藏红花素通过跨膜受体蛋白/发状分裂相关增强子1信号通路对缺氧诱导的视网膜神经节细胞凋亡的影响

目的探讨藏红花素对缺氧诱导的视网膜神经节细胞凋亡的作用及其可能机制。方法于2021年1月至2022年1月采用不同浓度藏红花素处理视网膜神经节细胞RGC-5,四甲基噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活情况并筛选合适浓度。培养RGC-5细胞并用氯化钴(CoCl_(2))处理建立缺氧模型,分为缺氧组、藏红花素组、阳性对照(抗坏血酸)组和藏红花素+跨膜受体蛋白信号通路抑制剂(DAPT)组,另设对照组。Cell counting kit-8法检测细胞存活情况;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;钙荧光探针(Flou-4)实验检测各组细胞钙离子水平;实时定量PCR法检测跨膜受体蛋白(Notch1)、发状分裂相关增强子1(Hes-1)mRNA表达情况;蛋白质印迹法检测凋亡蛋白B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)、Bcl-2相关蛋白(Bax)、钙依赖性蛋白酶家族1(Cal⁃pain1)蛋白表达情况。结果藏红花素组细胞活力0.83±0.08高于缺氧组0.45±0.04,细胞凋亡率(17.92±1.21)%低于缺氧组(51.82±5.36)%,钙离子水平0.27±0.04低于缺氧组0.76±0.05,差异有统计学意义(P<0.05);藏红花素+DAPT组细胞活力0.50±0.06低于藏红花素组0.83±0.08,细胞凋亡率(36.50±3.50)%高于藏红花素组(17.92±1.21)%,钙离子水平0.65±0.05高于藏红花素组0.27±0.04,差异有统计学意义(P<0.05)。与缺氧组比较,藏红花素组Bcl-2蛋白表达水平升高,Notch1、Hes-1mRNA表达、Bax和Calpain1蛋白表达水平降低(P<0.05)。与藏红花素组比较,藏红花素+DAPT组Bcl-2蛋白表达水平降低,Notch1、Hes-1mRNA表达、Bax和Calpain1蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论藏红花素对体外培养的缺氧RGC-5细胞凋亡有一定的抑制作用,可能是通过抑制钙离子内流,阻滞Notch1/Hes-1通路,提高细胞内抑凋亡蛋白Bcl-2表达水平发挥作用。

狭窄通道红细胞跨膜传质特性数值分析

随着对血液微流动过程的不断探索,红细胞在微通道中的运动微观特性备受关注,利用流体力学特性的低损伤手段调控细胞体积并完成跨膜传药也逐渐成为研究热点.为了分析红细胞在微通道中的传质和力学特性及其影响因素,采用浸入式边界法研究细胞穿越狭窄通道的整个运动过程,并考虑细胞膜表面透水传质效应,完成细胞跨膜传质过程的数值建模,实现对狭窄通道中红细胞跨膜传质过程微观的传质特性数值分析.研究表明,细胞在挤入、排出狭缝的运动过程中,体积先损失、后恢复,在这个过程中,细胞头部和尾部以向外的渗透流出为主,中间部位则以向内的渗透流入为主.文章的研究进一步表明,狭缝挤压过程中的体积净变化是由向内和向外渗透速度的大小差异引起的,而与向内和向外渗透的膜面积差异并无明显关系.对体积变化的影响因素探究后发现,更狭窄的通道和更大的入口出口角均会引起细胞发生更多的体积损失和体积恢复,且出口角的变化会引起细胞体积恢复后所达到的体积稳定值:在固定入口角时,狭缝出口角越大,细胞离开狭缝后的稳定体积越小;细胞的硬度越大、细胞膜通透性(渗透系数)越大,细胞在狭缝中运动过程中的体积损失和体积恢复程度越高.

木质素单体跨膜转运的技术研究进展

木质素(lignin)作为一种重要的可再生资源,主要集中在植物的次生细胞壁中,在植物的营养物质运输、机械支持和病原体防御等生理过程中发挥着关键作用。木质素的形成过程包括3个主要环节:单体的胞内合成、跨膜转运以及胞外聚合。深入探究木质素单体跨膜转运的分子机制,对揭示细胞壁形成分子机制及木材改良具有重要意义。基于此,本综述从转录组学、基因工程、点击化学、荧光显微成像、分子模拟等技术角度,对木质素单体跨膜转运的相关进展和最新技术进行了梳理和总结,阐述了木质素单体跨膜转运相关研究的新技术和存在的技术瓶颈,并对比分析了不同技术之间的优缺点,最后提出了木质素单体跨膜转运机制研究中仍存在的问题和面临的挑战。相信随着成像技术、结构生物学、人工智能等科技的飞速发展,将为进一步阐明木质素单体跨膜转运的分子机理提供有效的技术手段。期望本综述为木质素单体的相关研究提供新的思路和方法。

跨膜蛋白质在恶性肿瘤中作用的研究进展

跨膜蛋白质(TMEMs)是一种横跨脂质生物膜的蛋白质家族,它作为生物膜上的通道蛋白质发挥着重要的生理作用。TMEMs在恶性肿瘤中表达上调促进恶性肿瘤进展,例如TMEM16A、TMEM206,也有表达下调促进恶性肿瘤发展的TMEM100,以及在不同恶性肿瘤的表达相反的TMEM98,可作为肿瘤的治疗靶点和预后标志物。此外,TMEMs通过不同上下游调控因子通过Wnt、AKT信号通路的发挥作用,以及在某些恶性肿瘤细胞中对顺铂相关化学耐药性有进一步的研究。

胃癌组织MutL同系物1、羧基张力蛋白、跨膜丝氨酸蛋白酶4蛋白表达与患者临床病理特征、上皮间质转化及术后3年预后的关系

目的:探讨胃癌组织MutL同系物1(MLH1)、羧基张力蛋白(CTEN)、跨膜丝氨酸蛋白酶4(TMPRSS4)蛋白表达与患者临床病理特征、上皮间质转化(EMT)及术后3年预后的关系。方法:选择胃癌患者62例,取手术切除的癌组织及癌旁组织,行免疫组织化学法检测MLH1、CTEN、TMPRSS4蛋白表达,分析临床病理特征、EMT标志物和术后3年预后与蛋白表达的相关性。结果:胃癌组织CTEN、TMPRSS4蛋白阳性表达率高于癌旁组织,MLH1阳性表达率低于癌旁组织(均P<0.05)。胃癌组织上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)阳性表达率分别为37.09%、64.52%、75.80%,CTEN、TMPRSS4蛋白阳性表达与E-cadherin呈负相关,与Vimentin和N-cadherin表达呈正相关(均P<0.05);MLH1阳性表达与Vimentin、N-cadherin呈负相关,与E-cadherin呈正相关(均P<0.05)。胃癌组织MLH1、CTEN、TMPRSS4蛋白阳性表达与TNM分期有关(均P<0.05)。术后3年随访结果显示,62例患者中44例存活(存活组),18例病死(病死组),存活组MLH1阳性表达率高于病死组,CTEN、TMPRSS4阳性表达率低于病死组(均P<0.05)。结论:CTEN、TMPRSS4在胃癌中高表达,且与Vimentin和N-cadherin表达呈正相关,与E-cadherin表达呈负相关。MLH1在胃癌中低表达,与Vimentin、N-cadherin表达呈负相关,与E-cadherin表达呈正相关。三者均与TNM分期密切相关。胃癌患者中,MLH1阳性表达率较高者术后3年预后较好。

粒子特性对纳米粒子跨膜输运过程的影响

纳米粒子由于其特异性强、选择性高等特点被广泛用作药物载体,研究纳米粒子与生物膜相互作用机制具有重要的理论和实际意义.文章采用自洽场理论研究了纳米粒子跨膜运输的过程,系统探讨了纳米粒子特性对粒子跨膜输运过程的影响.结果表明,纳米粒子穿膜过程中,通过挤压双层膜形成特定通道,从而促使粒子进入囊泡.通过计算不同特性纳米粒子进入囊泡过程中体系的自由能、熵、焓的变化情况,进一步分析了粒子跨膜运输的物理机制,并找到了纳米粒子穿膜的最佳形状,为进一步理解纳米粒子与生物膜相互作用机制提供了参考.

跨膜emp24转运蛋白家族在人类恶性肿瘤中的研究进展

跨膜emp24转运蛋白(TMED)家族是一种跨膜蛋白,在早期胚胎发育、器官形成、先天免疫信号传导、细胞增殖等许多方面发挥重要作用。近年来,TMED家族在恶性肿瘤方面的研究备受关注,其异常表达与肿瘤的发生、发展、侵袭、转移及预后都有很大关系。最新研究发现,TMED在不同恶性肿瘤中呈现出不同程度的表达,其中包括乳腺癌、肝癌、卵巢癌、结直肠癌、宫颈癌等,其促进肿瘤发展的机制十分复杂。文章就TMED在恶性肿瘤中的研究现状及作用机制进行综述,为肿瘤的预防和治疗提供新的思路。

无人机航拍技术赋能生物复习课的实践——以“物质跨膜运输的实例”为例

“物质跨膜运输的实例”一直是教学的重难点。以无人机航拍技术为载体,以模型构建为手段,以班级活动的形式在高中生物第一轮复习中帮助学生进行知识点的梳理和内化,引导学生自主提出问题、讨论问题、解决问题。对“无人机技术进课堂”做了新颖尝试,并提出了将无人机航拍和生物教学相结合的具体操作路径。

不同预冲量联合跨膜预冲法对维持性血液透析患者白细胞计数影响的研究

研究不同预冲量联合跨膜预冲法对维持性血液透析患者白细胞计数的影响。方法 纳入2021 年 1月至 2023 年 6月在柳州市工人医院血液透析室维持性血液透析患者100例为研究对象,随机分为两组,每组各50例。对照组和试验组预冲量分别为 0.9%生理盐水 700ml和1500ml,每组冲洗各6次,两组均联合跨膜预冲法。比较两组治疗开始时和治疗15分钟后患者的白细胞计数,比较两组透析低血压和高血压发生率、凝血发生率。结果 两组患者治疗前后白细胞计数没有差异(P>0.05);对照组患者治疗15分钟后白细胞计数较试验组显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);试验组透析低血压的发生率明显低于对照组(P<0.05);治疗后,实验组的凝血程度恢复明显比对照组好,其中凝血程度0级和Ⅰ级的占比96%,而对照组凝血程度0级和Ⅰ级的占比90%。结论 根据患者实际情况选择不同预冲量联合跨膜预冲法可以有效减少对白细胞计数的影响,有效减少透析低血压的发生率,改善血流动力学稳定性,确保透析充分性,值得临床推广和应用。

分析宫腔粘连患者子宫内膜中Notch跨膜受体-1及缺氧诱导因子-1α表达水平

目的分析宫腔粘连患者子宫内膜中Notch跨膜受体-1(Notch1)及缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达水平。方法选取37例非宫腔粘连患者作为对照组,75例宫腔粘连患者作为宫腔粘连组。比较两组患者宫腔组织中Notch1及HIF-1αmRNA表达水平,比较不同严重程度宫腔粘连组患者Notch1、HIF-1αmRNA表达水平及蛋白表达水平,分析Notch1、HIF-1α表达水平与宫颈粘连严重程度相关性。结果相比对照组,宫腔粘连组Notch1mRNA及HIF-1αmRNA均显著更高,差异有统计学意义(P<0.05)。重度组患者Notch1、HIF-1αmRNA及蛋白表达水平高于中度组及轻度组(P<0.05),中度组患者Notch1HIF-1αmRNA表达水平及蛋白表达水平均高于轻度组(P<0.05)。Notch1及HIF-1α表达水平与宫腔粘连严重程度成正相关(P<0.05)。结论宫腔粘连患者子宫内膜中Notch1及HIF-1α有着相对较高的表达水平,Notch1HIF-1α表达水平与宫腔粘连严重程度成正相关。

获得性囊性纤维化跨膜传导调节因子功能障碍及炎性因子在儿童鼻-鼻窦炎中的表达特征分析

目的探讨获得性囊性纤维化跨膜传导调节因子(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator,CFTR)功能障碍及炎性细胞因子在儿童鼻-鼻窦炎发展中的作用。方法纳入2021年1—12月在首都医科大学附属北京儿童医院耳鼻咽喉头颈外科因急慢性鼻-鼻窦炎行鼻内镜手术治疗31例患儿,其中慢性鼻窦炎(chronic rhinosinusitis,CRS)患儿17例(CRS组),急性细菌性鼻窦炎(acute bacterial rhinosinusitis,ABRS)患儿14例(ABRS组)。收集所有患儿的全血、鼻黏膜及鼻息肉样本,应用全外显子二代测序技术检测全血样本中CFTR基因的表达情况,q RT-PCR检测息肉和黏膜组织中CFTR mRNA的表达水平,微量样本多重蛋白定量技术(cytometric bead array,CBA)检测息肉和黏膜组织中炎性细胞因子的表达水平。结果根据CFTR基因检测结果,所有入组患儿均排除囊性纤维化。ABRS组鼻黏膜组织CFTR mRNA的表达水平明显低于CRS组,而CRS组鼻息肉组织CFTR mRNA的表达水平明显低于鼻黏膜组织。ABRS组鼻黏膜组织γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)、IL-13、IL-6、IL-8的表达水平明显高于CRS组(P<0.05),而CRS组鼻息肉组织IL-6、IL-8、单核细胞趋化因子-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)的表达水平明显高于鼻黏膜组织(P<0.01)。结论获得性CFTR功能障碍及与中性粒细胞趋化相关的炎性因子在ABRS中的作用更为明显,在CRS息肉的发生发展中也可能起到一定作用。

前列腺六段跨膜上皮抗原4对炎症环境下前列腺癌细胞增殖的影响

目的探讨脂多糖(LPS)诱导的炎症微环境下前列腺六段跨膜上皮抗原4(STEAP4)在前列腺癌发展中的作用。方法采用LPS诱导前列腺癌细胞PC3和VCa P的炎症环境;将PC3和VCa P细胞分为对照组、LPS处理组(将PC3和VCa P细胞暴露于1μg/ml的LPS)、转染对照组(LPS+转染si-con)和转染沉默组(LPS+转染si-STEAP4)。转染24 h后采用蛋白免疫印迹检测STEAP4水平。采用酶联免疫吸附试验检测细胞因子白细胞介素(IL)-6、IL-8和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平。采用CCK-8和Ed U染色检测细胞增殖能力。采用蛋白免疫印迹检测环鸟苷酸(c GMP)-c GMP依赖性蛋白激酶(PKG)信号通路相关蛋白表达水平。结果LPS处理组PC3和VCa P细胞的STEAP4蛋白表达水平显著高于对照组(P<0.05);LPS处理组PC3和VCa P细胞的STEAP4蛋白表达水平与转染对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);转染沉默组PC3和VCa P细胞的STEAP4蛋白表达水平显著低于转染对照组(P<0.05)。LPS处理组PC3和VCa P细胞的IL-6、IL-8和TNF-α的表达水平显著高于对照组(P<0.05);LPS处理组和转染对照组PC3和VCa P细胞的IL-6、IL-8和TNF-α的表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);转染沉默组PC3和VCa P细胞的IL-6、IL-8和TNF-α的表达水平显著低于转染对照组(P<0.05)。LPS处理组PC3和VCa P细胞24、48、72 h的增殖活力均显著高于对照组(P<0.05);LPS处理组和转染对照组PC3和VCa P细胞24、48、72 h的增殖活力比较,差异无统计学意义(P>0.05);转染沉默组PC3和VCa P细胞24、48、72 h的增殖活力均低于转染对照组(P<0.05)。LPS处理组PC3和VCa P细胞的增殖活力显著高于对照组(P<0.05);LPS处理组和转染对照组PC3和VCa P细胞的增殖活力比较,差异无统计学意义(P>0.05);转染沉默组PC3和VCa P细胞的增殖活力显著低于转染对照组(P<0.05)。LPS处理组PC3和VCa P细胞中c GMP、PKG1、PKG2和磷酸化血管扩张剂刺激磷酸蛋白(pVASP)/VASP的相对表达量显著低于对照组(P<0.05);转染对照组和LPS处理组PC3和VCa P细胞中c GMP、PKG1、PKG2和pVASP/VASP的相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05);转染沉默组的PC3和VCa P细胞中c GMP、PKG1、PKG2和pVASP/VASP的相对表达量显著高于转染对照组(P<0.05)。结论STEAP4沉默能够抑制LPS诱导的前列腺癌细胞的增殖和炎症反应。STEAP4下调可能通过减少细胞增殖和炎症反应来抑制LPS诱导的肿瘤发生。

连续性肾脏替代治疗过程中跨膜压与体外循环凝血风险的关系研究

目的 探讨连续性肾脏替代治疗(CRRT)过程中跨膜压(TMP)变化与体外循环凝血的关系,确定凝血发生前TMP的预警值。方法 回顾性分析2019年1月-2021年8月在我院急诊重症监护室行CRRT治疗的50例患者共计473例次治疗的数据,根据其是否发生凝血分为未凝血组(n=398例次)和凝血组(n=75例次),包括患者的基本信息、CRRT前24 h内的血常规、凝血指标、血钙水平、治疗过程中的抗凝方式、血流速和TMP等。采用单界点P值最小法寻找TMP的最佳分界值,采用单因素和多因素Cox回归模型分析TMP与体外循环凝血的关系,同时运用寿命表法估计CRRT体外循环凝血风险的概率并绘制生存曲线。结果 在473例次CRRT治疗中,发生体外循环凝血75例次(15.9%),主要发生在治疗的第3~15 h。多因素Cox回归模型分析显示,下机前1 h的TMP是体外循环凝血风险的预测因素[HR=1.011,95%CI(1.007,1.015),P<0.001];以TMP 86 mmHg(1 mmHg≈0.133 kPa)为分界点再次拟合模型,下机前1 h TMP>86 mmHg是体外循环凝血风险的预测因素[HR=9.597,95%CI(5.166,17.829),P<0.001]。结论 TMP升高是CRRT体外循环凝血风险的预测因素。当肾脏替代治疗过程中TMP持续升高,尤其是升高至86 mmHg以上时,应警惕体外循环凝血的发生。

胆管闭锁患儿肝脏组织中跨膜转运蛋白39A表达观察

目的通过观察胆管闭锁患儿肝脏组织中跨膜转运蛋白39A(TMEM39A)的表达变化,初步探讨TMEM39A与胆管闭锁发病的关系。方法选取胆管闭锁患儿30例纳入病例组,同期收治的先天性胆总管囊肿患儿30例纳入对照组。分别采用免疫组化法和Western blotting法检测两组患儿肝脏组织中的TMEM39A蛋白,采用RT-qPCR法检测TMEM39A mRNA。结果免疫组化检测结果显示,TMEM39A蛋白主要分布在汇管区周围肝细胞胞质内,病例组TMEM39A蛋白相对表达量高于对照组(分别为0.695±0.137、0.375±0.096,P<0.05);Western blotting检测结果显示,病例组TMEM39A蛋白相对表达量高于对照组(分别为0.624±0.082、0.352±0.082,P<0.05)。病例组TMEM39A mRNA相对表达量高于对照组(分别为5.724±1.490、2.338±0.984,P<0.05)。结论胆管闭锁患儿肝脏组织中TMEM39A蛋白及mRNA呈高表达,TMEM39A异常表达可能与胆管闭锁的发病有关。

囊性纤维化跨膜转运调节体氯离子通道——跨上皮离子转运的多功能引擎(英文)

囊性纤维化跨膜转运调节体(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator,CFTR)是ATP结合转运体超家族(ATP- binding cassette transporter superfamily)的一名特殊成员,因为它是一个具有相当复杂调控机制的氯离子通道。CFTR由五个结构域(domain)组成:两个跨膜结构域(membrane-spanning domains,MSDs),两个核苷酸结合域(nucleotide-binding domains,NBDs)和一个特殊的调控域(regulatory domain,RD)。MSDs构成一个低电导(6～12 pS)的阴离子选择性孔道(pore),其形状如同不对称的沙漏,胞外小胞内大,狭窄部分为离子筛。两个NBDs组成头尾相对的二聚体,在二聚体之间的接触面上有两个能和ATP结合的位点(位点1和位点2)。CFTR的门控机制是:ATP分子与位点1和2相互作用促使NBD二聚体的结合与解离,从而引起MSDs的构象发生变化进而使通道孔打开和关闭。RD具有多样化的结构,它含有多个磷酸化共有位点(consensus phosphorylation sites)。RD的磷酸化促进NBDs与ATP的结合,从而使CFTR得以激活。CFTR通过支架蛋白与其它膜受体以及蛋白激酶、磷酸酶形成大分子信号复合体。在复杂的细胞信号系统参与下,CFTR的功能活动在时间和空间上得到精确的调控。此外,CFTR的活动与细胞代谢有紧密联系:CFTR与代谢酶形成大分子复合体,当细胞能量需求增加时,CFTR活动会受到抑制而使细胞能量得以保存。CFTR广泛分布于机体上皮组织,它通过促进水盐转运而控制上皮细胞分泌物的量与组成。值得注意的足,在呼吸道,CFTR还对机体的防御机制起重要作用。CFTR功能失常严重影响跨上皮离子转运,进而引起或加重某些疾病。

体外消化对β-胡萝卜素大豆分离蛋白纳米颗粒黏液层渗透及跨膜转运的影响机制

纳米载体体内吸收过程复杂,受生物吸收屏障影响,纳米制剂在促进活性分子吸收利用度方面受到质疑。本实验采用大豆分离蛋白(soy protein isolate,SPI)制备包埋β-胡萝卜素的植物基纳米颗粒(β-carotene loaded soy protein isolate nanoparticles,BC-SPIs),并通过体外模拟消化模型研究BC-SPIs在消化过程中的结构特性变化。同时,通过Caco2细胞转运模型考察消化条件对消化后BC-SPIs跨膜转运的影响机制。此外,利用含黏液层的Caco2-HT29共培养模型考察消化前后BC-SPIs的黏液层渗透性。研究发现,在消化前,BC-SPIs可以直接通过网格蛋白和小窝蛋白依赖的内吞作用被Caco2单层细胞吸收;而在经过体外模拟消化后,BC-SPIs粒径增大,可以通过网格蛋白依赖的内吞作用、小窝蛋白依赖的内吞作用以及巨胞饮3种内吞形式被细胞直接吸收。消化后的BC-SPIs带有更高的负电荷,跨越黏液层屏障的能力提高了0.48倍,同时β-胡萝卜素的跨膜转运量提高了0.56倍。本研究明确了BC-SPIs在消化前和消化后的不同吸收途径,揭示了BC-SPIs在模拟消化条件下与胆盐互作及尺寸增大对其细胞转运吸收效率的促进作用。这些发现可为进一步提高纳米载体在生物利用度方面的应用潜力提供理论参考,有助于推动纳米技术在药物、保健品等领域的发展。

跨膜浓度梯度对渗透压囊泡循环活性的调控

本文通过分析囊泡在膨胀状态与孔隙状态的动力学行为,揭示调控膨胀拉伸能与孔隙势能的内在物理参量.建立递推微分方程的分析模型,该模型提供了膨胀-破裂循环特征量膨胀系数在各个循环中初始跨膜浓度梯度依赖性的定量信息.研究得出,通过增加初始跨膜浓度梯度,可加快膨胀系数增长速率(循环数为1时,初始跨膜浓度梯度增加3倍,膨胀系数增长速率增加2.65倍);随着循环数的增多,膨胀系数的增长由线性转变为非线性.此外,初始跨膜浓度梯度与循环次数密切相关,我们的模型计算预测增加初始跨膜浓度梯度可实现循环次数的增多.研究结果为靶组织以可编程方式释放活性生物治疗剂的发展提供了具有实际意义的理论依据.

跨膜4域亚家族成员6D基因敲除致雄性小鼠生育力降低实验研究

目的:探讨跨膜4域亚家族成员6D(Ms4a6d)基因敲除对雄性小鼠生育力的影响。方法:采用聚合酶链式反应(PCR)鉴定小鼠基因型,将Ms4a6d^(-/-)雄鼠和野生型C57小鼠分别与同龄野生型雌鼠合笼交配,统计各组雌鼠怀孕产仔情况,收集睾丸组织,称重并计算器官指数,评估附睾尾精子数量、运动参数等变化情况,通过形态学分析和HE染色评估小鼠睾丸组织形态学变化,采用免疫荧光染色分析睾丸巨噬细胞变化。结果:Ms4a6d^(-/-)雄鼠子代数目显著低于WT雄鼠(P<0.05);Ms4a6d^(-/-)雄鼠睾丸体积及质量均减少(均P<0.05);Ms4a6d^(-/-)雄鼠附睾尾精子浓度下降(P<0.05),各项运动参数未见统计学差异(P>0.05);睾丸组织切片HE染色结果显示Ms4a6d^(-/-)雄鼠睾丸曲细精管直径及管腔厚度均明显减少,支持细胞、精原细胞、初级精母细胞及精子细胞均减少;免疫荧光结果显示Ms4a6d^(-/-)雄鼠睾丸巨噬细胞受到影响。结论:Ms4a6d基因敲除干扰了雄性小鼠睾丸的发育,并造成生精小管直径减少、厚度变薄,附睾尾部精子数量显著下降,从而使成年雄鼠的生育力显著下降。

半硫杂竹脲[6]大环分子的合成与离子跨膜转运性质测定——推荐一个大学综合化学实验

介绍了一个以半硫杂竹脲[6]大环分子(stBU[6])为研究对象的综合实验,涉及制备、表征、性能测试等实验基础步骤。该实验与学科热点、学术前沿紧密结合,科教融合,通过一系列荧光测试,引导学生了解离子跨膜传输的作用机制,熟悉大型仪器使用,为学生拓展视野、提高综合实践能力等打好基础。

磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸3-激酶催化亚基α通过调控跨膜受体蛋白1对子宫内膜癌病人中性粒细胞的影响

目的探究磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸3-激酶催化亚基α(PIK3CA)基因通过调控跨膜受体蛋白1(Notch1)的表达对子宫内膜癌病人血中性粒细胞的影响。方法选择2020年3月至2021年9月在海南医学院第一附属医院接受治疗的50例子宫内膜癌病人(病例组)和50例健康女性(对照组)为分析对象。检测病例组和实验组血清中中性粒细胞(NE)、淋巴细胞(LY)、血红蛋白(Hb)、血小板(PLT),计算NLR指数(中性粒细胞计数/淋巴细胞计数)。逆转录PCR(RT-PCR)和Western blotting检测PIK3CA和Notch1的相对表达量。选取人原髓细胞白血病细胞/全反式维甲酸细胞(HL-60/ATRA细胞),在不同时间下进行培养,验证PIK3CA通过Notch1对NE的影响。结果病例组病人NE、LY、PLT指标以及NLR指数为(6.03±0.40)×10^(9)/L、(2.15±0.31)×10^(9)/L、(257.40±37.51)×10^(9)/L、(3.69±0.41)分别高于对照组的(5.13±0.50)×10^(9)/L、(1.68±0.16)×10^(9)/L、(202.10±23.39)×10^(9)/L、(2.44±0.39),病例组病人Hb水平为(138.72±13.79)g/L低于对照组Hb水平(149.52±10.65)g/L,说明子宫内膜癌病人炎症微环境异常。病例组PIK3CA和Notch1相对表达量为(3.351±0.496)、(3.467±0.440)高于对照组的(1.581±0.275)、(1.519±0.279)。HL-60/ATRA细胞培养实验验证了PIK3CA高表达促进Notch1高表达进而抑制NE的增殖。结论在NE中,Notch1表达量随着PIK3CA表达量升高而升高,NE细胞活力逐渐下降,初步证实了PIK3CA基因通过调控Notch1的表达对子宫内膜癌中NE产生影响。