人肝肿瘤细胞的裸小鼠原位癌建模条件优化及评价

目的优化通过注射人肝肿瘤细胞株构建原位癌裸小鼠模型的条件,并探索适宜的给药治疗时间。方法选用稳定表达萤光素酶报告基因(LUC)的人肝细胞癌Hep3B与肝母细胞瘤HepG2细胞株,使用小动物活体成像系统分析萤光素酶发光强度与肝肿瘤细胞数量之间的线性相关性,验证人源肝肿瘤细胞的发光效率。在5周龄雌性BALB/c裸小鼠的肝叶原位接种不同浓度(8×10^(6)、2.4×10^(7)、7.2×10^(7)个/mL)、不同重悬介质(PBS、Matrigel)的人肝肿瘤细胞悬液HepG2-LUC和Hep3B-LUC(共12组,每组7只),分别构建人肝肿瘤裸小鼠原位癌模型。每7 d为1个周期记录各组小鼠体重,用小动物活体成像系统定期监测原位肿瘤的生长过程,观察肿瘤生长趋势。接种肿瘤细胞后第35天剖取小鼠肝脏,制备病理切片,进行苏木精-伊红(hematoxylin and eosin,HE)染色观察组织病理学变化。结果两种人肝肿瘤细胞株的发光强度均与细胞数量呈正相关(R^(2)=0.9831,R^(2)=0.9705),适宜用于原位癌模型的构建。HepG2-LUC高浓度组,HepG2-LUC+Matrigel低、中、高浓度组,Hep3B-LUC中、高浓度组与Hep3B-LUC+Matrigel低、中、高浓度组均成功造模。HepG2-LUC+Matrigel高浓度组较低浓度与中浓度组小鼠的体重显著下降(P<0.05),Hep3B-LUC+Matrigel高浓度组较低浓度与中浓度组小鼠的体重也显著下降(P<0.05)。成功造模组小鼠的荧光发光强度随时间呈指数型增长(R^(2)>0.9500),且在移植后14 d发光强度至少可达到1.0×10^(7) p/(s·cm^(2)·sr)。HepG2-LUC低、中浓度组和Hep3B-LUC低浓度组小鼠肝脏未见明显的病理学变化,其余组肝脏肿瘤和肝细胞病变明显。结论对于HepG2-LUC细胞株,推荐肝叶原位注射2.4×10^(7)个/mL(50μL)且与Matrigel重悬的混合细胞液体造模,并于造模后第7天给药或采取预后措施;而对于Hep3B-LUC细胞株,推荐肝叶原位注射7.2×10^(7)个/mL(50μL)(不与Matrigel重悬混合)造模,并于造模后的第14天给药或采取预后措施。

中药复方WCAP及拆方对人胰腺癌皮下移植瘤裸小鼠模型及IL⁃6/STAT3信号通路的影响

目的观察中药复方WCAP及其拆方对人胰腺癌BxPC-3细胞裸小鼠皮下移植瘤生长及对白介素-6/信号转导和转录激活因子3(IL-6/STAT3)信号通路的影响。方法建立人胰腺癌BxPC-3细胞裸小鼠皮下移植瘤模型,将30只SPF级裸小鼠随机分为6组,即空白对照组、5-氟尿嘧啶(5-FU)组、复方组、健脾组、清热解毒组和软坚散结组,每组5只,观察各组裸小鼠皮下移植瘤瘤质量及抑瘤率,实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)和Western blot法分别检测瘤组织中IL-6/STAT3通路及其下游靶基因c-myc癌基因(c-myc)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的mRNA和蛋白表达水平。结果①与空白对照组比较,各干预组瘤质量均轻于空白对照组,5-FU组、复方组及各拆方组均可抑制裸小鼠皮下移植瘤的生长(P<0.05),复方组抑瘤率高于各拆方组(P<0.05)。②与空白对照组比较,5-FU组、复方组和软坚散结组IL-6/STAT3通路及其下游靶基因c-myc、cyclin D1、VEGF、MMP-2的mRNA表达均降低(P<0.05)。③与空白对照组比较,5-FU组、复方组IL-6/STAT3通路及其下游靶基因涉及的c-myc、cyclin D1、VEGF、MMP-2蛋白表达均降低(P<0.05),软坚散结组c-myc、MMP-2和IL-6蛋白表达均降低(P<0.05)。结论WCAP复方可抑制人胰腺癌BxPC-3细胞裸小鼠皮下移植瘤的生长,其机制与抑制IL-6/STAT3通路并调节其下游靶基因c-myc、cyclin D1、VEGF、MMP-2的表达水平有关;与各拆方相比,WCAP复方在抑瘤率、小鼠体质量及IL-6/STAT3通路及其下游靶基因调控方面作用更好。

苯并[a]芘恶性转化细胞THBEc1致裸小鼠原位肺癌模型的构建及血清人源神经纤维网蛋白2对该模型的诊断价值

目的建立苯并[a]芘(BaP)恶性转化人支气管上皮细胞T-16HBE-C1(THBEc1)的裸小鼠原位肺癌模型,评估血清人源神经纤维网蛋白2(NRP2)对该模型的诊断价值。方法12只雄性ICR小鼠随机分为3组,右肺分别一次性注射无菌生理盐水20,30和40μL,观察14 d内小鼠死亡数,以确定小鼠肺内注射安全体积。16只雄性BALB/c-nu裸小鼠随机分为4组:对照组[皮下和肺内同时一次性接种人支气管上皮16HBE(HBE)细胞,皮下1×10^(6),肺内2×10^(5)]、皮下荷瘤模型组(皮下一次性接种THBEc1细胞1×10^(6))、原位肺癌模型组(肺内一次性接种THBEc1细胞2×10^(5)或5×10^(5))。接种后每7 d监测小鼠体重和皮下肿瘤体积;HE染色检测肺肿瘤和皮下肿瘤组织病理特征,计算成瘤率;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测裸小鼠血清和胸水中人源NRP2水平;采用受试者工作特征(ROC)曲线确定血清人源NRP2对THBEc1细胞导致的裸小鼠原位肺癌模型的诊断价值。结果肺内注射40μL无菌生理盐水可致2/4小鼠死亡,20和30μL组未见小鼠死亡,但整体表现欠佳,故后续实验注射体积选择20μL。对照组裸小鼠均未在接种部位检出肿瘤,小鼠体重持续增长;皮下荷瘤模型组祼小鼠全部成瘤,体重显著低于对照组(P<0.05)。接种细胞后第10天,原位肺癌模型5×10^(5)细胞组裸小鼠全部成瘤(4/4);第14天,原位肺癌模型2×10^(5)细胞组裸小鼠3/4成瘤,且2个剂量组小鼠体重均低于对照组(P<0.01,P<0.05),肿瘤组织均呈鳞状细胞癌特征。ELISA结果显示,对照组裸小鼠血清人源NRP2水平均显著低于皮下荷瘤模型(4只)和原位肺癌模型(7只)裸小鼠(P<0.05)。原位肺癌模型组(4只)裸小鼠胸水中均可检出高水平的人源NRP2。ROC曲线显示,血清人源NRP2水平能有效区分THBEc1细胞在裸小鼠肺内是否成瘤,最佳截断值为123.00 ng·L^(-1)。结论通过肺内注射接种THBEc1细胞建立了裸小鼠原位肺癌模型,血清人源NRP2可用于该模型诊断。

四君子汤诱导裸小鼠移植性人胃癌细胞凋亡的初步研究

目的:研究健脾类中药四君子汤在体内诱导移植性人胃癌细胞凋亡的作用。方法:采用人胃癌细胞SGC7901裸小鼠皮下移植瘤模型。实验动物共30只,造模后随机分为3组,每组10只。四君子汤组,予四君子汤煎剂灌胃;5FU组,5FU腹腔注射,共6天;对照组,予生理盐水灌胃,共40天。应用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL法)、电镜观察结合流式细胞分析技术,观察四君子汤的抑瘤作用及细胞形态学改变,并计算肿瘤细胞凋亡率。结果:发现四君子汤对裸小鼠移植性人胃癌细胞瘤抑瘤率为34.33%,TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡指数AI为16.24%±3.21%,与对照组的2.63%±1.03%比较明显提高t检验P<0.01;流式细胞分析示四君子汤组凋亡率为11.38%±6.46%,比对照组的7.15%±1.32%提高(t检验P<0.05);电镜下见凋亡细胞染色质浓聚成块,位于核周边,胞浆浓缩。结论:四君子汤有诱导裸小鼠移植性人胃癌细胞凋亡的作用,其对胃癌治疗的价值有必要进一步研究。

20(S)-原人参二醇对肺癌A549细胞增殖和荷瘤裸小鼠肿瘤生长的抑制作用

目的研究20(S)-原人参二醇对小细胞肺癌A549细胞增殖和荷瘤裸小鼠肿瘤生长抑制作用。方法采用噻唑蓝(MTT)法观察20(S)-原人参二醇对小细胞肺癌A549细胞增殖的抑制作用,流式细胞术测定20(S)-原人参二醇对小细胞肺癌A549细胞凋亡及周期的影响,并在裸小鼠人肺癌模型上观察20(S)-原人参二醇对荷瘤裸小鼠肿瘤生长的抑制作用。结果20(S)-原人参二醇对A549细胞具有明显的抑制作用并有剂量时间依赖关系,并且流式细胞仪检测时均出现典型凋亡峰,24小时凋亡率分别为32.47%、32.75%、33.51%。荷瘤裸小鼠动物实验表明,20(S)-原人参二醇对裸小鼠的肿瘤生长也具有明显的抑制作用,抑瘤率分别为18.78%、34.37%、50.02%。结论20(S)-原人参二醇对A549细胞的增殖和荷瘤裸小鼠肿瘤的生长具有明显的抑制作用。

可移植性人脑胶质瘤组织裸小鼠脑内移植及其MR显像研究

背景与目的:文献报道的胶质瘤动物原位移植模型,大多数是将细胞悬液立体定向接种于鼠脑内,操作繁杂,耗时长,难以在短时间内完成批量实验。本研究接种可移植性人脑胶质瘤组织于裸小鼠脑内,探讨建立人脑胶质瘤裸小鼠原位移植模型及其MR活体成像的可行性。方法:在套管针内,置入位于裸小鼠皮下生长的可移植性人脑胶质瘤组织2mm3,经微型颅钻钻颅孔后经套管针推入裸小鼠右尾状核内,第30天在配有小鼠专用micro-23微线圈的1.5TMR机上进行头颅扫描和专用软件测量显像的肿瘤体积。继而取全脑作连续冰冻切片,HE染色,在光学显微镜下观察肿瘤病理特征,在体视显微镜目镜下用测微尺测量肿瘤。然后将上述两种方法测得的数据进行统计学分析,评价荷瘤鼠活体MR显像计算肿瘤体积的可行性。结果:经MR扫描的15只颅内接种肿瘤的小鼠,有14只的尾状核区域见到肿瘤显像;在脑切片上,与MR像相同部位见到了肿瘤组织。经脑切片测得的肿瘤体积[(23.19±10.18)mm3]和经MRI测得的肿瘤体积[(23.45±11.64)mm3]比较差异无统计学意义(P>0.05)。肿瘤模型制作成功率为93%(14/15),肿瘤模型MR显像成功率为100%(14/14)。结论:经套管针定量植入胶质瘤组织于裸小鼠尾状核,制作可移植性裸小鼠人脑胶质瘤原位模型,具有操作便捷、省时、便于批量制作、致瘤率高等优点。配有小鼠专用微型线圈的1.5TMR机可用于荷瘤裸小鼠的头颅成像、在活体上对移植瘤进行定位和体积测量等研究。

多药耐药细胞系K562/A02裸小鼠皮下移植瘤模型的建立与鉴定

目的:建立一种耐药特性稳定的裸小鼠移植瘤动物模型,为进行体内肿瘤耐药机制研究和逆转药物的筛选提供实验模型和实验基础。方法:将具有典型MDR表型的K562/A02耐药细胞接种于裸小鼠右侧背侧皮下,而亲本K562细胞接种裸小鼠左侧背侧皮下,接种细胞数为1×107细胞/只,观察肿瘤成瘤情况及生长特性,并比较裸小鼠移植瘤细胞和体外培养细胞对化疗药物的敏感性,同时利用RT-PCR和免疫组织化学染色对裸小鼠K562/A02移植瘤基因表型进行鉴定。结果:1)K562/A02裸小鼠移植瘤的成瘤率为100%,大约于第6～9天成瘤(体积>100mm3),敏感肿瘤生长速度与耐药肿瘤无明显差别;2)裸小鼠K562/A02移植瘤肿瘤细胞和体外培养原代细胞对阿霉素的IC50分别为185.24μg/ml和235.25μg/ml,而K562/A02移植瘤肿瘤的IC50分别为3.07μg/ml和3.26μg/ml;阿霉素治疗组能够明显减慢K562敏感移植瘤的生长,而对K562/A02耐药移植瘤的生长几乎无作用;3)K562/A02裸小鼠移植瘤肿瘤细胞具有mdr1/Pgp表达,而K562裸小鼠移植瘤肿瘤细胞则无mdr1/Pgp表达。结论:以K562/A02细胞建立的裸小鼠耐药移植瘤模型,仍保持近似体外的耐药活性和基因表型,为耐药机制和逆转研究提供了良好的体内模型。

肺腺癌骨转移裸小鼠模型的建立及MicroCT观察

背景与目的骨转移占晚期肺癌的50%-70%。本研究以体外侵袭、迁移能力不同的肺腺癌细胞系A549、H1299、SPC-A-1、XL-2为基础建立肺腺癌骨转移裸小鼠模型,MicroCT观察骨转移情况。方法将50只6 w-8 w龄裸小鼠随机平均分为5组,4个实验组左心室分别注射相应四种细胞悬液(0.2 mL/只);对照组左心室注射等量生理盐水。注射后第二周起定期对各组小鼠进行MicroCT扫描,当小鼠明显消瘦时此组观察结束,结束前行骨组织病理学检查;对各实验组出现的骨转移部位按中轴骨和四肢骨归类,比较这两种部位之间的转移率;根据各组出现骨转移所用平均时间、骨转移率,对各细胞系骨转移能力进行统计分析。结果经MicroCT、病理学检查确定,各实验组出现不同骨转移率,对照组小鼠无骨转移现象;各实验组中轴骨转移率均明显高于四肢骨,这与临床上肺癌骨转移规律一致,模型建立成功。各实验组间发生骨转移的小鼠数目及出现转移所用平均时间无明显差异。结论MicroCT能清晰地检测到骨质破坏,利于骨转移情况的判断;我们成功建立了肺腺癌骨转移模型,为以后探索出新的肺腺癌乃至肺癌骨转移临床预防和治疗方案提供基础;4种肺腺癌细胞系体外侵袭、迁移能力强弱不等,但体内骨转移能力没有明显差异,其原因还有待进一步的探索。

裸小鼠高致瘤性K562-n细胞系的生物学特性研究

目的 探索高致瘤性K5 6 2 -n细胞系在胸腺缺陷裸小鼠体内致瘤的细胞生物学机理。方法 通过极限稀释法建立K5 6 2 -n细胞系致瘤率不同的克隆株 ,并以K5 6 2细胞为对照 ,对各克隆株进行裸小鼠体内外生物学特性的比较研究。结果 高致瘤性的K5 6 2 -B、K5 6 2 -C、K5 6 2 -E克隆株 (致瘤率≥ 5 / 6 ) ,其软琼脂培养集落形成率 ,特别是大集落形成率 ,较对照K5 6 2细胞显著增高 ,(P <0 .0 1) ,而无致瘤性或低致瘤性的K5 6 2 -A、K5 6 2 -D克隆株 (致瘤率≤ 2 / 6 ) ,其集落形成率与对照无显著差别 (P >0 .0 5 ) ;超微结构观察提示高致瘤性克隆株 ,常染色质成分增多 ,异染色质少见 ,胞浆内微丝增多且排列紊乱 ;流式细胞仪细胞周期分布分析显示高致瘤性的克隆株S期细胞比例增加。实验结果还表明裸小鼠NK细胞对高致瘤性克隆株的杀伤活性显著低于对照的K5 6 2细胞 (P <0 .0 1) ,而低致瘤性克隆株与对照无显著差别 (P >0 .0 5 ) ;组织病理观察显示低致瘤性的克隆株及对照K5 6 2细胞 ,所成裸小鼠肿瘤组织内有大量的炎性细胞浸润 ,大量肿瘤细胞被杀伤 ,血供丰富区尤甚 ,而高致瘤性克隆株所致肿瘤组织内炎性细胞浸润少见 ,肿瘤组织增殖旺盛。结论 K5 6 2 -n细胞系的裸小鼠高致瘤机理在于 :1.软琼脂集落形成率增高?

人胃恶性淋巴瘤裸小鼠原位移植模型的建立及其生物学特性的研究

为探讨胃恶性淋巴瘤的发病机制和实验治疗提供理想的动物模型。将 11例胃恶性淋巴瘤新鲜组织移植裸鼠胃粘膜下层 ,观察原位移植成瘤率 ,移植瘤的侵袭和转移 ,及其形态学特征 (光镜 ,电镜 ,免疫组化)。从 11例胃恶性淋巴瘤标本中筛选出 1株人胃恶性淋巴瘤裸鼠原位移植高转移模型和 1株人胃恶性淋巴瘤裸鼠原位移植模型 ,分别传至 36代和 2 7代 ,共移植裸鼠 32 9只。自第 3代起移植成瘤率及液氮冻存复苏成活率均为 10 0 %。出现淋巴道、血道及种植转移。原位移植瘤的病理组织学、超微结构、DNA含量测定及染色体核型分析结果均与来源人胃恶性淋巴瘤相似。人胃恶性淋巴瘤在裸鼠胃内自主生长 ,浸润破坏胃壁各层组织结构。表明此模型可用于胃恶性淋巴瘤的发病机制、侵袭。

人脑转移癌组织裸小鼠脑内移植模型的建立

目的建立人肺腺癌脑转移瘤的裸小鼠原位移植模型，并分析移植瘤的生物学特征。方法取人肺腺癌脑转移瘤组织块，接种于裸小鼠右尾状核。致瘤后即用裸小鼠的瘤组织进行其原位传代接种，观察致瘤率及荷瘤鼠生存期；MRI观察移植瘤在鼠脑内的大体形态；HE染色分析各代移植瘤的组织学形态；免疫组化染色观察移植瘤中CEA的表达；Alcian blue／PAS特殊染色检测移植瘤中粘液的性质。结果移植瘤组织在裸小鼠右尾状核已连续传至6代，共65只鼠。荷瘤鼠生存期：原代为（47．6±1．8）d，2～3代有所缩短，4～6代稳定在（38．0±0．9）d；移植瘤MRI类圆形，瘤周无水肿。移植瘤病理为低分化腺癌，不向周围正常鼠脑组织浸润；移植瘤中CEA表达阳性，有酸性粘液存在。结论人肺腺癌脑转移瘤组织块接种于鼠脑内建立的原位移植模型能更好地模拟临床原发肿瘤的病理学特征，本方法为研究人肺腺癌脑转移瘤的生物学特性及实验治疗提供了一个可靠的动物模型。

同源导入近交系绿色荧光裸小鼠Foxn1^(nu).B6-CAG-EGFP/SU的建立

目的建立一个能稳定表达增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorecence protein,EGFP)的裸小鼠近交新品系,供包括人脑胶质瘤在内的所有人类肿瘤移植实验用。方法将雌性C57BL/6-Tg(CAG-EGFP)转基因小鼠和雄性Foxn1nu裸小鼠,按同源导入方法进行杂交和回交,用荧光手电筒和匹配的眼镜、多功能活体成像仪、荧光显微镜对是否表达EGFP进行鉴别,传至F10后进行遗传学检测。结果所建品系命名为Foxn1nu.B6-CAGEGFP/SU(Soochow University),14个遗传生化位点中13个表型与BALB/c(Foxn1nu)吻合,唯Pep3(肽酶-3)的电泳为b型,而标准的BALB/c近交系为a型;外周血淋巴细胞占全部有核细胞15%,T淋巴细胞仅占0.3%,与亲本的Foxn1nu一致。结论成功地建立了一个既与亲本C57BL/6-Tg N(CAG-EGFP)-样稳定表达EGFP,又与Foxn1nu裸小鼠(BALB/c背景)一样具有T细胞缺乏的荧光裸小鼠新品系-Foxn1nu.B6-CAG-EGFP|SU,Pep3为b型是有别于Foxn1nu裸小鼠的生化遗传标记位点。

茶多酚对微卫星不稳定结直肠癌裸小鼠的抗肿瘤作用及其作用机制

目的:探索茶多酚对微卫星不稳定结直肠癌裸小鼠的作用及其作用机制。方法:采用hMSH2缺失结肠癌细胞株Lovo细胞建立裸鼠的皮下瘤模型,4周后使用皮下瘤接种法建立结肠造口结肠癌原位移植瘤模型。40只模型裸鼠分为模型组和50、75、100mg/kg茶多酚组。腹腔注射茶多酚治疗5d后,计算肿瘤抑制率,并检测肿瘤微卫星不稳定情况和转化生长因子β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、TGF-β2和胰岛素样生长因子(insulin-like growth factor,IGF)片段的变化情况。结果:使用50、75和100mg/kg 3个剂量茶多酚治疗后,在1、2、3和4周末,治疗组和模型组肿瘤抑制率比较,差异有统计学意义(P<0.01);3个治疗组之间比较,差异无统计学意义。使用茶多酚治疗后肿瘤微卫星标志趋于稳定。结论:茶多酚对错配修复基因缺失的结直肠癌有明显抑制作用,其作用机制可能与抑制微卫星不稳定有关。

实验性持续腹腔化疗裸小鼠人卵巢癌腹腔移植瘤

目的 :评价持续腹腔冲洗化疗对人卵巢上皮癌裸鼠腹腔瘤治疗的效果。方法 :首先用裸鼠建立卵巢浆液性上皮癌细胞株SKOV3腹腔瘤动物模型 ,然后分 3组 ,即常规cDDP化疗组 (常规组 )、持续冲洗化疗组 (冲洗组 )和对照组进行腹腔化疗的动物实验。二疗程后处死裸鼠 ,测其体重、腹腔瘤大小 ;流式细胞术 (FCM)检测腹腔冲洗液的细胞周期及凋亡率、瘤组织C erbB2、Fas的表达。结果 :冲洗组的裸鼠末体重 (FBW ) 初体重 (IBW) =0 .886 ,冲洗组腹腔瘤的体积明显小于常规组 ,抑瘤率明显增高 ,差异显著 (P <0 .0 5 )。腹腔冲洗液中G1 期、S期比例明显下降 (P <0 .0 5 ) ,细胞凋亡率明显升高 (P <0 .0 5 ) ,而细胞数无明显下降 (P >0 .0 5 )。C erbB2在常规组、冲洗组和对照组的表达率分别为 5 9%、42 %和 6 6 % ,3组之间比较均具有显著意义 (P <0 .0 5～P <0 .0 1)。Fas凋亡基因在 3组的表达率分别为 2 2 %、2 9%和 13% ,均具有显著意义 (P <0 .0 5～P <0 .0 1)。结论 :腹腔持续冲洗化疗治疗裸鼠腹腔瘤与常规方法相比具有显著疗效 ,且毒性并未有增加的趋势。

人肝细胞癌裸小鼠肝内移植模型的超微结构观察

人肝癌裸小鼠移植模型是在人体外进行人体肝癌整体研究较为理想的实验工具。我院自1989年开始进行人肝癌裸小鼠肝内移植。现已建成我国第一株人肝癌裸小鼠肝内移植模型。现将该模型的形态学特征报告如下:

ns脉冲电场诱导裸小鼠皮下人黑色素移植瘤凋亡

为研究ns脉冲电场对在体肿瘤的诱导凋亡效应,以接种人黑色素瘤细胞A375的BALB/c裸小鼠为对象,采用电场强度20kV/cm、脉冲宽度300ns的脉冲电场处理后,抑瘤效应宏观观察到肿瘤组织的生长受到显著抑制(P<0.01),透射电子显微镜观察到典型的凋亡细胞超微结构形态,免疫荧光染色法定性检测到caspase-3蛋白表达明显增强,用RT-PCR方法定量检测到caspase-3 mRNA表达明显增强(P<0.01)。实验结果证实了ns脉冲电场能有效抑制在体肿瘤组织生长,机制在于其通过活化肿瘤细胞caspase-3蛋白酶而诱导肿瘤细胞调亡,为ns脉冲电场治疗肿瘤提供了依据。

不同光照时间对BALB/c裸小鼠生长发育及繁殖影响的比较研究

目的比较不同光照时间对BALB/c裸小鼠的影响。方法观察裸小鼠出生后在不同光照时间里的生长情况;记录雌鼠的交配分娩间隔、生产胎数、产仔数及育成率;测定血液生化指标。结果各组裸小鼠的生长差异不显著(P>0.05);中光照组的平均育成率和离乳裸鼠育成率与长光照组比较差异显著(P<0.05);中光照组的ALT、TB、SUA与长光照组比较差异显著(P<0.05)。结论中光照和短光照适宜BALB/c裸小鼠的生长发育和繁殖。

绿色荧光裸小鼠的选育初报

目的选育系统表达绿色荧光蛋白的BALB／c裸小鼠，并对该小鼠各组织器官绿色荧光蛋白表达情况进行观察。方法根据遗传学原理对C57BL／6．TgN（GFP）小鼠与BALB／c裸小鼠进行杂交、自交和回交，建立稳定表达绿色荧光蛋白的BALB／c裸小鼠，对该小鼠遗传质量进行检测；解剖观察胸腺生长情况以及多组织器官绿色荧光蛋白的表达情况。结果成功选育出的BALB／c带绿色荧光蛋白的裸小鼠（简称荧光裸小鼠），外观呈黄绿色；胸腺缺失；在荧光显微镜下，脑、心脏、肺脏、肝脏、肾脏及胰腺等组织器官可见明显绿色荧光。结论成功选育出BALB／c绿色荧光裸小鼠，该小鼠外观呈黄绿色，全身主要组织器官稳定表达绿色荧光蛋白。

肠复康诱导人结肠癌HT-29裸小鼠移植瘤细胞凋亡的机制

目的探讨肠复康诱导人结肠癌HT-29裸小鼠移植瘤细胞凋亡的机制。方法建立人结肠癌HT-29癌细胞株裸小鼠皮下移植瘤模型,用电子天平测量移植瘤的质量,苏木精伊红(HE)染色计数凋亡细胞数,免疫组化染色结合图像分析系统半定量检测移植瘤细胞诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、抗凋亡蛋白Bcl-2、促凋亡蛋白Bax、半胱天冬酶3(caspase-3)的积分光密度(IOD),同时计算Bcl-2/Bax IOD比值,并使用逐步引入剔出模型进行单因素和多因素线性回归分析。结果与模型组比,肠复康组和西药组均使移植瘤瘤体质量量明显减轻(P<0.05或0.01),凋亡细胞数明显增多(P均<0.01),同时能显著增高瘤细胞iNOS、Bax及caspase-3蛋白的含量(P<0.05或0.01),显著降低瘤细胞Bcl-2/Bax比值(P<0.05或0.01);单因素回归分析显示,瘤细胞iNOS、Bcl-2、Bax及caspase-3含量和Bcl-2/Bax比值与移植瘤凋亡细胞数有关;多因素回归分析显示,移植瘤凋亡细胞数与瘤体质量呈明显负相关(r=-0.775,P<0.01),瘤细胞iNOS及Bax蛋白含量与移植瘤凋亡细胞数呈明显正相关(r=0.771,P<0.01,r=0.763,P<0.01)。结论肠复康能诱导人结肠癌HT-29裸小鼠移植瘤细胞凋亡,其机制之一可能是促进NO的生成,通过线粒体凋亡途径激活caspase-3,导致瘤细胞凋亡。

裸小鼠淋巴结的解剖和组织学特点

目的:研究裸小鼠淋巴结的解剖学和组织学特点。方法:使用手术显微镜解剖20只BALB/c裸小鼠和20只BALB/c小鼠,通过免疫组织化学方法比较了两者淋巴结中T淋巴细胞和B淋巴细胞表达的不同。结果:平均每只裸小鼠中包含23个淋巴结和一组大型淋巴结群。裸小鼠颈部淋巴结分布密度较高,其中颌下淋巴结及颈浅淋巴结在裸小鼠中大多数为2个(构成比分别为95%和90%),而在小鼠中大多数为4个(构成比分别为95%和90%),两者差异有统计学意义。无论小鼠还是裸小鼠的颈深淋巴结均为2个(构成比分别为100%和95%),两者差异无统计学意义。裸小鼠淋巴结中CD3阳性的T淋巴细胞减少。细胞膜和细胞质着色的CD3阳性表达的T细胞在裸小鼠的表达阳性率为15%,在小鼠的表达阳性率为100%,两者表达的差异有统计学意义。细胞膜阳性表达CD20的B细胞在裸小鼠中的阳性率为95%,在小鼠中的阳性率为100%,两者表达的差异无统计学意义。结论:裸小鼠淋巴结分布的解剖图对于初学者有一定的帮助,裸小鼠颈部淋巴结密度较高的解剖学特点和缺乏CD3阳性的T淋巴细胞将有助于更好地理解裸小鼠的淋巴结转移机制。