四溴联苯醚通过溶酶体-内源性和外源性凋亡通路诱导褶皱臂尾轮虫(Brachionus plicatilis)细胞凋亡

实验生态条件下研究褶皱臂尾轮虫(Brachionus plicatilis)对四溴联苯醚(BDE-47)胁迫的响应.从转录组水平分析差异基因和富集通路,并对关键基因蛋白进行验证,以期揭示胁迫-响应的机制与途径.结果表明:(1)经0.08mg/L BDE-47胁迫24h的处理组中出现582个差异基因;差异基因主要富集在核糖体、凋亡等信号通路;其中抑制凋亡的核糖体、雌激素信号通路的差异基因显著下调,与凋亡相关的MAPK信号通路、凋亡通路的差异基因显著上调,表明BDE-47诱导轮虫凋亡.(2)褶皱臂尾轮虫溶酶体膜通透性升高,溶酶体内的组织蛋白酶L(Cathepsin L)表达量上升(P<0.05),表明溶酶体受损.促/抗凋亡因子比值Bax/Bcl-2升高(P<0.05)､Caspase家族被激活;在加入Cathepsin L抑制剂后,Bax/Bcl-2以及Caspase家族活性受到显著抑制.此外,轮虫体内活性氧(ROS)含量和过氧化物酶(POD)基因表达出现显著升高.

食物丰度对褶皱臂尾轮虫耐受盐度能力的复杂效应

由于海洋环境的复杂性,一些生态因子常处于波动状态。为了阐明不同食物丰度条件下,褶皱臂尾轮虫对盐度的耐受能力是否会发生变化,本实验在选取5个盐度(S=3、5、20、30、45)基础上,结合不同丰度的球形棕囊藻种群,模拟轮虫在自然环境中经历的一系列多样化的食物丰度,检测轮虫生活史参数的变化。结果表明,除了存活时间外,轮虫发育时间和繁殖力均受到盐度与食物丰度的显著交互作用。在所有盐度下,棕囊藻丰度较低时,轮虫的发育成熟所需时间均显著延长,且繁殖力受到显著抑制,但这种限制作用可随着棕囊藻丰度的增加呈指数式快速恢复至各自盐度下的正常值。不管食物条件如何,当盐度为20时,轮虫的首次繁殖时间最短且总后代数最高,其次为盐度30,其他3个盐度(S=3,5,45)处理的轮虫则显著受到不良影响,而食物丰度的增加在一定程度上可以缓解低渗和高渗环境给轮虫繁殖带来的负面影响。综合不同盐度不同棕囊藻丰度下轮虫的生活史参数可以发现,轮虫的寿命和繁殖之间存在权衡,且这种权衡在适宜盐度(S=20、30)下表现的最明显。上述发现对于准确评估变化环境下浮游动物的综合表现具有重要指导意义。

低盐度胁迫对褶皱臂尾轮虫增殖情况的影响

为优化轮虫养殖条件,探讨了低盐度环境对褶皱臂尾轮虫(Brachionus plicatilis)增殖和产卵率的影响。试验设置不同盐度处理组(盐度分别为3‰、4‰、5‰、6‰),在控制水温和pH值的条件下,每日投喂小球藻,并监测轮虫的增殖情况。结果显示,随着盐度的增加,轮虫的增殖率和产卵率均显著提高,其中6‰盐度组的增殖率最高。这表明褶皱臂尾轮虫在低盐度下虽能存活,但其繁殖性能在更高盐度下更好。

环境因子对L型、S型褶皱臂尾轮虫生长的影响

在实验室条件下,通过种群累积培养的方法,研究了不同盐度和小球藻(Chorella vulgaris)、亚心形扁藻(Platymonas subcordiformis)、微绿球藻(Nannochloris oculata)、波吉卵囊藻(Oocystis borgei)等不同饵料微藻对L型褶皱臂尾轮虫(Brachionus Plicatilis tipicus)和S型褶皱臂尾轮虫(Brachionus Plicatilis rotundiformis)生长的影响,探讨这两种轮虫在生态条件上的差异.结果表明:L型和S型褶皱臂尾轮虫对盐度的适应有显著的差异,生长的最适盐度分别为15和20,大水体培养时,其适宜生长的盐度范围分别是15～20和10～30.饵料微藻对L型和S型褶皱臂尾轮虫生长的影响一致.小球藻培养效果在4种饵料微藻中最好,其生长率明显高于微绿球藻和亚心形扁藻,波吉卵囊藻培养效果较差.

北方地区海水池塘褶皱臂尾轮虫培育技术

褶皱臂尾轮虫广泛分布于北方地区的半咸水和海水水域,因其个体小、游动缓慢、便于捕食、营养丰富、易于被消化吸收、对环境适应性强、生长快、繁殖迅速等特点而成为许多水产经济动物幼体不可缺少的天然优质饵料。现总结海水土池培育褶皱臂尾轮虫技术如下,供参考。一、池塘条件池塘大小要适中,一般面积以5~20亩为宜,便于管理和操作。池塘形状以长方形、南北走向为宜,水深一般在1~2米之间,利于水体交换的同时保证有足够的水体空间和稳定性。

光照、pH及盐度对褶皱臂尾轮虫培养效果的影响

研究了在不同光照周期,pH和盐度突变条件下褶皱臂尾轮虫的存活和增殖率。试验结果表明,光照对褶皱臂尾轮虫种群增殖的促进作用明显,持续光照条件下轮虫种群增殖率为持续黑暗状态的3.5倍;pH存活上限9.5,下限5.5;种群增殖最适pH为7.5～8.5;种群繁殖的最适盐度为30～35,存活的下限为15,上限为40。研究结果显示,光照对于褶皱臂尾轮虫的增殖是必要的;pH的不同对褶皱臂尾轮虫带卵量、孵化率和孵化时间均有影响。盐度突变盐差越大,褶皱臂尾轮虫的适应能力(适应所需时间和存活率)越弱。

UV-B辐射增强对褶皱臂尾轮虫实验种群动态的影响

采用单个体培养和生命表技术,研究了不同UV-B辐射剂量对褶皱臂尾轮虫(Brachionus plicatilis)实验种群的存活时间、产卵量、生殖率和内禀增长率等关键种群参数的影响.结果表明,UV-B辐射可使轮虫的存活时间显著缩短(p<0.05),对照组轮虫存活时间最长,在本实验条件下达390 h;最大剂量1.20 kJ/m2处理组最短,为300 h.低剂量的0.24、0.48和0.72 kJ/m2UV-B辐射促进了褶皱臂尾轮虫的繁殖,而高剂量的0.96和1.20 kJ/m2UV-B辐射抑制了褶皱臂尾轮虫的繁殖.褶皱臂尾轮虫的生命期望随UV-B辐射剂量的增大呈一致性缩短,可以作为大气UV-B辐射强弱的生物指标.

南极大磷虾粉对褶皱臂尾轮虫生长及脂肪酸组成的影响

以活性干酵母培养的褶皱臂尾轮虫(Brachionus plicatilis)为对照,并以南极大磷虾粉对轮虫进行强化,设定轮虫培养液中南极大磷虾粉质量浓度分别为30、50和70 mg/L。分别测定强化12 h和18 h时轮虫的密度、带卵率以及强化后6 h、12 h、18 h轮虫的脂肪酸组成与含量。结果表明,12 h和18 h时,50 mg/L组的轮虫密度急剧升高,并显著高于其他3组,依次表现为50 mg/L组>30 mg/L组>对照组>70 mg/L组。带卵率方面:第12小时和18小时带卵率由高到低依次为50 mg/L组、30 mg/L组、70 mg/L组、对照组(P<0.05)。脂肪酸方面:6 h时,除了70 mg/L组的ARA与对照组、50 mg/L组和70 mg/L组的ω6-系列多不饱和脂肪酸总量(∑ω6-PUFA)与对照组没有显著差异外,其余强化组的ARA、EPA、DHA、ω3-系列多不饱和脂肪酸总量(∑ω3-PUFA)和∑ω6-PUFA都显著高于对照组(P<0.05);尤其是50 mg/L组的DHA和∑ω3-PUFA显著高于其他两个强化组和对照组(P<0.05),含量几乎达到对照组的10倍。12 h和18 h时,所有强化组的ARA、EPA、DHA、∑ω3-PUFA含量都显著高于对照组(P<0.05),而且50 mg/L组的上述脂肪酸含量都是最高的,或者与30 mg/L组和70 mg/L组并列第一。3个强化组的DHA/EPA比值、EPA/ARA比值也显著高于对照组(P<0.05)。结论认为,南极大磷虾粉的强化剂量以50 mg/L为优,强化时间则以12 h和18 h为宜,南极大磷虾粉对褶皱臂尾轮虫具较好的营养强化效果。

不同饵料对褶皱臂尾轮虫种群生长繁殖的影响

用３种饵料、４个组合培养褶皱臂尾轮虫，研究饵料对轮虫种群生长、繁殖的影响。结果表明：用光合细菌和鲜酵母混合为饵组，轮虫的最高培养密度达到了１８２０ｍＬ－１，高于其它３组；轮虫的日平均增殖率为０．４３５１，比光合细菌组和鲜酵母组分别增加了６．４％和２５．０％。对轮虫生长、繁殖有明显的促进作用。

不同饵料和接种密度对褶皱臂尾轮虫种群增长的影响

应用正交设计方法, 研究了水温分别为(17.8±1.3 )℃和( 23.3±1.9 )℃条件下, 不同饵料和接种密度对褶皱臂尾轮虫(Brachionusplicatilis) 种群增长的影响. 结果表明: 1) 当水温为( 17.8 ±1.3 )℃时, 轮虫密度随接种密度的增加而提高, 而轮虫种群增长率则随接种密度的增加而下降; 2) 当水温为(17.8±1.3)℃时, 饵料和接种密度均对轮虫种群增长具显著影响, 水温为( 23.3 ±1.9)℃时, 饵料对轮虫种群增长具显著影响, 而接种密度对种群增长影响不显著; 3) 这3种生态因子的最佳组合为:水温为( 23.3 ±1.9 )℃、接种密度为轮虫100只/mL、饵料为酵母60g/ (亿个·d).

长江口疏浚弃土悬沙对褶皱臂尾轮虫的影响

采用克隆培养法 (编制生命表 )和群体累积培养法 ,研究了长江口疏浚弃土悬沙对褶皱臂尾轮虫(Brachionusplicatilis)的影响 .实验设 0 (CK)、1、3、5、7、9mg·ml-16个悬沙梯度和 2 0、12× 10 6cells·ml-1两个饵料密度 .结果表明 ,克隆培养时 ,悬沙可使该轮虫种群的内禀增长率 (rm)下降 2 9.6 %～ 6 4 .1% ,最大降幅为 130 .0 % .悬沙对轮虫种群的存活率 (lx)有影响 ,而对种群的繁殖率 (mx)无显著影响 .群体累积培养时 ,悬沙对轮虫种群的雌体密度、雄体密度、孤雌生殖卵和休眠卵的密度以及种群的动态变化规律无显著影响 .可见 。

塔玛亚历山大藻和东海原甲藻对褶皱臂尾轮虫种群数量的影响

通过对 2 0 0 2年 5月东海赤潮原因种 -东海原甲藻和亚历山大藻的单一藻种和两种藻混合情况下对褶皱臂尾轮虫种群数量影响的实验研究 ,发现塔玛亚历山大藻 (ATHK )对轮虫有致死作用 ,其4 8hLC50 为 130 0cell·ml-1.藻的各组分毒性比较研究表明 ,只有藻液和藻细胞具有这种毒害作用 ,藻在早期生长阶段的毒害作用较强 ,毒性大小与藻细胞活性相关 .东海原甲藻在高密度 (4× 10 4、5× 10 4、10× 10 4cell·ml-1)时对轮虫种群数量在第 5d时开始有影响 ;东海原甲藻在低密度 (1× 10 4、2× 10 4、3× 10 4cell·ml-1)时 ,轮虫能够以其为食并进行生长繁殖 .两种藻混合情况下 ,东海原甲藻能够减轻塔玛亚历山大藻对轮虫的毒害作用 .实验结果表明 ,此次赤潮对东海的微型浮游动物种群能够产生一定的影响 .

2种多溴联苯醚(BDE-47、BDE-209)对褶皱臂尾轮虫单一和联合毒性效应研究

为丰富海洋环境中多溴联苯醚污染对浮游动物毒性效应的研究,本文采用不同浓度的2种多溴联苯醚BDE-47和BDE-209作为胁迫因子,以褶皱臂尾轮虫(Brachionus plicatilis)为受试生物,研究其单一及联合急性毒性效应。研究显示:单一急性毒性作用时,BDE-47胁迫对轮虫的48、72和96hLC50分别为2.113、0.376、0.163mg/L,均小于BDE-209各相应的LC50值,分别为11.162、1.237、0.295mg/L,说明BDE-47对褶皱臂尾轮虫的急性毒性大于BDE-209;二者联合作用时,分别采用浓度1∶1和毒性1∶1进行试验,应用Marking相加指数法计算AI(Additive index),评价二者对轮虫的联合毒性,2种试验配比方式得到的结果类似,暴露时间分别为24、48h时AI>0,联合作用结果均为协同作用;72、96h时AI<0,均表现为拮抗作用。结果表明,96h内随着暴露时间的增加,BDE-47和BDE-209对其联合毒性作用从协同作用转变为轻微的拮抗作用。

利用啤酒酵母活菌株培养褶皱臂尾轮虫的研究

本文介绍了用啤酒酵母活菌株培养褶皱臂尾轮虫的试验成果。试验表明:(1)轮虫接种的适宜密度是14—7 0个/毫升;(2)投喂量对水环境因子有一定影响,但在充分充气条件下,pH和溶氧量变化对轮虫增殖没有明显影响;而化学耗氧量的变化在超过100ppm时,对轮虫增殖有严重影响。(3)投喂量应根据水温和轮虫的数量来确定,在水温30℃时,投喂率3(克酵母/克轮虫),连续采收使轮虫密度保持在200个/毫升左右,可望长时间获得轮虫高产稳产的培养效果;(4)除啤酒酵母外,投喂适当经乳化处理的清鱼肝油,不会影响轮虫的产量,但可以提高轮虫作为幼鱼饵料的营养效果。

真鲷饵料生物褶皱臂尾轮虫和眼点拟微绿藻的大量培养

于1992～1994年 ,在中国水科院黄海水产研究所小麦岛试验基地(青岛)进行的“中日合作真鲷增殖放流项目”执行期间 ,对真鲷饵料生物———眼点拟微绿藻 (Nannochloropsisoculata)和L型褶皱臂尾轮虫 (Branchionus plicatilis)进行了大量培养。眼点拟微绿藻的平均接种密度为1211.3×104个/ml,经5～6d的室内或室外露天培养即可达到平均为2341.0×104 个/ml的收获密度 ;采用眼点拟微绿藻和新鲜面包酵母作为混合饵料 ;褶皱臂尾轮虫 (L型 )培养3～4d即可由接种时平均密度148.0个/ml,增长至平均216.8个/ml的采收密度。眼点拟微绿藻和轮虫的日间增殖密度分别是12.8 %和26.6 %。每生产108个褶皱臂尾轮虫需要消耗0.73m3眼点拟微绿藻 (密度为2000×104/ml)和790.8g 鲜面包酵母。采用此法 ,作者连续3a成功地为每年百万尾以上真鲷苗种提供了足够的生物饵料。总结3a苗种培育和生物饵料培养之间的关系 ,作者认为 ,大规模稳定生产海水鱼类苗种时,育苗与饵料生物培养 (褶皱臂尾轮虫和眼点拟微绿藻 )水体的合理比例应为1∶1～1.5∶3。

不同强化剂及其剂量对褶皱臂尾轮虫成活率和脂肪酸组成的影响

以小新月菱形藻强化效果为对照，研究了3种油脂型强化剂（墨鱼油、精制鱼油、混合鱼油）在不同剂量（0．25g／L、0．35g／L和0．45g／L）下强化12h后褶皱臂尾轮虫的脂肪酸组成和成活率。结果表明，不同强化剂和强化剂量下褶皱臂尾轮虫的成活率存在显著差异。用小新月菱形藻强化轮虫的成活率最高（96．82％），随着油脂型强化剂剂量的增大，轮虫的成活率显著下降。当强化剂量为0．45g／L时，墨鱼油型强化剂强化过程中轮虫的成活率仅为72．54％。不同强化剂强化后轮虫的脂肪酸组成有显著差异，强化前轮虫的EPA、ARA和DHA的量分别为2．56％、0．95％和7．73％，PUFA含量仅为16．65％。小新月菱形藻强化轮虫的EPA、ARA和DHA的量分别为12．27％、1．80％和8．61％，PUFA含量为26．00％。墨鱼油型强化剂强化的轮虫EPA、ARA和DHA的量分别为12．73％～13．47％、1．41％～1．46％和17．04％～17．96％，PUFA含量为39．36％～40．82％。精制油型强化剂强化的轮虫EPA、ARA和DHA的量分别为14．58％～17．00％、1．48％～2．78％和30．24％～31．93％，PUFA含量为55．53％～59．32％。混合鱼油型强化剂强化的轮虫EPA、ARA和DHA的量分别为13．34％～14．13％、1．38％～1．42％和24．88％～26．60％，PUFA含量为48．87％～50．70％。综合考虑轮虫成活率及脂肪酸组成，采用0．35g／L精制鱼油或0．25g／L混合鱼油强化银鲳仔鱼的饵料轮虫是合适的。

不同脂肪源对褶皱臂尾轮虫脂类和脂肪酸组成的影响(英文)

以褶皱臂尾轮虫 (Brachionusplicatilis )为实验动物并设计不同脂肪源饵料 ,分别为 :面包酵母Saccharomycescerevisice(对照组 ) ,微绿球藻Nannochlorpsisoculata (A) ,5 %大豆磷脂 + 5 %鱼油 + 90 %面包酵母 (B) ,10 %鱼油 + 90 %面包酵母 (C)。结果表明 :(1)接受不同脂肪源的轮虫的脂肪酸组成显著不同 ,尤其是高度不饱和脂肪酸 (HUFA ,2 0C)含量存在显著差异 ,说明饵料中HUFA含量对轮虫体内相应脂肪酸的含量有显著影响。投喂饵料C的轮虫具有高含量的n - 3HUFA(2 6 .7% ) ,而对照组轮虫的n - 3HUFA只有 7.5 6 % ,所以投喂饵料C使轮虫的脂类HUFA水平得到了强化 ,提高了轮虫的营养价值。 (2 )轮虫脂类的HUFA水平不仅由饵料中脂类的相应脂肪酸组成决定 ,而且轮虫脂类HUFA的提高和强化效果与饵料中HUFA的化学形态密切相关。甘油三酯型饵料HUFA的强化轮虫效果高于磷脂型的HUFA。 (3)将富含HUFA的鱼油直接添加在干性饵料如面包酵母中 ,而不是通过对鱼油乳化后直接强化轮虫 ,同样能取得良好的强化效果 ,且操作简便 ,不易污染水质 。

赤潮藻塔玛亚历山大藻对褶皱臂尾轮虫生活史特征的影响

采用生命表方法,研究了不同浓度塔玛亚历山大藻对褶皱臂尾轮虫生命周期中各发育阶段历时以及种群增长参数的影响.结果表明:塔玛亚历山大藻对褶皱臂尾轮虫的生长发育有明显影响,使轮虫的繁殖前期和世代时间延长,繁殖期、繁殖后期和平均寿命缩短,产卵量和繁殖率降低.轮虫的净生殖率和内禀增长率均低于对照.不同藻浓度下轮虫能够维持一定的种群增长.

3种赤潮藻对褶皱臂尾轮虫的急性毒性效应

应用急性毒性试验方法,研究了可控生态条件下不同密度的东海原甲藻(Prorocentrum donghaiense Lu)、赤潮异弯藻(Heterosigma akashiwo Hada)和塔玛亚历山大藻(Alexandrium tamarense Balech)对褶皱臂尾轮虫(Brachionus plicatilis)的致死率和种群增长参数的影响.结果表明,东海原甲藻、赤潮异弯藻和塔玛亚历山大藻对褶皱臂尾轮虫24 h的LC50分别为3.56、1.21和0.49(×104cells/mL);3种赤潮藻在对褶皱臂尾轮虫的致毒过程中均表现了明显的密度效应;104cells/mL的东海原甲藻藻体,105cells/mL的赤潮异弯藻滤液和藻内容物以及103cells/mL的塔玛亚历山大藻滤液、藻内容物和藻体对褶皱臂尾轮虫有显著的抑制效应,且抑制作用随藻密度的增加而增强.

7株海洋微藻强化褶皱臂尾轮虫效果的研究

该文用 7株富含 EPA、DHA的海洋微藻对褶皱臂尾轮虫 (Brachionus plicatilis)进行强化 ,通过检测轮虫的脂肪酸组成和含量来研究这几种微藻对轮虫的营养价值。结果表明 :轮虫中的脂肪酸组成和含量与所用饵料密切相关 ,尤其是 EPA、DHA等多不饱和脂肪酸 (PUFA)主要取决于这些脂肪酸在藻中的含量 ;强化 12 h后 ,轮虫中的 n- 3PUFA含量一般为饵料中含量的 75 %左右 ,强化 2 4 h达 80 %以上 ,强化 7d的轮虫可达 90 %以上。