白花败酱草总黄酮对实验性急性肺损伤模型大鼠的肺保护作用及其机制

目的:探讨白花败酱草总黄酮(total flavoniods from Patrina villosa Juss,PJF)对实验性急性肺损伤(acute lung injury,ALI)模型大鼠的肺保护作用及其潜在机制。方法:用气管内滴注5 mg/kg脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)构建ALI大鼠模型。将60只雄性SD大鼠随机分为对照组、LPS组、LPS+低剂量(100 mg/kg)PJF组和LPS+高剂量(300 mg/kg)PJF组(后2组在ALI造模前1 h给予PJF灌胃),每组15只。造模后24 h,收集支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)和肺组织。HE染色显示肺组织形态;干湿称重法测量肺组织的湿/干重比;伊文思蓝染色评估肺组织中上皮屏障的通透性;ELISA检测BALF中炎症因子肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)和IL-6含量,以及肺组织中氧化应激指标超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活性及丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量;免疫印迹法检测肺组织中C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)、葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)和X框结合蛋白1(X-box binding protein 1,XBP1)蛋白表达。结果:与对照组比较,LPS组大鼠肺组织呈现肺泡结构不清和大量炎症细胞浸润,ALI评分和肺组织的湿/干重比显著升高(P<0.05),BALF中IL-6、IL-1β和TNF-α水平,以及肺组织中MDA含量、MPO活性及CHOP、GRP78和XBP1蛋白表达水平显著升高(P<0.05),肺组织中SOD和GSH-Px活性显著降低(P<0.05)。与LPS组比较,PJF干预组肺组织形态改善,ALI评分和肺组织的湿/干重比显著下降(P<0.05),BALF中IL-6、IL-1β和TNF-α水平,以及肺组织中MDA含量、MPO活性及CHOP、GRP78和XBP1蛋白表达水平显著降低(P<0.05),肺组织中SOD和GSH-Px活性显著升高(P<0.05);且高剂量组的效果明显优于低剂量组。结论:PJF对ALI大鼠具有肺保护作用,其机制可能与抑制炎症反应、氧化应激和内质网应激有关。

败酱草水提物通过调控circ_0000936/miR-665抑制胶质瘤细胞增殖、迁移及侵袭

目的:探讨败酱草水提物对胶质瘤细胞生物行为的影响及其可能作用机制。方法:收集2019年2月至2020年1月期间于本院接受手术切除并经病理证实的31例胶质瘤组织,qRT-PCR法检测正常脑组织与胶质瘤组织中circ_0000936、miR-665的表达量;Pearson法分析胶质瘤组织中circ_0000936和miR-665表达量的相关性;体外培养人胶质瘤细胞LN229,不同浓度的败酱草(0.5 mg/mL、1.0 mg/mL、2.0 mg/mL)处理LN229细胞,si-NC、si-circ_0000936分别转染至LN229细胞,pcDNA-circ_0000936转染至LN229细胞后加入2.0 mg/mL败酱草处理细胞;CCK-8、平板克隆形成实验、Transwell小室实验与流式细胞术分别检测细胞增殖、克隆形成、迁移、侵袭及凋亡能力;双荧光素酶报告基因实验检测circ_0000936与miR-665的靶向关系;Western blot法检测Bax、Bcl-2蛋白表达量。结果:胶质瘤组织中circ_0000936的表达量高于正常脑组织(P<0.05),而miR-665的表达量低于正常脑组织(P<0.05);circ_0000936和miR-665呈负相关(r=-0.980,P<0.001);败酱草能够以浓度依赖性方式降低细胞活力、细胞克隆形成率、Bcl-2蛋白水平和circ_0000936的表达量(P<0.05),迁移及侵袭细胞数减少(P<0.05),而凋亡率、Bax蛋白水平和miR-665的表达量升高(P<0.05);转染si-circ_0000936后miR-665的表达量升高(P<0.05),细胞活力、细胞克隆形成率和Bcl-2蛋白水平降低(P<0.05),迁移及侵袭细胞数减少(P<0.05),凋亡率和Bax蛋白水平升高(P<0.05);转染pcDNA-circ_0000936能够逆转败酱草对LN229细胞生物学行为的作用。结论:败酱草水提物可通过调控circ_0000936/miR-665诱导胶质瘤细胞凋亡,并阻碍增殖、迁移及侵袭。

败酱草及其近缘种叶绿体全基因组分析和DNA条形码构建

目的:基于败酱类药材基原植物的叶绿体基因组序列分析开发特定的DNA条形码,准确鉴别败酱草及其近缘种。方法:采用Illumina高通量测序技术对败酱科败酱属植物白花败酱、黄花败酱和异叶败酱的叶绿体基因组进行测序;采用生物信息学软件对基因组进行组装注释、特征分析、序列比较和系统发育分析;基于叶绿体基因组高突变区构建特异性DNA条形码进行验证。结果:3种败酱属植物叶绿体基因组呈四分体结构,全长分别为159585、158919、158919 bp,编码的基因数分别为130、132、132,包含8个rRNA基因和37个tRNA基因,蛋白质编码基因数分别为85、87、87。ccsA、ndhG、rpl23、ndhF序列作为特异性DNA条形码成功扩增16份样品,黄花败酱、白花败酱和少蕊败酱聚类在同一支,异叶败酱和糙叶败酱聚类在另一支。通过ccsA、ndhG、ndhF序列可进一步鉴别糙叶败酱和异叶败酱。结论:ccsA、ndhG、rpl23、ndhF序列可作为补充特异性DNA条形码区分败酱草及其近缘种。

白花败酱草化学成分与药理活性研究进展

白花败酱草是败酱属植物,分布广泛,植物资源量大。在我国,白花败酱草具有悠久的药用历史,作为一味传统中药在多种方剂中出现。在中医临床应用中,白花败酱草在治疗呼吸系统、消化系统、泌尿生殖系统、妇科、皮肤科等多学科疾病的治疗实践中得到了广泛应用。目前,对于白花败酱草的化学成分研究进展颇丰,已提取分离出81种单体成分,包括苯丙酸类、黄酮类、萜类等多种结构类型。同时,药理学研究发现白花败酱草具有多种明确的药理活性,包括抗肿瘤、消炎镇痛、抑菌以及保护肝脏等,并对其作用机制进行了初步研究探讨。该文在临床功效、化学成分、药理作用等方面对白花败酱草进行了综述,归纳总结现有已发表的研究成果,为其临床应用和进一步研究提供依据和基础。

黄柏、土茯苓、败酱草治疗人乳头瘤病毒感染经验--仝小林三味小方撷萃

人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)感染发病隐匿,病程缠绵难愈,持续性的感染很可能会造成宫颈癌的发生。中医认为,HPV感染属湿毒之邪,仝小林院士临床上常使用扶正驱邪、利湿解毒的方法进行治疗。在态靶辨治的基础上,应用黄柏、土茯苓、败酱草三味小方为基本方加减,明确病态,精准打靶。针对“湿”态,三药均能清热燥湿,针对毒邪,三药均具有解毒疗疮的作用,黄柏可清下焦热,土茯苓清热解毒,败酱草排脓破血,态靶同调。临床黄柏常用剂量为15~30g,土茯苓常用剂量为30~60g,败酱草常用剂量为15~30g,患者应定期复查HPV,根据病情变化,随症治疗。

白花败酱草中异牡荆苷和异荭草苷的高速逆流色谱分离和制备

应用高速逆流色谱分离制备白花败酱草中的异荭草苷和异牡荆苷,以乙酸乙酯∶乙醇∶水(4∶1∶5)为两相溶剂系统,上相为固定相,下相为流动相,流速2.0 mL/m in,主机800 r/m in,检测波长254 nm。以此分离条件经一步洗脱,从300 mg白花败酱草粗提物中制备得到异荭草苷24.1 mg和异牡荆苷49.8 mg,产物纯度经HPLC检测高达98.0%,结构经UV、IR、MS1、H NMR和13C NMR鉴定,二者均为首次从败酱属植物中分离得到。

败酱草质量标准的建立及优化

目的提高和完善中药败酱草的质量标准。方法采用显微鉴别观察败酱草粉末的显微特征,以绿原酸指标对12批败酱草进行薄层鉴别,用高效液相色谱法(HPLC)对败酱草进行指纹图谱研究。结果败酱草粉末显微鉴别、薄层鉴别方法具有较好的专属性,在选定的色谱条件下,得到败酱草的HPLC指纹图谱,同时测定出绿原酸、芦丁关键成分,标定出11个共有峰作为败酱草药材质量评估的关键指标。结论薄层鉴定和显微鉴别可以很好地对败酱草进行定性鉴别,败酱草指纹图谱的确立,建立及优化了败酱草的质量标准。

败酱草质量研究

目的:建立败酱草的薄层鉴别方法(TLC)及HPLC测定东莨菪内酯含量测定方法,为败酱草的质量研究提供依据。方法:采用TLC鉴别法,HPLC作为含量测定方法,色谱柱:Ultimate Plus C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:乙腈-0.5%冰醋酸(15∶85);柱温:25℃;流速:1 mL·min^(-1);检测波长:343 nm。结果:薄层鉴别中检出与对照药材相同颜色的荧光斑点;东莨菪内酯在0.8384~20.96μg·mL^(-1)范围内线性关系良好(函数关系为Y=39.233X+7.0215,r=0.9999),回收率为91.0%~97.9%,均值为95.4%,RSD(n=6)为3%。结论:本方法鉴别专属性较好,含量测定方法专属性、稳定性、重现性、准确度良好,可用于败酱草的质量控制。

GC-MS法检测白花败酱草与黄花败酱草挥发性成分

利用气相色谱-质谱联用(GC-MS)分析白花败酱草与黄花败酱草中挥发性成分.采用水蒸气蒸馏法提取败酱草中挥发性成分,利用气质联用技术对成分进行分析并应用NIST 05a.L标准质谱图库检索鉴定各成分、采用面积归一化法计算各成分的相对百分含量.结果表明:黄花败酱草挥发油中鉴定54个成分,占总量的94.56%.白花败酱草挥发油中共鉴定36种成分,占总量的89.87%.两种挥发油共同含有成分9种,分别为hexanal,2-Pentylfuran,benzeneacetaldehyde,α-Ionene,1,2,3,4-Tetrahydro-1,6,8-trimthylnaphthalene,1,2,3,4-Tetrahydro-1,5,7-trimethylnaphthalene,β-Damascenone,hexahydrofarnesylacetone,palmitic acid.首次对白花败酱草与黄花败酱草挥发性成分进行对比分析,为白花败酱草与黄花败酱草的鉴别、质量评价以及挥发性成分开发利用提供基础.

败酱草治神经性皮炎

鲜败酱草500克,洗净、捣烂,充分拌匀备用。使用时,用两层纱布包裹捣烂的败酱草涂搽患处。每日数次,每次揉擦2~3分钟,一般连续2~3周即可显效或治愈。四川彭州胡佑志成都中医药大学副研究员蒲昭和点评:神经性皮炎,中医称为“顽癣”,此症多是因湿热毒邪侵袭所致,治疗常选择清热解毒、燥湿杀虫类药物为主。败酱草为草本植物黄花败酱、白花败酱的带根全草,本品因晒干后有强烈的臭酱气味,故名败酱草。

败酱草多糖的组成及抗疲劳与耐缺氧作用

目的:评价败酱草多糖(Herba Patriniae polysaccharide,HPP)抗疲劳和耐缺氧的活性。方法:采用水提醇沉法提取HPP,对其基本成分组成进行测定;同时建立小鼠负重游泳模型和耐缺氧模型,同时给予小鼠不同剂量的HPP水溶液,测定小鼠力竭游泳时间与耐缺氧时间以及血乳酸(blood lactic acid,BLA)、血尿素氮的浓度和肌酸激酶(creatine kinase,CK)活性、肝糖原和肌糖原的含量。结果:HPP是一种含蛋白质的多糖,蛋白质含量为13.26%,单糖主要由D-甘露糖、L-鼠李糖、D-半乳糖醛酸、D-葡萄糖、D-半乳糖、L-阿拉伯糖以物质的量比0.53∶0.35∶3.18∶1∶2.72∶1.27组成;服用HPP可使小鼠游泳力竭时间显著延长、肝糖原含量升高,而BLA含量和CK活性均不同程度下降,但耐缺氧时间变化不明显。结论:HPP具有抗疲劳的作用,但其对小鼠的耐缺氧作用不明显。

败酱草中黄酮类化合物的提取及其抗氧化活性

目的:探讨败酱草中黄酮的最佳提取条件及其抗氧化活性。方法:以乙醇体积分数、提取时间、温度、料液比为主要影响因素,以黄酮含量为评价指标,确定最佳提取条件,并通过对羟自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O2·)、NO2的清除效果及对油脂的抗氧化研究其抗氧化活性。结果:在乙醇体积分数60%、提取时间2h、温度70℃、料液比1:20(g/mL)的条件下提取效果最好,败酱草提取物在各抗氧化体系中均表现出较强的抗氧化活性,对两种油脂均有良好的抗氧化效果,且其作用具有剂量效应关系,其抗氧化活性均强于VC。结论:败酱草中含有活性较高的抗氧化成分。

败酱草多糖提取、纯化、鉴定及其体外抗RSV作用研究

目的:提取、分离、纯化和鉴定败酱草多糖(AP4),并研究其对呼吸道合胞病毒的体外抑制作用。方法:经水提取、乙醇沉淀、离心、大孔吸附树脂两次层析、Sevag法脱蛋白得到败酱草多糖(AP4);用茚三酮法和紫外光谱分析鉴定该多糖,并用纸层析法对AP4组成成分进行确定。通过细胞培养法检测AP4对呼吸道合胞病毒增殖的抑制作用。结果:紫外光谱分析未见核酸和蛋白质的特征吸收峰,AP4是由葡萄糖、阿拉伯糖、鼠李糖、岩藻糖、半乳糖、甘露糖、木糖等7种单糖成分组成的多糖。AP4半数中毒浓度(TC50)为10.89 mg/ml,抑制呼吸道合胞病毒的半数有效浓度(EC50)为0.0801 mg/ml,治疗指数(TI)为135.95。结论:AP4是由7种单糖成分组成的多糖,其在Hela细胞中对呼吸道合胞病毒有明显的抑制作用。

白花败酱草化学成分研究

目的∶研究白花败酱草的化学成分。方法:硅胶柱和制备液相色谱分离纯化,理化常数和波谱分析(1H-NMR,13C-NMR,MS)确定结构。结果:从白花败酱草醋酸乙酯和正丁醇萃取部位共分得了7个化合物,分别鉴定为5-羟基-7,3′,4′-三甲氧基黄酮(Ⅰ),5-羟基-7,4′-二甲氧基黄酮(Ⅱ),木犀草素(Ⅲ),槲皮素(Ⅳ),异荭草苷(Ⅴ),异牡荆苷(Ⅵ),8-C-葡萄糖基-7-甲氧基-4′,5-二羟基黄酮(Ⅶ)。结论:Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅴ,Ⅵ,Ⅷ均是首次从败酱属植物中分离得到,Ⅳ是首次从白花败酱草中分离得到。

败酱草多糖的免疫调节作用及对S_(180)荷瘤小鼠的影响研究

目的:探讨败酱草多糖的免疫调节作用及对S_(180)荷瘤小鼠的影响。方法:通过血清溶血素及抗体生成细胞水平试验、碳粒廓清试验评价败酱草多糖是否具有免疫调节作用;采用S_(180)荷瘤小鼠实验,通过对脏器指数及血清白蛋白、VEGF、TNF-α、IL-2、GSH-Px、CAT、SOD、MDA等指标的测定,探讨其抑瘤作用及潜在机制。结果:败酱草多糖可升高小鼠血清溶血素、抗体生成细胞水平及单核巨噬细胞吞噬功能;同时能抑制S_(180)荷瘤小鼠的肿瘤生长,升高小鼠脾脏指数、胸腺指数及血清白蛋白水平;并能升高血清TNF-α、IL-2、GSH-Px、CAT及SOD水平,降低血清VEGF、MDA水平。结论:败酱草多糖具有调节小鼠免疫功能及抑制S_(180)荷瘤小鼠肿瘤生长的作用,其机制与免疫调节及抗氧化作用有关。

败酱草粗多糖抗氧化稳定性的研究

以从败酱草中提取的粗多糖为研究对象,通过设定不同的酸碱度、温度、金属离子和光照条件,以粗多糖溶液对羟自由基(.OH)的清除率反映其抗氧化稳定性。结果表明,粗多糖溶液在pH7和80℃时,清除效果最显著。加入Na+、K+、Ca2+对清除率影响不明显。因此,粗多糖溶液对羟自由基具有良好的清除作用,在含金属离子(Na+、K+、Ca2+)、酸性条件下对抗氧化稳定性影响较好,在碱性、加热、光照的条件下抗氧化稳定性较差。本实验对败酱草粗多糖的抗氧化稳定性进行了初步的研究,为多糖作为抗氧化剂的进一步开发应用提供了一定的理论依据。

白花败酱草黄酮类成分的高速逆流色谱快速制备

目的应用高速逆流色谱分离纯化白花败酱草化学成分。方法利用正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(1∶0.6∶0.6∶1)为两相溶剂系统,主机转速800 r.min-1,上相为固定相,下相为流动相,流速2.0 mL.min-1,检测波长254 nm,所得产物经高效液相色谱法检测,结构经MS1、H-NMR和13C-NMR鉴定。结果6 h内经一步洗脱从400 mg白花败酱草乙酸乙酯萃取物中分离得到纯度高于98%的木犀草素26 mg,5-羟基-7,4′-二甲氧基黄酮15 mg和5-羟基-7,3′,4′-三甲氧基黄酮21 mg。结论3个化合物均为首次从败酱属植物中分离得到,该分离制备法简便、快速、产物纯度高。

反相制备液相色谱分离白花败酱草异戊烯基黄酮

用半制备型反相高效液相色谱(RPLC)对白花败酱草氯仿萃取物进行了分离制备。色谱柱为YWGC18(200 mm×10.0 mm i.d.,10μm),流动相为乙腈∶水∶乙酸(55∶45∶1,V/V),检测波长280 nm,流速4.0mL/m in,进样750μL(样品液浓度30 g/L)。在此条件下一次分离得到5个单体化合物,经理化反应和光谱分析分别鉴定为bolusanthol B(1),(2S)-5,7,2,′6-t′etrahydroxy-6-lavandu lylated flavanone(2),(2S)-5,2,′6-′trihydroxy-2,″2-″d im ethylpyrano[5,″6″∶6,7]flavanone(3),orotin in(4)和orotin in-5-m ethyl ether(5)。其中2和3为新化合物,1、4和5为首次从败酱属植物中分离得到。

白花败酱草提取物对小鼠睡眠功能和自发活动的影响

目的:探讨白花败酱草提取物对小鼠睡眠功能和自发活动的影响。方法:①小鼠(n=36)腹腔注射白花败酱草提取物(0.04和0.06mg/g),15min后放入吊笼中,稳定3min后记录用药后15s内活动波形。②小鼠(n=36)腹腔注射白花败酱草提取物(0.04和0.06mg/g),15min后,腹腔注射阈上剂量的戊巴比妥钠(0.25%)0.02mL/g,观察小鼠翻正反射消失时间。③小鼠(n=36)腹腔注射白花败酱草提取物(0.04和0.06mg/g),15min后,腹腔注射阈下剂量的戊巴比妥钠(0.25%)0.01mL/g,观察小鼠翻正反射消失时间。结果:①白花败酱草提取物(0.04和0.06mg/g)能非常显著抑制小鼠自发活动大、中波次数分别为(24.9±10.6)和(15.6±8.8),与对照组(64.8±16.2)比较,差异有非常显著性意义(t=2.355,3.136;P<0.05～0.01)。②白花败酱草提取物(0.04和0.06mg/g)能显著加速阈上剂量戊巴比妥钠的入睡时间犤(3.6±2.1)和(2.8±1.7)min犦、犤(165.2±68.3)和(189.1±71.7)min犦,和延长戊巴比妥钠的睡眠时间,与对照组比较,差异有显著性意义(t=2.422,3.224;P<0.05～0.01)。③白花败酱草提取物(0.04和0.06mg/g)能显著加速阈下剂量戊巴比妥钠的入睡时间犤(4.3±2.8)和(5.8±3.2)min犦和延长戊巴比妥钠的睡眠时间犤(51.1±42.2)和(58.8±46.3)min犦,与对照组比较。

白花败酱草提取物对小鼠U_(14)宫颈癌细胞的抑制作用

目的研究白花败酱草水提液对小鼠移植性宫颈癌的抑制作用及其机制。方法观察败酱草大、小两个剂量水提液对U14荷瘤小鼠肿瘤生长的抑制率及胸腺和脾腺指数的影响;采用比色分析法检测血清中总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)的变化;采用HE染色,光镜下观察败酱草诱导肿瘤组织细胞分化的程度。结果高、低剂量败酱草水提液均可抑制U14宫颈癌细胞的生长,抑瘤率分别为42.3%、41.75%;同时荷瘤鼠胸腺和脾腺指数明显降低(P<0.01);败酱草水提液可降低U14荷瘤鼠血清MDA水平(P<0.01),提高T-AOC和SOD活性(P<0.01)。HE染色后,败酱草水提液能在一定程度上改善肿瘤组织形态。结论白花败酱草水提液具有抗U14宫颈癌的作用。其机制可能与调节小鼠免疫功能,增强抗氧化防御系统酶活性有关。