比浊法测定抗生素微生物检定试验菌菌液浓度

采用比浊法对中国药典抗生素微生物检定法中藤黄八叠球菌、枯草芽孢杆菌、短小芽孢杆菌等试验菌菌液浓度进行测定。结果显示：菌液浓度与透光率（T）的负对数呈良好的线性关系，测定波长分别为500±2nm，760±2nm，865±2nm，回归直线方程分别为C八叠＝0.87111gl／T-0.0116（r＝0.9997），C枯草＝8.75991gl／T-0.0118（r＝0．9998），C短小＝10．32901gl／T-0.0099（r＝0．9997）。

3类消毒剂中和剂鉴定试验中试验菌选用的探讨

目的:探讨3类消毒剂中和剂鉴定试验中试验菌的选用。方法:以3类消毒剂共6份样品为受试对象,用大肠杆菌和金黄色葡萄菌作为试验菌进行中和剂鉴定试验和杀菌试验。结果:75%酒精和复方银离子消毒剂用金黄色葡萄球菌及0.1%苯扎氯铵消毒剂用大肠杆菌作为试验菌,一次就可以获得判定中和剂有效的试验结果,而75%酒精和复方银离子消毒剂用大肠杆菌及0.1%苯扎氯铵消毒剂用金黄色葡萄球菌作为试验菌,需要经过稀释消毒剂浓度和同比例的中和剂才可以获得判定中和剂有效的试验结果。75%酒精和复方银离子消毒剂对金黄色葡萄球菌杀菌效果较大肠杆菌差;0.1%苯扎氯铵消毒剂对大肠杆菌的杀菌效果较金黄色葡萄球菌差。结论:选择消毒剂杀灭效果较差的菌种作为中和剂鉴定试验菌,更容易获得判定中和剂有效的试验结果。

奶牛乳房炎病原菌的分离鉴定及15味中药对其抑菌效果试验

为了探究15味中药对奶牛乳房炎主要致病菌的抑制效果,本试验对河南省豫东地区奶牛场采集的160份乳房炎奶样进行病原菌分离鉴定,筛选出主要致病菌,随后用煎煮法提取15味中药的有效成分,并进行浓缩,使用牛津杯法、琼脂稀释法和试管二倍稀释法进行体外抑菌试验,确定15味中药的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果显示,共分离出347株病原菌,其中金黄色葡萄球菌和乳房链球菌检出率较高;15味中药水提物中黄连和紫花地丁对金黄色葡萄球菌抑制作用较强,MIC分别为31.25和62.5 mg/mL,MBC分别为62.5和125 mg/mL;黄连和蒲公英根对乳房链球菌抑制作用较强,MIC均为31.25 mg/mL,MBC分别为31.25和62.5 mg/mL,黄连、蒲公英根、穿心莲和马齿苋对大肠杆菌抑制作用较强,MIC均为62.5 mg/mL,MBC均为125 mg/mL。15味中药水提物中黄连、紫花地丁、蒲公英根、穿心莲和马齿苋对奶牛乳房炎致病菌大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和乳房链球菌的体外抑菌作用较好,提示其可作为潜在的中药抑菌剂。本试验为进一步开发治疗奶牛乳房炎的中药单方或复方制剂提供参考。

28株产肠毒素大肠杆菌的生化反应和药敏试验

近年来,国内外学者从霍乱样腹泻病人粪便中分离出能产生肠毒素的大肠杆菌,即产肠毒素性大肠杆菌(ETEC)。为了观察产肠毒素性大肠杆菌、致病性大肠杆菌与普通大肠杆菌之间的差别。我们将收集到的菌株进行了兔肠攀试验、生化反应、药敏试验及血清凝集试验。

酵母样真菌最低抑菌浓度药敏试验的临床价值研究

目的 对酵母样真菌抗真菌药物最低抑菌浓度(minimal inhibit concentration,MIC)进行药敏试验,为临床合理用药提供相关依据。方法 采集铜仁市人民医院从2020年1月—2022年6月根据常规培养方式培养出344株酵母样真菌进行MIC药敏试验,对试验结果进行分析,统计标本来源类型、科室、不同种类酵母样真菌的分布情况,对主要酵母样真菌的药敏性进行分析。结果 培养出的344株酵母样真菌标本来源科室主要为重症医学科(23.55%)、神经外科(15.12%);标本类型主要为尿液标本(56.69%),其次为分泌物标本与切口分泌物标本(均12.21%);酵母样真菌种类主要为白色假丝酵母菌(39.83%),其次为光滑假丝酵母菌(22.97%)、克柔假丝酵母菌(14.83%)、热带假丝酵母菌(9.88%)。白色假丝酵母菌、光滑假丝酵母菌、热带假丝酵母菌对5-氟胞嘧啶、两性霉素B的敏感性较高,克柔假丝酵母菌对两性霉素B、伏立康唑的敏感性较高。结论 应当对重症医学科、神经外科的患者及中老年患者加强酵母样真菌感染的预防,尤其是对尿路感染的预防。不同种类的酵母样真菌对不同抗真菌药物敏感性有所不同,酵母样真菌MIC药敏试验对临床上合理使用抗真菌药物具有重要的指导价值。

头孢克洛对细菌感染小鼠的体内保护试验

国产头孢克洛,效价932ug/mg。珠海特区丽珠医药研究所提供。进口器头孢克洛,效价为934ug/mg,DOBFAR S.P.A.产品,进口头孢曲秦.效价为815μg/mg,PAREKH CHEMICALS ITALIA产品。头孢唑啉为东北制药厂产品。 试验动物为NIH小鼠,体重18—20g,雌雄各半。试验菌株为临床分离的金葡萄94—19—1和大肠杆菌93—1—3。将隔夜培养的新鲜菌斜面,用生理盐水洗下后,再用0.5％灭菌酵母液稀释至所需浓度备用。以不同的菌稀释液0.5ml腹腔感染小鼠。

MALDI-TOF MS与VITEK2在血流感染致病菌快速鉴定及药敏试验中的应用

目的:探究基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(Matrix-assisted laser desorption/ionizationtime-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)与VITEK2在血流感染致病菌药敏试验中的联合应用效果。方法:选取景德镇市第二人民医院检验科2022年1月1日至2022年12月31日血流感染阳性样本126份,分别行常规鉴定及MALDI-TOF MS鉴定,完成菌株鉴定后通过VITEK2系统行抗菌药物敏感性试验(Antimicrobial susceptibility testing,AST),比较2种鉴定方法的细菌菌株鉴定结果及细菌耐药情况。结果:常规鉴定方法对革兰氏阴性、革兰氏阳性菌在属、种水平鉴定符合率达到100%;MALDI-TOF MS鉴定革兰氏阴性菌在属水平的符合率达97.7%(85/87),在种水平的符合率达95.4%(83/87),2例无结果(1例阴沟肠杆菌阴沟亚种,1例少动鞘氨醇单胞菌);MALDI-TOF MS鉴定革兰氏阳性菌在属、种水平的符合率均达97.4%(38/39),1例无结果(科氏葡萄球菌解脲亚种)。常规鉴定+VITEK2对革兰氏阴性菌AST分析的分类一致(Categorical agreement,CA)、基本一致(Essential agreement,EA)分别达到98.6%(1086/1101)、99.5%(1096/1101),对革兰氏阳性菌AST分析的CA、EA分别达到98.6%(550/558)、99.6%(556/558);MALDI-TOF MS+VITEK2(VITEK MS)对革兰氏阴性菌AST分析的CA、EA分别达到98.3%(1082/1101)、99.5%(1095/1101),对革兰氏阳性菌AST分析的CA、EA分别达到97.8%(546/558)、99.5%(555/558)。进一步参考肉汤稀释法药敏结果行一致性分析。结果发现,常规鉴定+VITEK2在革兰氏阴性菌的药敏试验中,10份AST鉴定结果出现小误差(Minus errors,MIE),5份AST鉴定结果出现重大误差(Major errors,ME);在革兰氏阳性菌的药敏试验中,8份AST鉴定结果出现MIE,2份AST鉴定结果出现ME。VITEK MS在革兰氏阳性菌的药敏试验中,13份AST鉴定结果出现MIE,6份AST鉴定结果出现ME;在革兰氏阳性菌的药敏试验中,9份AST鉴定结果出现MIE,3份AST鉴定结果出现ME。结论:MALDI-TOF MS联合VITEK2在临床血流感染致病菌鉴定及药敏试验中可快速、精确实现诊断并提供AST报告。

2株枯草芽孢杆菌对大肠杆菌和沙门氏菌的体外抑菌试验研究

本试验旨在检测2株枯草芽孢杆菌对致病性大肠杆菌和沙门氏菌抑菌作用。以致病性大肠杆菌和沙门氏菌作为指示菌,采用2株枯草芽孢杆菌与大肠杆菌和沙门氏菌同时接种及先后接种的方法,对其与大肠杆菌和沙门氏菌的生物颉颃作用进行了研究。结果表明,先接种枯草芽孢杆菌再接种致病菌抑制作用最明显且在24h时抑菌作用最强,同时接种枯草芽孢杆菌和致病菌抑制作用次之,先接种致病菌再接种枯草芽孢杆菌的抑制作用最弱。提示,2株枯草芽孢杆菌对致病性大肠杆菌和沙门氏菌都有一定的抑制作用,但抑制作用的强弱有差异,且与枯草芽孢杆菌和致病菌接种的时间长短有关。

产细菌素乳酸菌的筛选及体外抑菌试验

从健康鸡、兔、仔猪肠道内容物及新鲜粪便中分离到 4 1株乳酸菌 ,通过单层琼脂平板扩散实验 ,筛选出 5株有明显抑菌活性代谢产物的乳酸菌 ,其中 4株属于乳杆菌属 ,1株属于链球菌属。排除酸的干扰后 ,离心发酵液对指示菌仍有抑菌活性 ,用胰蛋白酶和木瓜蛋白酶处理后抑菌活性明显降低 ,用过氧化氢酶作用上清液 ,抑菌效果不变 ,说明过氧化氢未起作用 ,从而得知抑菌物质中有蛋白质类细菌素。将离心发酵液分别调 p H值为 2 .0、3.0、4 .0、5 .0、6 .0、7.0 ,做抑菌试验 ,试验结果证明 :所分离的 5株乳酸菌在p H2 .0 ,3.0 ,4 .0时均有较强的抑菌活性 ,且 MD菌株在 p H7.0时抑菌活性亦较强 ,这进一步排除了酸的作用。每周重复一次 ,抑菌结果完全一致 ,但至第 5周时 ,抑菌现象完全消失 ,说明抑菌物质随时间的延长而失活 。

石河子地区奶牛乳房炎病原菌分离鉴定及中药抑菌试验

[目的]为使用中草药防治奶牛乳房炎提供理论依据。[方法]采集52头奶牛的260份乳样,用乳腺炎诊断液(SMT)诊断奶牛乳房炎,并从奶样中分离鉴定出乳房炎病原菌;在此基础上,选取4株肠杆菌2、株链球菌和3株葡萄球菌进行中药及其复方的抑菌试验,根据最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)评价中药的体外抗菌活性。[结果]从260份乳样中共分离出176株细菌,其中葡萄球菌71株,占总数的40.34%,肠杆菌62株,占总数的35.23%,链球菌25株,占总数的14.21%,这3个细菌是奶牛乳房炎的主要致病菌;75.57%的乳房炎由2种以上细菌混合感染所致。[结论]奶牛乳房炎主要致病菌对单味中药产生了不同程度的耐药性,而中药复方的抑菌效果较好。

射干和马齿苋对46株绿脓杆菌体外抑菌试验的研究

目的 :探讨射干、马齿苋对绿脓杆菌 ( PA)的体外抑菌作用。方法 :取射干、马齿苋水煎剂对4 6株PA进行 MIC试验 ,统计 MIC50 和 MIC90 。结果 :射干水煎剂对 PA MIC范围为 31.2 5～ 3.90 g/ L,MIC50 为 7.81g/ L,MIC90 为 15.62 g/ L;马齿苋水煎剂对 PA MIC范围为 31.2 5～ 7.81g/ L,MIC50 为15.62 g/ L,MIC90 为 31.2 5g/ L。结论 :射干、马齿苋于体外对绿脓杆菌有较强抑制作用。

16种中药对水貂绿脓杆菌的体外抑菌试验

采用打孔法测定五味子等16种中药对绿脓杆菌标准株和分离株的抑菌圈直径,探讨其对绿脓杆菌的抑菌作用。结果表明,五倍子、五味子、诃子、石榴皮和乌梅等收涩类中药对绿脓杆菌标准菌株和水貂分离菌株均有较好抑菌作用,尤其是五倍子、诃子、五味子作用较强。黄连、金银花、连翘和射干等清热类中药也有一定抑菌效果,黄芪和太子参等补益类中药以及穿心莲、贯众、苍术、丁香和大黄均无抑菌作用。

丹皮酚提取、磺化及对植物病原菌的抑菌试验

测定安徽南陵地区不同生长年限的牡丹根皮、木心及茎、叶的丹皮酚含量 ,并比较不同提取方法的效果 ;丹皮酚用浓硫酸和发烟硫酸磺化 ,得产物丹皮酚磺酸钠 ,并通过HPLC、TLC、FTIR、UV检测鉴定其理化性质 ;用丹皮酚、丹皮酚磺酸钠进行了初步的抑制植物病原菌试验 ,发现对RS10 5、青枯病菌、苹果斑枯病菌、玉米纹枯病菌有较强的抑制作用 ,并对玉米苗期纹枯病显示出较好的防治效果。

11种中草药对8种常见细菌的体外抑菌试验

目的探讨黄连、黄芩、半边莲、蒲公英、穿心莲、野菊花、连翘、艾叶、夏枯草、五味子、金银花等11种中药对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、变形杆菌、枯草杆菌、痢疾杆菌、伤寒杆菌、白色念珠菌等8种临床常见细菌的体外抑菌效果。方法制备11种中药提取物,采用试管对倍稀释法对金黄色葡萄球菌等8种受试菌进行体外抑菌试验,测定最小抑菌浓度(M IC)。结果与结论11种中药对受试菌均有不同程度的抑菌效果,其中以黄连的效果最好,它对8种受试菌的M IC均介于7.8mg/m l-31.2mg/m l之间,黄芩、夏枯草、五味子次之。

中药对临床耐药菌株的体外抑菌试验观察

目的了解甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(MRSA)及超广谱β内酰胺酶(ESBLs)阳性肠杆菌科细菌,对中药制剂“肺炎1号”的敏感性,为耐药菌株的治疗寻找新的途径。方法采用血清药理学检测方法,用不同浓度中药含药进行耐药菌株的抑菌试验。结果通过“肺炎1号”含药血清对临床分离的MRSA菌株、产ESBLs肺炎克雷伯菌的抑菌试验表明最低血清抑菌滴度与阴性对照组比较差异有非常显著性(P<0.01);与阳性对照组比较,对MRSA菌株差异无显著性(P>0.05),而对产ESBLs肺炎克雷伯菌差异亦有显著性(P<0.05),抑菌效果优于阳性组。结论采用本院自制中药复方制剂“肺炎1号”含药血清对临床分离的MRSA菌株和产ESBLs的肺炎克雷伯菌株进行抑菌试验,表现出较明显的抑菌作用,为拓宽中药制剂的用药范围,减轻耐药菌株的药物压力奠定了一定基础。

中药对鸡致病性大肠埃希菌的体外抑菌试验

为研究25种中药对秦皇岛地区鸡致病性大肠埃希菌(Escherichia coli)地方流行株QH1(O78)、QH2(O89)、QH4(O1)的体外抑菌效果,以E.coli标准株ATCC25922作为质控菌株。利用水提法制备中药药液,使终浓度为1g/mL;用平板琼脂打孔法和改良微量二倍稀释-平板法分别测定25种中药的抑菌圈直径和最小抑菌浓度(MIC)。结果表明,金银花、黄连、乌梅、五味子4种中药对鸡致病性E.coli地方株极度敏感,抑菌圈直径在20.3mm^22.7mm之间,其MIC在15.65mg/mL^31.25mg/mL之间;其他药物对鸡致病性E.coli地方株有不同程度的敏感性,为鸡致病性E.coli地方株中药防治提供理论基础。