超高效液相色谱-质谱/质谱联用法测定白酒中的甜蜜素

目的：以SN/T 1948-2007标准为参考，建立了准确快速测定白酒中甜蜜素的超高速液相色谱-质谱/.质谱分析方法。方法：以甲醇和0.1%的乙酸为流动相，样品经挥发酒精后用水定容，采用C18柱分离，在ESI负离子模式下定量测定，并在ESI正离子模式下定性确认。结果：甜蜜素含量在5.00～100μg/L的范围内与峰面积有良好的线性关系，检出限可达5μg/L；在三个添加水平下，样品平均加标回收率分别为106.0%，102.8%、102.0%，重复性RSD2.1%；完成一个样品的检测时间少于10 min。结论：该方法用于白酒中甜蜜素测定快速、准确。

超高速液相色谱-质谱联用法测定金耳环中5种成分的含量

目的建立同时测定金耳环药材中3,4,5-三甲氧基甲苯、3,5-二甲氧基甲苯、甲基丁香酚、马兜铃内酰胺I(AL-I)和7-甲氧基马兜铃内酰胺IV(7-OCH3-AL-IV)5种成分含量的超高速液相色谱-质谱联用(UFLC-MS/MS)方法,并研究5种成分在金耳环药材不同药用部位中的分布。方法岛津Shimadzu Shim-pack XR-ODSⅢ色谱柱(2.0 mm×75 mm,1.6μm),流动相为0.1%甲酸-甲醇,梯度洗脱,柱温40℃,大气压化学电离离子源(APCI),正离子检测模式,多反应监测扫描模式(MRM)测定。结果5种成分的分离度良好,标准曲线在检测范围内均呈良好线性。金耳环药材不同部位中3,4,5-三甲氧基甲苯、3,5-二甲氧基甲苯、甲基丁香酚、AL-I和7-OCH3-AL-IV的含量范围分别是1.50~16.71、28.59~177.20、2.46~22.48、46.39~324.04、12.95~251.04 ng·mg^-1;其中花和叶中7-OCH3-AL-IV的含量[(52.14~251.04)ng·mg^-1]均高于根中含量[(28.54~40.73)ng·mg^-1];花中AL-I的含量[(171.93~324.04)ng·mg^-1]远高于根部含量[(78.44~124.56)ng·mg^-1];花和叶部两种马兜铃内酰胺总含量大于根部;根茎、叶和花中甲基丁香酚的含量[(3.57~22.48)ng·mg^-1]均大于同样品根中的含量[(2.46~7.29)ng·mg^-1]。结论本实验建立的方法操作简单,结果准确,具有较好的重复性和稳定性,其中金耳环中3,4,5-三甲氧基甲苯、3,5-二甲氧基甲苯和甲基丁香酚的含量为首次报道。由AL-I、7-OCH3-AL-IV和甲基丁香酚在不同部位的含量测定结果来看,金耳环应该以根入药,根茎、叶和花部位应该摘除,并谨慎使用。

SPE-UFLC-MS法测定医药废水中8种四环素类抗生素

建立了固相萃取-超高速液相色谱质谱(SPE-UFLC-MS)法测定医药废水中8种四环素类抗生素的方法。通过固相萃取条件优化,选择固相Oasis HLB萃取柱、净化剂为30%ZnSO_(4)+20%K_(2)[Fe(CN)_(4)]溶液、稳定剂为1g·L^(-1)的Na_(2)EDTA、萃取pH值为8,获得最佳目标化合物萃取回收率。8种四环素类抗生素的标准曲线线性关系良好(r>0.999),且检出限低于10ng·L^(-1),平均回收率为95.3%~106.9%,相对标准偏差RSD小于8.23%。方法精密度和准确度较好。经实样测试,医药废水的调质池中除地美环素盐酸盐和二甲胺四环素盐酸盐外,其他6种四环素类抗生素均有不同程度检出,可为医药废水抗生素类化合物检测提供借鉴。

基于UFLC-MS/分子模拟计算的吴茱萸醇提取物中胆碱酯酶抑制剂筛选

采用超高速液相色谱⁃质谱(UFLC⁃MS)研究了吴茱萸醇提取物中入血小分子化合物的体内药代动力学过程.同时对UFLC⁃MS生物样品分析方法进行包括特异性、线性、精密度、准确度、稳定性、基质效应和回收率等考察,结果表明,该方法稳定可靠,且醇提取物中10个生物碱类化合物均被胃肠道快速吸收,并且多数化合物血药浓度在1~2 h左右达到峰值.将吸收入血的10个生物碱类化合物与乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱脂酶进行柔性分子对接及构效关系分析,发现其中活性最高的为去氢吴茱萸碱、吴茱萸碱、吴茱萸次碱和吴茱萸酰胺Ⅰ4个吲哚型生物碱,它们与乙酰胆碱酯酶的对接打分均在-46.02 kJ/mol以下;与丁酰胆碱脂酶对接打分均在-41.84 kJ/mol以下.吴茱萸碱、吴茱萸次碱、去氢吴茱萸碱和吴茱萸酰胺可能是以乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱脂酶为靶点的胆碱酯酶抑制剂前体化合物.

人参皂苷Re对阿尔茨海默病模型小鼠脑组织生物标记物调控作用的研究

目的通过超高速液相色谱-质谱联用(UPLC-MS)技术研究人参皂苷Re(G-Re)对阿尔茨海默病(AD)模型小鼠生物标记物的调控作用以及机制,为AD的中药治疗提供新思路。方法将小鼠随机分为对照组、AD模型组和G-Re治疗组,通过免疫组化实验观察小鼠脑部海马区细胞的病理学改变,运用以UPLC-MS为基础的代谢组学技术研究G-Re对AD模型小鼠脑组织生物标记物的调控作用。结果免疫组化实验发现,对照组小鼠海马区无Aβ沉积,AD模型组小鼠海马区可见大量Aβ沉积,经G-Re治疗后小鼠海马区Aβ沉积明显减少。代谢组学分析发现,AD模型组小鼠脑组织中存在次黄嘌呤、次黄嘌呤核苷、苯丙氨酸、16碳鞘氨醇、植物鞘氨醇、溶血磷脂酰胆碱C16:0、溶血磷脂酰胆碱C18:1、溶血磷脂酰胆碱C18:0等9种生物标记物。与对照组比较,AD组次黄嘌呤、次黄嘌呤核苷和苯丙氨酸的含量明显升高(P<0.05),16碳鞘氨醇、植物鞘氨醇、溶血磷脂酰胆碱(C16:0、C18:1、C18:0)的含量明显降低(P<0.05)。经G-Re干预后,AD组小鼠脑组织中次黄嘌呤、次黄嘌呤核苷和苯丙氨酸的含量明显降低(P<0.05),16碳鞘氨醇、植物鞘氨醇、溶血磷脂酰胆碱(C16:0、C18:1、C18:0)的含量明显升高(P<0.05)。结论 G-Re可以干预AD小鼠体内氨基酸、核酸及脂质等代谢途径,减少小鼠海马区的Aβ沉积,从而对AD起到治疗作用。

UPLC-MS-MS同时快速检测水样中5种有机污染物

水样中联苯胺、甲萘威、莠去津、呋喃丹和丙烯酰胺5种有机物是国标规定优先控制有机污染物。5种有机物在水样中一般含量较低,衍生化或富集预处理复杂繁琐,普通色谱检测过程耗时较长。利用超高速液相色谱-串联质谱(UPLC-MS-MS)的高灵敏度和超高流速,采用多反应检测模式(MRM)和简单外标定量方法直接进样,同时快速检测了重庆主城区某水厂水源水和出厂水中5种有机物的浓度,将总检测时间从42 h缩短为6 min。5种有机物在该方法中的定量检测限分别为0.100、0.928、0.655、1.18和0.297μg/L,方法精密度RSD<10%(n=7),加标回收率范围为80%~118%。

UPLC-MS/MS测定鱼肉中4种硝基呋喃类药物代谢物残留量的方法研究

建立了基于UPLC-MS/MS分析技术的,能够快速检测鱼肉中硝基呋喃类3-氨基-2-恶唑烷酮(AOZ)、5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮(AMOZ)、1-氨基-2-乙内酰(AHD)、氨基脲(SEM)4种残留检测方法。实验样品经盐酸溶液水解后,邻苯基甲醛衍生16 h,用氢氧化钠溶液将提取液调至弱碱性,用正己烷去除脂肪等杂质,高速离心除去蛋白质等杂质后,加入氯化钠、乙腈萃取提取液,将目标物转移至乙腈层,加入等量的0.1%甲酸水溶液稀释后过滤膜,滤液上UPLC-MS/MS分析,以多离子反应检测模式(MRM)方式进行数据采集,采用同位素内标法进行定量。结果表明,4种硝基呋喃类代谢物在浓度0.1~2.0 ng/ml呈良好线性关系,相关系数(R^2)均不小于0.995,检出限为0.5μg/kg。在0.5、1.0、5.0μg/kg添加水平下,目标分析物的加标回收率为94.3%~96.4%,相对标准偏差为3.0%~4.5%(n=5)。该方法无需采用乙酸乙酯提取,无需将提取液吹干,无需采用固相萃取柱净化,减少操作步骤,节省实验时间、实验成本,具有操作简单、快捷、低成本、高效、灵敏度高等特点,可作为鱼肉中4种硝基呋喃类兽药代谢物残量同时分析的快速检测方法。

在线SPE-UPLC-MS-MS同时快速检测水样中6种优先控制痕量有机物

水样中微囊藻毒素、联苯胺、甲萘威、莠去津、呋喃丹和丙烯酰胺6种化合物是国标规定优先控制有机污染物。6种有机物在水样中一般含量较低,衍生化或富集预处理复杂繁琐,普通色谱检测过程耗时较长。利用在线固相萃取—超高速液相色谱—串联质谱(在线SPE—UPLC—MS—MS)的高灵敏度和高流速,采用多反应检测模式(MRM)和简单外标定量方法,直接进样同时快速检测了重庆主城区某水厂水源水和出厂水中6种有机物的浓度。6种有机物在该方法中的定量检测限分别为19.4ng/L,20ng/L,15.9ng/L,18.6ng/L,19.3ng/L和17.2ng/L。

在线SPE-UPLC-MS-MS快速检测水样中3种痕量类固醇雌激素

雌酮(E1)、17β-雌二醇(E2)和17α-乙炔基雌二醇(EE2)是雌情活力最强的3种类固醇雌激素(SEs)。3种SEs在水样中一般含量很低,富集预处理繁琐耗时,且普通高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS-MS)检测过程也耗时较长。利用在线固相萃取-超高速液相色谱-串联质谱(在线SPE-UPLC-MS-MS)的在线SPE功能和超高流速,采用多反应检测模式(MRM)和内标定量方法,直接进样同时快速检测了重庆主城区某水厂水源水和出厂水中3种SEs的浓度。方法全过程检测时间由8.5h大幅缩减为仅11min。3种SEs在该方法中的定量检测限分别为0.500ng·L^(-1),0.200ng·L^(-1)和0.100ng·L^(-1),符合相关国际标准要求。

UFLC-MS/MS法分析不同来源白芷中9个新型呋喃香豆素

目的:超高速液相色谱-质谱联用(UFLC-MS/MS)技术分析不同来源白芷中9个新型呋喃香豆素(杭白芷香豆素A、B、C、D、E、F、G、H、J)的含量。方法:甲醇超声提取白芷,提取物经UFLC-MS/MS分析,色谱柱为Kinetex~?C_(18)(100 mm×2.1 mm,2.6μm),流动相为乙腈和水,梯度洗脱,流速为0.5 mL·min^(-1)。选择电喷雾离子源,在正离子模式下进行检测,定量分析选用多反应监测模式。对来源于重庆市南川县、安徽省亳州市、湖南省郡东县、吉林省通化市、黑龙江省绥棱县、中国台湾台中市和花莲县样品中的上述9个成分的含量进行测定。结果:经过优化,9个呋喃香豆素可在12 min内被准确定量。系统适用性、线性、检测下限、定量下限、精密度、回收率、稳定性经验证良好。不同产地白芷中上述9个成分含量变化差异极大。结论:该方法准确、高效,灵敏度高,可用于白芷中9个新型呋喃香豆素的含量测定。

中药复方茯苓汤有效成分的初步研究

目的:通过化学分析及不同中药组合的药效学实验揭示临床用于治疗湿疹的中药复方茯苓汤的主要有效成分及活性物质群。方法:采用超高速液相色谱-二极管阵列检测器-电喷雾-质谱(UFLC-DAD-ESI-MS)法分析复方茯苓汤的主要化学成分;在化学轮廓测定的基础上,依据主要物质峰的来源对中药组方进行了拆分并设立了4组中药组合(Ⅰ-Ⅳ),Ⅰ组为茯苓,泽泻,黄柏,栀子,赤芍,浮萍,当归,甘草8味中药组方后的水提物,Ⅱ组为栀子,赤芍,甘草3味中药组方的水提物,Ⅲ组为茯苓,当归2味中药组方的水提物,Ⅳ组为茯苓,栀子,赤芍,当归,甘草5味中药组方的水提物。用2,4-二硝基氟苯(DNFB)诱发的小鼠变应性接触性皮炎(ACD)为动物模型,比较ig不同中药组合(Ⅰ-Ⅳ)及阳性对照氢化可的松和阴性对照生理盐水的药效学指标,观察中药对小鼠耳质量、耳厚度、耳真皮炎性细胞浸润以及血清细胞因子的影响。结果:UFLC-DAD-ESI-MS代谢轮廓分析获得了复方茯苓汤中的11个主要化学成分信息,其中京尼平龙胆双糖苷、京尼平苷、芍药苷和甘草苷为其主要化学成分。与生理盐水组比较,各中药组和氢化可的松组对诱发皮炎前后小鼠的耳质量差、耳厚度差及真皮炎症细胞浸润的影响均有显著差异(P<0.05),其中,Ⅰ组、Ⅳ组和氢化可的松组更优(P<0.01)。结论:复方茯苓汤的主要药效成分多来源于栀子,赤芍,甘草,茯苓和当归5味中药。