脂质体转染NF-κB诱捕物寡核苷酸抑制大鼠静脉桥血管内膜增生

目的探讨转染NF-κB诱捕物寡核苷酸(decoyODN)对自体移植静脉内膜增生的影响。方法制作20只自体颈部动脉上静脉移植SD大鼠模型,无序ODN对照组、decoyODN实验组各10只。移植前,实验组移植静脉行脂质体包裹的NF-κBdecoyODN溶液浸泡转染,对照组行脂质体包裹的无序ODN溶液浸泡。移植术后4周取出移植血管,利用病理学、凝胶电泳迁移率迟滞分析(EMSA)和RT-PCR分别检测移植血管内膜厚度、管腔狭窄度、血管组织NF-κB转录活性和TNF-αmRNA表达情况。结果实验组移植血管内膜厚度、管腔狭窄度、NF-κB转录活性、TNF-αmRNA表达较对照组明显减小或减少(均P<0.01)。结论 NF-κBdecoyODN可有效抑制静脉桥血管NF-κB的激活从而抑制移植静脉内膜的增生。

脂质体介导核因子-κB诱捕物寡聚脱氧核苷酸对重症急性胰腺炎大鼠胰腺炎症因子mRNA表达和胰腺损伤的影响

目的:探讨脂质体(liposome)介导核因子-κB (nuclear factorκB,NF-κB)诱捕物(decoy)寡聚脱氧核苷酸(ODN)对重症急性胰腺炎大鼠胰腺NF-κB活性及受其调控炎症因子基因mRNA表达和胰腺损伤的影响．方法:除假手术组(n=10)外,其余SD大鼠以牛磺胆酸钠(STC)诱导建立重症急性胰腺炎模型后,分别于建模后1 h静脉注射裸ODN(n =10)、脂质体／decoy ODN复合物(n=10)、脂质体／scrambled ODN复合物(n=10)和生理盐水(n=10),注射4h应用电泳迁移率变动分析(EMSA)NF-κB的活性,利用逆转录－聚合酶链反应(RT-PCR)法检测胰腺组织ICAM－1,IL－1α,IL-2,TNF-α,VCAM-1 mRNA表达,同时检测血淀粉酶、胰腺组织湿／干重比率和胰腺组织髓过氧化物酶(MPO)．结果:EMSA显示,脂质体／decoy ODN复合物组NF-κB活性明显低于生理盐水组、脂质体／scrambled ODN复合物组和裸ODN组,均有显著性差异(P<0．05)．RT-PCR结果显示,脂质体／decoy ODN复合物组ICAM-1,IL-1α．IL-2,TNF-α和VCAM-1 mRNA表达低于生理盐水组、脂质体／scrambled ODN复合物组和裸ODN组,均有显著性差异(ICAM-1:0．75±0．13 vs 1．39±0．15,1.37±0．16,1.32±0．17, P<0．05;IL-1α:0．64±0．09 vs 1.34±0．20．1．30±0．14,1．25±0．20,P<0．05;IL-2:0．23±0．08 vs 0．74±0．13,0．71±0．12,0．69±0．14,P<0．05; TNF-α:0．41±0．13 vs 1．30±0．17,1．26±0．17, 1．23±0．20,P<0．05;VCAM-1:0．21±0．06vs 0．68±0．13,0．69±0．15,0．63±0．13,P<0．05)．与生理盐水组、脂质体／scrambled ODN复合物组和裸ODN组相比,脂质体／decoy ODN复合物组淀粉酶、胰腺组织湿／干重比率和胰腺组织MPO活性显著性降低(淀粉酶:5093 1．85±22432．15 nkat／L vs 188024．26±38659．56．188412．68±37988．26,183119．95±33636．23 nkat／L,all P<0．05;湿／干重比率:5．76±0．20 vs 6．77±0．18,6．72±0．18,6．35±0．12．P<0．05; MPO活性:46．68±3．00 nkat／g vs 99．02±2．50．98．1 9±2．83,98．52±2．50 nkat／g,P<0．05)．结论:NF-κB decoy ODN可特异性抑制胰腺NF-κB活性及其调控的炎症因子ICAM-1, IL-1α,IL-2,TNF-α和VCAM-1 mRNA的表达,减轻胰腺损害．

核因子кB诱捕物寡核苷酸对肾小管上皮细胞炎症因子表达的影响

目的 研究核因子(NF)κB结合位点诱捕物寡核苷酸(NF-κB decoy ODN)对肾小管上皮细胞的NF-κB活性及下游炎症因子表达的影响。方法 (1)鱼精蛋白-脂质体法转染NF-κB decoyODN:将NF-κB decoy ODN与鱼精蛋白、脂质体混合,转染至TNF-α刺激培养的大鼠肾小管上皮细胞内,测定转染率。(2)凝胶电泳迟滞分析测定转染 NF-κB decoy ODN后细胞NF-κB活性。(3)RT-PCR方法检测转染NF-κB decoy ODN后细胞 ET-1、iNOS、ICAM-1、VCAM-l以及MCP-1 mRNA表达水平。结果 当+/-比例为4时,鱼精蛋白-脂质体法转染率高达93.20％;转染NF-κB decoy ODN可抑制TNF-α激活的NF-κB活性,从而进一步抑制ET-1、iNOS、ICAM-1、VCAM-I和MCP-1的mRNA表达。结论(1)鱼精蛋白-脂质体法是一种不受血清影响的高效率转染方法。(2)NF-κB decoy ODN在体外通过抑制NF-κB活性,进而影响肾小管上皮细胞炎症因子的表达。

核因子-κB诱捕物寡聚核苷酸对大鼠移植肾黏附分子mRNA表达的影响

目的观察在ECs器官保存液中，脂质体介导的核因子-κB（NF—κB）诱捕物寡聚核苷酸（ODN）复合物对大鼠移植肾黏附分子mRNA表达的影响。方法建立大鼠原位移植肾模型，利用4℃的含1．0μmol／L的NF—KB诱捕物ODN脂质体复合物的ECs灌注移植肾，低温保存6h后移植到受体大鼠；80只大鼠分为4组：手术组（Control组）、ECs组、诱捕DON（decoyODN）组、错配ODN（scram-ODN）组。电泳迁移率（EMSA）方法检测经诱捕物ODN转染肾脏的NF—κBDNA结合活性，逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）技术检测术后10h移植肾中细胞间黏附分子-1（ICAM．1）、血管细胞黏附因子-1（VCAM-1）的mRNA表达。结果EMSA结果显示，Control组相对密度单位（RDU）为0．84±0．50；ECs组RDU为57．65±3．58；与ECs组比较，decoyODN组RDU为1．16±0．28（P〈0．05），而scram．ODN组RDU为57．57±4．12（P〉0．05）；与Control组比较，ECs组移植肾，ICAM-1、VCAM-1的mRNA水平明显升高（P〈0．05）；与ECs组比较，NF—κB诱捕物ODN处理组移植肾的ICAM-1、VCAM-1的mRNA水平显著下降（P〈0．05），而scram．ODN处理组移植肾的ICAM-1、VCAM-1的mRNA表达则未见抑制（P〉0．05）。结论诱捕物ODN脂质体复合物可明显降低移植肾黏附分子ICAM-1、VCAM-1的mRNA表达水平。

桃小食心虫对无患子果实的危害特点及防控措施

桃小食心虫(Carposina sasakii Matsumura),别名桃蛀果蛾,是危害无患子的主要蛀果害虫,蛀果率高达90%。文章通过智慧物联网诱捕器动态监测手段,摸清桃小食心虫在无患子果实的发生动态,并通过田间试验,采用化学防治和性诱剂防治的方式,旨在寻找防治桃小食心虫的有效措施。结果表明采用化学药剂和性诱剂防治桃小食心虫都具有很好的防治效果,而性诱剂防治桃小食心虫在时效和环境保护方面均优于化学防治。

脂质体介导NF—κB decoy ODN对重症急性胰腺炎大鼠肺炎症因子mRNA表达和肺损伤的影响

目的 探讨脂质体（liposome）介导转录因子NF—κB诱捕物（decoy）寡聚脱氧核苷酸（oligodeoxynucleotide，ODN）对重症急性胰腺炎SD大鼠肺部NF-κB活性及受其调控炎症基因mRNA表达和肺损伤的影响。方法 以牛磺胆酸钠（STC）诱导SD大鼠建立重症急性胰腺炎模型，以假手术组为对照组，于建模后1h分别静脉注射裸ODN、脂质体／decoy ODN复合物、脂质体／scrambled ODN复合物和生理盐水，注射4h后应用电泳迁移率变动（EMSA）分析NF-κB的活性，利用逆转录-聚合酶链反应法（RT-PCR）检测肺组织ICAM-1、IL-1α、IL-2、TNF—α、VCAM-1mRNA表达，同时检测氧分压、肺组织湿／干重比率和肺组织髓过氧化物酶（MPO）。结果 EMSA显示脂质体／decoy ODN复合物组NF—κB活性明显低于生理盐水组、脂质体／scrambled ODN复合物组和裸ODN组（P〈0.05），RT—PCR显示脂质体／decoy ODN复合物组ICAM-1、IL-1α、IL-2、TNF—α、VCAM-1mRNA表达小于生理盐水组、脂质体/scrambled ODN复合物组和裸ODN组（P〈0．05）。与生理盐水组、脂质体／scrambled ODN复合物组和裸ODN组相比，脂质体／decoy ODN复合物组动脉血氧分压升高，肺组织湿／干重比率和肺组织髓过氧化物酶（MPO）活性降低（P〈0．05）、结论 NF—κB decoy ODN可特异性抑制肺NF-κB活性及其调控的炎症因子ICAM-1、IL—1α、IL-2、TNF-α、VCAM-1mRNA的表达，减轻肺损害。