二乙基亚硝胺所诱导大鼠肝癌表达上调的基因

目的:首次大范围地观察二乙基亚硝胺(DEN)诱导的大鼠肝癌组织基因表达的差异,探索DEN诱发肝癌的分子机制.方法:DEN诱导大鼠肝癌,常规抽提和纯化RNA,采用AffymetrixRat230AGeneChip及技术比较肝癌组织与正常大鼠肝组织基因表达的差异.结果:在芯片的15710个基因中,肝癌有84.54%的基因阳性表达,肝癌基因表达在正常肝脏5倍以上的有509个,其中325个为EST片段,已知基因184个,其中的168个基因可以检索到有关文献的报道.在这168个基因中,有100个基因被发现与肿瘤有关,其中有36个与肝癌有关;有4个基因与肝脏有关;另有64个基因与肿瘤和肝脏无关.结论:?DEN诱发大鼠肝癌的后基因组变化中168个基因值得优先关注.

大鼠肢体缺血再灌注后肺组织BAX基因表达上调

目的探讨在体大鼠肢体缺血再灌注(LIR)后肺组织BAX和BCL2基因表达的变化。方法在大鼠肢体缺血再灌注(LIR)损伤动物模型上,用TUNEL法、电泳法及免疫组织化学等技术观察LIR后肺损伤发生过程中,肺组织细胞凋亡变化以及BAX和BCL2蛋白质表达的改变。结果大鼠LIR后,肺血管内皮细胞及附壁的炎细胞凋亡明显增加;肺组织BCL2表达的变化不大,但BAX蛋白质表达明显上调,DNA断链率升高,活性氧(ROS)含量增加,且与肺组织细胞凋亡的增加相一致。结论肺组织细胞凋亡以及BAX和BCL2表达的变化可能参与LIR后肺损伤的发生。

p16基因的表达上调对鼻咽癌细胞恶性表型的影响——p16基因在鼻咽癌中的改变系列研究(Ⅱ)

目的： 探讨上调ｐ１６ 基因的表达对鼻咽癌细胞恶性表型逆转的作用， 为ｐ１６ 基因在鼻咽癌发病过程中具有一定的作用提供直接的证据。方法： 本文采用电穿孔的方法向ｐ１６ 基因表达下调的鼻咽癌细胞系ＨＮＥ１ 中导入全长野生型的ｐ１６ ｃＤＮＡ，通过Ｇ４１８ 筛选获得可以稳定传代的转染细胞系。对其中４ 个转染细胞系以ＰＣＲ 和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ 杂交鉴定转染细胞系中外源ｐ１６ ｃＤＮＡ 整合以及ｐ１６ 基因表达的状况。并借助比较细胞倍增时间，流式细胞计数和裸鼠接种的方法对转染细胞的恶性表型进行了检测。结果：在所鉴定的４ 个转染细胞系中有一个转染细胞系（ ＃ ４－ ２） 不仅整合了外源ｐ１６ ｃＤＮＡ，且ｐ１６ 基因的表达明显增高。与未转染的鼻咽癌细胞系ＨＮＥ１ 及未整合外源ｐ１６ ｃＤＮＡ 的转染细胞系相比，＃ ４ － ２ 细胞的倍增时间延长，停滞于Ｇ１ 期的细胞数明显增多，接种裸鼠后肿瘤形成的潜伏期延长。结论：以上实验结果证实ｐ１６ 基因在鼻咽癌的发生过程中确实具有一定的作用，它的表达上调可以促进鼻咽癌细胞恶性表型的逆转。

水通道蛋白-3在胰腺癌组织中表达上调与分化程度相关

胰腺癌是消化系统中高度恶性肿瘤,发病率位居第二。该病起病隐匿,确诊时大多数患者已发生远处转移或至晚期,往往丧失了外科手术机会,是病死率极高的恶性肿瘤之一。

KSHV RTA介导的宿主细胞Bcl-2表达上调促进病毒的溶解性感染

目的研究卡泼肉瘤病毒(kaposis's sarcoma-associated herpesvirus,KSHV)编码的复制转录激活因子(replication and transcription activator,RTA)调控宿主细胞Bcl-2表达的分子机制及其生物学意义。方法用实时聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白质印迹(western blotting)技术检测RTA转染的细胞、TPA诱导的KSHV阳性细胞Bcl-2 mRNA和蛋白质表达水平;采用荧光素酶报告基因技术检测RTA对Bcl-2基因启动子活性的调节。构建RNA干扰慢病毒载体,筛选稳定感染的BC3细胞,TPA诱导48 h后,分别用PCR、PI染色流式细胞术检测病毒子DNA和细胞凋亡率。结果 RTA转染的细胞、TPA诱导的KSHV阳性细胞Bcl-2 mRNA和蛋白质表达水平显著增高。RTA反式激活Bcl-2基因启动子,这种激活作用具有剂量依赖性。用RNA干扰技术抑制Bcl-2基因后,TPA诱导的KSHV阳性细胞与对照组细胞相比凋亡率增加,病毒子产生减少。结论KSHV RTA能够调控内源性细胞凋亡信号通路,延缓溶解性感染宿主细胞的凋亡,并促进病毒子产生。

双调蛋白激活人体肝星状细胞并在非酒精性脂肪性肝炎中表达上调

【据《Sci Rep》2015年3月报道】题：双调蛋白激活人体肝星状细胞并在非酒精性脂肪性肝炎中表达上调（作者McKee C等）

炎性痛诱导海马神经元形态学变化及PKC的表达上调(英文)

目的 观察福尔马林诱导炎性痛过程中海马蛋白激酶C的表达和神经元形态学变化,并进一步明确海马与疼痛的关系。方法 SD大鼠被随机分为对照组和实验组,实验组又按照注射福尔马林后炎性痛发生时间分为1h, 3h, 12h, 1d, 3d和7d组。应用组织化学和免疫细胞化学方法观察炎性痛过程中海马神经元形态学变化和PKC活性的改变。结果 注射福尔马林1d后海马PKC免疫反应明显上调,PKC被激活并由细胞核转移到膜结构;而“黑神经元”于注射福尔马林后3d最明显,于第7天有所恢复。PKC的活性与神经元的形态学变化均以海马CA3区明显。结论 实验结果表明海马参与了对伤害性信息的调节,而且PKC与炎性痛过程中神经元的损伤有密切关系。

背根神经节中Pannexin-1表达上调参与神经病理性疼痛

慢性神经病理性疼痛可造成患者极度的痛苦，治疗困难。尽管在此领域目前已有大量研究，但其机制尚未完全阐明。Pannexin-1（Panx1）是一个能释放ATP和其他信号分子的大孔径膜蛋白。细胞膜去极化，胞浆钙以及NMDA受体激活都可激发Panx1通道开放。据研究，大脑中Panx-1的激活参与癫痫和头痛的发生。

HAb18G/CD147在激活的人脐静脉内皮细胞表达上调促进肿瘤血管生成

以前的研究证实HAb18G/CD147分子是一个在多种恶性肿瘤细胞表面高表达的质膜糖蛋白，与肿瘤的恶变显著相关。但该分子在内皮细胞的作甩尚未被揭示。本研究发现，HAh18G／CD147在激活的人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells，HUVEC）表达显著增强。

应用差异显示技术克隆脑脓肿早期表达上调的新基因

本研究以大鼠脑脓肿模型为基础，利用mRNA荧光差异显示技术，比较正常组、对照组和脑脓肿组脑组织中基因表达的差异，以寻找脑脓肿发病的早期相关基因。

家蚕miR-14的上调表达与靶基因的预测分析

【目的】了解家蚕细胞中上调miRNA的方法及靶基因预测,为家蚕miRNA的功能研究提供方法参考。【方法】构建家蚕miR-14的真核表达载体pSK-hr3-ie1-EGFP-pri-mir-14并在家蚕BmN细胞中表达,同时通过转染化学合成的miRNA mimics上调BmN细胞中miR-14的水平。首先通过PCR扩增miR-14的前体及其侧翼序列(pri-mir-14)并克隆至真核表达载体pSK-hr3-ie1-EGFP的EGFP基因下游。分别将重组质粒pSK-hr3-ie1-EGFP-pri-mir-14、对照质粒pSK-hr3-ie1-EGFP、bmo-miR-14 mimics和negative control mimcs转染至家蚕BmN细胞,观察EGFP及FAM在细胞中的荧光情况,以检测其转染效率,qRT-PCR方法检测bmo-miR-14在细胞中的水平。分别采用RNAhybrid和miRanda预测bmo-miR-14的靶基因。【结果】重组表达载体pSK-hr3-ie1-EGFP-pri-mir-14与miRNA模拟物bmo-miR-14 mimics都能上调BmN细胞中的miR-14水平,与对照相比分别提高了2.1、984倍。利用生物信息学方法预测bmo-miR-14靶基因,RNAhybrid和miRanda分别预测得到153和171个潜在bmo-miR-14靶基因,其中两者共同预测的靶基因有49个。GO分析结果显示,预测的49个靶基因的分子功能集中于结合和催化;而生物学过程集中于细胞过程和代谢过程。【结论】通过转染重组质粒及化学合成miRNA mimics,使细胞中相应的miRNA上调,可用于bmo-miR-14后续的功能研究。

银屑病患者外周血T淋巴细胞CD40／CD40L表达上调

近年来认为T细胞在银屑病的发病中起重要作用，共刺激信号CD40／CD40L对T细胞的活化是必须的。我们采用流式细胞仪检测进行期寻常性银屑病（以下简称银屑病）患者外周血CD40／CD40L的表达，以探讨其在银屑病发病中的作用。

脊髓损伤后受损组织胶质纤维酸性蛋白表达上调的信号传导机制

我们检测脊髓损伤（SCI）后胶质纤维酸性蛋白（GFAP）表达上调的信号通路，以期找到调节GFAP表达的分子机制进而调节瘢痕形成的新方法。

脂多糖诱导黏蛋白MUC5AC表达上调机制的研究进展

一、黏蛋白（Muein，Muc）和脂多糖的生化特性及作用MUC广泛分布于机体各组织黏膜上皮表面，对黏膜起润滑、保护的作用。MUC的分布有组织、器官和细胞特异性。目前已经报道的有20余种[1-4]。MUC是由其多肽基因（Mucgene）编码而成的，根据MUC存在形式的不同可将其分为两类：分泌型和膜结合型。

KSHV RTA上调宿主细胞Bcl-2表达的分子机制研究

目的研究卡波氏肉瘤病毒(Kaposis's Sarcoma-Associated Herpesvirus,KSHV)编码的复制转录激活因子(replication and transcription activator,RTA)调控宿主细胞Bcl-2表达的分子机制。方法用实时聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白质印迹(Western blot)技术检测RTA转染的细胞、TPA诱导的KSHV阳性细胞Bcl-2 mRNA和蛋白质表达水平;采用PCR定点突变和荧光素酶报告基因技术,检测RTA对Bcl-2基因启动子活性的调节,并鉴定启动子序列中对RTA调控具有重要作用的顺式反应元件。结果 RTA转染的细胞、TPA诱导的KSHV阳性细胞Bcl-2 mRNA和蛋白质表达水平显著增高。RTA通过与Bcl-2基因启动子中CCN9GG反应元件结合激活Bcl-2的转录,这种激活作用呈剂量依赖性,并且P2启动子对RTA反式激活Bcl-2基因不可或缺。结论 KSHVRTA能够上调宿主细胞Bcl-2表达,CCN9GG样RTA反应元件和P2启动子对RTA调控Bcl-2表达具有重要作用。

ING4基因表达上调对卵巢上皮性癌细胞生物学行为的影响

近年来的研究证实,ING4基因在许多恶性肿瘤中表达下降,如胃癌[1]、肺癌[2]等,体外实验也证实,ING4基因可能通过活化凋亡通路,影响多种凋亡相关基因,促进肿瘤细胞凋亡.ING4基因被认为是一重要的候选抑癌基因.本课题组的前期研究发现,ING4蛋白在卵巢上皮性癌（卵巢癌）组织中的表达低于卵巢良性肿瘤组织和正常卵巢组织[3].提示,ING4基因在卵巢癌的发生、发展中可能发挥着重要的作用,但对于ING4基因与卵巢癌的关系,目前尚无明确定论.本研究将ING4基因转染至卵巢癌细胞系OVCAR细胞中,观察ING4基因转染后对卵巢癌细胞生物学行为的影响.