玛瑙红樱桃最佳愈伤组织诱导培养基的筛选

为提高玛瑙红樱桃(Cerasus pseudocerasus Lindl.)愈伤组织诱导率,以MS培养基为基本培养基,采取单因素试验分别对0.1%HgCl_(2)处理外植体的时间、NAA浓度和IBA浓度范围进行探究,再使用BoxBehnken响应面法进行三因素的优化试验,筛选玛瑙红樱桃的最佳愈伤组织诱导培养基。结果表明,单因素试验中,0.1%HgCl_(2)最佳处理时间为5 min,NAA浓度为0.35~0.65 mg/L,平均诱导率达73%,IBA浓度为0.20~0.40 mg/L,平均诱导率达67%;Box-Behnken响应面模型分析得出最佳愈伤组织诱导培养基配方为MS+0.51 mg/L NAA+0.35 mg/L IBA,0.1%HgCl_(2)处理外植体时间为4.5 min,平均诱导率达95%。NAA与IBA配合使用效果优于单独使用。

应用正交设计筛选小叶章诱导培养基的配方

以小叶章的茎段作外植体,采用正交设计法,考察6-BA、TDZ、NAA三种激素对小叶章初代培养产生的影响,确定适宜的激素种类及水平,优化筛选出适宜小叶章的诱导培养基.研究表明,激素6-BA是茎段诱导的关键因素;适宜小叶章初代培养的培养基配方为:1/2MS+6-BA0.5 mg·L^(-1)+TDZ0.1mg·L^(-1)+NAA0.1 mg·L^(-1)。

孝顺竹外植体适宜消毒方法及丛芽诱导培养基的筛选

竹子是一种重要的非木质资源，其生长快，用途广，不仅具有较高的观赏价值，应用于园林和城市规划，而且还具有良好的经济效益和社会效益。全世界有竹类植物70余属，1200余种，而中国就有400多种。由于竹子开花周期长，获取种子较困难，而传统的“分篼”等繁殖方法繁殖率较低，因此，目前市场上对各竹种种苗的需求量均较大。本试验应用现代植物组织培养技术方法，解决竹子传统繁殖方法繁殖效率较低的问题，以期获得大量保持母株特性，患病少且健壮的竹子试管苗，为竹类的工厂化育苗奠定基础。

籼粳正反交及诱导培养基对杂种F_1花药培养的反应

籼粳正反交及诱导培养基对杂种Ｆ＿１花药培养的反应花药培养可以克服常规籼粳杂交育种中存在的某些困难，籼粳杂种花粉植株遗传性纯合而稳定，结实正常。如何培养出大量绿色花粉株是发挥花培育种优势的关键所在。本研究就不同诱导培养基及籼粳品种正反交对水稻花药培养的...

不同诱导培养基对冬小麦组织培养效果的影响

两种不同的诱导培养基诱导冬小麦的成熟种胚，用得到的愈伤组织进行分化，通过对愈伤组织成苗率、分化率、褐死率的统计分析，结果表明，各个品种用最好的诱导培养基得到的愈伤组织质量提高，成苗率、分化率都大于用基本的诱导培养基得到的愈伤组织；对两种愈伤组织同时进行愈龄实验，发现不同愈伤组织培养的最适分化时间不同，继代一次分化率、成苗率都最高；随着继代代数的增多，褐死率呈明显的上升趋势。

菜心游离小孢子培养高频胚诱导培养基优化

【目的】对菜心小孢子培养的诱导培养基进行优化,以提高胚胎诱导率,创制优良DH系应用于育种实践。【方法】设置不同蔗糖浓度和激素(6-BA和NAA)浓度组合的NLN诱导培养基,以10份不同基因型的菜心为试材,进行小孢子培养及出胚率分析,筛选最佳诱导培养基。【结果】7份材料诱导出胚状体,不同基因型间的胚胎诱导率差异显著,说明基因型是影响小孢子形成的主要因素;在无激素处理中,100 g/L蔗糖浓度NLN(NLN-10)小孢子胚诱导率最高,出胚材料诱导率在3.45~30.46胚/皿;NLN含量减半的1/2 NLN-10培养基处理出胚率约为NLN-10处理的2/3;130 g/L蔗糖浓度NLN处理出胚率显著降低,最高仅为14胚/皿,蔗糖浓度为160 g/L的NLN(NLN-16)处理未出现胚状体;在NLN-10中分别添加0.1 mg/L 6-BA和NAA,促进出胚效果最佳,出胚率最高的Rt19006达46.93胚/皿,是不添加激素处理的1.5倍;当NLN-10中6-BA和NAA浓度均达到0.2 mg/L时,胚胎生长发育受到抑制。【结论】筛选出可有效促进菜心小孢子出胚的诱导培养基配方,即100 g/L蔗糖浓度的NLN+6-BA 0.10 mg/L+NAA 0.10 mg/L。

巨菌草诱导培养基的筛选及优化

巨菌草(Pennisetumsp.)属单子叶禾本科狼尾草属植物,可作为动物饲料和多种食用菌的培养基质,在中国及非洲广泛种植,然而不耐寒的特性限制了其推广应用。要克服其遗传缺陷,需借助转基因或体细胞杂交等技术,因此,必须建立巨菌草的组织培养体系。本研究以巨菌草幼茎为材料,研究了巨菌草外植体的消毒方式和2,4-D、IAA与NAA,细胞分裂素(6-BA和KT)的不同浓度及组合对愈伤组织诱导的影响。结果表明,用75%酒精擦拭剥离后的叶鞘,再用2%的次氯酸钠溶液消毒10 min就能达到理想的消毒目的。1.0~4.0 mg·L-1的2,4-D都可以诱导出愈伤组织,且各浓度间无显著差异(P】0.05);0.2mg·L-1 IAA对愈伤组织诱导有较好的促进作用;不同细胞分裂素对愈伤组织诱导没有明显促进作用。巨菌草愈伤组织诱导的最佳培养基配方是MS+2,4-D(3.0mg·L-1)+IAA(0.2mg·L-1)。

农杆菌介导胡萝卜转化体系的诱导培养基优化

高频再生系统是外源基因成功转化的先决条件,但再生系统不等同于转化系统。为提高农杆菌共培养后胡萝卜的再生频率,以日本新黑田五寸参和林丰改良五寸参2个品种胡萝卜下胚轴为外植体,利用农杆菌介导法将人源白细胞介素-2基因(IL-2)导入其中,探讨了共培养后诱导培养基中激素浓度和筛选剂对再生的影响。结果显示:不同基因型胡萝卜的分化对激素浓度的反应不同,林丰改良五寸参在3种培养基上的胚性愈伤率差异不显著;日本新黑田五寸参胚性愈伤率和每个外植体分化的抗性株数随激素浓度的提高而呈上升趋势,2,4-D和6-BA浓度为1.0mg/L时胚性愈伤率和每个外植体分化的抗性株数最高,分别为87.50%和59株;日本新黑田五寸参以bar基因为标记基因、PPT作筛选剂时,分化较好。因此,遗传转化过程中,为提高共培养后胡萝卜胚状体的分化率,对共培养后的诱导培养基进行再优化是必要的。

不同诱导培养基对小麦花药培养胚状体诱导率的影响

为明确W14-F诱导培养基对黑龙江省春小麦品种及人工合成小麦材料的花药培养胚状体诱导率,以6份人工合成小麦材料和4个普通小麦品种为材料,采用4种诱导培养基W14-F、MS、N6和C17进行花药培养比较试验。结果表明:不同的诱导培养基对于小麦材料的胚状体诱导率不同,4种诱导培养基的胚状体诱导能力依次为W14-F>C17>N6>MS,W14-F培养基胚状体诱导率明显高于其它3个培养基。人工合成小麦和普通小麦在4种培养基上都得到了相近的胚状体诱导率,说明W14-F培养基同样适合人工合成小麦。利用该技术体系培养人工合成小麦与普通小麦的杂种F1材料,得到了较高的诱导率,这为该技术体系直接应用于利用人工合成小麦改良小麦品种抗病抗逆性研究中提供了可靠的依据。

月季茎段组培诱导培养基优选试验

以月季茎段为外植体,应用正交设计试验研究培养基中不同植物生长调节剂及浓度因子对月季茎段再生诱导的影响。结果表明:MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+GA3 1.0 mg/L培养基配方为月季茎段诱导最佳培养基。

应用正交试验优选柑桔成年态茎段组培诱导培养基

以早蜜桔成年态茎段为外植体,应用正交设计试验研究组培培养基中不同植物生长调节剂添加种类及浓度因子对柑桔成年态茎段试管内无菌再生诱导的影响。结果表明,MS+6-BA 0.5 mg/L+IAA 0.05 mg/L+GA 0.5 mg/L培养基配方适用于本地早蜜桔成年态茎段试管内离体诱导。

大蒜微型鳞茎诱导培养基的筛选初报

以吉木萨尔白蒜为试验材料,利用大蒜鳞茎盘为外植体,在B5＋6-BA0.5 mg/L＋NAA0.5 mg/L＋蔗糖30 g/L＋琼脂4.5 g/L培养基进行初始培养获得绿芽,在此基础上开展试管内诱导微鳞茎培养基配方研究。结果表明,1/2 MS＋IBA 1.5 mg/L＋NAA 0.1 gm/L＋蔗糖50 g/L＋琼脂4.5 g/L为组培苗试管内诱导鳞茎较好的培养基配方,在该培养基上大蒜绿芽第45天开始形成鳞茎,第90天鳞茎直径为0.3~0.5 cm。

基于大肠杆菌表达系统高效生产外源蛋白的自诱导培养基的研发

为提高大肠杆菌生产抗原的产量,实现企业降本增效,加快口蹄疫多表位疫苗的产业化进程,本研究拟研发适合大肠杆菌表达系统高效表达重组蛋白的自诱导培养基,并以实验室构建的口蹄疫多表位重组表达质粒为试验对象,通过正交试验、优化诱导温度,筛选和确定最佳自诱导培养基配伍。结果显示,在16℃诱导培养,自诱导培养基表达可溶性蛋白的产量为普通LB培养基的6倍,而成本却降低了78%。这说明我们成功研发出了适合原核表达系统的自诱导培养基,其良好的成本效益性价比将有助于生物制品生产企业降低成本,提高产品的竞争力,具有广阔应用前景的产品。

美味猕猴桃品种‘金魁’离体叶片不定芽诱导及生根培养基筛选

猕猴桃（Actinidia spp.）果实酸甜适中,含丰富的VC和多种矿质元素及氨基酸,其种子中还含有大量的亚麻酸、不饱和脂肪酸等成分[1],被誉为＂水果之王＂。湖北省农业科学院果茶蚕桑研究所从野生猕猴桃品种‘竹溪2号’（‘Zhuxi No.2’）中实生驯化选育出美味猕猴桃〔Actinidia chinensis var.

不同诱导培养基和籼粳成分对水稻花药培养效果的影响

以5份不同籼粳成分的水稻为试验材料,分别以不同基本培养基(改良M8,SK3,合5,NB)、碳源(蔗糖和麦芽糖)、激素(单一激素、复合激素)为变量,设计16种诱导培养基进行花药培养,探讨水稻适宜的花培条件。结果表明,不同材料花药培养力差异显著,零轮、蜀恢527花药培养力显著高于9311/广粳1号∥9311、9311/广粳1号∥蜀恢527、9311/零轮;籼型基因频率与绿苗率呈显著负相关(-0.89*);基本培养基GM_8和合5花培效果较好,NB培养基不适合供试材料的花药培养;以蔗糖为碳源,添加复合激素的处理花培效果较好。改良的M_8+50 g/L蔗糖+2 mg/L 2,4-D+1 mg/L NAA+1 mg/L KT是适宜水稻花药培养的诱导培养基。

产L-5-甲基四氢叶酸工程菌自动诱导培养基的优化

考察了自动诱导培养基代替异丙基-β-D-巯基半乳糖苷(IPTG)培养基诱导四氢叶酸还原酶在重组大肠杆菌BL21(DE3)中表达的可行性,对自动诱导培养基自诱导时的乳糖浓度和葡萄糖添加量进行优化,并与IPTG诱导培养基进行比较,确定了自动诱导培养基配方:葡萄糖1.8 mmol/L、乳糖3 mmol/L、胰蛋白胨10 g/L、酵母膏5g/L、NaCl 10 g/L。HPLC结果显示,自诱导与IPTG诱导条件下的L-5-甲基四氢叶酸产量接近。

有机磷酸盐-与无机磷酸盐-钙化诱导培养基诱导主动脉瓣膜间质细胞钙化效果的对比研究

目的比较有机磷酸盐(OP)-与无机磷酸盐(IP)-钙化诱导培养基(OIM)诱导主动脉瓣膜间质细胞(AVICs)钙化的效果。方法主动脉瓣膜来源于2017年1—10月在第二军医大学附属长海医院行心脏移植的患者,取外观正常的主动脉瓣膜备用,采用改良的二次胶原酶消化法分离AVICs并随机分为A组和B组,A组采用普通培养基+OP-OIM进行培养,B组采用普通培养基+IP-OIM进行培养。采用茜素红染色检测钙化结节,采用邻甲酚酞络合酮比色法检测钙含量,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测Runt相关转录因子2(RUNΧ2)、碱性磷酸酶(ALP)mRNA相对表达量,采用蛋白质免疫印迹法检测RUNΧ2蛋白相对表达量,采用对硝基苯酚比色法检测ALP活性。结果 (1)细胞免疫荧光检测结果显示,分离得到的细胞Vimentin阳性率接近100%。流式细胞术检测结果显示,分离得到的细胞CD31阳性率为1.17%。(2)A组细胞培养21 d可见大量橘红色钙化结节,B组细胞培养7 d可见大量橘红色钙化结节。A组细胞培养21 d和B组细胞培养7 d钙含量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。(3)以细胞培养0 d作为对照,A组细胞培养21 d与B组细胞培养7 d RUNΧ2 mRNA相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05);但A组细胞培养21 d与B组细胞培养7 d ALP mRNA相对表达量比较,差异有统计学意义(P<0.05)。(4)两组细胞培养0 d RUNΧ2蛋白相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05);A组细胞培养21 d与B组细胞培养7 d RUNΧ2蛋白相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。(5)两组细胞培养0 d ALP活性比较,差异无统计学意义(P>0.05);A组细胞培养21 d与B组细胞培养7 d ALP活性比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论IP-OIM培养7 d与OP-OIM培养21 d诱导的AVICs钙化效果相当,IP-OIM诱导AVICs钙化较OP-OIM缩短14 d,可替代OP-OIM快速有效地建立体外AVICs钙化模型。

周楸腋芽诱导与增殖培养基激素筛选研究初探

为筛选出楸树腋芽离体培养诱导与增殖培养基的最适激素组合,和进一步研究楸树组织培养快繁技术和工厂化育苗提供理论依据,以‘周楸2号’为试材,采用萘乙酸(NAA)和6-苄基腺嘌呤(6-BA)不同激素配比的诱导培养基和增殖培养基,对楸树带腋芽茎段进行了诱导芽发生成苗对比试验。结果表明,‘周楸2号’腋芽离体培养最适诱导培养基是N6+NAA 0.015 mg/L+6-BA 0.9 mg/L,其诱导芽数量是3.80个,诱导芽长度是1.49 cm,诱导率为32.78%;最适增殖培养基是N6+NAA 0.15 mg/L+6-BA 0.8 mg/L,其诱导芽数量是4个、诱导芽长度是4.44 cm,诱导率为62.22%。

培养基及高温暗培养时间对小麦花药培养的影响

为进一步提高小麦花药培养的效率,优化花药培养条件,对诱导培养基及高温暗培养时间进行了研究。总共对103份不同基因型材料进行了花药培养,比较了C17和W14培养基的培养效果,并对其中激素KT和2,4-D的浓度进行了优化,比较了宁春4号和J 63在高温暗培养不同时间的花培效果。结果表明:在愈伤组织诱导方面,C17培养基明显优于W14,几乎相当于W14的2倍,而在绿苗分化方面,W14培养基诱导产生的愈伤组织绿苗分化的效果更好。当将W14培养基中激素KT的浓度由0.5mg/L提高到1.0mg/L时,有利于诱导愈伤组织产生,降低白苗分化的比例,从而使绿苗产率得到提高。C17诱导培养基中激素KT和2,4-D的最佳浓度组合分别是KT 1.0mg/L+2,4-D 1.5mg/L或KT 0.5mg/L+2,4-D 2.0mg/L;高温暗培养不同时间表明:高温培养比不进行高温培养的愈伤诱导率高,宁春4号最佳的高温暗培养时间是3d,J 63是10d,是否高温暗培养的最适宜时间与基因型有关系,还需要通过大量的基因型材料加以验证。

彩色辣椒子叶离体再生培养基的筛选

以5种彩椒为材料,以MS无机物+B5有机物+6-BA4mg/L+IAA1mg/L+AgNO33mg/L+琼脂7g/L+蔗糖30g/L为基本培养基,添加椰子汁、不同种类的氨基酸等,筛选各品种适宜的诱导培养基。结果表明,培养基中添加L-丝氨酸1.0mg/L+甘氨酸1.0mg/L或GA30.5mg/L+L-苯丙氨酸2.0mg/L+氨基丁酸2.0mg/L有利于诱导芽再生以及其后芽伸长、生根成苗。前者有利于黄欧宝、桔西亚两个品种的诱导和再生,后者适于白公主、多米、紫贵人3个品种的诱导和再生。