基于多维谱效关系的中药质量控制与安全性评价的研究进展

中药为宝贵的传统医学资源,但由于中药发挥药效成分不明确、中药安全性评价体系以及质量控制不够完善限制了其临床应用价值。中药不同于西药,其成分复杂、作用靶点多,一种药效的体现往往是多种成分协同作用的结果,且中药药效易受采收时节、炮制方法、不同产地以及不同配伍等的影响,所以中药的安全性评价和质量控制一直以来备受关注。本文对基于多维谱效的中药安全性评价以及质量控制进行整理,为中药安全性评价和质量控制的进一步研究提供理论支持。

白及指纹图谱及谱效关系研究进展

目的:白及的商品种类繁多,质量参差不齐,导致其药效不一,故制定科学有效的质量控制方法极为重要。方法:通过查阅中国知网、Pub Med、万方、贵州数字图书馆等数据库相关文献,综述了近年来白及药材指纹图谱及其谱效关系的研究进展。结果与结论:根据相关文献分析白及指纹图谱主要研究方法有色谱法、光谱法以及分子生物学方法,近年来主要采用高效液相色谱法对白及进行指纹图谱研究。对于其谱效关系的研究相关报道较少,仅对其抗炎抑菌和抗氧化作用进行了谱效关系的研究,而白及药理作用较多,对于其他药理作用(止血、抗肿瘤等)需进一步分析。为了更好地开发利用白及自然资源,有必要对其进行指纹图谱及谱效关系的研究,阐明其药效物质基础。该文对白及指纹图谱及谱效关系方面研究进展进行综述,以期为中药白及的质量控制及进一步开发研究打下坚实的基础。

牛筋草HPLC指纹图谱及抗炎活性谱效关系的研究

目的 建立牛筋草的指纹图谱并考察其体外抗炎活性的谱效关系。方法 采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)建立10批牛筋草的指纹图谱,评价其相似度并进行聚类分析和主成分分析;以二甲苯致小鼠耳肿胀模型和小鼠棉球肉芽肿模型评价其抗炎作用,并采用灰色关联度和偏最小二乘回归分析探讨指纹图谱与抗炎药效的谱效关系。结果 建立的10批牛筋草HPLC指纹图谱相似度在0.850~0.987范围内。共确定了17个共有峰,指认出其中4个成分,聚类分析和主成分分析均将10批样品分为3类。谱效关系结果发现牛筋草抗炎作用的主要相关成分有6个。结论 建立的牛筋草指纹图谱方法可行,通过谱效关系分析筛选出其具有抗炎活性的有效成分,为牛筋草抗炎作用物质基础研究提供参考。

基于谱效关系的畲药地稔抗糖氧剥夺再灌注活性成分研究

目的:采用谱效方法研究地稔抗糖氧剥夺再灌注(OGD/R)的药效物质。方法:应用SH-SY5Y的OGD/R模型,对地稔12个不同提取物活性进行筛选;结合高效液相色谱建立指纹图谱;利用偏最小二乘法(PLS)及灰色关联(GRA)联合分析色谱峰与抑制LDH释放及促进细胞增殖作用的谱效关系。结果:给药浓度为10、100、300 mg/L地稔提取物,12种提取物均具有显著抑制LDH释放作用,其中抑制效果最好的为水煎液300 mg/L;50%乙醇提取物及正丁醇提取物可使细胞活力显著升高。建立了24个色谱峰的地稔不同提取物高效液相指纹图谱。谱效关系研究发现,地稔提取物中峰3、1(没食子酸)、18、2(原儿茶酸)、15(芦丁)具有潜在的抗OGD/R的活性,细胞实验验证芦丁、原儿茶酸、没食子酸抑制OGD/RSH-SY5Y细胞的LDH释放能力,增强细胞活力。结论:通过谱效从地稔中得到5个抗OGD/R的药效物质,包括芦丁、原儿茶酸、没食子酸。

基于抗氧化谱效关系的肉苁蓉质量标志物研究

目的:建立基于抗氧化谱效关系的肉苁蓉质量标志物(Q-marker)研究方法,为其药效物质基础及质量控制研究提供依据。方法:采用超高效液相色谱法(UPLC)建立10批肉苁蓉指纹图谱。利用H2O2建立细胞氧化损伤模型,以活性氧自由基半数抑制率、超氧化物歧化酶和过氧化氢酶含量为药效指标测定肉苁蓉抗氧化能力。通过主成分分析、皮尔逊相关性分析和偏最小二乘法-回归分析共同构建谱效关系,并对筛选出的活性成分进行药效验证。结果:建立了肉苁蓉的UPLC指纹图谱,共确定了17个共有峰。基于谱效关联分析筛选出9个成分,活性成分验证结果显示京尼平苷酸、8-表马钱子酸、松果菊苷、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷、管花苷A具有抗氧化活性且呈浓度依赖性。结论:基于谱效关系探讨了肉苁蓉的Q-marker,为其药效物质基础及质量标准提升提供参考。

基于电子鼻技术的臭灵丹草指纹图谱建立及谱效关系研究

目的:基于超快速气相电子鼻技术,建立15批臭灵丹草饮片的气味指纹图谱,结合谱效相关性分析,筛选与抗氧化活性相关的成分。方法:使用超快速气相电子鼻建立15批臭灵丹草饮片的气味指纹图谱,进行相似度评价。结合AroChemBase数据库进行定性分析。以DPPH自由基、ABTS自由基清除能力为指标评价臭灵丹草饮片挥发性成分的抗氧化活性,结合多元统计分析评价谱效关系,筛选与抗氧化活性关联度较大的成分。结果:建立了15批臭灵丹草饮片的气味指纹图谱,结合AroChemBase数据库标定了14个共有峰,分别为异戊烷、乙叉降冰生烯、α-蒎烯、α-水芹烯、1,8-桉叶素、5-甲基-4-壬烯、柠檬烯、二溴氯丙烷、芳樟醇、甲基丁香酚、十一酸甲酯、β-石竹烯、醋酸十一酯、覆盆子酮。臭灵丹草饮片挥发油清除DPPH、ABTS自由基的IC50分别为6.56~21.26 mg/mL、3.89~18.34 mg/mL,灰色关联度分析及偏最小二乘回归分析结果表明柠檬烯、甲基丁香酚、覆盆子酮等与其抗氧化相关性较大。结论:臭灵丹草饮片超快速气相电子鼻气味指纹图谱结合谱效关系研究初步筛选了与抗氧化能力相关性较大的3个成分,可为臭灵丹草饮片质量控制提供依据。

基于谱效关系的茴香根皮抗肝纤维化有效成分筛选及其机制探讨

为探讨茴香根皮治疗肝纤维化的化学成分,揭示其药效物质基础和作用机制。本研究应用UPLC-Orbitrap-MS/MS技术定性鉴别茴香根皮95%乙醇提取物、石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水部位的化学成分,根据质谱裂解规律和对照品验证及文献检索推测鉴定了各组分的58个共有化合物;采用MTT法检测各组分对HSC-T6细胞增殖的影响,谱效关系筛选抗肝纤维化潜在活性化合物,结果显示茴香根皮抗肝纤维化贡献较大的成分是二氢辣椒碱、去氢骆驼蓬碱、异莨菪亭;体外实验验证单体化合物抗肝纤维化活性及机制,结果表明二氢辣椒碱、去氢骆驼蓬碱和异莨菪亭对活化的HSC-T6具有较好的抑制作用(P<0.01、P<0.001),均可以抑制α-SMA的表达(P<0.01、P<0.001);二氢辣椒碱和去氢骆驼蓬碱具有较强的促凋亡作用,可以下调Bax/Bcl-2和Caspase3的相对表达量(P<0.05、P<0.01)。表明茴香根皮抗肝纤维化的药效物质可能为二氢辣椒碱、去氢骆驼蓬碱和异莨菪亭、东莨菪内酯、7-羟基香豆素等,其机制可能是通过抑制肝星状细胞活化、调节Bax/Bcl-2的表达发挥作用,体现了茴香根皮多成分多靶点抗肝纤维化的作用特点。

菊茎叶总黄酮高效液相色谱指纹图谱与抗氧化活性的谱效关系研究

目的研究菊茎叶总黄酮指纹图谱与其抗氧化活性的相关性,探究菊茎叶总黄酮抗氧化活性的物质基础。方法采用高效液相色谱法建立11批菊茎叶总黄酮样品的指纹图谱;分别采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基清除法、2,2′-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐自由基清除法及血浆铁离子还原法测定其抗氧化活性,结合灰色关联度法、偏最小二乘回归法分析谱效关系。结果建立17个共有峰的菊茎叶总黄酮的高效液相色谱指纹图谱,指认其中11个共有峰,相似度大于0.886。灰色关联分析显示其中11个色谱峰关联度均大于0.9,偏最小二乘回归分析结果显示6个色谱峰的变量重要性投影值>1,表明菊茎叶总黄酮与抗氧化活性有重要相关性。结论共有峰6(山柰酚-3-O-芸香糖苷)、峰11、峰12(香叶木素-7-O-β-D-葡萄糖苷)、峰13(木犀草素)、峰15与抗氧化活性密切相关,初步推测为菊茎叶总黄酮抗氧化活性的物质基础。

苦豆子提取物指纹图谱建立及其抗炎作用谱效关系研究

目的:建立苦豆子总黄酮、总生物碱、总多糖配伍后的指纹图谱,研究不同配伍的化学成分与细胞活力以及抗炎之间的关联性,明确不同配伍对细胞活力的影响以及抗炎作用的物质基础。方法:采用高效液相色谱(HPLC)建立苦豆子总黄酮、总生物碱、总多糖配伍后的指纹图谱,以LPS刺激RAW264.7建立炎症细胞模型,对不同配伍组合对炎症细胞模型肿瘤坏死因子(TNF-α)水平以及以细胞活力进行检测,采用正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)研究苦豆子化学成分与抗炎作用的谱效关系,筛选苦豆子抗炎作用的物质基础。结果:苦豆子生物碱类成分HPLC指纹图谱共有峰有8个,指认出5个共有峰,分别是槐果碱、槐定碱、苦参碱、氧化槐果碱和氧化苦参碱;黄酮类成分HPLC指纹图谱共有峰有15个,指认出3个共有峰,分别为槲皮素、紫铆因和芹菜素。相关性分析结果表明,槐果碱、槐定碱、氧化槐果碱和氧化苦参碱与脂多糖(LPS)诱导的小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7)细胞释放的炎症因子TNF-α水平呈显著负相关,槲皮素与细胞活力呈负相关,紫铆因、芹菜素与细胞活力呈正相关,槐定碱、氧化苦参碱与细胞活力呈负相关,苦参碱、槐果碱、氧化槐果碱与细胞活力呈正相关。结论:槐果碱、槐定碱、氧化槐果碱和氧化苦参碱可能是苦豆子抗炎的物质基础,可为挖掘苦豆子的质量标志物以及药材质量控制提供参考。

基于谱效关系探究不同根型黄芩抗氧化活性成分差异

目的:研究黄芩根型与其化学成分及抗氧化活性的相关性,探究不同根型黄芩抗氧化活性成分的差异。方法:以不同根型的黄芩为研究对象,建立其指纹图谱,测定有效成分含量,以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除法及2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基清除法的半抑制质量浓度(IC50)为抗氧化作用的药效指标,探究不同根型黄芩中发挥抗氧化活性的主要化学成分。采用灰色关联度分析、双变量相关性分析和偏最小二乘回归分析进行抗氧化活性的谱效关系研究,并对筛选的具有抗氧化活性的成分进行药效验证。结果:从不同根型黄芩的高效液相色谱指纹图谱中确定共有峰17个,与对照指纹图谱相似度不低于0.9000,并确认了黄芩苷(峰6)、汉黄芩苷(峰11)、黄芩素(峰14)、汉黄芩素(峰16)、白杨素(峰17)5个峰。直根小根型的黄芩有效成分含量较高。不同根型黄芩DPPH自由基清除法的IC50为0.112~0.168 mg/mL,ABTS自由基清除法的IC50为0.208~0.302 mg/mL。通过谱效关系分析筛选出峰2、峰3、峰6(黄芩苷)、峰7、峰10、峰11(汉黄芩苷)、峰14(黄芩素)可能为黄芩中具有抗氧化活性的成分。单体物质体外抗氧化活性成分验证结果显示,黄芩苷和黄芩素是清除DPPH自由基的主要物质,黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素是清除ABTS自由基的主要物质。结论:不同根型黄芩有效成分含量有明显差异,直根小根型黄芩有效成分含量高,抗氧化能力强。通过单体化合物抗氧化活性验证得出黄芩苷和黄芩素是黄芩中具有抗氧化活性的主要物质,阐明了黄芩抗氧化的物质基础,为不同根型黄芩的质量控制与评价提供依据。

生、醋柴胡UPLC-DAD指纹图谱建立及抗肝纤维化作用的谱效关系研究

目的建立生、醋柴胡的指纹图谱,比较生、醋柴胡化学成分差异,考察两者抗肝纤维化作用的差异,探究其与抗肝纤维化药效之间的关联性。方法采用UPLC法建立10批生柴胡和10批醋柴胡的指纹图谱,以TGF-β诱导肝星状细胞(LX-2)建立肝纤维化体外细胞模型,以Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠ,col1a1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)蛋白表达情况为药效指标,利用MetaboAnalyst 5.0网站,以变量重要性投影(VIP)值>1为标准筛选影响生、醋柴胡质量的差异标志物,并采用正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)研究生、醋柴胡差异化学成分及与抗肝纤维化作用的谱效关系,筛选生、醋柴胡抗肝纤维化作用的主要成分。结果生、醋柴胡样品的UPLC指纹图谱共有峰有18个,生、醋柴胡的主要差异成分有9个,其中峰9、7、6可以指认为柴胡皂苷d、柴胡皂苷a、柴胡皂苷f。药效结果发现,生、醋柴胡均有抗纤维化活性,且醋柴胡抗纤维化活性更强。通过谱效关联结果发现,柴胡抗肝纤维化作用的主要相关成分为11、12、14、15、18号峰。结论建立生、醋柴胡的指纹图谱方法简单可行,通过谱效关系筛选出抗肝纤维化活性的重要成分,为明确生、醋柴胡抗肝纤维化作用物质基础提供依据。

基于谱效关系的小儿肺热咳喘颗粒抑菌作用研究

目的 建立小儿肺热咳喘颗粒高效液相色谱(HPLC)特征图谱,研究小儿肺热咳喘颗粒对肺炎链球菌的抑菌活性并建立谱效关系模型。方法 以HPLC法测定15批小儿肺热咳喘颗粒特征图谱;牛津杯法研究抑菌活性。采用《中药指纹图谱相似度评价系统》(2012A版)建立15小儿肺热咳喘颗粒特征图谱并进行相似度评价和特征峰指认。以相对抑菌活性为抑菌作用指标,进行灰色关联度分析,利用SPSS 21.0软件进行Pearson相关性分析,建立谱效关系模型并验证。结果 共得到13个特征峰,相似度不低于0.936;指认2、9、11号峰为绿原酸、黄芩苷、木犀草素,13个特征峰均与相对抑菌活性呈正相关,灰色关联度值为0.743~0.924,2、9、11、12号峰为抑菌主要活性成分;验证3批小儿肺热咳喘颗粒样品相对抑菌活性的预测值与测量值相对误差均小于6%。结论 小儿肺热咳喘颗粒抑制肺炎链球菌主要成分包括绿原酸、黄芩苷、木犀草素,且抑菌作用可能由多种成分协同作用产生,与多味药材的配伍有关,验证了中成药具有多成分协同作用的特点;初步确定建立的谱效关系模型可用于小儿肺热咳喘颗粒抗菌作用的预测与评价。

决明子脐贴对慢传输型便秘大鼠的治疗作用及谱效关系

目的研究决明子脐贴对慢传输型便秘(STC)大鼠的治疗作用及谱效关系。方法将大鼠随机分为空白对照组、模型组、便秘贴阳性对照组和决明子脐贴低、中、高剂量组,6只/组。以复方地芬诺酯混悬液连续灌胃14d建立STC大鼠模型。造模成功后,将决明子脐贴按低、中、高剂量(41.75、125.25、375.75 mg/kg)固定于大鼠腹部神阙穴处,连续给药14 d,以便秘贴(13.33mg/kg)为阳性对照组,空白对照组与模型组给予等体积的纯水灌胃。观察大鼠的一般情况,计算大鼠粪便含水率、肠道推进率,HE染色观察大鼠结肠病理改变,测定大鼠血清中NO、NOS水平以及结肠组织中总蛋白含量、NO、NOS、AChE水平。建立决明子脐贴的HPLC指纹图谱,采用均值法和灰色关联度分析法研究决明子脐贴共有峰与对STC大鼠治疗作用的谱效关系。结果决明子脐贴能提高大鼠粪便含水率、肠道推进率,HE染色观察未发现结肠组织有病理学改变。与空白对照组比较,模型组大鼠血清与结肠中的NO、NOS水平上升(P<0.05,P<0.01),AChE水平下降(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,各给药组大鼠血清与结肠中NO、NOS水平下降(P<0.05,P<0.01),AChE水平上升(P<0.05,P<0.01)。6批决明子脐贴共确认28个共有峰,根据谱效关系得到的关联度与关联序结果显示,决明子脐贴中各成分对STC大鼠的治疗作用贡献度不同,其中橙黄决明素的贡献最大。结论决明子脐贴通过不同给药剂量的多种活性成分协同发挥对STC大鼠的治疗作用,其中橙黄决明素、大黄酸、黄决明素、决明素、美决明素、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚是决明子脐贴治疗STC的主要药效成分群。

骨碎补UPLC指纹图谱与人骨肉瘤细胞MG63中碱性磷酸酶活性的谱效关系研究

建立骨碎补生品和砂烫品提取物的UPLC指纹图谱,并研究骨碎补提取物与人骨肉瘤细胞MG63中碱性磷酸酶(ALP)活性之间的谱效关系。采用UPLC法建立骨碎补生品和烫品的指纹图谱并通过UPLC-Q-TOF MS法对其化学成分进行鉴别;通过测定MG63细胞中ALP活性检测骨碎补提取物对MG63细胞成骨分化的影响;采用灰色关联度分析、双变量相关性分析以及偏最小二乘回归分析法分析骨碎补生品和烫品的UPLC特征指纹峰与其促ALP活性之间的谱效关系。在标定的12个共有峰中,确定了4、5、12号峰与ALP活性呈正相关,其对应的物质依次是咖啡酸-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、儿茶素7-葡糖苷、柚皮苷,为深入研究骨碎补的促成骨分化活性物质基础提供依据。

基于谱效关系的款冬花祛痰活性成分研究

目的:研究款冬花提取物的高效液相色谱指纹图谱与祛痰作用的谱效关系,筛选款冬花的祛痰活性成分。方法:采用高效液相色谱法建立款冬花提取物的指纹图谱并获得其化学成分含量信息,采用小鼠酚红排泌模型获得款冬花提取物的祛痰药效指标信息,采用偏最小二乘回归法对款冬花提取物的化学成分含量信息与祛痰药效指标信息进行谱效相关分析。结果:初步判断芦丁、异槲皮苷、绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C及峰3成分、峰17成分构成款冬花的祛痰活性成分群。结论:款冬花的祛痰作用是多成分共同作用的结果。本研究结果可为关联药效的款冬花质量标准的建立提供参考。

基于谱效关系和网络药理学的穿心莲抗氧化物质基础研究

为研究穿心莲HPLC指纹图谱及体外抗氧化作用的谱效关系,构建穿心莲抗氧化作用网络,整合谱效关系和网络药理学数据,预测穿心莲抗氧化作用的物质基础。采用HPLC法建立10批次穿心莲的指纹图谱;测定穿心莲对大鼠肝细胞(BRL-3A)中活性氧(ROS)及丙二醛(MDA)含量的影响;采用灰色关联分析法进行谱效关联分析,初步确定抗氧化成分;结合网络药理学,预测抗氧化候选成分;根据分析结果,探究穿心莲抗氧化成分。结果:本研究建立了穿心莲指纹图谱,共标定11个共有峰;根据灰色关联度大小排序,9、7、10、5、1、6、8、3号共有峰与BRL-3A细胞ROS含量有较高关联度;9、7、10、5、1、6、8、3号共有峰与BRL-3A细胞MDA含量有较高关联度;网络药理学推测穿心莲抗氧化成分主要包括14-脱氧穿心莲内酯、新穿心莲内酯、穿心莲苷A等25个;整合分析确定穿心莲抗氧化成分为共有峰9、7、10、5、1、6、8、3代表的成分及14-脱氧穿心莲内酯、新穿心莲内酯等。综上,穿心莲抗氧化药效是多种成分共同作用的结果,穿心莲的活性成分可能主要通过细胞凋亡途径,作用于丝/苏氨酸蛋白激酶(AKT1)、内皮生长因子受体(EGFR)、半胱氨酸蛋白酶3(CASP3)等靶点发挥其药理作用。本研究可对穿心莲抗氧化的物质基础研究提供参考。

不同产地广防风HPLC指纹图谱及抗氧化降血糖谱效关系研究

建立广防风药材的HPLC指纹图谱并探究其与降血糖、抗氧化活性的谱效关系,为广防风的质量评价提供依据。采用HPLC法建立10批广防风特征指纹图谱,《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2012版)进行相似度评价,与对照品比对进行共有峰指认,SPSS 25.0进行聚类分析和主成分分析。以DPPH法、ABTS法评价抗氧化活性,pNPG法评价降血糖活性,运用灰色关联分析、双变量相关分析进行谱效关系研究。建立了10批广防风药材的HPLC指纹图谱,相似度为0.767~1.000,标定21个共有峰,指认了6个成分,10批广防风6个成分含量差异显著,10批广防风聚为3类,主成分分析得到6个主要因子。10批广防风均具有体外抗氧化和降血糖活性。灰色关联度显示21个共有峰与清除DPPH、ABTS+自由基和抑制α-葡萄糖苷酶活性关联度均大于0.731。双变量相关性分析显示峰3、峰17与DPPH自由基清除活性呈显著正相关,峰1、峰4与ABTS+自由基清除能力呈显著正相关,峰1、峰4、峰11(毛蕊花糖苷)与α-葡萄糖苷酶抑制活性呈显著正相关。该方法能有效分析不同产地广防风药材的质量,为广防风抗氧化和降血糖药效物质基础筛选和质量评价提供依据。

唐古特大黄FTIR的双指标序列分析及抗炎谱效关系研究

对于中药材的质量控制研究是中医药现代化的主要研究内容之一。唐古特大黄是一种常用中药,目前对唐古特大黄的质量控制研究多集中在总蒽醌类成分、游离蒽醌类成分以及指纹图谱,基于抗炎效果的质量标准研究尚为少数。采集不同产地、不同采收时间的18批唐古特大黄药材,对其粉末进行傅里叶变换红外光谱(FTIR)研究,发现16个共有峰,18批次之间具有较高的相似性(0.798~0.900),相同产地(甘南产、青海产)的唐古特大黄相似度较高(相似度大于0.900的达80%以上),但两产地之间的相似度相对较低(相似度大于0.900的仅为69.44%),结合聚类分析发现不同产地唐古特大黄FTIR谱图存在一定差异性,产地可能是主要影响因素。建立双指标分析序列,可在一定程度上区分药材不同产地。脂多糖(LPS)刺激RAW264.7细胞建立炎性细胞模型,以NO抑制率作为炎性指标,测定不同批次唐古特大黄的NO抑制率。以共有峰透过率作为X, NO抑制率作为Y,采用SMICA14.1软件构建PLSR模型建立谱效关系,谱图中X_(14)、X_(15)、X_(11)、X_(2)四个共有峰VIP>1,其中X_(2)与抗炎效果呈正相关关系,X_(14)、X_(15)、X_(11)与抗炎效果现负相关关系。进一步建立数学模型得共有峰(X)与NO抑制率(Y)的关系Y=237.618+2.992X_(2)-0.845X_(4)+2.979X_(6)-3.722X_(7)+0.433X_(8)-0.957X_(12)-0.759X_(14)-0.632X_(15)(p=0.003<0.01,R=0.935),p<0.01代表构建数学模型有意义,R=0.935代表所构建数学模型可解释93.5%的数据。可知X_(2)、X_(6)与抗炎效果呈正相关关系,X_(4)、X_(7)与抗炎效果呈负相关关系,可预测体外抗炎效果,准确率达93.5%,但由于样本量过小,仅可用于解释本研究纳入数据。X_(6)是由甲基的β(C—H)产生,可能与大黄素、大黄酸、大黄素甲醚、芦荟大黄素等蒽醌类成分有关。该研究将抗炎活性与红外光谱数据相结合,引入唐古特大黄质量评价体系,为唐古特大黄产业的健康发展提供新思路。

基于谱效关系的地菍石油醚提取物抗炎活性物质基础研究

目的建立地菍石油醚提取物的指纹图谱,并结合细胞药效学实验探究其抗炎活性物质基础。方法采用高效液相色谱(HPLC)法,利用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》生成20批地菍石油醚提取物的指纹图谱,并进行相似度评价和共有峰指认;建立脂多糖诱导的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7炎症模型,以一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的抑制率为指标,考察地菍石油醚提取物的抗炎活性,并运用灰色关联度法、偏最小二乘回归分析法进行谱效关系研究;采用分子对接验证抗炎活性成分与TNF-α、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白质受体的结合活性。结果20批地菍石油醚提取物的指纹图谱中有19个共有峰,20批样品的相似度为0.603~0.990;指认了牡荆素(5号峰)、异牡荆素(6号峰)、鞣花酸(7号峰)、槲皮素(9号峰)、木犀草素(10号峰)5个成分。地菍石油醚提取物19个共有峰与NO、TNF-α抑制率的关联度均大于0.7,峰19、13、9(槲皮素)、12、5(牡荆素)、6(异牡荆素)、8、7(鞣花酸)、18、1与NO抑制率呈正相关;峰8、10(木犀草素)、13、15、3、19、17、7(鞣花酸)、18、1与TNF-α抑制率呈正相关。牡荆素、异牡荆素、槲皮素与iNOS蛋白质受体的结合能均小于-5.0 kcal/mol。结论牡荆素、异牡荆素、槲皮素可能是地菍石油醚提取物发挥抗炎作用的药效物质基础。

双冬胶囊HPLC指纹图谱建立及其抗炎作用的谱效关系研究

目的建立双冬胶囊高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,并研究其抗炎作用的谱效关系。方法采用HPLC法建立15批双冬胶囊的指纹图谱,同时进行相似度评价。建立大鼠足肿胀模型考察双冬胶囊的抗炎活性,以大鼠足肿胀率及右后足组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、前列腺素E2(PGE2)、白细胞介素6(IL-6)、IL-8、IL-1β、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平为抗炎药效指标,采用灰色关联度分析法构建双冬胶囊抗炎作用的谱效关系。结果15批双冬胶囊确定了20个共有峰,相似度均大于0.97,指认了8个共有峰。经灰色关联度分析可知,15批双冬胶囊各共有峰峰面积与足肿胀率及MDA、SOD、PGE2、IL-6、IL-8、IL-1β、TNF-α水平的关联度分别为0.6211~0.7835、0.5643~0.8279、0.5810~0.8453、0.5649~0.8550、0.5831~0.8564、0.5765~0.8635、0.5641~0.8380、0.5725~0.8513。其中,与抗炎药效指标关联性较强的有峰4(京尼平苷酸)、峰10(绿原酸)和峰2所代表的化学成分。结论本研究成功建立15批双冬胶囊的HPLC指纹图谱,其中京尼平苷酸、绿原酸等可能是其抗炎药效成分。