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中美山杨茎尖超低温保存技术
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作者 马元东 王兆宁 +5 位作者 韩文哲 田林平 齐雨 李春明 刘焕臻 白卉 《东北林业大学学报》 北大核心 2025年第4期61-66,78,共7页
以中美山杨Z9-1组培苗茎尖为材料,在分化培养基(MS培养基+6-苄氨基嘌呤(6-BA)质量浓度为0.5 mg/L+萘乙酸(NAA)质量浓度为0.05 mg/L+蔗糖质量浓度为20 g/L+琼脂质量浓度为7 g/L)上诱导无菌苗,于生根培养基(0.5倍浓度的MS+吲哚丁酸(IBA)... 以中美山杨Z9-1组培苗茎尖为材料,在分化培养基(MS培养基+6-苄氨基嘌呤(6-BA)质量浓度为0.5 mg/L+萘乙酸(NAA)质量浓度为0.05 mg/L+蔗糖质量浓度为20 g/L+琼脂质量浓度为7 g/L)上诱导无菌苗,于生根培养基(0.5倍浓度的MS+吲哚丁酸(IBA)质量浓度为0.5 mg/L+萘乙酸(NAA)质量浓度为0.02 mg/L+蔗糖质量浓度为20 g/L+琼脂质量浓度为7 g/L)中诱导生根,组培苗按照4周的继代周期继代保存;在试验设计的玻璃化超低温保存程序基础上,采用单因素试验(低温锻炼、预培养、玻璃化溶液处理时间)对保存程序进行优化试验,测定超低温保存后,中美山杨成活率、渗透调节物质(可溶性蛋白、可溶性糖、游离脯氨酸)质量分数、成活茎尖的组织学观察(细胞结构)、遗传稳定性;分析低温锻炼时间、预培养处理、玻璃化溶液处理时间,对中美山杨组培苗超低温保存成活率的影响,筛选最优试验条件,构建中美山杨茎尖玻璃化法超低温保存体系。结果表明:将冷锻炼4周的中美山杨组培苗,剥取茎尖并接种在“蔗糖浓度为0.7 mol/L+甘油浓度为2 mol/L”的预培养基中;4℃黑暗条件培养3 d,室温装载处理20 min;随后用PVS3(蔗糖为50%+甘油为50%)处理60 min,并立即投入液氮冻存1 h;取出后转入40℃水浴中快速化冻1 min,再用卸载溶液在室温下洗涤20 min,置于恢复培养基上暗培养1周后,茎尖成活率为88.89%。利用简单重复序列区间(ISSR)分子标记检测,再生苗的遗传稳定性未发生改变。 展开更多
关键词 中美山杨 茎尖 超低温保存 遗传稳定性
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马尾松种子超低温保存前后转录组测序分析
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作者 张晓宁 徐展武 +5 位作者 张烨 覃子海 魏秋兰 林东 肖玉菲 刘海龙 《种子》 北大核心 2024年第2期53-59,87,共8页
本研究利用Illumina HiSeq^(TM)6000平台对超低温保存前后的马尾松种子进行转录组测序分析,共获得51.79 Gb的过滤数据,冻存前后共鉴定到2 122个差异表达基因,其中823个上调,1 299个下调。GO富集分析表明,163个差异表达基因被显著富集到3... 本研究利用Illumina HiSeq^(TM)6000平台对超低温保存前后的马尾松种子进行转录组测序分析,共获得51.79 Gb的过滤数据,冻存前后共鉴定到2 122个差异表达基因,其中823个上调,1 299个下调。GO富集分析表明,163个差异表达基因被显著富集到33个GO条目中;KEGG富集分析表明,169个差异表达基因显著富集到79条代谢通路。根据KO和KEGG结果,从富集到植物激素信号转导通路、植物MAPK信号通路、淀粉和蔗糖代谢通路、转录因子通路上的基因中,筛选出19个差异表达基因。 展开更多
关键词 马尾松 种子 超低温保存 转录组测序 差异表达基因
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南方红豆杉悬浮细胞超低温保存体系的建立
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作者 俞嘉卿 邱涵 +3 位作者 余文捡 钱宇星 黄林 魏赛金 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期118-127,共10页
【目的】紫杉醇具有广谱抗癌作用,但其在红豆杉中含量极低,已无法满足日益增长的临床需求。目前,红豆杉悬浮细胞培养技术被认为是解决紫杉醇稀缺的有效途径之一,然而细胞经过连续不断传代后容易发生遗传性变异,导致细胞生长状态不佳,合... 【目的】紫杉醇具有广谱抗癌作用,但其在红豆杉中含量极低,已无法满足日益增长的临床需求。目前,红豆杉悬浮细胞培养技术被认为是解决紫杉醇稀缺的有效途径之一,然而细胞经过连续不断传代后容易发生遗传性变异,导致细胞生长状态不佳,合成紫杉醇的能力下降。研究提出一个优化的超低温保存南方红豆杉悬浮细胞的方法以解决这一难题。【方法】以南方红豆杉悬浮细胞为材料,采用单因素试验,研究预培养温度、预培养时间、预处理剂、脱水时间、冷冻保护剂及解冻温度对细胞存活的影响,并在此基础上以细胞存活率为优化目标对超低温保存条件进行响应面优化。【结果】根据单因素试验筛选出3个显著影响因素,分别为蔗糖浓度、脱水时间、解冻温度;通过响应面优化获得细胞最佳保存条件为:南方红豆杉悬浮细胞首先在B5培养基中预培养12 d,预培养温度为5℃,然后室温下用6.6%蔗糖预处理30 min,去除预处理剂,加入20%乙二醇+35%甘油+10%DMSO+10%山梨醇作为冷冻保护剂,在0℃条件下脱水处理31 min,0℃冰浴30 min,-20℃放置2 h,最后放入-80℃冰箱中保存14 d。冷冻后的悬浮细胞在41℃水浴60 s迅速解冻,接着用含1.2 mol/L蔗糖的B5培养基洗涤去除保护剂,最后在B5培养基上对悬浮细胞进行恢复性培养。经过上述冻存处理的南方红豆杉悬浮细胞存活率可达68.19%。【结论】建立了南方红豆杉悬浮细胞的超低温保存体系,并对其进行了优化,取得了一定的冻存效果,这为南方红豆杉及其他药用植物细胞的长期维持提供了技术参考。 展开更多
关键词 南方红豆杉 悬浮细胞 超低温保存
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改良超低温保存箱制备新鲜冰冻血浆的质量分析
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作者 周竞 阎兵 +3 位作者 戴书明 傅强 达倩倩 艾俊 《中国输血杂志》 CAS 2024年第7期816-819,826,共5页
目的 观察分析使用改良后的超低温保存箱,对制备新鲜冰冻血浆(FFP)的质量影响。方法 选取2023年7—11月采集的400 mL的合格全血标本80例(去除O型),实验分为4组,每组标本20例。A组:使用传统低温冰箱速冻1 h后,放入-30℃冷库储存;B组:使... 目的 观察分析使用改良后的超低温保存箱,对制备新鲜冰冻血浆(FFP)的质量影响。方法 选取2023年7—11月采集的400 mL的合格全血标本80例(去除O型),实验分为4组,每组标本20例。A组:使用传统低温冰箱速冻1 h后,放入-30℃冷库储存;B组:使用平板速冻机速冻1 h后,放入-30℃冷库储存;C组:使用改良超低温保存箱速冻1 h后,放入-30℃冷库储存;D组:使用新改良超低温保存箱速冻1 h并储存12 h后,放入-30℃冷库储存。检测4组标本凝血因子FⅧ和纤维蛋白原(Fg)的含量。结果 B、C、D 3组的FⅧ含量均显著高于A组,有统计学差异(P<0.05),B、C、D 3组之间FⅧ含量差异无统计学意义(P>0.05),4组之间的Fg含量差异均没有统计学意义(P>0.05)。结论 新改良的超低温保存箱在制备FFP的质量上优于低温冰箱的传统制备工艺,与平板速冻机制备效果差异无统计学意义,但改良式的超低温保存箱兼顾储存功能,可以使FFP的制备流程更加灵活,可以提高成分制备工作的效率。 展开更多
关键词 新鲜冰冻血浆 FⅧ 超低温保存
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玻璃化超低温保存对独占春原球茎生理生化特性影响 被引量:1
5
作者 韩豫 崔雨童 +2 位作者 陈彧 饶丹丹 吴二焕 《东北林业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期8-12,共5页
为探明兰花稀缺品种独占春(Cymbidium eburneum Lindl.)玻璃化超低温保存技术中成活率较低的问题,以独占春原球茎为研究对象,研究了玻璃化超低温保存技术对其生理生化特性的影响,并分析了各生理指标之间的相互关系。结果表明:逆境胁迫中... 为探明兰花稀缺品种独占春(Cymbidium eburneum Lindl.)玻璃化超低温保存技术中成活率较低的问题,以独占春原球茎为研究对象,研究了玻璃化超低温保存技术对其生理生化特性的影响,并分析了各生理指标之间的相互关系。结果表明:逆境胁迫中,含水量随玻璃化超低温保存进程缓慢降低,卸载处理迅速降低,其含水量是对照处理的79.06%;相对电导率逐渐升高,卸载处理达到最高(86.36%);氧化损伤指标中的丙二醛(MDA)质量摩尔浓度显著升高,玻璃化处理达到最大;蛋白质羰基(PCO)质量摩尔浓度则是先升高后降低再升高,玻璃化处理质量摩尔浓度最低;氧化物质指标中的过氧化氢酶(CAT)活性和抗坏血酸(ASA)质量摩尔浓度变化趋势一致,均先升高后降低,且预培养处理达最大值;超氧化物歧化酶(SOD)活性先降低后升高,呈现双峰变化趋势;活性氧成分中H_(2)O_(2)和·OH质量摩尔浓度在玻璃化处理均达到最大值,且H_(2)O_(2)质量摩尔浓度变化趋势和CAT活性变化趋势在玻璃化超低温保存进程中表现为相互抑制。通过相关性分析,CAT活性和超氧自由基(O·-2)质量摩尔浓度呈极显著正相关,和H_(2)O_(2)质量摩尔浓度呈显著负相关,表明氧化酶物质对活性氧成分具有清除作用。 展开更多
关键词 独占春 原球茎 玻璃化超低温保存 生理生化特性
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银杏愈伤组织超低温保存的研究 被引量:35
6
作者 徐刚标 李美娥 +1 位作者 郑从义 易文 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2001年第3期30-34,共5页
本文对银杏子叶愈伤组织进行了超低温保存研究。结果表明 ,冰冻保护剂、冷冻速度对解冻后材料相对存活率影响较大 ,冻前预培养和预冻至某一温度停留一段时间也较为重要。在含高浓度山梨醇或甘露醇的培养基上预培养 2d的愈伤组织 ,用 10 ... 本文对银杏子叶愈伤组织进行了超低温保存研究。结果表明 ,冰冻保护剂、冷冻速度对解冻后材料相对存活率影响较大 ,冻前预培养和预冻至某一温度停留一段时间也较为重要。在含高浓度山梨醇或甘露醇的培养基上预培养 2d的愈伤组织 ,用 10 %二甲基亚砜 +0 .5mol·L- 1 山梨醇作为冰冻保护剂 ,以 1℃·min- 1 速度降温 ,在 - 15℃、- 35℃分别停留 10min和 30min后 ,投入液氮中保存 1d ,细胞相对存活率可达 6 0 %以上。再培养时 ,细胞能恢复生长。 展开更多
关键词 银杏 子叶 愈伤组织 超低温保存 种质保存
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怀山药种质资源的玻璃化法超低温保存 被引量:23
7
作者 李明军 洪森荣 +4 位作者 徐鑫 张晓丽 刘欣英 柳俊 谢从华 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期288-292,共5页
本文对怀山药种质资源的玻璃化法超低温保存技术进行了研究。结果表明,怀山药带芽茎段玻璃化法超低温保存较佳的技术体系是继代生长60d的怀山药无菌苗置4℃冰箱低温锻炼7d;在无菌条件下切取1~1.5cm的带芽茎段,转至含5%蔗糖+3%... 本文对怀山药种质资源的玻璃化法超低温保存技术进行了研究。结果表明,怀山药带芽茎段玻璃化法超低温保存较佳的技术体系是继代生长60d的怀山药无菌苗置4℃冰箱低温锻炼7d;在无菌条件下切取1~1.5cm的带芽茎段,转至含5%蔗糖+3%甘露糖的培养基内,置4℃冰箱预培养2d;用60%的PVS1(22%甘油+13%乙二醇+13%聚乙二醇+10%二甲基亚砜)在室温下处理60min,再用100%的PVS1在0℃条件下处理60min,随即迅速投入液氮;保存24h后,在37℃水浴中快速化冻,用含5%蔗糖的MS培养液洗涤4次,每次停留10min;转至再生培养基(MS+KT 2mg/L+NAA 0.02mg/L)再培养,成活率可达77.14%,再生苗与常温苗形态指标差异不大。 展开更多
关键词 怀山药 种质资源 玻璃化法 超低温保存 存活率
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铁皮石斛种子、原球茎和类原球茎体的超低温保存研究 被引量:27
8
作者 王君晖 张毅翔 +2 位作者 刘峰 黄纯农 葛霁光 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期59-61,共3页
对珍稀濒危植物铁皮石斛的种子、原球茎和类原球茎体进行了液氮超低温保存研究。把4个月龄的种子脱水至含水量为12%~19%,能获得较高的冻后存活率(95%)和较快的恢复生长速率。种子在0.5mol/L脱落酸培养基上萌发3... 对珍稀濒危植物铁皮石斛的种子、原球茎和类原球茎体进行了液氮超低温保存研究。把4个月龄的种子脱水至含水量为12%~19%,能获得较高的冻后存活率(95%)和较快的恢复生长速率。种子在0.5mol/L脱落酸培养基上萌发3周所形成的原球茎,用玻璃化保护剂PVS2处理15min,其冻后存活率可达88%。将生长旺盛的暗培养类原球茎体的含水量在6~7d内干燥至30%±2%,其冻后存活率可达48%~80%。 展开更多
关键词 铁皮石斛 种子 原球茎 类原球茎体 超低温保存 冻后存活率 珍稀濒危植物
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植物种质资源超低温保存现状及其研究进展 被引量:45
9
作者 陈晓玲 张金梅 +2 位作者 辛霞 黄斌 卢新雄 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期414-427,共14页
根据联合国粮农组织2010年发布的世界各国的《第二份世界粮食和农业植物遗传资源现状报告》以及有关国际会议和相关文献资料,从超低温保存材料类型、基本程序、方法技术、理论基础、影响因素、保存费用、保存策略和保存现状、实际应用... 根据联合国粮农组织2010年发布的世界各国的《第二份世界粮食和农业植物遗传资源现状报告》以及有关国际会议和相关文献资料,从超低温保存材料类型、基本程序、方法技术、理论基础、影响因素、保存费用、保存策略和保存现状、实际应用等方面综述了全球植物种质资源超低温保存现状及其研究进展,展望了植物种质资源超低温保存技术的应用前景,旨在加强非正常型种子植物种质资源的安全长期保存。文章最后分析了我国存在的差距,提出了今后努力方向和发展的建议。 展开更多
关键词 植物 种质资源 超低温保存 研究进展
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大黄鱼精液的高效超低温保存 被引量:18
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作者 肖志忠 陈雄芳 +3 位作者 丁福红 刘清华 徐世宏 李军 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期1-4,72,共5页
采用2 mL的冷存管和程序降温仪高效超低温保存大黄鱼(Pseudosciaena croce)精液。分析比较了5种不同浓度抗冻剂(二甲基亚砜、乙二醇、丙二醇和甘油和甲醇)、3种降温速率(10,20和30℃/min)和2种解冻温度(28℃和43℃)对大黄鱼精液超低温... 采用2 mL的冷存管和程序降温仪高效超低温保存大黄鱼(Pseudosciaena croce)精液。分析比较了5种不同浓度抗冻剂(二甲基亚砜、乙二醇、丙二醇和甘油和甲醇)、3种降温速率(10,20和30℃/min)和2种解冻温度(28℃和43℃)对大黄鱼精液超低温保存效果的影响。实验结果表明,采用Hanks’作为稀释液,10%~20%甘油或10%DMSO作为抗冻剂,20℃/min的降温速率对精液进行超低温保存43℃水浴解冻,冻精激活后获得理想的运动率(76.6%±11.4%~80.0%±12.6%),而且对10%甘油保存的冻精进行人工授精实验获得了与新鲜精液相似的受精率和孵化率。 展开更多
关键词 超低温保存 抗冻剂 大黄鱼(Pseudosciaena croce) 精液 运动率 受精率
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香蕉茎尖的玻璃化法超低温保存及其植株再生 被引量:24
11
作者 吴黎明 曾继吾 +3 位作者 彭抒昂 易干军 周碧容 吴元立 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期501-506,共6页
以香蕉(Musa spp.)为试材,对其离体培养茎尖玻璃化法超低温保存影响因素进行研究.结果表明,不定芽在MS+3.0~5.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA的培养基上分化较好.香蕉茎尖超低温保存较佳体系是:2.0~3.0 cm的茎尖在含0.4 mol/L蔗糖培... 以香蕉(Musa spp.)为试材,对其离体培养茎尖玻璃化法超低温保存影响因素进行研究.结果表明,不定芽在MS+3.0~5.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA的培养基上分化较好.香蕉茎尖超低温保存较佳体系是:2.0~3.0 cm的茎尖在含0.4 mol/L蔗糖培养基上预培养2 d,剥取带1~2个叶原基的茎尖(长1.0~1.5 mm),室温(25℃)下装载液(MS+2 mol/L甘油+0.4 mol/L蔗糖)装载20~30 min,然后用玻璃化溶液(PVS2)于0℃下处理40 min,换1次PVS2后迅速投入液氮.保存至少1 h后,在40℃水浴中化冻90 s,用1.2 mol/L蔗糖培养液洗涤2次,每次10 min,然后转入含0.3 mol/L蔗糖的MS培养基上,暗培养10~15 h后转移到含0.5 mg/L 6-BA的MS培养基中,暗培养1周后转移到正常光下,3个香蕉品种(巴西蕉、广东香蕉2号、广东粉蕉1号)的成活率分别为75.9%、40.0%和69.6%,再生率分别为63.4%、35.0%和63.4%.再生植株生长和分化正常,生根后可移栽成活. 展开更多
关键词 香蕉 茎尖 超低温保存 玻璃化法
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超低温保存法去除马铃薯X病毒和马铃薯纺锤块茎类病毒 被引量:33
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作者 白建明 陈晓玲 +3 位作者 卢新雄 郭华春 辛霞 张志娥 《分子植物育种》 CAS CSCD 2010年第3期605-611,共7页
病毒病严重危害马铃薯生产,是造成马铃薯减产和品质下降的主要因素。PVX和PSTVd属于危害马铃薯最主要的病毒。本文尝试用超低温保存法和常规方法(茎尖分生组织培养、温热疗法以及温热疗法结合茎尖分生组织培养)来去除马铃薯试管苗中的PS... 病毒病严重危害马铃薯生产,是造成马铃薯减产和品质下降的主要因素。PVX和PSTVd属于危害马铃薯最主要的病毒。本文尝试用超低温保存法和常规方法(茎尖分生组织培养、温热疗法以及温热疗法结合茎尖分生组织培养)来去除马铃薯试管苗中的PSTVd和PVX。结果显示马铃薯茎尖经过超低温保存后,存活率和成苗率分别为83.64%和72.04%,高于茎尖分生组织培养(46.67%和31.49%)、温热疗法(72.22%和44.44%)以及温热疗法结合茎尖分生组织培养(50.54%和30.38%)。4种方法都可以去除PVX,其中超低温保存法的脱毒率最高,为59.13%,温热疗法结合茎尖分生组织培养为56.02%,温热疗法和茎尖分生组织培养较低,为42.61%和35.83%。但是4种方法都未能有效地去除PSTVd类病毒,只能通过严格检疫来控制。 展开更多
关键词 马铃薯 PSTVD PVX 超低温保存 茎尖分生组织培养
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中华乌塘鳢精子的生物学特性及其超低温保存 被引量:28
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作者 江世贵 苏天凤 +2 位作者 喻达辉 陈竞春 周立新 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期119-122,共4页
对中华乌塘鳢精子激活的生理生态学进行了研究 ,探讨了中华乌塘鳢精子超低温保存方法。中华乌塘鳢精子激活的适宜盐度为 5~ 15 ;其精子的激活不仅与激活溶液盐度有关 ,而且与激活溶液的离子成份有关 ,激活溶液中K+ 的存在在一定程度上... 对中华乌塘鳢精子激活的生理生态学进行了研究 ,探讨了中华乌塘鳢精子超低温保存方法。中华乌塘鳢精子激活的适宜盐度为 5~ 15 ;其精子的激活不仅与激活溶液盐度有关 ,而且与激活溶液的离子成份有关 ,激活溶液中K+ 的存在在一定程度上对精子的活动有抑制作用 ;中华乌塘鳢精子对pH的适应性强 ,在pH 5 .5~ 9.5范围内 ,激活率均在 70 %以上 ,尤以中性及弱酸性条件下的激活率最高 ,在pH 6 .0时精子活力最好。使用筛选出的精子保存液 ,以二甲亚砜 (DMSO)为抗冻保护剂 ,采用快速冷冻和解冻方法 ,成功地进行中华乌塘鳢精子超低温保存 ,解冻后的中华乌塘鳢精子激活率达 90 %以上 ,受精率达 80 %以上。 展开更多
关键词 中华乌塘鳢 精子 激活 超低温保存
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番茄花粉超低温保存的研究 被引量:37
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作者 赵树仁 武丽英 +1 位作者 姚民昌 程爱华 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 1993年第1期66-70,共5页
对影响花粉超低温保存效果的因素进行了研究,结果表明在—25℃下进行低温锻炼可提高在液态氮(—196℃,LN)中冰冻保存花粉的生存率;负压环境对花粉的超低温保存有积极作用;自来水冲洗是液氮保存番茄花粉的较佳解冻方法;在液氮温度下,没... 对影响花粉超低温保存效果的因素进行了研究,结果表明在—25℃下进行低温锻炼可提高在液态氮(—196℃,LN)中冰冻保存花粉的生存率;负压环境对花粉的超低温保存有积极作用;自来水冲洗是液氮保存番茄花粉的较佳解冻方法;在液氮温度下,没有观察到花粉游离脯氨酸(Pro)含量的变化;液氮中保存的番茄花粉能正常授粉结实,并能产生种子。 展开更多
关键词 种质 花粉 超低温保存 番茄
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板栗种子超低温保存研究 被引量:20
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作者 郑郁善 陈礼光 +2 位作者 李庆荣 林镇斌 吴擢溪 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2002年第6期146-149,共4页
The quality character, the dehydrogenase activities and the α amylase activity of Castanea mollissima conserved materials, including the seeds and the excised embryos, were analyzed for purpose of the feasibility of ... The quality character, the dehydrogenase activities and the α amylase activity of Castanea mollissima conserved materials, including the seeds and the excised embryos, were analyzed for purpose of the feasibility of long term storage associated with cryopreservation. The results showed that moisture content was the critical factor deciding the cryopreservation effects of seeds, which were desiccated down to 20% necessarily. Under the conditions of the cryoprotectants, the freezing injury reduced largely, and dehydrogenase activities remained well. Moreover the cryoconserved scale of moisture content was enlarged. A proper combination of cryopreserved factors contributed to maintain the seed vigor, the dehydrogenase activity and α amylase activity of excised embryos during cryopreservation. 展开更多
关键词 板栗 超低温保存 种子活力 种子保存 顽拗性种子
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植物组织培养物的超低温保存 被引量:31
16
作者 苗琦 谷运红 +1 位作者 王卫东 秦广雍 《植物生理学通讯》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期350-354,共5页
对超低温保存技术的研究历史、基本原理、方法、影响因素和国内外植物组织培养物超低温保存的研究进展作了介绍,并对这一问题的前景作了展望。
关键词 超低温保存 组织培养物 植物 低温保存技术 研究历史 基本原理 研究进展 国内外
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黄皮种子的保湿贮藏及胚轴的超低温保存 被引量:18
17
作者 陆旺金 金剑平 +1 位作者 向旭 傅家瑞 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期7-11,共5页
以典型的顽拗性种子黄皮(Clausenalansium)为材料,研究了其种子的保湿贮藏及胚轴的超低温保存.结果表明:部分脱水的生理成熟期种子,每100g种子混入4~6g百菌清贮于15℃,800多d后仍保持较高的发芽率... 以典型的顽拗性种子黄皮(Clausenalansium)为材料,研究了其种子的保湿贮藏及胚轴的超低温保存.结果表明:部分脱水的生理成熟期种子,每100g种子混入4~6g百菌清贮于15℃,800多d后仍保持较高的发芽率及种子活力.经梯度蔗糖、梯度蔗糖加脱落酸(Abscisicacid,ABA)及110g/L蔗糖(Sucrose,Suc蔗糖)+20μmol/LABA预培养的生理成熟期胚轴,脱水8~10h后加入预冷的冰冻保护剂直接入液氮(LiquidNitrogen,LN),24h后取出,37℃水浴化冻并转移至30g/LSuc的木本植物培养基(WoodyPlantMedium,WPM)中恢复生长,两个月后再转移至含不同组合的萘乙酸(αnaphthaleneaceticacid,NAA)和6-基腺嘌呤(6-Benzy-ladenine,6-BA)的30g/LSuc的WPM培养基中生长两个月,发现:梯度蔗糖预培养的胚轴生根率为50%,而经梯度蔗糖加ABA及110g/LSuc+20μmol/LABA预培养的胚轴则分别保持30%及10%的生根率,并能诱导产生少量的愈伤组织;用新鲜的胚轴及子叶为外植体,能诱导产生愈伤组? 展开更多
关键词 黄皮 种子 保湿贮藏 离体胚轴 超低温保存
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马氏珠母贝精子的超低温保存 被引量:19
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作者 王梅芳 余祥勇 +2 位作者 刘永 毛勇 于非非 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期170-174,共5页
通过比较不同pH值(5.5-9.5)、不同盐度的海水等作为基础液对马氏珠母贝精子保存的影响,选择其中无激活精子作用又对其生理特性(活力,寿命,受精能力等)无影响者,加入二甲亚砜抗冻剂配制成超低温保存的抗冻保护液,精液与保护液... 通过比较不同pH值(5.5-9.5)、不同盐度的海水等作为基础液对马氏珠母贝精子保存的影响,选择其中无激活精子作用又对其生理特性(活力,寿命,受精能力等)无影响者,加入二甲亚砜抗冻剂配制成超低温保存的抗冻保护液,精液与保护液按1:10和1:20的比例混合,样品按4组不同的降温程序平衡后转入液氮冷冻,比较其超低温冻存的效果。结果表明:以海水(pH7.5—8.0)为基础液,配制10%DMSO作为抗冻保护液,精液与保护液比例为1:20,在低温(0-4℃)中平衡约30min,在距液氮面15cm、5cm处分别停留5min、10min后转入液氮(-196℃),冻存精子效果良好。冷冻24h、48h及5个月后,在38—40℃下水浴解冻复苏后,用终浓度0.25‰的氨海水刺激,精子存活率可超过60%,受精率可达80%。 展开更多
关键词 马氏珠母贝 精子 超低温保存
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魔芋花粉的低温和超低温保存 被引量:75
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作者 张玉进 张兴国 刘佩瑛 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期139-140,共2页
利用干燥法和玻璃化法 ,魔芋花粉能够在 4℃下保存 1个月 ,- 2 0℃下保存 6个月 ;魔芋花粉经液氮超低温 (- 196℃ )保存后 ,有明显的“冷刺激”现象 ,即保存花粉比新鲜花粉有更高的离体萌发率。
关键词 魔芋 花粉 低温保存 超低温保存 冷刺激现象
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桃花粉低温和超低温保存方法比较研究 被引量:15
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作者 张金梅 闫文君 +5 位作者 李雪 黄斌 张海晶 赵剑波 姜全 陈晓玲 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期670-675,共6页
桃(Prunus persica(L.)Batsch)是我国重要的无性繁殖作物种质资源,目前主要保存于3个国家无性繁殖作物种质圃。随着以茎尖、花粉、休眠芽为保存载体的超低温保存技术的发展,超低温保存已成为无性繁殖作物重要备份保存方式。本研究以15... 桃(Prunus persica(L.)Batsch)是我国重要的无性繁殖作物种质资源,目前主要保存于3个国家无性繁殖作物种质圃。随着以茎尖、花粉、休眠芽为保存载体的超低温保存技术的发展,超低温保存已成为无性繁殖作物重要备份保存方式。本研究以15份桃种质花粉为研究对象,开展含水量、回湿处理和保存温度(4℃低温保存和液氮超低温保存)对保存后花粉离体萌发率的影响研究。研究结果:明确了桃种质花粉超低温保存的含水量;揭示了回湿处理对部分桃种质花粉超低温保存产生显著影响;超低温保存后花粉离体萌发率最高可达83%;4℃低温保存和超低温保存比较研究结果表明,超低温保存4年后14份桃种质花粉离体萌发率仍可保持30%以上,11份桃种质花粉离体萌发率与保存前花粉离体萌发率相比无显著变化甚至显著提高,而4℃低温保存的花粉离体萌发率降至0。该研究为国家种质库建立花粉规模化超低温保存提供技术支撑。 展开更多
关键词 花粉 4℃低温保存 超低温保存 离体萌发 监测
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