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传染性胰腺坏死病毒VP3蛋白在干酪乳杆菌的表面表达 被引量:5
1
作者 刘敏 赵丽丽 +4 位作者 葛俊伟 乔薪瑗 刘巍巍 赵永欣 李一经 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期19-22,共4页
为获得传染性胰腺坏死病毒(IPNV)VP3蛋白在菌体表面表达,本研究将IPNV VP3基因定向插入乳酸杆菌表面表达型载体pPG1,构建的重组质粒pPG1-VP3电转化干酪乳杆菌,获得了重组干酪乳杆菌表达系统pPG1-VP3/Lactobacillus casei393。经1%糖诱... 为获得传染性胰腺坏死病毒(IPNV)VP3蛋白在菌体表面表达,本研究将IPNV VP3基因定向插入乳酸杆菌表面表达型载体pPG1,构建的重组质粒pPG1-VP3电转化干酪乳杆菌,获得了重组干酪乳杆菌表达系统pPG1-VP3/Lactobacillus casei393。经1%糖诱导表达后,SDS-PAGE和western blot检测表明,有约31ku蛋白得到了表达,其大小与理论值相符;诱导表达的菌体进行间接免疫荧光试验表明,重组蛋白在菌体表面获得了表达。该病毒VP3蛋白在乳酸菌的表面表达为进一步探讨传染性胰腺坏死病毒VP3蛋白免疫原性及相关功能奠定了基础。 展开更多
关键词 传染性胰腺坏死病毒 VP3蛋白 干酪乳杆菌 表面表达
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噬菌体6肽随机表面表达文库的构建 被引量:2
2
作者 张英 李爱民 侯云德 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第3期267-273,共7页
体外合成编码6肽的随机DNA片段以及用于随机DNA片段扩增的一对PCR引物,再经PCR扩增、BglI酶切扩增产物,获得编码6肽的随机DNA克隆片段,并利用已构建的噬菌体表面表达载体(FUSE5)的特性,将随机DNA克... 体外合成编码6肽的随机DNA片段以及用于随机DNA片段扩增的一对PCR引物,再经PCR扩增、BglI酶切扩增产物,获得编码6肽的随机DNA克隆片段,并利用已构建的噬菌体表面表达载体(FUSE5)的特性,将随机DNA克隆片段与FUSE5载体连接,连接物电转化MC1O61宿主菌,经抗性和插入复活筛选,获得1.6x108个独立克隆。构成文库的克隆经酶切、PCR扩增、斑点杂交、序列测定、亲和素富集等方法的综合鉴定和评定,以及6肽随机克隆体外增殖和表达特性观察,结果均表明,我们已成功构建了编码6肽的噬菌体随机表面表达文库。对原库作不同批次连续扩增所获扩增库,又进一步证实,已构建的原库具备以质粒和丝状噬菌体二种形式在体外稳定增殖的特性。 展开更多
关键词 噬菌体 表面表达 6肽随机文库 构建
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N-甲基-D-门冬氨酸受体与使君子酸受体在培养海马神经元树突上的膜表面表达与共定位 被引量:1
3
作者 邱爽 王敏珍 +2 位作者 傅展燕 黄曼 罗建红 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期30-34,共5页
目的 研究含NR2B亚单位的N 甲基 D 门冬氨酸 (NMDA)受体 (NR2B NMDAR)与含GluR1亚单位的使君子酸 (AMPA)受体 (GluR1 AMPAR)在发育不同阶段的培养海马神经元树突上的膜表面表达与共定位。 方法 以FLAG NR2B和GFP GluR1表达载体共转... 目的 研究含NR2B亚单位的N 甲基 D 门冬氨酸 (NMDA)受体 (NR2B NMDAR)与含GluR1亚单位的使君子酸 (AMPA)受体 (GluR1 AMPAR)在发育不同阶段的培养海马神经元树突上的膜表面表达与共定位。 方法 以FLAG NR2B和GFP GluR1表达载体共转染原代培养第 5d(DIV5 )的大鼠海马神经元 ,分别用相应特异性抗体和荧光标记二抗作活细胞染色 ,显示膜表面表达的受体簇。 结果 对DIV7和DIV14的培养海马神经元树突表面受体簇计数 (个数 10 0 μm) ,GluR1 AMPAR受体簇分别为 5 9 2± 5 6和 74 8± 3 1(P <0 0 5 ) ;NR2B NMDAR为 38 7±3 5和 80 8± 4 9(P <0 0 1) ;两者共定位为 16 3± 5 2和 4 0 1± 6 0 (P <0 0 1)。DIV14海马神经元 4 0 %的共定位受体簇分布在树突棘上。 结论 随着海马神经元的发育 ,树突膜表面NR2B NMDAR、GluR1 AMPAR及两者共定位受体簇密度均增加 ,提示 ,形成更多具有活性的兴奋性突触 ,且主要位于树突棘上。 展开更多
关键词 N-甲基-D-门冬氨酸受体 使君子酸受体 培养 海马 神经元树突上 表面表达 共定位
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Tapasin对HLA-E细胞表面表达的影响 被引量:2
4
作者 赵亮 范丽安 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期82-84,共3页
目的 :探索伴侣分子Tapasin对HLA E分子细胞表面表达的影响。方法 :体外构建HLA EcDNA的逆转录病毒表达载体 ,并通过感染的方法将其转入Tapasin阴性的T2细胞系 ,利用流式细胞术检测HLA E分子在靶细胞表面的表达情况。结果 :外源HLA E基... 目的 :探索伴侣分子Tapasin对HLA E分子细胞表面表达的影响。方法 :体外构建HLA EcDNA的逆转录病毒表达载体 ,并通过感染的方法将其转入Tapasin阴性的T2细胞系 ,利用流式细胞术检测HLA E分子在靶细胞表面的表达情况。结果 :外源HLA E基因在Tapasin阴性的T2细胞表面获得表达 (74 13% ) ,而对照细胞及经空载体转染的T2细胞表面未检测到HLA E分子的表达。结论 :HLA E分子的细胞表面表达也存在TAP非依赖的方式。 展开更多
关键词 HLA-E TAPASIN T2细胞 抗原肽相关转运蛋白 细胞表面表达
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乳酸乳球菌食品级表面表达系统建立和报告基因检测 被引量:1
5
作者 庄重 季莉 +3 位作者 徐莹莹 李珊珊 季玉红 段义农 《南通大学学报(医学版)》 2015年第4期280-282,共3页
目的 :建立乳酸乳球菌食品级高效表面表达系统。方法 :克隆并表达枯草芽孢杆菌基因组中γ-多聚谷氨酸合成酶亚基跨膜蛋白Pgs A,同时将报告基因——金黄色葡萄球菌耐热核酸酶融合在Pgs A蛋白C-末端,通过甲苯胺蓝-DNA琼脂平板检测酶活性... 目的 :建立乳酸乳球菌食品级高效表面表达系统。方法 :克隆并表达枯草芽孢杆菌基因组中γ-多聚谷氨酸合成酶亚基跨膜蛋白Pgs A,同时将报告基因——金黄色葡萄球菌耐热核酸酶融合在Pgs A蛋白C-末端,通过甲苯胺蓝-DNA琼脂平板检测酶活性。结果:耐热核酸酶基因被成功表达并锚定在细胞表面,具有较高酶活性。结论:该系统的成功建立为未来高致病性病原微生物抗原簇重组表达,进而研制新型基因工程口服疫苗奠定基础。 展开更多
关键词 乳酸乳球菌 表面表达 PgsA 核酸酶
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细菌表面表达载体的构建与鉴定 被引量:1
6
作者 徐建生 成大荣 +1 位作者 孙怀昌 崔治中 《河南科技大学学报(农学版)》 2004年第4期14-19,共6页
用聚合酶链式反应(PCR)技术,从金黄色葡萄球菌中扩增出769bp的编码SPA细胞壁跨膜区的编码序列。将扩增的片断克隆进pEZZ 18载体BamHI和SalI位点之间。重组质粒转化大肠杆菌HB101后,根据酶切分析筛选到含有目的基因的重组质粒pZSPAX。序... 用聚合酶链式反应(PCR)技术,从金黄色葡萄球菌中扩增出769bp的编码SPA细胞壁跨膜区的编码序列。将扩增的片断克隆进pEZZ 18载体BamHI和SalI位点之间。重组质粒转化大肠杆菌HB101后,根据酶切分析筛选到含有目的基因的重组质粒pZSPAX。序列测定结果表明,该重组质粒中的插入序列与已发表的SPA X是一致的。通过水肿病毒素B亚单位(SLT IIeB)基因(slt IIeB)证实质粒pZSPAX能作为在细菌表面表达目的基因的载体。 展开更多
关键词 细菌 表面表达 表达载体 重组质粒 PCR SPA pEZZ-18 抗原
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脓毒血症病人外周血单核细胞CD14、HLA-DR表面表达的临床意义 被引量:1
7
作者 李文雄 夏成青 +1 位作者 陈惠德 齐曼 《中华腹部疾病杂志》 2003年第2期82-85,共4页
目的 通过研究脓毒血症病人单核细胞CD14、HLA-DR的表面表达来评价其免疫状况和预后,并据此来寻找对脓毒血症病人进行免疫调节治疗时机和方法。方法 在病人被确诊为脓毒血症后的第1、3、5、7、14、21、28天测定外周血单核细胞CD14、HLA... 目的 通过研究脓毒血症病人单核细胞CD14、HLA-DR的表面表达来评价其免疫状况和预后,并据此来寻找对脓毒血症病人进行免疫调节治疗时机和方法。方法 在病人被确诊为脓毒血症后的第1、3、5、7、14、21、28天测定外周血单核细胞CD14、HLA-DR的表面表达量及它们的平均荧光强度(MFI),一旦病人脓毒血症消失,上述检测自动停止。并在抽血的当天对病人进行APACHE-Ⅱ和SOFA评分。病人被诊为脓毒血症后的第1次测量为初次测量,最后一次测量为末次测量。结果 31例脓毒血症病人中,10例死亡,21例存活。死亡组%CD14、MFI(CD14)均明显低于存活组,APACHE-Ⅱ评分、SOFA评分均明显高于存活组;HLA-DR、MFI(HLA-DR)分别与存活组比较均无明显差异。存活组初次%CD14、MFI(CD14)、HLA-DR、MFI(HLA-DR)分别与死亡组比较,均无明显差异(P>0.05);存活组末次CD14、HLA-DR均明显高于初次CD14、HLA-DR(P<0.05),死亡组无明显差异(P>0.05)。结论 脓毒血症病人外周血单核细胞CD14、MFI(CD14)、HLA-DR、MFI(HLA-DR)表面表达量的初次测定值与预后无关;%CD14或HLA-DR值呈下降趋势而APACHE—II或SOFA评分升高者,提示病人处于免疫抑制状态,预后较差,此时可能是采用rINF-γ进行免疫调节治疗的最佳时机。 展开更多
关键词 脓毒血症 单核细胞 CD14 HLA-DR 表面表达 研究方法
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猪水肿病毒素B亚单位的表面表达
8
作者 徐建生 崔治中 +2 位作者 成大荣 董国雄 李俊宝 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期219-223,共5页
用聚合酶链式反应 (PCR)技术 ,从大肠杆菌PPSLT_ⅡeB中扩增出猪水肿病素 (SLT_Ⅱe)的B亚单位基因 (slt_ⅡeB)的 2 0 4bp的编码序列。将此PCR扩增产物按预定的阅读框架克隆进质粒表达载体PZSPAX ,并转化到大肠杆菌HB10 1中 ,筛选到含有s... 用聚合酶链式反应 (PCR)技术 ,从大肠杆菌PPSLT_ⅡeB中扩增出猪水肿病素 (SLT_Ⅱe)的B亚单位基因 (slt_ⅡeB)的 2 0 4bp的编码序列。将此PCR扩增产物按预定的阅读框架克隆进质粒表达载体PZSPAX ,并转化到大肠杆菌HB10 1中 ,筛选到含有slt_ⅡeB的重组质粒PZBSPAX。将重组质粒PZBSPAX进行序列分析 ,结果表明 :重组质粒PZBSPAX中的插入序列与发表的slt_ⅡeB是一致的 ,证明PZBSPAX就是含有slt_ⅡeB的重组表达质粒。含有重组质粒PZBSPAX的大肠杆菌HB10 1命名为重组大肠杆菌PZBSPAX。通过在不同温度条件下、不同培养时间情况下、不同IPTG诱导条件下 ,利用荧光抗体染色证明重组大肠PZBSPAX可表面表达预期的融合蛋白PP_SLT_ⅡeB_SPAX ;利用SDS_PAGE、Western_blot对重组大肠杆菌PZBSPAX的表达进行了分析 ,结果表明重组大肠杆菌PZBSPAX表达的融合蛋白PP_SLT_lleB_SPAX与预期大小一致 。 展开更多
关键词 仔猪 水肿病 毒素 B亚单位 表面表达 传染病 大肠杆菌 抗原性
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噬菌体表面表达抗汉坦病毒衣壳蛋白单链抗体的研究
9
作者 李光富 唐家琪 +4 位作者 陈宇萍 王琰 操敏 李先富 潘秀珍 《中国病毒学》 CSCD 2000年第4期409-413,共5页
The expression vector of anti Hantavirus(HV) capsid protein scFv was constructed by DNA recombination and PCR technique,and expressed in E.coli . The expressed scFv was fused with the phage GeneⅢ protein, and located... The expression vector of anti Hantavirus(HV) capsid protein scFv was constructed by DNA recombination and PCR technique,and expressed in E.coli . The expressed scFv was fused with the phage GeneⅢ protein, and located on the surface of phage.The sequencing of scFv demonstrated that the sequence of scFv is consistent with that of cloned antibody variable region from F3 strain hybridom against HV capsid protein.The expressed scFv was proved to be able to bind HV antigen by ELISA. 展开更多
关键词 单链抗体 肾综合征出血热病毒 噬菌体表面表达
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产肠毒素大肠杆菌K88ac-STa-LTB嵌合抗原多克隆抗体制备及植物乳杆菌表面表达研究
10
作者 刘琼 刘永仕 +3 位作者 尚晓敏 李桂玲 姜延龙 王春凤 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第1期13-17,25,175,共7页
为了研究植物乳杆菌(Lactobacillus,plantarum,L.plantarum)表面表达黏附素-肠毒素(K88ac—STa—LTB)嵌合抗原的可行性,试验利用原核表达载体pET28a表达纯化此嵌合抗原,蛋白复性后免疫Babl/c小鼠制备多克隆抗体,以制备的多克隆抗体作为... 为了研究植物乳杆菌(Lactobacillus,plantarum,L.plantarum)表面表达黏附素-肠毒素(K88ac—STa—LTB)嵌合抗原的可行性,试验利用原核表达载体pET28a表达纯化此嵌合抗原,蛋白复性后免疫Babl/c小鼠制备多克隆抗体,以制备的多克隆抗体作为一抗,采用Westem-blot、流式细胞术及间接免疫荧光试验研究此嵌合抗原在植物乳杆菌表面表达情况。结果表明:K88ac—STa—LTB嵌合抗原在大肠杆菌中以包涵体形式表达,纯化并复性的重组蛋白大小约为32.5 ku,制备的抗体效价为121b。重组菌株NC8-pLP1261-8576表达的K88ac-STa-LTB嵌合抗原经Western-blot分析,能被鼠抗LTB单克隆抗体及自制的鼠抗K88ac-STa-LTB多克隆抗体识别,流式细胞术及荧光显微镜观察证明此嵌合抗原在菌体表面表达。 展开更多
关键词 植物乳杆菌 产肠毒素大肠杆菌 黏附素-肠毒素嵌合抗原 多克隆抗体 表面表达
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几种表面表达模型在DEM精度评估中应用比较
11
作者 徐道柱 田浩 +1 位作者 张卫柱 熊顺 《测绘科学与工程》 2013年第6期63-67,共5页
本文分析了表面表达模型误差在针对未知数据源的DEM精度评估时带来的影响,选择了几种常用的表面表达模型和两个百万区的DEM数据,通过实验的方法对不同模型引起的误差进行比较,同时,对采用同一种模型时不同地形类型对误差的影响进行... 本文分析了表面表达模型误差在针对未知数据源的DEM精度评估时带来的影响,选择了几种常用的表面表达模型和两个百万区的DEM数据,通过实验的方法对不同模型引起的误差进行比较,同时,对采用同一种模型时不同地形类型对误差的影响进行了比较,对模型的地形适应度进行了分析,得出了移动曲面模型较优的分析结果,为DEM精度评估时表面表达模型的选择提供参考。 展开更多
关键词 表面表达模型 DEM精度评估 移动曲面模型 地形划分
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外周血单个核细胞表面表达MHC分子的研究
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作者 李向东 《现代检验医学杂志》 CAS 2005年第6期86-88,共3页
关键词 外周血单个核细胞 细胞表面表达 MHC分子 主要组织相容性复合体 MHC-Ⅰ类分子 淋巴细胞 blood 基因性 cell 单核细胞
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猪细小病毒VP2蛋白在干酪乳杆菌表面的表达 被引量:5
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作者 徐义刚 崔丽春 +6 位作者 马广鹏 唐丽杰 葛俊伟 夏春丽 乔薪媛 赵丽丽 李一经 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期315-318,共4页
将编码猪细小病毒主要免疫保护性抗原VP2基因插入干酪乳杆菌细胞表面表达载体pPG中,构建了重组表达载体pPG-VP2,将其电转化干酪乳杆菌Lactobacillus casei 393,获得了表达猪细小病毒VP2蛋白的重组干酪乳杆菌系统,经2%乳糖在MRS培养基中... 将编码猪细小病毒主要免疫保护性抗原VP2基因插入干酪乳杆菌细胞表面表达载体pPG中,构建了重组表达载体pPG-VP2,将其电转化干酪乳杆菌Lactobacillus casei 393,获得了表达猪细小病毒VP2蛋白的重组干酪乳杆菌系统,经2%乳糖在MRS培养基中的诱导表达,SDS-PAGE检测表明,有约74kD蛋白得到了表达,表达蛋白的大小与理论值相符。Western-blot结果分析表明,表达的蛋白可被鼠源PPV抗血清所识别,间接免疫荧光实验结果表明,所表达的蛋白能够在干酪乳杆菌菌体表面检测到。 展开更多
关键词 猪细小病毒 VP2蛋白 干酪乳杆菌 表面表达
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牛IgG2 Fc受体在COS-7细胞表面的稳定表达 被引量:4
14
作者 李青梅 郭军庆 +5 位作者 张改平 杨艳艳 王选年 张华 乔松林 王丽 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期121-124,共4页
将牛IgG2 Fc受体(boFcγ2R)编码区cDNA亚克隆到真核表达载体pcDNA3的巨细胞病毒启动子下游,构建了重组表达质粒pc3bo2R;以重组质粒转染COS-7细胞,用玫瑰花环试验检测boFcγ2R在转染细胞表面的表达,通过G418抗性筛选和连续克隆化,在转染... 将牛IgG2 Fc受体(boFcγ2R)编码区cDNA亚克隆到真核表达载体pcDNA3的巨细胞病毒启动子下游,构建了重组表达质粒pc3bo2R;以重组质粒转染COS-7细胞,用玫瑰花环试验检测boFcγ2R在转染细胞表面的表达,通过G418抗性筛选和连续克隆化,在转染细胞表面稳定表达了boFcγ2R受体分子,转染细胞的玫瑰花环形成率达90%。最后获得稳定表达boFcγ2R受体分子的COS-7转染细胞系,为受体的功能研究提供了良好的技术平台。 展开更多
关键词 牛IgG2 FC受体 COS-7细胞 细胞表面表达 玫瑰花环试验
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细胞间粘附分子-1在不同白血病细胞表面的表达 被引量:3
15
作者 童秀珍 罗绍凯 +2 位作者 洪文德 孔庆瑜 彭爱华 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第7期384-385,共2页
关键词 白血病 细胞间粘附分子-1 细胞表面表达
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甜味蛋白Brazzein在乳酸乳球菌的表面表达及鉴定 被引量:2
16
作者 王长远 刘祎婷 +1 位作者 张丽萍 姚笛 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第5期189-193,共5页
为了提高甜味蛋白Brazzein的产量及甜度,将第29位的天冬氨酸、第31位的组氨酸和第41位的谷氨酸突变为赖氨酸、丙氨酸、赖氨酸,然后结合乳酸乳球菌密码子偏嗜性,对甜味蛋白编码序列进行优化。将优化的Brazzein基因克隆入表面表达载体p NZ... 为了提高甜味蛋白Brazzein的产量及甜度,将第29位的天冬氨酸、第31位的组氨酸和第41位的谷氨酸突变为赖氨酸、丙氨酸、赖氨酸,然后结合乳酸乳球菌密码子偏嗜性,对甜味蛋白编码序列进行优化。将优化的Brazzein基因克隆入表面表达载体p NZ8112,构建甜味蛋白Brazzein的乳酸乳球菌表面表达系统。通过SDSPAGE、免疫印迹及免疫荧光等方法验证甜味蛋白Brazzein成功表达于乳酸乳球菌表面,这为甜味蛋白Brazzein的商品化开发奠定基础。 展开更多
关键词 甜味蛋白 BRAZZEIN 乳酸菌 表面表达
原文传递
Ag43/GFP嵌合表达质粒的构建及其在大肠杆菌表面的表达
17
作者 黄用豪 赵焕阁 +3 位作者 周松林 林映莹 谭光宏 黄风迎 《广东医学》 CAS 北大核心 2015年第4期517-521,共5页
目的构建大肠杆菌抗原Ag43(p ETAg43')以及Ag43和绿色荧光蛋白(GFP)(p ETAg43'/GFP)的重组表达质粒,了解p ETAg43'/GFP是否能够将GFP表达于细菌表面。方法用PCR扩增获得Ag43大部分基因序列(Ag43'),同时用酶切方法从质粒... 目的构建大肠杆菌抗原Ag43(p ETAg43')以及Ag43和绿色荧光蛋白(GFP)(p ETAg43'/GFP)的重组表达质粒,了解p ETAg43'/GFP是否能够将GFP表达于细菌表面。方法用PCR扩增获得Ag43大部分基因序列(Ag43'),同时用酶切方法从质粒p EGFP-C1切取GFP基因序列,首先将Ag43'基因序列插入表达质粒p ET-22b中,获得重组质粒p ETAg43',然后再将GFP基因序列插入p ETAg43'获得质粒p ETAg43'/GFP。将重组质粒p ETAg43'/GFP转化Ag43基因缺失的菌株JM109(△Ag43),用荧光显微镜和SDS-PAGE了解是否能将GFP表达于细菌表面,同时了解加热是否能够直接获得Ag43'/GFP的嵌合重组蛋白。结果琼脂糖凝胶电泳发现PCR扩增的Ag43'和GFP基因序列分子量大小与预期值相一致,酶切分析重组质粒p ETAg43'和p ETAg43'/GFP结果与预期值相符,基因测序显示质粒p ETAg43'和p ETAg43'/GFP的基因序列和阅读框架均准确无误。质粒p ETAg43'/GFP经诱导后可以将Ag43'/GFP嵌合蛋白表达于大肠杆菌JM109(△Ag43)的表面,55℃加热50 min是提取Ag43'/GFP嵌合蛋白的最佳条件。结论成功构建了能够将外源蛋白GFP表达于细菌表面的重组表达载体,在大肠杆菌表面有效表达并加热提取获得了嵌合重组蛋白Ag43'/GFP,为制备其他自身抗原分子的Ag43嵌合蛋白奠定了基础。 展开更多
关键词 抗原Ag43 绿色荧光蛋白 嵌合重组蛋白质 重组表达质粒 细菌表面表达
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大肠杆菌CS3菌毛作为表面表达载体的改建
18
作者 高荣凯 张兆山 李淑琴 《云南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1999年第S3期363-363,共1页
关键词 表面表达载体 CS3菌毛 肠毒素性大肠杆菌 基因工程疫苗 医学科学院 工程研究 微生物催化剂 表面呈现 蛋白二级结构 生物吸附剂
原文传递
皮质醇对整合素家族细胞粘附分子CD11a/CD18、CD11b/CD18在大鼠急性坏死性胰腺炎合并多器官损伤白细胞表面表达的影响
19
作者 孙威 王仲秋 +1 位作者 渡边泰宏 土岐彰 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第12期1146-1146,共1页
我们应用流式细胞术检测了整合素家族细胞粘附分子CD11a/CD18和CD11b/CD18在大鼠急性坏死性胰腺炎(ANP)合并多器官损伤的模型血中白细胞表面的表达,探讨皮质醇在ANP合并多器官损伤中的作用及其机制.
关键词 皮质醇 整合素家族 细胞粘附分子 CD11a/CD18 CD11B/CD18 大鼠 急性坏死性胰腺炎 合并症 多器官损伤白 细胞表面表达
原文传递
里氏木霉细胞表面表达系统的构建 被引量:2
20
作者 苏建臣 欧阳浩淼 +2 位作者 赵婉 董志扬 金城 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期38-46,共9页
【目的】烟曲霉(Aspergillus fumigatus)的AfMp1p是一种通过糖基磷脂酰肌醇(glycosylphosphatidylinositol,GPI)修饰定位于细胞壁上的蛋白,其细胞壁定位信号位于蛋白质的C末端。里氏木霉(Trichoderma reesei)是一种重要的工业生产菌种... 【目的】烟曲霉(Aspergillus fumigatus)的AfMp1p是一种通过糖基磷脂酰肌醇(glycosylphosphatidylinositol,GPI)修饰定位于细胞壁上的蛋白,其细胞壁定位信号位于蛋白质的C末端。里氏木霉(Trichoderma reesei)是一种重要的工业生产菌种。构建里氏木霉的细胞表面表达系统具有十分重要的意义。【方法】我们将AfMp1p的细胞壁定位GPI信号肽和烟曲霉几丁质酶AfChiB1的N端信号肽分别与绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的C末端和N末端融合并转化里氏木霉。本文首先对木霉遗传转化系统进行了优化;随后通过Real-time PCR和蛋白定量,对GFP融合蛋白在里氏木霉中不同时期的表达情况进行了研究;最后对里氏木霉表达的GFP融合蛋白进行细胞定位研究。【结果】荧光观察结合Western blot的结果表明,在平台期中期和后期,带有GPI信号的GFP融合蛋白定位于细胞壁。【结论】烟曲霉来源的GPI信号可被里氏木霉识别,本论文所构建的表达系统可用于外源蛋白在里氏木霉中的细胞壁定位表达。 展开更多
关键词 里氏木霉 细胞表面表达系统 烟曲霉 GPI信号
原文传递
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