、自噬相关蛋白及CF D的表达水平,透射电镜观察巨噬细胞自噬小体的数量。结果:与模型组比较,平喘颗粒组显著降低U937细胞中CFD、Arg-1、FI ZZ1、YM1的表达水平及CD206阳性细胞百分比(P<0.01)。而在CFD-shRNA稳转U937细胞中加入CFD重组蛋白后,Arg-1、FIZZ1、YM1的表达水平及CD206阳性细胞数与模型组比较无显著性差异。与模型组比较,平喘颗粒组Beclin1与LC3Ⅱ/LC3Ⅰ显著降低(P<0.01),p62蛋白表达水平显著增加(P<0.01)。在CFD-shRNA稳转U937细胞中加入CF D重组蛋白后,自噬标记蛋白的表达水平与模型组比较无显著性差异。平喘颗粒+雷帕霉素组A rg-1、FIZZ1、YM1的表达水平及CD206阳性细胞数量显著高于平喘颗粒组(P<0.01)。结论:平喘颗粒可通过抑制CFD的表达水平进而抑制巨噬细胞的自噬水平,从而抑制巨噬细胞的M2型极化。

鸡补体因子C3d对禽流感病毒M2蛋白免疫应答反应的增强作用

M2蛋白是禽流感病毒中具有交叉保护性的结构蛋白,但其抗原性差,难以诱导高水平的免疫反应.分别将一个鸡补体因子C3d,2个C3d基因同禽流感sM2基因(缺失跨膜区的M2基因)以柔性肽链Linker串联连接,构建了4个重组质粒并在大肠杆菌中表达出4种带有谷胱苷肽硫转移酶(GST)的融合蛋白:GST-C3d-sM2,GST-C3d-L2-sM2,GST-C3d-L1-C3d-sM2,GST-C3d-L1-C3d-L2-sM2.将纯化后的4个融合蛋白及对照GST-sM2蛋白免疫BALB/c鼠4次(每组10只),结果在三免后,4个融合蛋白免疫的BALB/c鼠体内抗sM2抗体滴度与对照组相比均差异显著(p<0.05),并且GST-C3d-L1-C3d-L2-sM2组的抗体滴度最高.另外,分别构建重组质粒pcDNA-sM2和pcDNA-C3d-L1-C3d-L2-sM2,然后以这两种DNA疫苗与蛋白GST-C3d-L1-C3d-L2-sM2和GST-sM2同时接种14日龄SPF鸡3次(每组15只).结果表明,蛋白GST-C3d-L1-C3d-L2-sM2和对照组GST-sM2的抗sM2抗体滴度差异明显(p<0.01),而pcDNA-C3d-L1-C3d-L2-sM2平均sM2抗体滴度也明显高于对照组pcDNA-sM2(p<0.05).分别以脂多糖(LPS)和刀豆蛋白(ConA)作为致裂原对SPF鸡的外周血淋巴细胞进行淋巴细胞转化试验(MTT法).结果以LPS刺激的淋巴细胞的增殖程度在融合蛋白GST-C3d1-L1-C3d2-L2-sM2免疫组与对照组GST-sM2之间以及pcDNA-C3d-L1-C3d-L2-sM2免疫组与对照组pcDNA-sM2之间均差异极显著(p<0.01),而ConA刺激的淋巴细胞各组之间则无显著差异.所有这些结果证实,鸡补体因子C3d无论是在原核系统表达的融合蛋白,还是插入DNA疫苗中均可以增强禽流感病毒M2蛋白引起的免疫应答反应.

补体因子D及脂联素在子痫前期孕妇胎盘组织血清及尿液中的表达及相关性研究

目的检测子痫前期孕妇胎盘组织、血清及尿液中补体因子D（CFD）以及脂联素（ADPN）的水平,分析二者的相关性及其临床意义。方法选取2014年3~9月在重庆医科大学附属第一医院产科住院行剖宫产术的子痫前期孕妇29例（子痫前期组）和正常足月妊娠行择期剖宫产术的孕妇30例（正常妊娠组）,采用Western blotting检测正常妊娠组和子痫前期组孕妇胎盘组织中CFD、ADPN的表达水平。采用ELISA方法检测两组孕妇血清及尿液中CFD、ADPN水平,计算2个指标的组间水平差异,并分析二者的相关性。结果 （1）胎盘组织中,与正常妊娠组比较,子痫前期组孕妇CFD表达水平显著升高,而ADPN水平显著下降,差异均有统计学意义（P〈0.05或0.01）。（2）正常妊娠组孕妇血清及尿液中CFD水平为（0.67±0.04）μg/m L、（43.27±16.59）ng/m L,显著低于子痫前期组[（1.83±0.59）μg/m L、（174.95±23.61）ng/m L],差异均有统计学意义（P〈0.01）;正常妊娠组孕妇血清及尿液中ADPN水平[（80.68±1.27）、（9.29±1.33）ng/m L]显著高于子痫前期组[（13.16±2.01）、（2.40±0.86）ng/m L],差异均有统计学意义（P〈0.05）。（3）在子痫前期组孕妇的胎盘组织、血清及尿液中,CFD、ADPN水平均呈显著负相关（r=-0.82、-0.78、-0.63,P〈0.05）。结论子痫前期孕妇胎盘、血清和尿液中CFD、ADPN水平的异常变化与子痫前期发病有关,二者可能存在协同作用。联合检测孕妇血清和尿液中CFD、ADPN水平有望成为预测及诊断子痫前期的一种新手段。

尿液补体因子D联合血清胱抑素C预测重度子痫前期肾损伤的价值研究

目的探讨尿液补体因子D联合血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(简称胱抑素C)水平在预测重度子痫前期肾损伤中的价值。方法回顾性分析2015年6月-2017年8月西安市第三医院妇产科就诊的260例孕妇的临床资料,根据是否发展为重度子痫前期分为病例组和对照组。以上孕妇在孕中期均进行尿液补体因子D和血清胱抑素C水平的检测,同时收集以上孕妇发生重度子痫前期时肾功能的指标(24 h肌酐清除率),比较两组人群尿液补体因子D、血清胱抑素C水平、24 h肌酐清除率的差异,采用受试者操作特征(ROC)曲线计算尿液补体因子D和血清胱抑素C水平预测肾损伤的曲线下面积(AUC)。结果 260例孕妇中25例发展为重度子痫前期,发生率为9.62%,病例组中患者均出现不同程度的肾损伤。病例组尿液补体因子D、血清胱抑素C水平高于对照组,尿液补体因子D、血清胱抑素C水平能够预测重度子痫前期肾损伤,AUC分别为0.747(95%CI:0.632,0.832)、0.776(95%CI:0.676,0.861),两个指标联合的AUC为0.881(95%CI:0.719,0.932)。结论尿液补体因子D和血清胱抑素C水平可作为预测重度子痫前期肾损伤的指标,具有一定的临床参考价值,值得在临床推广。

血清补体因子B、补体因子D水平及血清C肽水平与糖尿病周围神经病变的相关性研究

目的探究血清补体因子B(CFB)、补体因子D(CFD)水平和血清C肽水平与糖尿病周围神经病变(DPN)的相关性,为临床防治该病提供参考依据。方法回顾性分析2021年6月至2022年6月苏州市吴江区第五人民医院收治的56例单纯2型糖尿病(T2DM)患者和60例DPN患者的临床资料,分别将其分作为T2DM组(56例)和DPN组(60例)。另选取同期进行体检的健康体检者50例作为阴性对照组(NC组),比较3组研究对象的临床资料和各项生化指标;分析一般资料中差异有统计学意义的指标与DPN发生的相关性,并将有差异的指标作为自变量,将发生DPN作为因变量,通过Logistic回归分析模型分析影响DPN发生的危险因素。结果3组研究对象空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA_(1c))、餐后2 h血糖(2 h PG)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、C肽、CFB、CFD相比,差异均有统计学意义(均P<0.05);其中DPN组研究对象FPG、HbA_(1c)、2 h PG、TNF-α、CFB、CFD高于T2DM组和NC组,且T2DM组FPG、HbA_(1c)、2 h PG、CFB、CFD高于NC组;DPN组研究对象C肽低于T2DM组和NC组,T2DM组低于NC组;DPN组和T2DM组FT3水平低于NC组,DPN组三酰甘油(TG)高于NC组(均P<0.05);DPN发生与FPG、2 h PG、HbA_(1c)、TNF-α、CFB、CFD指标呈正相关,与FT3、C肽呈负相关;FPG水平高、2 h PG水平高、HbA_(1c)水平高、TNF-α水平高、CFB水平高、CFD水平高均是影响DPN发生的危险因素,FT3水平高、C肽水平高均是影响DPN发生的保护因素(均P<0.05)。结论DPN发生与FPG、2 h PG、HbA_(1c)、TNF-α、CFB、CFD指标呈正相关,与FT3、C肽呈负相关;FPG水平高、2 h PG水平高、HbA_(1c)水平高、TNF-α水平高、CFB水平高、CFD水平高均是影响DPN发生的危险因素,FT3水平高、C肽水平高均是影响DPN发生的保护因素。

adipsin、A-FABP在妊娠期糖尿病胰岛素抵抗患者血清中的表达水平及其临床意义

【目的】探讨脂肪酶(adipsin)、脂肪细胞脂肪酸结合蛋白(A-FABP)在妊娠期糖尿病(GDM)胰岛素抵抗患者血清中的表达水平及其临床意义。【方法】选取陕西省安康市妇幼保健院2019年6月至2022年6月收治的100例GDM患者(观察组),另外,选取同期100例产检正常的孕妇作为对照组。比较两组孕妇三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)、糖化血红蛋白(HbA1c)、稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、adipsin、A-FABP水平;采用Spearman相关系数模型分析糖脂代谢指标、adipsin、A-FABP与HOMA-IR的相关性;采用非条件Logistic逐步回归分析GDM患者发生胰岛素抵抗的影响因素。【结果】观察组TG、FPG、HbAlc、FINS、HOMA-IR、adipsin、A-FABP水平均显著高于对照组(P>0.05);但两组TC、HDL-C、LDL-C比较,差异无统计学意义(P>0.05);相关性分析结果显示:FPG、HbAlc、FINS、TG、adipsin、A-FABP与HOMA-IR呈正相关(P<0.05);多因素Logistic回归性分析结果显示:FPG、HbAlc、FINS、TG、adipsin、A-FABP是GDM患者发生胰岛素抵抗的影响因素(P<0.05)。【结论】adipsin、A-FABP与GDM胰岛素抵抗显著相关,是预测GDM胰岛素抵抗的重要指标。

表达鸡补体因子C3d基因重组杆状病毒的构建及初步应用

为研制鸡体内补体因子C3d抗体的检测方法,采用RT-PCR方法从鸡肝脏组织细胞的总RNA中扩增出1 002bp的鸡补体因子C3d基因全长,然后将其克隆到杆状病毒载体pFB-LIC-Bse中获得重组质粒pFB-C3d。将pFB-C3d转化到带有杆状病毒基因组的DH10Bac感受态细胞中,制备重组杆粒rBacmid-C3d。再将该重组杆粒转染到昆虫细胞sf9中,通过病毒拯救技术构建携带C3d基因的重组杆状病毒。Western blot试验结果表明,重组杆状病毒能在昆虫细胞sf9中表达出大小约为35 000的C3d-his融合蛋白。以该融合蛋白作为抗原建立的Western blot和间接免疫荧光试验(IFA)显示,经C3d-M2-GST融合蛋白免疫的鸡血清能够与杆状病毒表达的C3d结合,说明本研究构建的重组杆状病毒可以用来检测C3d作为分子佐剂及其融合蛋白免疫鸡后产生针对C3d自身的抗体,为今后建立体内C3d水平监测的指示系统奠定基础。

糖尿病周围神经病变患者血清补体B、D因子水平及相关性

目的探讨2型糖尿病(T2DM)合并周围神经病变(DPN)患者血清补体因子B(CFB)、补体因子D(CFD)的水平及意义。方法选取2019年10月至2020年10月于济宁医学院附属医院内分泌科住院的T2DM患者110例,根据是否合并DPN分为糖尿病周围神经病变组(n=60)和单纯T2DM组(n=50);另选取同期于体检中心的体检人群52例为正常对照组(n=52)。ELISA法测定各组血清CFB、CFD、TNF-α的水平,分析CFB、CFD与各临床指标的相关性,采用logistic回归分析DPN的影响因素。结果糖尿病周围神经病变组CFB、CFD水平高于T2DM组和正常对照组[CFB:(845.43±101.10)μg/ml vs(792.19±116.59)μg/ml、(739.20±123.43)μg/ml,P<0.05]、[CFD:(491.71±41.03)mg/L vs(467.58±45.16)mg/L、(445.16±50.47)mg/L,P<0.05]。Pearson相关分析显示,血清CFB的水平与糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹血糖(FPG)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)呈正相关(均P<0.05),与游离三碘甲状腺原氨(FT3)、总胆红素(TBIL)呈负相关(均P<0.05)。血清CFD的水平与收缩压、HbA1c、FPG、TNF-α呈正相关(均P<0.05),与FT3、TBIL呈负相关(均P<0.05)。Logistic回归分析显示,排除收缩压、HbA1c、FPG、FT3、DBIL、TBIL、TNF-α等混杂因素后,CFB和CFD仍是DPN发生和发展的影响因素。结论(1)DPN患者血清CFB、CFD水平显著升高,提示CFB、CFD可能参与了DPN的发生和发展。(2)DPN患者血清TNF-α水平显著升高,验证了TNF-α在DPN发病过程中的作用。

重度子痫前期患者血清补体因子D、补体C5a的表达及与肾功能和平均动脉压的相关性分析

目的探讨重度子痫前期患者血清补体因子D (CFD)、补体C5a的表达及其与肾功能和平均动脉压的相关性,为临床诊治提供参考依据。方法选取2016年2月-2017年10月在长沙市中医医院接受治疗的重度子痫前期患者62例作为观察组,另选取同期正常单胎足月妊娠孕妇40例作为对照组。比较两组患者血清中尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、尿酸(UA)、胱抑素C (Cys-C)的水平以及肌酐清除率(CCr)、24 h尿蛋白总量、平均动脉压,比较两组患者血清中CFD、补体C5a的水平,采用Pearson相关系数分析重度子痫前期患者血清中CFD、补体C5a的表达与肾功能和平均动脉压的相关性。结果观察组血清中BUN、Cr、UA、Cys-C水平以及24 h尿蛋白总量、平均动脉压均显著高于对照组,CCr显著低于对照组,差异有统计学意义(均P<0. 05);观察组血清中CFD、补体C5a水平显著高于对照组,差异有统计学意义(均P<0. 05);重度子痫前期患者血清中CFD、补体C5a与Cr、UA、Cys-C、24h尿蛋白总量、平均动脉压呈正相关(P<0. 05),与CCr呈负相关(P<0. 05)。结论重度子痫前期患者肾功能明显受损,平均动脉压显著升高,且其血清中CFD、补体C5a水平明显上升,CFD、补体C5a与患者的肾功能和平均动脉压密切相关。

甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶3的研究现状

甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶3(MASP3)是补体凝集素途径的酶成分之一,由MASP1/3基因编码。既往资料证实,MASP3不参与凝集素途径活化,对补体蛋白C3、C4以及C2均无酶切活性,而近期研究表明MASP3是参与补体D因子活化的关键酶,进而可能是联系补体凝集素途径和旁路途径活化的重要成分。此外,人们通过动物疾病模型研究发现MASP3可能作为补体旁路途径异常相关疾病的新治疗靶点,从而为相关疾病提供新的治疗思路。本文旨在对MASP3的编码基因、蛋白结构、生物学功能以及其在旁路途径功能异常相关疾病模型中的研究进展进行综述。

自报职业性噪声暴露与成人哮喘患者血浆中炎性细胞因子表达水平的关联性分析

目的 探讨自报职业性噪声暴露与成人哮喘患者血浆中炎性细胞因子表达水平的关联性。方法 以910例成人哮喘患者为研究对象,收集患者的职业性噪声暴露接触史等信息,检测其血浆中可溶性白细胞分化抗原14(sCD14)、补体因子D(CFD)、嗜酸性粒细胞趋化因子11(CCL11)和IL-9的表达水平。采用多元线性回归模型分析自报职业性噪声暴露与患者血浆中四种因子表达水平的关联,并分析与各混杂因素之间的交互作用。结果 自报有职业性噪声暴露的成人哮喘患者血浆中CCL11、sCD14和CFD的表达水平显著高于无职业性噪声暴露史的患者(P<0.05)。调整混杂因素后,与自报无职业性噪声暴露史的患者相比,自报有职业性噪声暴露史的患者血浆中CFD的表达增加0.17 (95%CI:0.02~0.31)个自然对数单位;当处于缓解期时,自报有职业性噪声暴露的患者血浆中CCL11和sCD14的表达分别增加0.27 (95%CI:0.05~0.49)和0.22 (95%CI:0.02~0.41)个自然对数单位。交互作用分析显示,自报职业性噪声暴露史与吸烟、养宠物分别对CCL11和CFD的表达水平均具有显著相乘交互作用(P<0.05)。结论 自报职业性噪声暴露与成人哮喘患者血浆中CFD、CCL11及sCD14的表达水平显著增加有关。

CFD基因在宫颈鳞癌及癌前病变组织中的表达水平及意义

目的利用维吾尔族妇女宫颈癌疾病资源，探讨宫颈鳞癌及癌前病变与补体因子D（complement factor D，CFD）表达调控的关系及临床意义。方法收集维吾尔族妇女宫颈鳞癌（cervical squamous cell carcinoma，CSCC）、宫颈内上皮瘤变（cervical intraepithelial neoplasia，CIN）Ⅱ-Ⅲ及宫颈炎患者的新鲜组织标本72例及石蜡包埋组织切片82例，提取新鲜组织RNA，利用半定量RT—PCR方法，鉴定不同宫颈病变组织中CFDmRNA表达水平；利用免疫组织化学（sP）法，研究不同宫颈病变组织切片中CFD蛋白质表达水平变化。结果随着维吾尔族妇女宫颈病变进程，CFDtuRNA表达水平明显下调，CINII-Ⅲ或CSCC与宫颈炎相比，有显著差异（P〈0．05），但是CINII-III与CSCC之间无差异（P〉0．05）。通过免疫组织化学鉴定，发现CSCC组织的CFD蛋白质表达水平（22．7％）显著低于宫颈炎（55．6％，P〈0．05）和CINⅡ一Ⅲ（50％；P〈0．05），但CINII-III与宫颈炎的差异不显著（P〉0．05）。结论CFD转录表达下调或蛋白质表达水平下降与维族妇女宫颈癌发生有密切关系，可能成为肿瘤早期预警的分子标志物。