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许旺细胞在周围神经损伤修复中的作用及其可能分子机制 被引量:12
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作者 高伟 邵水金 +1 位作者 胡琳娜 刘延祥 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2010年第36期6825-6827,共3页
背景:周围神经损伤后神经功能的恢复一直是人们关注的焦点。许旺细胞在促神经功能恢复方面有着不可替代的作用。目的:对国内外有关许旺细胞在促神经功能恢复方面的作用及其可能的分子机制作一综述。方法:应用计算机检索CNKI、VIP和OVID... 背景:周围神经损伤后神经功能的恢复一直是人们关注的焦点。许旺细胞在促神经功能恢复方面有着不可替代的作用。目的:对国内外有关许旺细胞在促神经功能恢复方面的作用及其可能的分子机制作一综述。方法:应用计算机检索CNKI、VIP和OVID数据库中1993-01/2010-01关于周围神经损伤的文章,在标题和摘要中以"许旺细胞,周围神经,神经再生,综述"或"Schwann Cells,PeripheralNerve,Nerve Regeneration,Review"为检索词进行检索。选择文章内容与许旺细胞对周围神经损伤的作用有关者,同一领域文献则选择近期发表或发表在权威杂志上的文章。初检得到256篇文献,根据纳入标准选择关于许旺细胞作用机制的24篇文献进行综述。结果与结论:许旺细胞通过多种途径作用于受损的周围神经,进而促进损伤神经功能的恢复。如何促使损伤局部许旺细胞更多的增殖将成为更好地促进损伤神经功能恢复的一大突破点。综合各方面因素,电针治疗周围神经损伤将有更好的前景。 展开更多
关键词 许旺细胞 周围神经 神经再生 电针 综述文献
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许旺细胞与脱细胞神经移植物共培养在周围神经损伤修复中的作用 被引量:12
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作者 孙晓红 窦文波 +4 位作者 佟晓杰 张旭 贺政 王虹 张彩顺 《中国临床康复》 CSCD 北大核心 2006年第29期19-21,共3页
目的:观察体外分离、培养、纯化的许旺细胞对脱细胞神经移植物修复神经损伤的促进作用,为临床应用组织工程化神经修复周围神经缺损提供实验依据。方法:实验于2004-04/2005-04在中国医科大学组织工程实验室完成。纳入普通级雄性Wistar大... 目的:观察体外分离、培养、纯化的许旺细胞对脱细胞神经移植物修复神经损伤的促进作用,为临床应用组织工程化神经修复周围神经缺损提供实验依据。方法:实验于2004-04/2005-04在中国医科大学组织工程实验室完成。纳入普通级雄性Wistar大鼠24只,体质量180~220g。随机分为实验组、空白对照组、自体移植对照组共3组,每组8只。分笼饲养。另纳入5~8d龄Sprague-Dawley乳鼠40只,取其双侧坐骨神经与臂丛神经。实验组大鼠右后腿用种植许旺细胞的ARSN桥接人为造成的神经缺损。空白对照组大鼠右后腿用单纯ARSN桥接人为造成的神经缺损。酶反复消化法与差速贴壁法分离和培养许旺细胞;许旺细胞与10mm长的脱细胞神经移植物共培养后,应用外科手术移植到大鼠坐骨神经缺损处,自体移植对照组大鼠右后腿用单纯切断的神经上下颠倒原位桥接人为造成的神经缺损。13周取材通过透射电镜和扫描电镜观察神经纤维的再生情况。结果:Wistar大鼠24只全部进入结果分析,没有脱失。①实验组较空白对照组的再生有髓神经纤维均匀,轴索略粗,髓鞘厚度有差别,部分神经纤维髓鞘还未形成板层结构,许旺细胞包绕神经纤维,轴索内微丝微管结构较清晰,无髓神经纤维直径较小,不均匀分布在有髓神经纤维之间,由一层纤维结缔包裹形成纤维束,实验组较自体移植对照组的髓鞘略薄,自体移植组再生神经纤维均较粗,许旺细胞包裹轴突形成排列规则、电子密度较高的髓鞘,髓鞘厚薄基本相同。②实验组可见大量许旺细胞呈双极梭形,并且首尾相连排列成链状或网状特征性分布。许旺细胞还可在神经纤维上的胶原丝上附着。③实验组有髓神经纤维数、髓鞘厚度、G率(有髓纤维总面积/神经干总面积)接近自体移植对照组,差异无显著性意义[(5344±592),(5514±373);(3.13±0.16),(3.19±0.25)μm;(48.43±3.62)%,(57.11±2.28)%;P>0.05];与空白对照组比较差异有显著性意义[(5344±592),(3191±236);(3.13±0.16),(1.28±0.33)μm;(48.43±3.62)%,(31.05±4.19)%;P<0.05]。结论:与许旺细胞共培养的脱细胞神经移植物可加快宿主轴索再生,促进神经损伤修复,是临床修复神经缺损的可行办法。 展开更多
关键词 许旺细胞 神经组织 组织工程 共同培养技术 神经再生
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去细胞同种异体神经种植许旺细胞的体外实验:组织工程化人工神经应用的可行性 被引量:6
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作者 韩金豹 高宏阳 +2 位作者 赵宝辉 韩久卉 陈居文 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期2006-2010,共5页
目的:许旺细胞作为种子细胞在组织工程化人工神经制备中的作用已被学术界所接受。胎兔的神经系统已发育完善,而免疫系统尚未成熟,探讨将胎兔许旺细胞植入去细胞同种异体神经桥接体制备组织工程化人工神经修复周围神经缺损的可行性。方法... 目的:许旺细胞作为种子细胞在组织工程化人工神经制备中的作用已被学术界所接受。胎兔的神经系统已发育完善,而免疫系统尚未成熟,探讨将胎兔许旺细胞植入去细胞同种异体神经桥接体制备组织工程化人工神经修复周围神经缺损的可行性。方法:实验于2005-03/2006-03在河北医科大学第三医院完成。①实验材料:SPF级怀孕28d的新西兰白兔2只、成年新西兰白兔1只。②实验过程:包括胎兔许旺细胞培养、去细胞神经桥接体的制备以及许旺细胞与去细胞神经桥接体的体外种植3个步骤。使用双酶消化法培养许旺细胞并将其种植于经3%TritonX-100作用96h后的同种异体神经中。③实验评估:分别于培养的1,3,5d通过石蜡切片苏木精-伊红染色观察许旺细胞在桥接体中的生长情况。结果:①采用双差速贴壁法去除绝大部分成纤维细胞后在细胞培养的初期使用阿糖胞苷抑制成纤维细胞生长,后期培养液中加入神经生长因子促进许旺细胞生长能获取大量许旺细胞且纯度可达90%以上。②用3%TritonX-100作用96h可去除周围神经中的细胞和髓鞘而保留完整的神经基底膜管和纤维支架结构,并且对神经基底膜主要成分-层粘连蛋白无明显影响。③采用胎兔坐骨神经培养的许旺细胞能在用成年兔坐骨神经制备的去细胞桥神经接体中生长良好,并且有迁移成行的特性。结论:种植许旺细胞重新细胞化的去细胞同种异体神经将可能成为一种理想的组织工程化人工神经。 展开更多
关键词 周围神经 组织工程 化学萃取 许旺细胞
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碱性成纤维细胞生长因子对许旺细胞在小肠黏膜下层支架上黏附及增殖的影响 被引量:4
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作者 张开伟 肖睿 +2 位作者 段宏 项舟 李秀群 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2010年第21期3827-3831,共5页
背景:许旺细胞复合小肠黏膜下层是构建人工神经的可行方法,碱性成纤维细胞生长因子有促进许旺细胞增殖的作用。目的:验证碱性成纤维细胞生长因子对许旺细胞在小肠黏膜下层支架材料表面的细胞增殖及黏附状态的影响。方法:将体外分离培养... 背景:许旺细胞复合小肠黏膜下层是构建人工神经的可行方法,碱性成纤维细胞生长因子有促进许旺细胞增殖的作用。目的:验证碱性成纤维细胞生长因子对许旺细胞在小肠黏膜下层支架材料表面的细胞增殖及黏附状态的影响。方法:将体外分离培养的2代SD乳鼠许旺细胞接种于小肠黏膜下层支架材料上并加入50μg/L的碱性成纤维细胞生长因子复合培养为实验组,以单纯的许旺细胞复合小肠黏膜下层作为对照组,分别用MTT法测定细胞增殖能力,细胞黏附率检测细胞在支架上的黏附情况,用流式细胞仪测定细胞分裂周期,并用苏木精-伊红染色及描电镜观察细胞形态及与材料的贴附情况。结果与结论:MTT显示实验组的细胞增殖吸光度值明显高于对照组(P<0.05),实验组的细胞黏附率为(69.47±3.17)%,对照组为(44.58±1.76)%(P<0.05),细胞周期显示实验组比对照组的G2/M+S期细胞百分含量高(P<0.05),培养7d后的苏木精-伊红染色及扫描电镜显示实验组比对照组材料上聚集的细胞数量多,细胞形态伸展更明显,细胞贴附力更好。因此碱性成纤维细胞生长因子可明显地改善许旺细胞在小肠黏膜下层上的增殖及黏附能力,能促进许旺细胞与小肠黏膜下层支架的复合而构建人工神经导管。 展开更多
关键词 碱性成纤维细胞生长因子 许旺细胞 小肠黏膜下层 增殖 黏附
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体外纯化乳鼠许旺细胞的4种方法比较(英文) 被引量:4
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作者 陈钢 杨彩虹 +3 位作者 田林强 郭风劲 陈安民 孙凯 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1892-1896,共5页
背景:许旺细胞是外周神经系统中修复神经损伤及神经疾病的主要种子细胞之一。但是,许旺细胞的来源有限,且由于成纤维细胞的污染,使许旺细胞的纯度受到影响。有学者提出了其他的纯化方法,但每种方法都存在其不足之处而不能很好的满足临... 背景:许旺细胞是外周神经系统中修复神经损伤及神经疾病的主要种子细胞之一。但是,许旺细胞的来源有限,且由于成纤维细胞的污染,使许旺细胞的纯度受到影响。有学者提出了其他的纯化方法,但每种方法都存在其不足之处而不能很好的满足临床应用的需要。目的:比较差速贴壁消化法、冷喷注法、磁珠分选法和G418筛选法4种体外纯化乳鼠许旺细胞方法的差异。方法:取SD大鼠坐骨神经得到所需神经组织。分别用差速贴壁消化法、冷喷注法、磁珠分选法和G418筛选法纯化许旺细胞。比较4种方法获得细胞的活力,免疫组织化学法鉴定许旺细胞并计算纯度。结果与结论:差速贴壁消化法所得到的细胞纯度稍低,活力尚可;冷喷注法获得的细胞纯度和活力均较高;磁珠分选法获得的细胞纯度和冷喷注法相当,但是活力稍差;G418筛选法活力差,纯度高。 展开更多
关键词 许旺细胞 差速贴壁消化 冷喷注 磁珠分选 G418筛选
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兔微囊化许旺细胞移植对脊髓损伤大鼠髓鞘结构再生的影响 被引量:3
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作者 杨宝林 刘德明 +4 位作者 夏雯涵 马建敏 万斌 刘曾旭 蒋昌宇 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2009年第47期9261-9264,共4页
背景:许旺细胞对周围神经的轴突生长和髓鞘的形成具有重要作用,许旺细胞是否能在脊髓中发挥同样的作用引起了大家的关注,微囊化技术作为一种有效的免疫隔离手段,能有效保持许旺细胞的活性,以发挥许旺细胞修复脊髓的作用。目的:将海藻酸... 背景:许旺细胞对周围神经的轴突生长和髓鞘的形成具有重要作用,许旺细胞是否能在脊髓中发挥同样的作用引起了大家的关注,微囊化技术作为一种有效的免疫隔离手段,能有效保持许旺细胞的活性,以发挥许旺细胞修复脊髓的作用。目的:将海藻酸钠微囊包被兔许旺细胞后移植于大鼠脊髓损伤处,观察移植后髓鞘结构的变化。设计、时间及地点:完全随机分组,对照动物实验,于2005-03/2008-02在南昌大学基础医学院完成。材料:取成年家兔坐骨神经干,利用反复差速贴附法体外培养许旺细胞,制备许旺细胞悬液及微囊化许旺细胞悬液。方法:SD大鼠146只,建立T10脊髓右半横断损伤模型,随机分为单纯损伤组44只,细胞移植组44只,微囊化细胞移植组44只,正常对照组14只。术后1,3,7,14,28d,各组每时相取8只大鼠(正常对照组取2只)灌注固定,脊髓组织做石蜡切片,行苏木精-伊红染色、Loyez氏法髓鞘染色。另外,各组于2,8周时相点各取2只大鼠灌注,脊髓组织固定,Epon816包埋,醋酸铀和柠檬酸铝双染,电镜观察。主要观察指标:观察损伤周围组织的神经元数量及存活情况变化,损伤侧脊髓白质髓鞘的结构变化。结果:脊髓损伤后1,3d各组损伤侧脊髓神经元变性坏死,髓鞘数量减少、结构松弛,但细胞移植组和微囊化细胞移植组较少见。7d各组髓鞘数量减少,结构破坏,微囊化细胞移植组较轻。14d神经元数量增多,胞体增大,以微囊化细胞移植组明显。28d微囊化细胞移植组神经元逐渐恢复,髓鞘结构渐趋完整、数量增加,与单纯损伤组、细胞移植组比较差异有显著性意义(P<0.01)。8周时,微囊化细胞移植组见大部分髓鞘修复,可见新生髓鞘。结论:微囊具有免疫隔离作用,微囊化兔许旺细胞可促进大鼠脊髓神经元修复和轴突髓鞘化。 展开更多
关键词 微囊 许旺细胞 髓鞘 脊髓损伤
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人神经生长因子基因修饰的许旺细胞治疗脊髓损伤的实验研究 被引量:4
7
作者 田林强 陈钢 +3 位作者 杨彩虹 王秋 郭风劲 陈安民 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2012年第16期2693-2696,共4页
目的:观察神经生长因子(nerve growth factor,NGF)基因修饰的许旺细胞(Schwann cells,SCs)对大鼠脊髓损伤后运动功能恢复及GAP-43的表达情况,探讨其对脊髓损伤修复的作用机制。方法:清洁级SD大鼠52只,随机分为EGFP-N1-NGF转染许旺移植... 目的:观察神经生长因子(nerve growth factor,NGF)基因修饰的许旺细胞(Schwann cells,SCs)对大鼠脊髓损伤后运动功能恢复及GAP-43的表达情况,探讨其对脊髓损伤修复的作用机制。方法:清洁级SD大鼠52只,随机分为EGFP-N1-NGF转染许旺移植组16只(A组),许旺细胞移植组16只(B组),PBS对照组12只(C组)和假手术组8只(D组),用改良Allen法制造大鼠脊髓损伤模型。分别于术后7,14,21,28d用BBB评分法观察动物行为学的变化,用肌电图检测动物中枢传导速度和波幅;然后处死动物,取损伤区1cm范围脊髓节段,常规石蜡包埋,组织切片,GAP-43免疫组织染色观察脊髓损伤的组织学变化。结果:BBB评分结果D组>A组>B组>C组;肌电图检测结果显示中枢传导速度A、B、C组间差别有统计学意义P<0.05,D组明显高于其它三组;GAP-43免疫组化检测结果提示A>B>C组,D组仅有少量表达。结论:本研究证实NGF基因修饰的许旺细胞能够促进脊髓损伤的恢复,可能是促进神经轴突的生长有关。 展开更多
关键词 脊髓损伤 神经生长因子 许旺细胞 大鼠 运动功能
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壳聚糖乙酰化甲壳素材料与许旺细胞的体外相容性 被引量:4
8
作者 陈颖 任艳玲 +3 位作者 李奕 林巍巍 杨宇民 王晓冬 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2008年第32期6230-6234,共5页
背景:天然甲壳素溶解性差,不易加工处理。传统工艺制备的甲壳素存在较多致炎性杂质蛋白。目的:观察由高纯度壳聚糖乙酰化制备的甲壳素材料与许旺细胞的体外生物相容性。设计、时间及地点:对比观察实验,于2006-09/2007-10在南通大学医学... 背景:天然甲壳素溶解性差,不易加工处理。传统工艺制备的甲壳素存在较多致炎性杂质蛋白。目的:观察由高纯度壳聚糖乙酰化制备的甲壳素材料与许旺细胞的体外生物相容性。设计、时间及地点:对比观察实验,于2006-09/2007-10在南通大学医学院组织学与胚胎学教研室及江苏省神经再生重点实验室完成。材料:新生一两天的SPF级SD大鼠坐骨神经和臂丛神经用于培养许旺细胞,自制壳聚糖膜,脱乙酰度为92.5%。方法:将脱乙酰度92.5%的壳聚糖膜浸入5%的醋酐甲醇溶液中进行乙酰化反应后制备甲壳素膜。体外接种许旺细胞分别至壳聚糖膜和甲壳素膜上。主要观察指标:共培养6d后通过抗S-100蛋白免疫细胞化学的方法鉴定,并进行光镜、扫描电镜观察细胞形态。CCK-8试剂检测在壳聚糖膜浸出液、甲壳素膜浸出液、L-15培养基、有机锡浸出液中生长2,4,6d许旺细胞的细胞活力。结果:抗S-100蛋白免疫细胞化学的鉴定结果提示这类细胞为许旺细胞;光镜、扫描电镜观察均发现细胞能够在壳聚糖膜和甲壳素膜表面正常生长,细胞贴附牢固,外形饱满,大多数细胞呈长梭形,边缘清晰,细胞增殖情况良好。细胞活力检测的结果显示壳聚糖膜浸出液和甲壳素膜浸出液中生长的许旺细胞与L-15培养基中生长的细胞相比,细胞活力无明显差异(P>0.05)。有机锡浸出液中生长的许旺细胞活力均低于其他浸出液,差异有显著性意义(P<0.05)。结论:壳聚糖乙酰化制备的甲壳素材料与许旺细胞体外生物相容性良好。 展开更多
关键词 甲壳素 壳聚糖 乙酰化 许旺细胞 生物相容性 生物材料
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种植神经干细胞-许旺细胞的共聚物支架移植修复大鼠损伤脊髓 被引量:4
9
作者 夏雷 郝淑煜 +4 位作者 李德志 陈刚 高川川 历俊华 万虹 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2012年第47期8821-8825,共5页
背景:前期实验显示,在体外乙交酯-丙交酯共聚物支架与神经干细胞和许旺细胞有良好的相容性。目的:观察与许旺细胞共移植,神经干细胞是否能在乙交酯-丙交酯共聚物取向支架内存活、分化,乙交酯-丙交酯共聚物组织工程复合物是否能促进轴突... 背景:前期实验显示,在体外乙交酯-丙交酯共聚物支架与神经干细胞和许旺细胞有良好的相容性。目的:观察与许旺细胞共移植,神经干细胞是否能在乙交酯-丙交酯共聚物取向支架内存活、分化,乙交酯-丙交酯共聚物组织工程复合物是否能促进轴突再生及其髓鞘化。方法:制作成年Wistar大鼠T8段半横断脊髓损伤模型,随机分为3组:支架组植入乙交酯-丙交酯共聚物支架,神经干细胞组植入接种神经干细胞(标记绿色荧光蛋白)的乙交酯-丙交酯共聚物取向支架,联合组植入接种神经干细胞(标记绿色荧光蛋白)和许旺细胞的乙交酯-丙交酯共聚物取向支架。结果与结论:移植的神经干细胞可在大鼠脊髓内存活,并迁移至邻近脊髓,联合组标记绿色荧光蛋白阳性细胞存活率显著高于神经干细胞组(P<0.001)。联合组胶质纤维酸性蛋白/标记绿色荧光蛋白双阳性细胞多于神经元特异性烯醇化酶/标记绿色荧光蛋白双阳性细胞,神经干细胞组未发现神经元特异性烯醇化酶/标记绿色荧光蛋白双阳性细胞。联合组有少部分绿色荧光蛋白阳性细胞表达突触素,再生轴突和有髓轴突数量高于其他两组,但差异无显著性意义(P=0.058)。表明与许旺细胞共移植,可促进神经干细胞向神经元样细胞分化,少部分神经元样细胞还可能形成了突触连接;种植了神经干细胞和许旺细胞的乙交酯-丙交酯共聚物支架可促进轴突再生及其髓鞘化。 展开更多
关键词 脊髓损伤 细胞移植 组织工程 神经干细胞 许旺细胞 生物相容性多聚物 乙交酯-丙交酯共聚物支架
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成人骨髓基质干细胞体外诱导为许旺细胞的实验研究 被引量:6
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作者 王剑 杜劲松 +1 位作者 张信英 王德生 《中风与神经疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期525-528,共4页
目的 探索成人骨髓基质干细胞 (h MSCs)诱导分化为许旺细胞 (Schwann cell,SC)的可行性 ,奠定组织工程学治疗周围神经疾病的理论基础。方法 采取 Ficoll-paque梯度离心骨髓 ,分离 h MSCs,经过纯化、扩增培养 ,并证实其细胞来源 ;之后... 目的 探索成人骨髓基质干细胞 (h MSCs)诱导分化为许旺细胞 (Schwann cell,SC)的可行性 ,奠定组织工程学治疗周围神经疾病的理论基础。方法 采取 Ficoll-paque梯度离心骨髓 ,分离 h MSCs,经过纯化、扩增培养 ,并证实其细胞来源 ;之后采用 BHA、RA及 Forskolin、b FGF、PDGF、HRG顺次诱导、培养 ,经免疫组化鉴定S-10 0、GFAP的表达状况。结果 经过预诱导剂及诱导剂的先后作用 ,h MSCs的细胞形态发生明显改变 ,胞体呈长梭形 ,两极有丝状突起形成 ,经免疫组化的证实 ,S-10 0、GFAP阳性表达率分别为 (75%± 6.2 % )和 (67%± 4.5% )。结论  h MSCs经诱导后 ,细胞形态、体积大小均发生明显改变 ,S-10 0、GFAP染色呈阳性 ,符合许旺细胞形态和功能特征 ,证实 h MSCs可以作为种子细胞转化为许旺细胞 。 展开更多
关键词 成人骨髓基质干细胞 体外诱导 许旺细胞 实验研究
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微囊化兔许旺细胞移植脊髓损伤大鼠:碱性成纤维细胞生长因子表达和后肢运动功能的变化 被引量:3
11
作者 陈惠 傅文学 +2 位作者 桂婷 刘德明 杨耀防 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期1372-1376,共5页
背景:研究表明微囊化兔许旺细胞移植于大鼠损伤脊髓后,能减轻炎症反应,促进脊髓再生,但具体作用途径尚不完全清楚。目的:观察微囊化兔许旺细胞移植于损伤大鼠脊髓后,碱性成纤维细胞生长因子的表达以及后肢运动功能的恢复。方法:取家兔... 背景:研究表明微囊化兔许旺细胞移植于大鼠损伤脊髓后,能减轻炎症反应,促进脊髓再生,但具体作用途径尚不完全清楚。目的:观察微囊化兔许旺细胞移植于损伤大鼠脊髓后,碱性成纤维细胞生长因子的表达以及后肢运动功能的恢复。方法:取家兔坐骨神经以双酶消化法制成许旺细胞悬液后,再用气体喷入法制成海藻酸钡-许旺细胞微囊。同法制备不包被许旺细胞的空囊。SD大鼠随机分为4组:细胞组、空囊组、微囊组建立脊髓半横断损伤模型,分别于损伤处植入明胶海绵吸附的10μL许旺细胞悬液、10μL空囊、10μL海藻酸钡-许旺细胞微囊;正常组不做任何干预。采用BBB评分观察大鼠后肢运动功能恢复情况,制作脊髓标本切片通过苏木精-伊红染色和尼氏染色行病理学检查,免疫组织化学染色观察碱性成纤维细胞生长因子的表达变化。结果与结论:造模后即刻大鼠右后肢出现瘫痪;材料移植后7,14,28d,微囊组大鼠后肢运动功能明显恢复,BBB评分明显优于细胞组、空囊组(P<0.05或P<0.01)。碱性成纤维细胞生长因子阳性细胞主要见于神经元细胞的胞浆及胶质细胞的胞核内。材料移植后第1,3,7天,胶质细胞主要在脊髓损伤附近处表达,其中第3天表达量最大;第14天在神经元细胞的胞浆内可见碱性成纤维细胞生长因子表达,微囊组表达程度明显高于细胞组、空囊组;之后各组表达程度均明显下降。提示微囊化兔许旺细胞移植于损伤大鼠脊髓后,可以抑制异种移植后免疫排斥,减轻炎症反应,增加碱性成纤维细胞生长因子表达,促进后肢功能恢复和脊髓再生。 展开更多
关键词 脊髓损伤 移植 碱性成纤维细胞生长因子 运动功能 微囊 许旺细胞 生物材料
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不同浓度许旺细胞与聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物修复损伤周围神经的比较 被引量:6
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作者 孙焕伟 张铁慧 +2 位作者 由欣岩 任远飞 钟声 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2014年第47期7579-7584,共6页
背景:有研究表明,许旺细胞神经移植复合体具有极强修复自体神经缺损作用,并且许旺细胞在神经再生过程中发挥至关重要的作用。目的:比较不同浓度许旺细胞神经移植复合体修复自体神经缺损时周围神经的再生效果。方法:建立坐骨神经缺损模... 背景:有研究表明,许旺细胞神经移植复合体具有极强修复自体神经缺损作用,并且许旺细胞在神经再生过程中发挥至关重要的作用。目的:比较不同浓度许旺细胞神经移植复合体修复自体神经缺损时周围神经的再生效果。方法:建立坐骨神经缺损模型大鼠。原代培养大鼠许旺细胞,构建聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物管-细胞外基质凝胶-许旺细胞神经移植复合体修复坐骨神经缺损模型大鼠。按许旺细胞浓度的不同分为105,106,107,108,109 L-1浓度组,对照组不含许旺细胞。分别于建模后3,6和12周,行运动神经传导速度的测定。建模后12周各组胫骨前肌湿质量测量和组织学观察。结果与结论:建模后3,6和12周,含许旺细胞各浓度的神经移植复合体组各时间点神经传导速率均高于对照组(P<0.01),其中108 L-1组运动神经传导速度优于其他各浓度组(P<0.05)。建模后12周,大鼠胫骨前肌苏木精-伊红染色显示,各浓度许旺细胞神经移植复合体组正常肌纤维数均多于对照组(P<0.05)。其中许旺细胞浓度108,109 L-1浓度组胫骨前肌形态恢复较好,肌纤维细条样、波浪状,同向而行,长短、粗细及疏密大致一致。结果证实,108 L-1许旺细胞神经聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物移植复合体对缺损坐骨神经再生的促进作用较好。 展开更多
关键词 生物材料 材料相容性 聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物 周围神经 神经再生 坐骨神经 许旺细胞 神经缺损 神经移植物 最佳浓度 人工材料 神经修复
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大鼠骨髓间充质干细胞和许旺细胞联合移植治疗脊髓损伤 被引量:16
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作者 智晓东 吕刚 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2008年第16期3015-3018,共4页
目的:骨髓间充质干细胞和许旺细胞作为脊髓组织工程学的两个重要的种子细胞,均可进行自体移植,具有其他种子细胞无以比拟的优势。应用联合细胞移植治疗大鼠脊髓半横切模型,观察其疗效。方法:实验于2007-03/12在辽宁医学院科学实验中... 目的:骨髓间充质干细胞和许旺细胞作为脊髓组织工程学的两个重要的种子细胞,均可进行自体移植,具有其他种子细胞无以比拟的优势。应用联合细胞移植治疗大鼠脊髓半横切模型,观察其疗效。方法:实验于2007-03/12在辽宁医学院科学实验中心完成。①实验材料:清洁级健康成年SD雄性大鼠60只,体质量250-300g,由辽宁医学院实验动物中心提供。将大鼠按随机数字表法分为3组:联合细胞组、骨髓间充质干细胞组、磷酸盐缓冲液组,每组20只。实验过程中对动物处置符合动物伦理学标准。②实验方法:采用全骨髓培养法制备大鼠骨髓间充质干细胞,混合酶消化法制备大鼠许旺细胞。制作大鼠右侧T10脊髓半横切模型,联合细胞组注射骨髓间充质干细胞和许旺细胞,骨髓间充质干细胞组注射骨髓间充质干细胞,磷酸盐缓冲液组注射磷酸盐缓冲液。③实验评估:术后4周行网格及斜板实验,并检测大鼠损伤区脊髓诱发电位波幅及潜伏期,并行苏木精-伊红染色、免疫组织化学染色观察。结果:纳入大鼠60只,每组术后各2只因腹胀及感染死亡,进入结果分析54只。①网格实验及斜板实验均显示,联合细胞组大鼠恢复情况明显优于其他两组(P〈0.01),骨髓间充质干细胞组优于磷酸盐缓冲液组(P〈0.01)。②神经电生理检测显示,联合细胞组诱发电位波幅比其他两组高(P〈0.01),诱发电位潜伏期比其他两组短(P〈0.01),骨髓间充质干细胞组优于磷酸盐缓冲液组(P〈0.01)。③联合细胞组囊性病变区面积最小,其次是骨髓间充质干细胞组,磷酸盐缓冲液组囊性变区面积最大(P〈0.01)。④联合细胞组损伤侧灰质内神经元样细胞数多于其他两组(P〈0.01)。结论:骨髓间充质干细胞和许旺细胞可以联合移植,在体内存活良好,并互相协同促进损伤脊髓恢复,比单一细胞移植疗效更佳。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 许旺细胞 联合移植 脊髓损伤
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Ⅱ型神经纤维瘤病肿瘤性许旺细胞提取与纯化的体外研究 被引量:3
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作者 王维 杨学军 +5 位作者 李瑜 董雪涛 王华民 明浩朗 张斌 于圣平 《中国现代神经疾病杂志》 CAS 2011年第1期82-87,共6页
目的建立简便易行的Ⅱ型神经纤维瘤病肿瘤性许旺细胞体外提取并纯化方法,以获取能够满足实验需求的Ⅱ型神经纤维瘤病肿瘤性许旺细胞,提高原代培养成功率。方法采集6例Ⅱ型神经纤维瘤病患者肿瘤组织标本作为实验材料,Ⅰ型胶原酶消化培养... 目的建立简便易行的Ⅱ型神经纤维瘤病肿瘤性许旺细胞体外提取并纯化方法,以获取能够满足实验需求的Ⅱ型神经纤维瘤病肿瘤性许旺细胞,提高原代培养成功率。方法采集6例Ⅱ型神经纤维瘤病患者肿瘤组织标本作为实验材料,Ⅰ型胶原酶消化培养法提取肿瘤性许旺细胞,低浓度酶快速消化法、差数贴壁法和克隆筛选技术纯化肿瘤性许旺细胞。倒置相差显微镜观察细胞形态变化,免疫细胞化学染色检测纯化细胞S-100蛋白表达水平,结合细胞形态鉴定经体外培养并纯化的细胞为肿瘤性许旺细胞。结果自3例肿瘤组织标本培养液中成功获得肿瘤性许旺细胞。肿瘤细胞原代培养至第3天,可见大量双极梭形或三角形细胞,以低浓度酶快速消化法和差数贴壁法纯化细胞;培养至第3代,倒置相差显微镜观察可见4~5个克隆细胞,免疫细胞化学染色S-100蛋白表达阳性,肿瘤性许旺细胞纯度>95%,活力良好,可以稳定传代培养。结论应用体外原代培养方法结合低浓度酶快速消化法、差数贴壁法和克隆筛选技术能够有效剔除纤维母细胞,获得纯度高、活力良好的肿瘤性许旺细胞,可用于Ⅱ型神经纤维瘤病发病机制及治疗研究。 展开更多
关键词 神经纤维瘤病2型 许旺细胞 细胞 培养的 免疫组织化学
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神经生长因子对胎兔许旺细胞培养的影响 被引量:4
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作者 陈居文 韩金豹 +2 位作者 韩久卉 田德虎 高宏阳 《中国临床康复》 CSCD 北大核心 2006年第9期63-65,共3页
目的:应用神经生长因子培养胎兔许旺细胞,观察许旺细胞生长的情况。方法:实验于2002-02/2004-05在河北医科大学第三临床医学院中心实验室和细胞培养室完成。怀孕28d的新西兰白兔,剖腹取出胎兔,取胎兔坐骨神经,剥干净外膜,用植块加差速... 目的:应用神经生长因子培养胎兔许旺细胞,观察许旺细胞生长的情况。方法:实验于2002-02/2004-05在河北医科大学第三临床医学院中心实验室和细胞培养室完成。怀孕28d的新西兰白兔,剖腹取出胎兔,取胎兔坐骨神经,剥干净外膜,用植块加差速贴壁联合法培养胎兔许旺细胞,纯化传代后的胎兔许旺细胞分成2组培养,一组加含神经生长因子的培养液,即实验组,另一组加常规培养液,即对照组。细胞传代后24h在每个培养皿中随机选取3个视野,开始初次细胞计数,以后在统一视野每天进行许旺细胞计数。增殖指数=各次观察细胞数/初次观察细胞数。结果:实验用剖腹取出胎兔8只,坐骨神经16根。60个观察视野,均进入结果分析。①在第6天见细胞从胎兔神经组织块周围爬出。②第8天细胞沿组织块向外生长,可见大量梭形的胎兔许旺细胞;第14天植块周围细胞长势最好。③有两种细胞,一种为细胞形态梭形,有突起,多为双极,偶尔可见3个细长突起,胞核呈椭圆形,胞体周围有光晕,即生长晕,为许旺细胞。偶尔可见另一种细胞,胞体大,呈扁平状,外形不规则,突起短而多,细胞核较浅,核仁明显,有2~3个核仁,为成纤维细胞。④根据许旺细胞特有的特征性形态以及细胞免疫组化染色可证实为许旺细胞。⑤实验组许旺细胞的分裂增殖速度明显比对照组加快犤传代培养后第3天:(1.41±0.12),(1.05±0.10);第4天:(1.85±0.26),(1.21±0.22);第5天:(2.36±0.43),(1.23±0.32);第6天:(3.52±0.11),(1.94±0.33);第7天:(6.25±0.38),(3.14±0.27),P<0.001犦。结论:用神经生长因子可促进胎兔许旺细胞生长分裂,能够获得大量的胎兔许旺细胞,满足组织工程对许旺细胞的需求;此外胎兔许旺细胞作为组织工程的种子细胞也可以减轻免疫排斥反应的发生。 展开更多
关键词 组织工程 胚胎 许旺细胞 神经生长因子 细胞培养 神经组织
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不同浓度人羊膜匀浆上清液培养大鼠许旺细胞的增殖 被引量:4
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作者 刘亮 王磊 +9 位作者 童亚林 莫永亮 吕璐 陈云鹏 杨文贤 吕礼芳 詹球 朱富军 辛海明 龚震宇 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2014年第20期3218-3222,共5页
背景:许旺细胞是周围神经修复过程的重要细胞,而研究发现人羊膜细胞分泌的多种细胞因子能够促进许旺细胞增殖。目的:观察不同浓度人羊膜匀浆上清液对鼠许旺细胞(RSC96)生长的影响。方法:使用含体积分数20%胎牛血清的高糖DMEM培养基原代... 背景:许旺细胞是周围神经修复过程的重要细胞,而研究发现人羊膜细胞分泌的多种细胞因子能够促进许旺细胞增殖。目的:观察不同浓度人羊膜匀浆上清液对鼠许旺细胞(RSC96)生长的影响。方法:使用含体积分数20%胎牛血清的高糖DMEM培养基原代培养RSC96细胞株,传代至第2代用于实验研究。根据人羊膜匀浆上清液在培养基中的不同体积分数(0,10,15,20,25%)分组。结果与结论:人羊膜匀浆上清液的总蛋白浓度为675 mg/L,表皮生长因子、碱性成纤维生长因子和血管内皮生长因子浓度分别为(470.625±2.546),(4.121±0.026)和(0.172±0.002)ng/L。在培养第1-7天,10%和15%人羊膜匀浆上清液组的增殖率大于20%和25%人羊膜匀浆上清液组(P<0.05);10%、15%人羊膜匀浆上清液组显示出促进细胞增殖的作用,而20%、25%人羊膜匀浆上清液组显示出抑制细胞增殖的作用;各实验组的细胞活力与对照组接近(P>0.05)。提示人羊膜匀浆上清液低浓度时(10%和15%)具有促进RSC96增殖作用,高浓度时(20%和25%)抑制RSC96增殖。 展开更多
关键词 组织构建 组织工程 人羊膜匀浆上清液 许旺细胞 细胞增殖 细胞活力 周围神经 细胞生长曲线 MTT法 国家自然科学基金
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富血小板纤维蛋白诱导骨髓间充质干细胞向许旺细胞的分化 被引量:4
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作者 冯玉华 董静 +2 位作者 卢蕾 李琦 宋磊 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2012年第49期9157-9161,共5页
背景:富血小板纤维蛋白被誉为新一代血小板浓缩物,有研究表明,富血小板纤维蛋白可以诱导骨髓间充质干细胞分化为神经样细胞。目的:观察富血小板纤维蛋白对骨髓间充质干细胞向许旺细胞分化的影响。方法:分离兔骨髓间充质干细胞,并分为3组... 背景:富血小板纤维蛋白被誉为新一代血小板浓缩物,有研究表明,富血小板纤维蛋白可以诱导骨髓间充质干细胞分化为神经样细胞。目的:观察富血小板纤维蛋白对骨髓间充质干细胞向许旺细胞分化的影响。方法:分离兔骨髓间充质干细胞,并分为3组:对照组使用传统抗氧化剂诱导,富血小板纤维蛋白1组加入1块富血小板纤维蛋白诱导,富血小板纤维蛋白2组加入2块富血小板纤维蛋白诱导。结果与结论:培养第3,7,14,21天时取各组细胞行CCK-8细胞毒性检测发现,与对照组相比,富血小板纤维蛋白1组各时间点细胞增殖增快(P<0.05),与富血小板纤维蛋白1组相比,富血小板纤维蛋白2组各时间点细胞增殖增快(P<0.05);培养第21天时Real Time PCR检测发现,富血小板纤维蛋白1组细胞内S-100和神经胶质原纤维酸性蛋白mRNA表达较对照组增高(P<0.05),富血小板纤维蛋白1组与富血小板纤维蛋白2组相比S-100和神经胶质原纤维酸性蛋白mRNA表达差异无显著性意义(P>0.05);培养第21天时流式细胞术检测发现,富血小板纤维蛋白1组S-100(+)细胞百分比和神经胶质原纤维酸性蛋白(+)细胞百分比均高于对照组,富血小板纤维蛋白1组与富血小板纤维蛋白2组相比,阳性细胞百分比差异无显著性意义(P>0.05)。结果表明,富血小板纤维蛋白可促进骨髓间充质干细胞增殖,且富血小板纤维蛋白诱导骨髓间充质干细胞分化为许旺细胞的分化率高,优于传统化学诱导方法。 展开更多
关键词 血小板纤维蛋白 许旺细胞 骨髓间充质干细胞 诱导分化 周围神经 S-100 神经胶质原纤维酸性蛋白 组织工程
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羧甲基壳聚糖对体外培养许旺细胞增殖及核因子κB表达的影响 被引量:4
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作者 贺斌 陶海鹰 +1 位作者 卫爱林 刘世清 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2014年第3期389-394,共6页
背景:研究表明羧甲基壳聚糖对多种细胞具有促增殖作用,但其对许旺细胞增殖的影响及具体作用机制有待进一步探索。目的:观察羧甲基壳聚糖对许旺细胞的促增殖作用,以及其对许旺细胞内核因子κB表达及活性的影响。方法:取对数生长期的SD乳... 背景:研究表明羧甲基壳聚糖对多种细胞具有促增殖作用,但其对许旺细胞增殖的影响及具体作用机制有待进一步探索。目的:观察羧甲基壳聚糖对许旺细胞的促增殖作用,以及其对许旺细胞内核因子κB表达及活性的影响。方法:取对数生长期的SD乳鼠许旺细胞细胞悬液接种于96孔板,分别以PBS、0,10,50,100,200,500,1 000 mg/L羧甲基壳聚糖培养24 h,采用CCK-8法检测细胞增殖。取对数生长期的SD乳鼠许旺细胞,胰酶消化后制备成细胞悬液,接种于6孔细胞培养板内,分别加入50 mg/L羧甲基壳聚糖、100 mg/L羧甲基壳聚糖、200 mg/L羧甲基壳聚糖、PBS培养24 h,进行BrdU、Real-time PCR及Western blot法检测。结果与结论:CCK-8及BrdU检测结果表明羧甲基壳聚糖在50-1 000 mg/L范围内可促进许旺细胞增殖,200-500 mg/L时促增殖效应最明显。Real-time PCR及Western blot结果表明50-200 mg/L羧甲基壳聚糖可促进许旺细胞内核因子κB mRNA及蛋白的表达,且具有浓度依赖性。表明羧甲基壳聚糖可促进体外培养许旺细胞的增殖及其核因子κB的表达。 展开更多
关键词 生物材料 材料相容性 组织工程神经材料 羧甲基壳聚糖 许旺细胞 增殖 核因子ΚB 国家自然科学基金
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人参皂甙Rb1及Rg1对许旺细胞神经生长因子表达的影响(英文) 被引量:4
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作者 刘黎军 杨雷 +1 位作者 肖建德 王大平 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2009年第32期6393-6396,共4页
背景:人参皂甙可以促智抗衰老,保护大脑皮质运动神经元,具有抗细胞凋亡作用,但作用机制不清。目的:观察人参皂甙Rb1和Rg1对许旺细胞神经生长因子表达的影响。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2004-03/06在深圳市第二人民医院完成。材... 背景:人参皂甙可以促智抗衰老,保护大脑皮质运动神经元,具有抗细胞凋亡作用,但作用机制不清。目的:观察人参皂甙Rb1和Rg1对许旺细胞神经生长因子表达的影响。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2004-03/06在深圳市第二人民医院完成。材料:成人新鲜离体神经取自创伤离断无法再植的肢体,由深圳市第二人民医院提供。人参皂甙Rb1、Rg1由长春白求恩医科大学提供。方法:剥去神经外膜,剪成1.0~2.0mm碎块,采用酶消化法分离许旺细胞,双30min差速黏附法去除成纤维细胞,获得纯净度达95%以上的许旺细胞。将纯化的许旺细胞按每孔10万个细胞接种在预先涂有多聚赖氨酸的96孔细胞培养板上,设立3组:人参皂甙Rb1组分别加入含量为10,20,40,60,80μg的人参皂甙Rb120μL;人参皂甙Rg1组分别加入含量为10,20,40,60,80μg的人参皂甙Rg120μL;对照组加入PBS液20μL。主要观察指标:流式细胞仪检测许旺细胞神经生长因子的表达率。结果:与对照组比较,培养48h后人参皂甙Rb1组、人参皂甙Rg1组许旺细胞神经生长因子表达率均明显升高(P<0.05),且呈剂量依赖性增加,当人参皂甙Rb1和Rg1质量浓度达60mg/L时许旺细胞神经生长因子表达率最高。人参皂甙Rb1及Rg1相同剂量组之间比较,许旺细胞神经生长因子表达率差异无显著性意义(P>0.05)。结论:人参皂甙Rb1和Rg1可以通过促进许旺细胞分泌神经生长因子而具有潜在加速周围神经损伤修复的作用。 展开更多
关键词 许旺细胞 人参皂甙 神经生长因子
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高糖下调大鼠许旺细胞calpainⅡ的表达 被引量:3
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作者 张云云 汪洋 +2 位作者 丁正同 王坚 蒋雨平 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期398-399,407,共3页
目的:观察高糖对体外培养的大鼠许旺细胞calpainⅡ表达的影响。方法:体外培养大鼠许旺细胞,用MTT检测许旺细胞的存活力,用原位杂交和免疫细胞化学方法分别测定许旺细胞calpainⅡmRNA和蛋白的表达。结果:高糖(50mmol/L)培养24h,许旺细胞... 目的:观察高糖对体外培养的大鼠许旺细胞calpainⅡ表达的影响。方法:体外培养大鼠许旺细胞,用MTT检测许旺细胞的存活力,用原位杂交和免疫细胞化学方法分别测定许旺细胞calpainⅡmRNA和蛋白的表达。结果:高糖(50mmol/L)培养24h,许旺细胞存活力明显低于对照组(30mmol/L)(73·95%vs100%,P<0·01)。许旺细胞calpainⅡmRNA阳性颗粒和calpainⅡ蛋白阳性颗粒也明显少于对照组。结论:高糖培养下调许旺细胞cal-painⅡ表达。 展开更多
关键词 许旺细胞 葡萄糖 卡配因Ⅱ
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