中华鳖诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因的表达分析

一氧化氮(NO)参与生物体内多种重要的生理病理活动,可增强机体的免疫功能,而诱导型一氧化氮合酶(iNOS)是一氧化氮合成过程中的关键限速酶。为了探明iNOS在中华鳖(Pelodiscus sinensis)先天免疫中的作用,研究了iNOS基因在中华鳖组织的分布及外源刺激物对其基因和蛋白表达的影响。荧光定量PCR结果显示,iNOS基因在中华鳖的心脏、肝脏、肾脏、脾脏、肌肉、小肠和大肠中均有表达,其中在大肠中表达量最高,其次是小肠、肾脏和脾脏。在受脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)刺激后,肝、脾、肾、肌肉和小肠iNOS mRNA的表达显著升高。免疫组化实验结果显示LPS刺激后12 h、24 h iNOS蛋白在小肠、脾脏表达水平显著高于生理盐水对照组。研究结果表明iNOS可能参与了中华鳖的机体免疫反应。

诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因表达的调控

一氧化氮（ＮＯ）自由基有多方面的生物学功能。随着研究的深入，发现ＮＯ能与超氧阴离子（Ｏ－２·）反应生成激发态亚硝酸（ＯＮＯＯＨ＊），它与靶分子能产生羟自由基（·ＯＨ）和二氧化氮（ＮＯ２）样反应，在体内原先认为的一些ＮＯ效应，现在知道主要是由于ＯＮＯＯ...

过期妊娠患者绒毛合体滋养层细胞诱导型一氧化氮合酶（INOS）含量及活性（NOS）相关性研究

目的：探讨过期妊娠患者绒毛合体滋养细胞INOS与NOS相关性。方法：采用免疫组织化学ABC法和酶组织化学法(四唑蓝法)，检测96例过期妊娠患者(过期组)和正常足月妊娠患者(正常组)绒毛合体滋养细胞INOS及NOS的改变。结果：两组绒毛均存在INOS及NOS的阳性表达，且邻位相同。结论：INOS及NOS在过期妊娠患者表达强度于正常妊娠者。两组合体滋养细胞中，NOS表达强度的例数分布与INOS表述强度的例数分布呈正相关。

诱导型一氧化氮合酶(iNOS)对重症急性胰腺炎时胰岛内分泌功能的影响

目的研究重症急性胰腺炎大鼠胰腺内分泌功能的变化,探讨iNOS在胰腺内分泌功能损伤中的作用。方法2015年7月—2016年7月在济宁医学院动物实验中心取健康雄性Wistar大鼠,体重250~300 g,24只随机分成2组,对照组12只,SAP组12只,应用5%牛磺胆酸钠逆行注入大鼠胰胆管制作重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)大鼠模型,检测血清淀粉酶、血糖浓度;分离胰岛,行葡萄糖刺激胰岛素分泌试验;应用NOS试剂盒检测胰岛iNOS的活性。结果 SAP组血糖、血清淀粉酶、葡萄糖葡萄糖刺激胰岛素分泌实验和胰岛的iNOS活性分别为:(11.50±1.36)mmol/L、(1 575.36±435.33)m IU/L、(3.90±0.78)m IU/L、(10.36±2.14)m IU/L和(30.27±3.57)U/m L;对照组分别为:(5.32±1.25)mmol/L、(104.18±35.58)m IU/L、(7.82±1.03)mmol/L、(25.60±3.72)mmol/L和(7.79±0.58)U/m L;两组分别相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论重症急性胰腺炎时对胰岛功能影响较大SAP胰岛功能损伤与iNOS活性增强有关系,对胰岛素分泌产生负面影响。

Maspin蛋白和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在膀胱癌中的表达及意义

目的研究诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白和maspin蛋白在尿路上皮癌中的表达及其意义。方法采用免疫组织学SP法检测54例尿路上皮癌和18例正常膀胱组织中以上两种蛋白的表达。结果两种蛋白在膀胱尿路上皮癌中的表达与在正常膀胱黏膜中表达比较,均有显著性意义(均P<0.01)。iNOS蛋白表达与maspin蛋白表达间存在负相关(r=-0.992,P<0.05),但与TCCs分级无关。maspin表达与浸润性膀胱尿路上皮癌呈负相关性。结论 iNOS的高表达和maspin蛋白低表达是膀胱癌预后不良的指征。

诱导型一氧化氮合酶(iNOS)与神经源性膀胱的关系研究

一氧化氮（NO）是高等动物细胞中的一种结构简单却非常重要的信号分子，目前对NO的研究涉及生理学、生物化学、分子遗传学、分子生物学、病理毒理学等多个学科，发现它在心脏、肺脏、肾脏、神经组织、胰腺、胃肠道发挥着非常重要的生理作用，但在膀胱组织中的研究还处于起步阶段。

白芍总苷对巨噬细胞一氧化氮和诱导型一氧化氮合酶生成的影响及其机制研究

目的:探讨白芍总苷(TGP)抗炎作用与调节巨噬细胞一氧化氮(NO)的产生及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达的关系,并从调控核转录因子-κB(NF-κB)活性的途径探讨其作用机制。方法:预先用不同浓度的TGP与大鼠腹腔巨噬细胞共同孵育,然后加入脂多糖(LPS)刺激细胞,检测细胞培养液中NO的产生,Westernblot方法检测iNOS的表达和NF-κB抑制蛋白α(IκBα)的含量,同时检测NF-κB与DNA的结合活性。结果:TGP显著抑制了LPS诱导的大鼠腹腔巨噬细胞产生NO、表达i-NOS,同时也显著增加了细胞内IκBα蛋白的含量和抑制了NF-κB与DNA的结合活性。结论:TGP的抗炎作用与其通过抑制巨噬细胞NF-κB的活性,从而降低巨噬细胞iNOS的表达、减少NO产生密切相关。

诱导型一氧化氮合酶和缺氧诱导因子-1α与尖锐湿疣发生、发展的相关性研究

目的检测尖锐湿疣(CA)组织中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)与缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达,以明确其在CA发生、发展中的临床意义。方法收集50例CA和20例正常包皮组织,采用免疫组织化学法检测组织中iNOS与HIF-1α的表达并与CD34表达进行相关分析。结果 50例CA患者中,iNOS阳性50例(100%),表现为表皮全层细胞均为iNOS阳性表达;对照组20例正常皮肤中iNOS阳性14例(70%),iNOS阳性表达主要位于表皮基底层,且呈弱阳性表达,CA患者皮损中iNOS灰度值为(97.985±20.320)高于对照组(73.017±15.633)(P<0.05)。50例CA患者中42例HIF-1α阳性(84%),高于对照组阳性9例(45%)(P<0.05);且HIF-1α在CA患者中灰度值为(0.204±0.064),高于对照组(0.135±0.019)(P<0.05)。CA患者组织中iNOS与CD34表达呈正相关(r=0.375,P=0.007);CA患者组织中HIF-1α与CD34表达呈正相关(r=0.393,P=0.005)。结论 iNOS与HIF-1α可能协同参与CA的发病和发展。

罗红霉素通过诱导型一氧化氮合酶/一氧化氮途径抑制哮喘大鼠气道炎症

目的探讨罗红霉素对哮喘大鼠支气管诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及一氧化氮(NO)的影响。方法24只成年哮喘大鼠随机分成对照组、哮喘组以及罗红霉素组。对支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞总数及嗜酸性粒细胞计数,免疫组织化学检测大鼠支气管上皮细胞iNOS蛋白表达,RT-PCR检测肺组织iNOS mRNA表达,分光光度计检测肺组织iNOS活性及NO含量。双抗体夹心法检测肺组织白细胞介素-4(IL-4)及干扰素-γ(IFN-γ)。结果哮喘组大鼠BALF细胞总数及嗜酸性粒细胞分类分别为(7.28±1.65)×108.L-1、(7.73±1.54)%,均高于对照组(3.76±0.97)×108.L-1、(1.27±0.60)%;罗红霉素组BALF细胞总数及嗜酸性粒细胞分类分别为(5.68±0.95)×108.L-1、(5.54±1.53)%,明显低于哮喘组,差异有统计学意义。哮喘组肺组织IL-4浓度、iNOS活性及NO含量高于对照组,罗红霉素组肺组织IL-4浓度、iNOS活性及NO含量低于哮喘组。哮喘组肺组织IFN-γ浓度低于对照组,罗红霉素组肺组织IFN-γ浓度高于哮喘组。哮喘大鼠支气管上皮细胞iNOS蛋白及肺组织iN-OSmRNA表达分布吸光度值分别为(0.25±0.06)、(0.52±0.14),较对照组[(0.14±0.05),(0.33±0.05)]明显增强;但罗红霉素组iNOS蛋白及mRNA表达为(0.15±0.03)、(0.35±0.07),均明显较哮喘组减弱。结论罗红霉素通过干预哮喘大鼠气道IL-4、IFN-γ以及iNOS/NO体系,抑制哮喘气道炎症反应。

银杏叶提取物对实验性脊髓损伤后诱导型一氧化氮合成酶表达的影响

[目的]观察提取物（EGb）对脊髓损伤后诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的影响。[方法]SD雄性大鼠（SPF级）30只，体重250～300g，随机分成2组，对照组（生理盐水组）和EGb组，各分为5个时相点，每个时想点3只大鼠，均采用改良的Allen打击法制成中度急性脊髓损伤模型，术后EGb组给予舒血宁0．75ml／（kg·d），对照组给予等量生理盐水。分别于术后1、3、5、7、14d处死动物取材。[结果]显微镜下观察，阳性细胞胞浆棕黄色染色，对照组和治疗组均发现iNOS阳性细胞的表达，均在5d达到高峰，但EGb治疗组细胞阳性率显著低于对照组（P〈0．05）[结论]EGb能够抑制iNOS的表达；抑制iNOS的表达可能是银杏叶缓解急性脊髓损伤的诸多机制之一。

一氧化氮/诱导型一氧化氮合酶在动脉粥样硬化过程中的作用

目的:探讨一氧化氮(NO)/诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)过程中的动态变化,分析其对动脉粥样硬化形成过程的影响。方法:将60只SD大鼠随机分成2组:对照组及AS组,每组30只。AS组采用维生素D3腹腔注射联合高脂饲料饲养的方法构建动脉粥样硬化模型。用相关生化方法检测血清各项生化指标:总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、空腹血糖和钙离子,比色法检测血清NO浓度,并对主动脉行HE染色,免疫组化技术检测iNOS蛋白表达,将所得数据进行统计分析,用简单线性相关分析NO与钙离子及动脉粥样硬化指数的相关性。结果:90 d后成功构建了主动脉中膜钙化型动脉粥样硬化模型。血清NO浓度在动脉粥样硬化过程中逐步下降,各组间差异均有统计学意义(均P<0.05)。动脉粥样硬化过程中动脉粥样硬化指数与钙离子呈正相关,与NO呈负相关。在90 d的AS组粥样斑块区免疫组化技术检测到iNOS蛋白表达。结论:在动脉粥样硬化形成过程中,主动脉粥样斑块区iNOS蛋白高表达,但血清NO浓度逐渐降低,NO抗动脉粥样硬化作用减弱。

槲皮素抑制诱导型一氧化氮合酶减轻脓毒症大鼠的心肌损伤

目的初步探讨槲皮素对脓毒症心肌损伤的影响及其机制。方法将30只SPF级♂SD大鼠分为槲皮素预处理组、脓毒症组和假手术组,每组10只。采用盲肠结扎穿刺法制备脓毒症大鼠模型。盲肠结扎穿刺术后12 h经右颈总动脉左心室内插管监测各组大鼠MAP、LVSP、LVEDP、±dp/dtmax等血流动力学指标,免疫印迹法测定心肌组织iNOS蛋白表达,酶法测定心肌组织匀浆中iNOS活力及NO含量。结果脓毒症组大鼠LVSP降低、LVEDP升高、+dp/dtmax与-dp/dtmax均有所下降,而槲皮素预处理组以上各项指标均有不同程度改善;脓毒症组大鼠左心室心肌组织iNOS的表达上调,iNOS的活力升高,NO的含量增加,而槲皮素预处理组以上指标的增加幅度较小。结论槲皮素通过降低心肌组织iNOS的表达及活力,抑制脓毒症时心肌组织中过量的NO产生,减轻脓毒症心肌损伤。

诱导型一氧化氮合酶mRNA在心脏移植急性排斥反应中的表达(英文)

目的 研究诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)mRNA表达与心脏移植急性排斥反应的动态关系 ,以探讨iNOS基因mRNA表达能否作为心脏移植急性排斥反应的监测指标。方法 复制大鼠同种异位心脏移植模型 ,并采用半定量逆转录聚合酶链式反应 (RT -PCR)法检测移植心心肌iNOS基因mRNA表达水平。结果 实验组第 3、5、7、9、11天移植心心肌表达iNOSmRNA吸光度测定依次为 :(0 .4 4± 0 .19、0 .97± 0 .2 5、1.2 0± 0 .4 5、0 .89± 0 .2 7、0 .77± 0 .2 2 )以 β -actin为内参照。对照组移植后各天均无iNOSmRNA表达。 结论 急性排斥反应中移植心心肌iNOS基因mRNA表达早且表达水平显著升高 ,故iNOS基因mRNA表达可作为心脏移植急性排斥反应早期的一个监测指标。

诱导型一氧化氮合酶与疾病

A Review Nitric oxide(NO) is a biologically active molecule in vivo ,it has been found to play an important role not only as a cytotoxic effector but also an immune regulatory mediator and a signal molecule of message transmission.The inducible NO synthase (iNOS) produces NO after cells were activated and play a rather complicated pathophysiological action in a variety of human diseases or disorders. The molecular biological character of iNOS,its expression in human diseases and probable significance were reviewed.

衰老对大鼠阴茎组织诱导型一氧化氮合酶的表达和细胞凋亡的影响

目的:探讨年龄因素对大鼠阴茎组织诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达和细胞凋亡的影响。方法:雄性Wistar大鼠随机分为衰老组(10只,>25月龄)、老年组(8只,12～15月龄)和青年组(6只,3～4月龄),分别用免疫组化法检测阴茎组织iNOS的表达和原位缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡率。结果:衰老组、老年组及青年组iNOS的表达用相应的吸光度(A)表示分别为:0.24±0.03、0.17±0.02和0.12±0.03;细胞凋亡率分别为:(1.41±0.78)%、(0.94±0.43)%和(0.50±0.23)%,组间比较差异均有显著性(P均<0.05)。结论:衰老大鼠阴茎组织iNOS表达增多,细胞凋亡现象明显增加,衰老可能是老年性阴茎勃起功能障碍的机制之一。

基环氧合酶-2和诱导型一氧化氮合酶在舌不典型增生和鳞癌组织中的表达

背景与目的:近期研究表明,环氧合酶(cyclooxygenase-2,COX-2)和诱导型一氧化氮合酶(induciblenitricoxidesynthase,iNOS)共同参与肿瘤的发生发展过程,但有关它们异常表达与舌鳞癌生物学行为的关系尚不清楚。本研究拟探讨COX-2和iNOS在舌鳞癌的表达和两者间的相互关系。方法:应用免疫组化SP法,检测59例舌鳞癌及其45例增生性病变(轻、中、重度不典型增生分别为22例、20例、3例)和36例癌旁正常鳞状上皮中COX-2蛋白、iNOS蛋白的表达情况,并对这些指标进行相关分析。结果:在癌旁正常鳞状上皮、轻、中、重度不典型增生上皮和舌鳞癌组织中,COX-2蛋白异常表达检出率分别为8.3%(3/36)、4.5%(1/22)、5.0%(1/20)、0(0/3)和45.8%(27/59);iNOS蛋白异常表达检出率分别为44.4%(16/36)、72.8%(16/22)、80.0%(16/20)、100.0%(3/3)和98.3%(58/59)。COX-2蛋白在癌旁正常鳞状上皮的表达,与舌鳞癌组织的表达差异有显著性(P<0.001),与不典型增生总体的表达差异无显著性(P>0.05);iNOS蛋白在癌旁正常鳞状上皮的表达,与不典型增生总体和癌组织的表达差异均有显著性(P<0.001)。等级相关分析结果显示,COX-2、iNOS表达异常与组织学分级均显著正相关(相关系数r分别为0.418和0.607,P值均<0.001),而且COX-2蛋白与iNOS蛋白之间也具有显著相关性(r=0.245,P<0.001)。结论:COX-2和iNOS蛋白异常表达与舌鳞癌癌变过程显著相关。

血必净注射液对创伤弧菌脓毒症大鼠肺组织诱导型一氧化氮合酶及一氧化氮的影响

目的 研究血必净注射液对创伤弧菌脓毒症大鼠肺组织诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性和一氧化氮(NO)含量的影响及意义.方法 将110只清洁级SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组、模型组和血必净组.皮下注射创伤弧菌悬液制备创伤弧菌脓毒症模型.分别于术后1、6、12、24、48 h活杀10只动物,留取肺组织,检测iNOS活性、NO含量、髓过氧化物酶(MPO)活性,并观察肺组织病理变化.结果 模型组肺组织iNOS活性(U/mg)在染菌后1、6、12、24 h(分别为12.57±3.20、22.17±7.29、19.73±6.23、14.37±3.78)均明显高于正常对照组(6.69±1.87,均P【0.01);血必净组6、12、24 h iNOS活性(分别为14.97±3.48、15.15±5.46、10.28±4.13)明显低于同时间点模型组(P【0.05或P【0.01).模型组肺组织NO含量(μmol/g)在染菌后1、6、12、24、48 h(分别为14.53±3.82、31.52±7.01、41.32±7.28、32.82±5.42、24.82±6.01)均显著高于正常对照组(4.94±1.48,均P【0.01);血必净组肺组织NO含量在12 h、24 h(分别为30.93±5.19、25.25±4.67)与同时间点模型组比较均明显下调(均P【0.01).模型组肺组织MPO活性(U/g)在染菌后1、6、12、24 h(分别为1.21±0.32、2.11±0.28、2.05±0.24、1.07±0.36)也明显高于正常对照组(0.55±0.18,均P【0.01);血必净组MPO活性在6 h、12 h(分别为1.69±0.47、1.37±0.42)与同时间点模型组比较明显下调(均P【0.01).染菌后24 h,模型组大鼠肺组织损伤明显,血必净组大鼠肺损伤较模型组有所减轻.结论 iNOS和NO参与了创伤弧菌脓毒症肺损伤的病理生理学过程;血必净注射液干预治疗能显著下调肺组织iNOS活性及NO生成,减轻创伤弧菌感染所致的肺损伤.

筋脉通含药血清对高糖培养的Schwann细胞诱导型一氧化氮合酶和NADPH氧化酶p22-phox亚基表达的影响

目的:探讨筋脉通含药血清对高糖培养的Schwann细胞诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,i NOS)蛋白表达及烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nicotinamide adenine dinucleotidephosphate,NADPH)氧化酶p22-phox亚基mRNA表达的影响。方法:雄性Wistar大鼠随机分为3组,分别灌胃筋脉通、维生素C或蒸馏水制备含药血清和对照血清。取新出生大鼠的双侧坐骨神经用于制备Schwann细胞。将体外培养的Schwann细胞分为高糖组、筋脉通组(加入筋脉通含药血清)、维生素C组(加入维生素C含药血清)及正常对照组。培养48h后,采用免疫荧光法检测Schwann细胞内i NOS蛋白的表达,实时荧光定量聚合酶链式反应法检测NADPH氧化酶p22-phox亚基mRNA的表达。结果:高糖培养的Schwann细胞内i NOS蛋白表达及NADPH氧化酶p22-phox亚基mRNA表达均较正常对照组明显升高(P<0.01);与高糖组比较,筋脉通组i NOS蛋白表达及NADPH氧化酶p22-phox亚基mRNA表达明显降低(P<0.01),且明显优于维生素C组(P<0.01)。结论:筋脉通含药血清可以下调高糖培养的Schwann细胞i NOS蛋白及NADPH氧化酶p22-phox亚基mRNA的表达。

过度训练及补充二联甲苯或谷氨酰胺对大鼠腹膜巨噬细胞活性氧和诱导型一氧化氮合酶的影响

目的:观察过度训练及补充二联甲苯(DPI)或谷氨酰胺(Gln)对大鼠腹膜巨噬细胞活性氧(ROS)生成能力的影响,探讨诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在此过程中发挥的作用。方法:8周龄健康雄性wistar大鼠56只,随机分为安静对照组(C)、过度训练组(E)、过度训练补充DPI组(ED)、过度训练补充Gln组(EG)。后3组根据取材时间不同各分为2组,运动后36h取材组(E1、ED1、EG1),运动后7天取材组(E2、ED2、EG2)。总计7组,每组8只,除C组外,其他6组都进行11周递增负荷跑台训练。断头处死大鼠并分离纯化腹膜巨噬细胞,流式细胞术测定ROS生成量,荧光定量PCR技术测定iNOS基因表达。结果:ROS生成:E1组显著低于C组;ED1组显著低于E1组(P<0.05),与C组相比极显著降低(P<0.01);EG1组与E1组相比没有显著差异,与C组相比极显著降低(P<0.01)。E2组、ED2组、EG2组分别与E1组、ED1组、EG1相比均显著增高;E2组、ED2组、EG2组、C组4组之间比较无显著差异。iNOSmRNA表达:ED1组相对E1组显著增加(P<0.05),相对C组极显著增加(P<0.01);ED2组相对ED1组显著降低;其他相关组间比较无显著差异。对各组中ROS与iNOS表达量进行相关分析,显示二者呈直线负相关,相关系数r=-0.45(P=0.004)。以各组ROS和iNOS表达量相对,C组的倍比关系作图,发现ROS生成量较高时,iNOSmRNA表达处于较低水平(E2组),随着iNOSmRNA表达水平增加,ROS生成量呈现降低趋势。结论:过度训练使腹膜巨噬细胞ROS生成量显著低于生理水平,引起运动性免疫抑制;补充抗氧化剂DPI可使过度训练时巨噬细胞ROS生成量进一步降低,补充谷氨酰胺对过度训练引起的巨噬细胞ROS生成量降低没有改善作用;过度训练及补充DPI或谷氨酰胺可影响巨噬细胞内ROS生成,这在一定程度上受iNOS催化产生的NO调控。