细胞因子信号转导负调控因子家族

JAK/STAT是细胞因子发挥生物学功能的重要信号转导途径。作为抑制JAK/STAT途径的蛋白质—细胞因子信号转导负调控因子SOCS家族,目前已知有8个成员,细胞因子通过JAK/STAT通路调节该家族蛋白表达。近年来基因敲除在SOCS研究领域的广泛应用初步阐明了SOCS在体内的生物学功能。

人类免疫缺陷病毒1型病毒复制负调控因子编码基因的克隆及在BCBL-1细胞和NIH/3T3细胞中的表达

目的:分离克隆人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)编码的病毒复制负调控因子(Negative factor,Nef)基因,并将其导入BCBL-1细胞和NIH/3T3细胞中进行表达。方法:根据GenBank登记的Nef基因核苷酸序列设计PCR引物,在其5′端分别引入EcoRⅠ和SalⅠ酶切位点;以含有Nef基因的pCINL质粒为模板,扩增Nef基因,经双酶切后克隆进真核表达载体pCI-neo中。为了便于蛋白检测,在下游引物5′端引入Flag序列,构建重组真核表达质粒。重组质粒经酶切鉴定、核酸序列测定和分析后分别瞬时转染BCBL-1细胞和NIH/3T3细胞,用RT-PCR、Western blot分别从核酸和蛋白水平检测Nef基因的表达情况。结果:成功构建了含Nef基因的重组真核表达质粒,核酸序列分析显示,克隆的Nef基因序列全长651bp,与GenBank中登记的Nef基因序列100%同源,引入的Flag序列完全正确;RT-PCR和Western blot都在Nef预期位置检测到特异性条带。结论:HIV-1Nef基因在BCBL-1细胞和NIH/3T3细胞中获得了正确表达。

补髓生血颗粒对造血负调控因子IL-6和TGF-β_1的影响

目的 :探讨补髓生血颗粒剂对慢性再生障碍性贫血 (CAA)患者血清造血负调控因子IL - 6和TGF - β1表达水平的影响。方法 :采用免疫荧光法及流式细胞技术分别测定使用该颗粒剂治疗前后的CAA患者血清IL - 6和TGF - β1表达水平的影响 ,并与再障生血片对照组与正常组作比较研究。结果 :补髓生血颗粒剂与再障生血片临床疗效存在显著差异 (P <0 .0 5 ) ,两组疗前血清IL - 6和TGF - β1表达水平均明显高于正常组 ,疗后表达水平均下调。结论 :CAA患者血清中IL - 6和TGF - β1为造血负调控因子 ,参与了负向调控造血 ;补髓生血颗粒在下调造血负调控因子上优于再障生血片 ,提示补髓生血颗粒在调节CAA患者细胞免疫及下调造血负调控因子上发挥作用 ,从而改善了CAA的造血功能。

免疫性血小板减少症相关免疫负调控因子研究进展

ITP患者血小板减少的机制包括血小板消耗过多及产生不足,两者皆主由IgG抗血小板抗体介导[1],自身免疫的主靶点是血小板糖蛋白,如GPⅡb/Ⅲa和GPⅠb/Ⅸ。已经证实,ITP与血小板自身抗原的失耐受有关,而失耐受的原因仍不清楚。

细胞因子信号转导负调控因子-1和白细胞介素-6在慢性房颤患者心房组织中的作用

目的探讨慢性房颤(AF)患者心房组织中细胞因子信号转导负调控因子(SOCS)-1和白细胞介素(IL)-6水平的变化。方法依据《赫尔辛基宣言》精神将20例心外科手术患者分成AF组和窦性心律(SR)组,AF组10例,男5例,女5例,平均年龄(52.1±10.05)岁,AF持续时间大于6个月;SR组10例,男4例,女6例,平均年龄(41.2±18.75)岁。两组均无其他心律失常病史。在心脏停搏前取右心耳100 mg,一部分用Masson染色法观察形态变化,其余部分放入-70℃冰箱保存备用。IL-6水平用ELISA法测定,SOCS-1蛋白及mRNA表达用免疫印迹及RT-PCR法检测。心脏彩超检测左前降支(LAD)。结果 AF组心肌细胞排列明显不规则,心肌间质内有明显的胶原纤维和结缔组织增生,并将心肌肌束分隔;AF组心房组织中IL-6水平及LAD明显高于SR组(P<0.05);且IL-6水平与LAD呈正相关(r=0.94,P<0.05);AF组心房组织中SOCS-1蛋白及SOCS-1mRNA的含量表达明显高于SR组(P<0.05)。结论 IL-6和SOCS-1共同参与AF的病理过程,它们相互影响,相互作用使得AF得以维持。

植物蛋白负调控因子

介绍植物蛋白负调控因子的调控机制,它们在激素调节、生长发育尤其是花器官形成、抗病性和耐逆性中的作用,以及在激素信号、光敏色素信号、抗病信号、耐逆信号转导途径中的定位和作用的分子机制研究进展。

荧光实时定量PCR研究GA负调控因子基因在棉花纤维不同发育时期的表达模式

棉花纤维发育经历起始期、延伸期、次级细胞壁加厚期、脱水期共4个发育时期。为了了解GA负调控因子基因在整个纤维发育时期的调节作用,采用敏感的实时定量PCR对GA负调控因子基因Gh RGL在棉花纤维不同发育时期中的转录水平进行了定量研究,通过提取来源于不同纤维发育阶段[包括-3~0 DPA(开花后)胚珠,3 DPA胚珠,5 DPA胚珠,10 DPA胚珠,15 DPA纤维,25 DPA纤维]的样品总RNA,探讨不同发育时期Gh RGL基因的表达模式。结果显示,Gh RGL基因在所有被选的样品中都有表达,其中在5 DPA胚珠和10 DPA胚珠中转录水平较高,在10 DPA胚珠中表达水平最高,在-3~0 DPA胚珠、3 DPA胚珠、15 DPA纤维、25 DPA纤维中的表达水平较低,表明Gh RGL基因在纤维伸长期表达水平较高,暗示Gh RGL可能对纤维伸长起着重要作用。

细胞信号负调控因子3调控Wnt/β-Catenin信号通路对肿瘤干细胞的影响及其在脑胶质母细胞瘤中的应用

背景:有研究表明,细胞信号负调控因子3、Wnt/β-Catenin信号通路与脑胶质母细胞瘤的发生密切相关。目的:探讨细胞信号负调控因子3与Wnt/β-Catenin信号通路对肿瘤干细胞的影响及在治疗脑胶质母细胞瘤中的作用机制。方法:从手术切除的脑胶质母细胞瘤标本中,分离、培养及鉴定脑肿瘤干细胞。反转录PCR扩增细胞信号负调控因子3基因,转染至脑胶质母细胞瘤干细胞。反转录PCR、Western blot检测细胞信号负调控因子3转染前后,脑胶质母细胞瘤干细胞中细胞信号负调控因子3、信号转导与转录活化因子3、β-Catenin及抑癌因子人第10号染色体缺失磷酸酶及张力蛋白同源基因mRNA及蛋白的表达。结果与结论:高表达细胞信号负调控因子3可能通过抑制信号转导与转录活化因子3的表达,从而抑制Wnt/β-Catenin通路的传导,以增强人第10号染色体缺失磷酸酶及张力蛋白同源基因活性,降低胶质瘤细胞增殖及侵袭能力同时诱导细胞凋亡,为脑胶质母细胞瘤的靶向治疗提供新的途径。

TLR4信号通路负调控因子在断奶仔猪不同组织中的mRNA表达

本试验旨在研究Toll样受体4(TLR4)信号通路负调控因子在断奶仔猪不同组织的分布情况。选择12头杜×长×大断奶仔猪,屠宰,取脾脏、胸腺、下丘脑、垂体、肾上腺、空肠、回肠、肝脏、背最长肌、腓肠肌等组织。应用实时荧光定量PCR技术测定TLR4信号通路负调控因子在仔猪不同组织中的mRNA表达水平,包括单免疫球蛋白IL-1相关蛋白(SIGIRR)、细胞因子信号传导抑制因子1(SOCS1)、防辐射105(RP105)和Toll反应蛋白(Tollip)。结果表明:TLR4信号通路负调控因子在所测定的10个组织中均有一定程度的表达,但是组织分布规律存在一定的差异;主要在肝脏、回肠和脾脏中的表达量较高,在胸腺、垂体和空肠中的表达量居中,在其他组织中的表达量较低。TLR4信号通路负调控因子在不同组织中表达差异较大,可能与负调控因子在TLR4信号传导通路中结合的传导因子不同,以及机体各组织对病原的抵抗力不同有关。

造血负调控因子在再生障碍性贫血发病中的作用研究

造血负调控因子是一类能抑制造血干／祖细胞分化、增殖的细胞因子。再生障碍性贫血患者骨髓及血清中的造血负调控因子水平均升高，使造血干／祖细胞增殖分化受损，骨髓造血功能衰竭。本丈对肿瘤坏死因子（TNF-α）、γ-干扰素（IFN-γ）、白细胞介素2（IL-2）、白细胞介素8（IL-8）、转化生长因子β（TGF-β）等造血负调控因子在再生障碍性贫血发病过程中的作用作一综述。

副干酪乳酸杆菌通过诱导负调控因子抑制单核巨噬细胞对脂多糖刺激的炎性细胞因子应答

目的:探讨副干酪乳酸杆菌(Lactobacillus paracacei,L.para)预刺激抑制脂多糖(Lipopolysacchride,LPS)诱导的炎性细胞因子释放的调节机制。方法:用佛波酯诱导THP-1细胞分化为巨噬细胞样细胞;以L.para预刺激为实验组,小剂量LPS(10ng/ml)预刺激和TLR2激动剂Pam3CSK4预刺激为对照组,预刺激24 h后,再用LPS大剂量(1μg/ml)刺激经分化的THP-1细胞;检测预刺激对TLR信号通路负调控因子A20、SOCS1、SOCS3、IRAK3的表达水平,对TLR4和CD14的膜表达水平和mRNA水平,以及对大剂量LPS诱导的炎性细胞因子IL-1β、TNF-α水平的影响。各目的蛋白mRNA水平检测采用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)法,TLR4和CD14的膜表达检测采用流式细胞术。结果:L.para等预刺激能够降低LPS诱导的IL-1β、TNF-α表达水平;并能够上调细胞TLR信号途径负调控因子A20、SOCS1、SOCS3、IRAK3的mRNA水平,但不影响细胞膜的TLR4和CD14阳性百分率;IRAK1/4抑制剂能够减弱预刺激诱导的负调控因子表达水平,并减弱预刺激对LPS诱导炎症因子释放的抑制作用。结论:副干酪乳酸杆菌预刺激能够通过上调TLR信号通路负调控因子A20、SOCS1、SOCS3、IRAK3等的表达抑制单核巨噬细胞对LPS刺激的炎性细胞因子的释放。

骨髓增生异常综合征骨髓单个核细胞内负调控因子的研究

为研究MDS患者细胞凋亡与骨髓内不同T细胞亚群胞内负调控因子的关系 ,采用胞内细胞因子染色技术对骨髓内不同亚群T细胞胞内的TNF a和IFN γ水平进行检测和分析 ,用RT PCR技术测定BMMNC的凋亡基因Fas的mRNA水平。结果表明 ,MDS患者骨髓内产生TNF α增多的淋巴细胞为CD4 + CD4 5RO+ 、CD8+CD4 5RO+ 细胞 ,产生IFN γ增多的为CD4 + CD4 5RO+ 、CD8+ CD4 5RO+ 、CD8+ CD4 5RA+ 细胞 ,但均以CD8+CD4 5RO+ 细胞为主 ;MDS患者T淋巴细胞产生的IFN γ与FasmRNA存在相关性 ,而TNF α与FasmRNA相关性不强。结论 :MDS患者造血微环境中不仅T淋巴细胞亚群失调 ,而且各亚群分泌负调控因子增多 ;MDS患者髓内IFN γ主要来自于T淋巴细胞。

青鳉抗病毒感染过程的负调控因子jun的鉴定

Jun(Jun proto-oncogene,AP-1 transcription factor subunit)为组成转录因子AP-1的亚单位或亚家族成员,参与机体的免疫应答。为了进一步了解jun基因在鱼类抗病毒天然免疫方面的功能,以日本青鳉为研究对象,采用CRISPR/Cas9介导的基因编辑技术获得jun缺失的纯合子突变体品系,并对其在神经坏死病毒(nervous necrosis virus,NNV)感染过程中的特征展开研究。基因克隆结果显示,野生型日本青鳉的jun基因编码区全长921 bp,共编码306个氨基酸,含有N端的Jun超家族结构域和C端的bZIP超家族结构域,并在眼、脑、鳃、心脏、头肾、卵巢、精巢、肝脏、脾脏9个检测的组织中均有较高的表达。突变体jun-/-在基因组减少了124 bp,而蛋白只剩下59个氨基酸的N端序列,缺失了Jun超家族结构域和bZIP结构域。病毒感染实验结果显示,jun-/-仔鱼对于神经坏死病毒(nervous necrosis virus,NNV)的耐受能力相对野生型仔鱼有所提升;jun-/-成鱼眼、脑、鳃和肌肉组织内的病毒相对含量都显著低于野生型。进一步的qRT-PCR结果显示,在jun-/-青鳉中,fosl1的表达极显著下调,tbk1的表达降低,而irf3的表达极显著上调。以上结果表明,jun缺失能增强青鳉耐受NNV病毒的能力,jun基因可能是一个青鳉抗病毒信号通路的负调控因子。

果实成熟及品质形成的负调控因子研究进展

果实成熟及品质形成是植物果实生命周期中的一个重要阶段,其受到诸多调控因子的共同调控,可以分为正调控因子和负调控因子。过去果实成熟调控方面的研究主要集中于正调控因子的挖掘及功能解析,而现在果实成熟相关的负调控因子也逐渐受到研究者的关注。本文综述近年来发现的果实成熟及品质形成相关的负调控因子,根据其对成熟及品质形成关键基因的调控方式可分为:参与转录水平调控的转录抑制子,参与转录后水平和翻译后水平的负调控因子以及其它负调控因子4大类,并对相关后续研究方向进行探讨与展望。

阵发性睡眠性血红蛋白尿及再生障碍性贫血造血负调控因子的研究

目的检测阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)与再生障碍性贫血(AA)患者外周血血浆中造血负性调控因子IFN-γ、TNF-α和TGF-β1的表达;研究IFN-γ、TNF-α和TGF-β1表达水平与PNH和AA之间的关系。方法应用ELISA法检测18例成人PNH与20例AA患者外周血血浆中IFN-γ、TNF-α和TGF-β1的表达,并与15例健康体检者对比。结果AA组的IFN-γ和TNF-α均高于对照组,P<0.05;TGF-β1显著高于对照组,P<0.01。PNH组的IFN-γ、TNF-α和TGF-β1均显著高于对照组,P<0.01。PNH组的TNF-α高于AA组,P<0.05;PNH组IFN-γ和TGF-β1均显著高于AA组,P<0.01。结论IFN-γ、TNF-α和TGF-β1作为造血负性调控因子在PNH与AA患者体内对造血细胞起抑制作用,反映造血调控因子分泌紊乱可能在PNH与AA的发病中起一定作用。

激素和光信号途径中负调控因子的降解

植物体时刻感知来自体内和体外的各种信号,并将各种信号整合,通过调整自身代谢来适应环境的变化.各信号转导途径中,对正、负调控因子的调控可使信号进行有效的传递.在激素(如IAA,GA)和光信号途径中都出现了负调控因子的降解促进植物生长的现象.

细胞因子信号转导负调控因子、炎性因子与妊娠期高血压疾病患者病情的相关性分析

目的探讨细胞因子信号转导负调控因子(SOCS-3)、炎性因子与妊娠期高血压疾病患者病情的相关性分析。方法回顾性选取2017年1月至2019年1月郑州大学附属洛阳中心医院收治的妊娠期高血压疾病120例患者的临床资料进行分析,根据病情严重程度分为妊娠高血压(PIH)组(45例)、轻度子痫前期(PE)组(47例)、重度PE组(28例),另选取同期在郑州大学附属洛阳中心医院定期产检的正常孕妇30例作为对照组。比较分析各组血清SOCS-3、炎性因子水平,并采用Logistic回归分析其与预后的关系。结果与对照组比较,PIH组、轻度PE组、重度PE组血清SOCS-3水平低,IL-1β及TNF-α水平高(P<0.05),且SOCS-3水平PIH组>轻度PE组>重度PE组,IL-1β、TNF-α水平PIH组<轻度PE组<重度PE组,差异有统计学意义(P<0.05);根据Logistic回归分析结果显示年龄、病情程度、IL-1β、TNF-α水平为影响妊娠期高血压疾病患者预后的独立危险因素,SOCS-3为保护性因素(P<0.05)。结论妊娠期高血压疾病患者血清SOCS-3水平低于正常孕妇,IL-1β、TNF-α水平明显高于正常孕妇,且与病情严重程度及预后密切相关。