中药复方九味汤化学成分鉴定及质谱裂解规律研究

基于超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱(UHPLC-Q/Orbitrap HRMS)技术,建立了中药复方九味汤中化学成分的鉴定方法。在样品处理过程中,采用超声/微波辅助萃取技术提取九味汤中的有效成分。提取液经Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(150 mm×2.1 mm,1.7μm)分离,在电喷雾正、负离子模式下电离,四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱仪检测。采用全扫描-数据依赖型二级质谱扫描(Full MS/dd-MS2)模式采集数据,Xcalibur 4.1软件对数据进行色谱峰对齐和提取,随后将母离子和碎片离子的精确质量数信息与中药成分高分辨质谱数据库(OTCML)及自建数据库进行匹配,共鉴定出黄酮类、生物碱类、萜类、苯丙素类、氨基酸类、有机酸类、甾体类等144种化合物,并对代表性化合物的质谱裂解规律进行解析。本研究可为进一步揭示九味汤的药理作用提供科学依据。

超高效液相色谱-四极杆静电场轨道阱高分辨质谱法测定米炒人参炮制前后皂苷成分及其裂解规律的研究

目的建立超高效液相色谱-四极杆静电场轨道阱高分辨质谱法(ultra performance liquid chromatography-quadrupole-orbitrap-mass spectrometry,UPLC-Q-Orbitrap-MS)检测米炒人参炮制前后皂苷成分的方法,并研究其裂解规律。方法采用Supelco C18色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸水溶液梯度洗脱,应用电喷雾离子源,负离子全扫描模式采集一、二级质谱数据,扫描范围为150~2000 m/z。结合质谱数据库及相关文献信息,运用X Calibur2.2软件对米炒人参中皂苷类成分进行鉴定。以6种人参皂苷Re、Rg_(1)、Rb_(1)、Rc、Rb_(2)、Rb_(3)进行模拟炮制,确定皂苷类成分裂解产物,明确皂苷成分的裂解规律。结果从人参中检测出14个成分,鉴定出13种人参皂苷成分;米炒人参中检测出23个成分,鉴定出20种人参皂苷成分。通过比较人参米炒前后的皂苷类成分,发现米炒人参中存在人参中未检测到的8种稀有人参皂苷20(S)-Rg_(2)、20(S)-Rh_(1)、20(R)-Rh_(1)、F_(2)、20(S)-Rg_(3)、20(R)-Rg_(3)、20(S)-Rs_(3)、20(R)-Rs_(3)。模拟炮制结果表明,人参皂苷Re脱去C-20糖基,转化为稀有人参皂苷20(S)-Rg_(2);人参皂苷Rg_(1)脱去C-20位糖基,转化为稀有人参皂苷20(S)-Rh_(1)、20(R)-Rh_(1);人参皂苷Rb_(1)、Rb_(2)、Rb_(3)、Rc脱去C-20或C-3位糖基,转化为稀有人参皂苷20(S)-Rg_(3)、20(R)-Rg_(3)或F_(2)。结论人参经米炒后,稀有人参皂苷成分增加,产生的稀有皂苷为原型皂苷发生苷键裂解而获得,模拟炮制可作为其裂解规律研究的有效方法。

基于UPLC-Q-TOF MS的气滞胃痛胶囊化学成分快速鉴定及裂解规律研究

运用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF MS)技术建立了一种快速全面分析鉴定气滞胃痛胶囊化学成分的方法。采用Agilent poroshell 120 SB-C18色谱柱,以0.1%甲酸水-乙腈为流动相进行梯度洗脱,在电喷雾离子源正、负离子模式下,通过保留时间、质谱一级准分子离子峰、二级质谱裂解碎片,结合对照品及文献数据从气滞胃痛胶囊80%甲醇提取物中鉴定出97个成分,包括黄酮类41个、生物碱类19个、有机酚酸类12个、皂苷类8个、萜类5个、苯丙素类10个、核苷类1个及醌类1个,其中50个成分经过对照品比对。同时对所鉴定成分的结构类型、药材来源进行归属并探讨了各类结构的裂解规律。该研究可为气滞胃痛胶囊的质量控制和临床应用提供依据,也可为具有相似结构类型的化学成分鉴定提供参考。

UPLC-Orbitrap-MS/MS研究葶苈子化学成分及其质谱裂解规律

本研究建立了超高效液相色谱-静电场轨道离子阱-串联质谱(UPLC-Orbitrap-MS/MS)法鉴定葶苈子化学成分。将葶苈子的甲醇-水溶液(70:30,V/V)提取液经ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm×1.7μm)分离后,导入Orbitrap高分辨质谱仪,在电喷雾正、负离子模式下,采用全扫描-数据依赖型(data dependent)二级质谱扫描(Full MS/dd-MS^(2))模式采集数据,并使用Compound Discoverer(CD)软件对数据进行色谱峰对齐和提取。随后,将母离子和碎片离子的精确质量数导入CD软件与各数据库进行匹配,归纳各类化合物的质谱裂解规律。结果表明,在南葶苈子1(DS1)提取液中鉴定到39种化合物,包括生物碱类、黄酮类、强心苷类、酰胺类、有机酸类、氨基酸类等。采用该方法进一步鉴定南葶苈子2(DS2)和北葶苈子(LA),DS2中鉴定到37种化合物,其中10种为DS1中未鉴定到的;LA中鉴定到42种化合物,其中7种在DS1和DS2中均未鉴定到。本研究可为探讨不同来源葶苈子的药理学作用机制和葶苈子的临床应用提供数据支持。

超高效液相色谱-四极杆-飞行时间全信息串联质谱技术分析黄芪中黄酮类及皂苷类化合物质谱裂解规律

目的应用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间全信息串联质谱(ultra performance liquid chromatography-quadrupole-time of flight-mass spectrometry,UPLC-Q-TOF-MSE)技术分析黄芪中10个黄酮化合物、5个皂苷化合物的质谱裂解规律。方法在电喷雾离子源正、负离子模式下,分别对黄芪中10个黄酮化合物、5个皂苷化合物的主要特征碎片进行检测,依据获得的特征碎片分析裂解途径,归纳裂解规律。结果在正离子模式下,黄芪中的15种化合物均取得了较好的质谱信息。黄酮类化合物主要裂解规律为先脱去C6H10O5生成相应的苷元,其次是失去·CH_(3)、CO、H2O、CH_(4)O、C_(2)H_(4)O等官能团。同时,黄酮类化合物经逆-狄尔斯-阿尔德反应裂解(retro Diels-Alder reaction,RDA)后形成相应的片段离子。黄芪皂苷Ⅰ、黄芪皂苷Ⅱ、黄芪皂苷Ⅲ、黄芪甲苷和环黄芪醇在正离子模式下产生相同的裂解碎片m/z473、455、437、419、143、125。结论该研究获得了黄芪中黄酮类、皂苷类化合物的质谱裂解特征,可为挖掘黄芪作为药食同源药材,其功能成分对机体的保健作用机制研究提供参考依据,为保障黄芪动物性食品安全提供技术支撑。

磺胺类同分异构体质谱裂解规律及色谱分离研究

采用液相色谱-电喷雾-三重四极杆串联质谱法研究磺胺类同分异构体成分在电喷雾离子源正、负离子模式下的质谱裂解规律及分离方法。结果表明,一级质谱中,10种磺胺均在正离子模式下获得响应良好的[M+H]^(+)。二级质谱中,磺胺类的裂解途径大多是发生在-SO_(2)-两端,形成碎片离子[C_(6)H_(6)NSO_(2)]^(+)、[C_(6)H_(6)NO]^(+)和[C_(6)H_(6)N]^(+),[C_(6)H_(6)N]^(+)进一步裂解产生碎片离子[C_(5)H_(5)]^(+);类型2响应较高的碎片离子为m/z 124和m/z 186;类型3可形成碎片离子m/z 215和m/z 126。采用Thermo Scientific Hypersil GOLD C18色谱柱,柱温35℃,进样量20μL,流动相为5 mmol/L乙酸铵(含0.1%甲酸)和甲醇,流速0.25 mL/min,在正离子扫描模式下,设置梯度洗脱程序分离了4个类型10种同分异构体。这些质谱裂解规律和分离方法有助于对磺胺类同分异构体的定性和定量分析提供理论依据。

α-萘酚型和β-萘酚型偶氮染料在四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱的裂解规律分析

采用四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱仪直接采集碎裂片段的精确质荷比(m/z),通过元素模拟得到各主要碎片的元素组成并进行比对,研究了α-萘酚型和β-萘酚型偶氮染料的质谱裂解规律。结果表明:两种染料均存在偶氮式和腙式两种形态。在腙式形态时,断裂位点均发生在氮氮键。在偶氮式形态时,β-萘酚型更容易丢失萘酚上的羟基,而α-萘酚型则在偶氮键和萘酚之间发生断裂。总的来说,β-萘酚型更倾向于腙式的裂解方式,而α-萘酚型更倾向于偶氮式的裂解方式。

食品中化学性有害物的质谱软电离裂解规律及筛查技术研究进展

食品中化学性有害物是导致食品安全问题的重要原因,质谱是对食品中化学性有害物进行定性定量分析的有效方法。该文按照化合物结构类别,综述了食品中重要化学性有害物的质谱软电离裂解机理,包括农药、兽药、真菌毒素,以及其他化学污染物。对于每类化合物,重点综述化合物质谱裂解产生的特征碎片、中性丢失等,以及这些质谱软电离裂解机理在食品中化学性有害物筛查及发现中的应用。研究化合物的质谱裂解机理可以帮助研究者对化合物进行结构解析和结构确证,为食品中同类结构新型化学性有害物的发掘提供理论依据。

氟喹诺酮类化合物电喷雾质谱裂解规律

采用Finnigan三重四级杆电喷雾质谱仪,运用准-MS/MS/MS方法,对氟喹诺酮类化合物裂解规律进行了初步探索,通过比较9种化合物的电喷雾质谱裂解行为,发现它们在正离子软电离状态下均存在中性丢失CO2、H2O、HF和CO的裂解途径,除那氟沙星和巴洛沙星外(结构中不含哌嗪环),脱羧后均有哌嗪环结构重排反应,脱羧产物和哌嗪环结构重排产物是主要碎片离子。

仿刺参皂苷类化合物的电喷雾负离子质谱裂解规律研究

采用电喷雾-四极杆-飞行时间质谱(ESI-Q-TOF MS)在负离子检测方式下,对仿刺参中4种皂苷类成分的裂解途径进行研究。通过ESI-MS产生的[M-H]-获得相应化合物的相对分子质量信息,对[M-H]-进行碰撞诱导解离(CID)获得相应化合物的裂解途径信息。研究发现,4种皂苷化合物的ESI-MS/MS裂解规律相同,首先断裂苷元上的18(20)内酯键,然后连续丢失糖链的末端单糖,最后生成苷元的特征碎片离子m/z423,这些特征有助于皂苷类化合物的结构解析。

基于UHPLC-Q-TOF MS/MS的胆南星中胆汁酸类成分的质谱裂解规律研究

采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱(UHPLC-Q-TOF MS/MS)法研究胆南星中4种类型25种胆汁酸类成分在电喷雾离子源正、负离子模式下的质谱裂解规律。结果表明,一级质谱中,25种胆汁酸类成分均可得到加氢(脱氢)的准分子离子峰[M+H]+([M—H]^-);二级质谱中,不同类型胆汁酸类成分(包含多种同分异构体)的裂解途径大多是脱去母核上的取代基产生H 2O及CO 2的中性碎片丢失。尤其是甾体母核C17位的功能基团更易裂解,产生一系列特征性碎片离子。游离胆汁酸在正离子模式下可发生A环和C环开裂,产生m/z 175.1123、161.0966、147.0814离子;在负离子模式下可发生中性丢失,形成[M—H—CO 2]^-、[M—H—H 2CO 2]^-、[M—H—H 2O—H 2CO 2]^-离子。此外,在正离子模式下,牛磺酸型胆汁酸可形成牛磺酸基裂解碎片离子m/z 126.0226,甘氨酸型胆汁酸可形成甘氨酸基裂解碎片离子m/z 158.0818;在负离子模式下,牛磺酸型胆汁酸侧链断裂可产生丰度较强的磺酸基m/z 79.9568、牛磺酸基m/z 124.0073和牛磺酸脱氨m/z 106.9803碎片离子,甘氨酸型胆汁酸侧链断裂可产生丰度较强的m/z 74.0426碎片离子。在负离子模式下,单酮基胆汁酸母核裂解还可形成带有酮基的特征离子m/z 402.3013,而胆汁酸酯则难以形成稳定的负离子,在正离子模式下则可产生甘氨酸甲酯离子m/z 90.0557。这些质谱裂解规律有助于对胆南星中其它胆汁酸类化合物的结构进行解析与推断,也可为快速分析和鉴定含有胆汁酸类成分的样品提供依据。

用电喷雾四极杆飞行时间质谱研究头孢类药物的质谱裂解规律

利用电喷雾四极杆飞行时间质谱研究了3种常用头孢类药物的质谱裂解行为.二级质谱数据结果显示:在正离子模式下,β-内酰胺结构不太稳定,在C(6)_C(7)和C(8)_N(1)键处易于断裂,进而形成稳定的共轭结构,此类药物易失去中性碎片NH3.

三磷酸腺苷的电喷雾质谱裂解规律研究

采用电喷雾离子阱质谱仪对正负离子模式下5′-三磷酸腺苷(adenosine 5′-triphosphate,ATP)的各种离子[ATP+H]+、[ATP-nH+(n+1)Na]+(n=0～4)、[ATP-H]-的裂解规律进行了系统研究,并提出可能的裂解过程。实验发现在裂解过程中,ATP脱去γ-磷酸时,不仅是P—O键断裂,还存在三磷酸链上β-P‖O中O先夺去碱基上的氨基或核糖环上的羟基中H、N或O再亲核进攻磷引发结构重排,脱去γ-磷酸得到一系列碎片离子。利用理论计算解释了2种重排途径的可能性与碎片离子的丰度差异。

基于高分辨质谱法的淫羊藿特征药效黄酮质谱裂解规律及新化合物鉴定研究

结合高分辨质谱法探讨淫羊藿特征药效黄酮的质谱裂解规律,并运用该规律鉴定新化合物的化学结构。Q-TOF采集样品数据,PeakView软件对已知成分进行定性分析,借助该软件的Mass Calculators、Formula Finder、Fragments Pane等功能对化合物二级质谱裂解规律进行剖析总结。本研究从54批15个淫羊藿品种中共鉴定出了27种该类成分。在含有ESI源质谱中特征黄酮会先后由外至内断裂C-3位的糖苷键及C-7位的糖苷键,其后则是脱去C-8位的异戊烯基和C-4′位的甲氧基,如果糖苷上键合有乙酰基,那么质谱中会先脱掉乙酰基,如果C-8位异戊烯基双键被加成还原为了异戊醇基,那么该基团会先脱水再脱掉烃基,如果C-8位与C-7位基团成环,将不会产生异戊烯基的特征碎片。借由此裂解规律还鉴定出了2个新化合物的化学结构。该分析方法简单、实用、可靠,该实验结果有助于进一步明确淫羊藿的药效物质基础和生物合成规律。

黄酮醇糖苷及其结构类似物的质谱裂解规律研究

目的:研究创新药物3′,4′-二甲氧基黄酮醇-D-葡萄糖苷(GDH)及其结构类似物的质谱裂解规律。方法:在正、负离子检测模式下,对GDH及其结构类似物进行电喷雾离子阱质谱(ESI-MSn)分析,并用Mass Frontier 6.0软件辅助解析其中主要的特征碎片离子,以及可能的裂解途径。结果:在正离子模式下,从3-羟基-3′,4′-二甲氧基黄酮醇(NDH21)获得m/z299、284、266、239、238、165、137等特征离子;从GDH获得m/z483、461、321、299等特征离子;从3-乙酰氧基-3′,4′-二甲氧基黄酮(NDH01)获得m/z363、321、306等特征离子;从3-丙酰氧基-3′,4′-二甲氧基黄酮(NDH02)获得m/z 377、321、306等特征离子;从3,3′,4′-三甲氧基黄酮(甲基化NDH21)获得m/z 335、320、305等特征离子。在负离子模式下,从NDH21、GDH、NDH01、NDH02和甲基化NDH21均获得m/z297、282、267等特征离子。结论:在正离子模式下,除了NDH21显示较强的[M+H]+外,GDH及其他结构类似物均显示较强的[M+Na]+加合离子峰,主要产生丢失C环3-OH上取代基的碎片信息;除GDH外,其他黄酮醇糖苷类似物进一步产生丢失B环甲基的裂解途径。在负离子模式下,NDH21生成[M-H]-,GDH及其他结构类似物主要通过丢失C环3-OH上取代基发生裂解,并且同样出现丢失B环甲基的裂解途径。

4种四环素类抗生素的电喷雾质谱裂解规律研究

目的研究四环素类抗生素的电喷雾质谱裂解规律。方法采用电喷雾-四极杆飞行时间质谱对四环素类抗生素进行分析。根据结构特征,对4种四环素类抗生素标准品进行正离子检测。结果在正离子检测模式下,四环素类抗生素易获得H+形成[M+H]+的准分子离子,对其进行碰撞诱导解离,得到特征碎片离子,用精确质量数对碎片离子进行确证,分析几种四环素类抗生素的质谱裂解规律。结论本文提出的电喷雾质谱裂解规律可为四环素类抗生素的鉴定及结构分析提供参考依据。

硫酸类肝素二糖的质谱裂解规律探析

硫酸类肝素结构决定了它与蛋白之间的相互作用,对硫酸类肝素结构的解析,能够进一步阐明结构与功能之间的关系。本实验采用电喷雾离子阱-多级质谱技术(ESI-MSn)在负离子模式(ESI-)下探析了12种硫酸类肝素二糖的裂解规律。实验发现:二糖中亚硫酸根的位置和数量对其在质谱分析中的稳定性起着决定作用,所含亚硫酸根越多越不稳定;N位亚硫酸根比C—2位和C—6位亚硫酸根更容易丢失。此外,二级质谱表明,同分异构体有其特定的裂解规律。该质谱裂解规律有助于硫酸类肝素二糖同分异构体的鉴定,可为多级质谱在硫酸类肝素结构研究中的应用提供理论依据。

渔用麻醉剂MS-222的电子轰击电离质谱裂解规律研究

目的建立气相色谱-串联质谱(GC-MS/MS)法研究渔用麻醉剂MS-222电子轰击电离的裂解途径的分析方法。方法针对MS-222,采用电荷和游离基理论,解释主要碎片离子的裂解机制。结果 MS-222经电子轰击电离产生特征碎片离子m/z 150、137、120和93;分子离子以饱和氧和不饱和氧为电荷/游离基中心引发α断裂和酯基上伴随γ重排的β断裂,碎片离子进一步发生简单α裂、消除反应等反应,产生相应的特征碎片离子。结论电子轰击电离结合GC-MS/MS可用于鱼类麻醉剂MS-222的质谱断裂机制研究,方法简便,可推广到其他鱼类麻醉剂的研究中去。

基于超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱技术研究全氟化合物质谱裂解规律

目的采用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱研究全氟化合物的质谱裂解规律。方法标准品由甲醇溶解并配制成混标溶液,经Thermo Hypersil GOLD aQ色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.9μm)分离,以甲醇和0.1%甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,在电喷雾负离子模式下采集数据,根据一、二级质谱离子的精确质荷比推导全氟化合物可能的裂解途径。结果全氟磺酸类化合物主要发生CC键和CS键断裂,产生特征碎片[·C3F6-SO3]–m/z229.94和[SO3]–m/z79.95;全氟羧酸类化合物首先丢失中性分子CO2,产生[M-O-CO2]–碎片离子,继而发生不同数量的CC键断裂,产生m/z218.98、168.98、118.99等特征碎片离子。结论该研究提出的质谱裂解规律为快速鉴定和分析复杂体系中具有相似结构特征的全氟化合物提供重要依据。

用FABMS法研究抗生素柱晶白霉素、4″—酰化螺旋霉素和Shengjimycins的质谱裂解规律

本文介绍用FABMS法或SIMS法研究抗生素柱晶白霉素、4″—酰螺旋霉素、Shengjimycins的质谱裂解规律。用MS数据和13CNMR(COM ,DEPT)数据鉴别该分子式和结构式。