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怀地黄基因片段及其中转座酶基因的克隆与序列分析 被引量:5
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作者 周延清 姚换灵 +4 位作者 段红英 周春娥 张永华 陈艳梅 张喻 《河南农业科学》 CSCD 北大核心 2012年第1期106-109,共4页
根据已知裂叶牵牛花PNZIP启动子碱基序列的相关信息设计引物,采用PCR方法,从怀地黄基因组中扩增出5个基因片段,回收和克隆出其中一个1 096bp的基因片段。经过NCBI对比分析,发现它是一个类似转座子的相关蛋白基因序列,含有一个完整的开... 根据已知裂叶牵牛花PNZIP启动子碱基序列的相关信息设计引物,采用PCR方法,从怀地黄基因组中扩增出5个基因片段,回收和克隆出其中一个1 096bp的基因片段。经过NCBI对比分析,发现它是一个类似转座子的相关蛋白基因序列,含有一个完整的开放阅读框,大小为450bp,编码由150个氨基酸组成的转座酶。然后,基于该开放阅读框的碱基序列,设计另一对引物,用PCR方法,从中扩增出该完整开放阅读框的序列片段。 展开更多
关键词 怀地黄 转座酶基因 基因克隆 开放阅读框 序列分析
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鲍曼不动杆菌烧伤分离株推定转座酶基因(tnpU)研究 被引量:3
2
作者 黄璇 潘宇红 +2 位作者 程华莉 陈蓉芳 张烽 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期509-511,共3页
目的研究鲍曼不动杆菌烧伤分离株携带推定转座酶基因(tnpU)的情况。方法用PCR方法对20株鲍曼不动杆菌烧伤患者分离株的tnpU进行检测,并对1株PCR产物进行基因测序及BLASTn比对。结果20株鲍曼不动杆菌烧伤患者分离株均检出tnpU基因,所测的... 目的研究鲍曼不动杆菌烧伤分离株携带推定转座酶基因(tnpU)的情况。方法用PCR方法对20株鲍曼不动杆菌烧伤患者分离株的tnpU进行检测,并对1株PCR产物进行基因测序及BLASTn比对。结果20株鲍曼不动杆菌烧伤患者分离株均检出tnpU基因,所测的1株tnpU序列与己在美国NCBI注册的6条tnpU序列相同。结论本组烧伤病房患者多重耐药鲍曼不动杆菌分离株tnpU阳性率高达100%,tnpU对进一步研究氨基糖苷类药物耐药机制有重要意义。 展开更多
关键词 鲍曼不动杆菌 耐药基因 转座酶基因
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PiggyBac转座酶转基因小鼠模型的建立 被引量:4
3
作者 马元武 王冬梅 +2 位作者 廉虹 王贵利 张连峰 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2012年第3期60-64,共5页
目的建立表达PiggyBac转座酶转基因小鼠模型,为研究PiggyBac转座子介导基因修饰在小鼠中的应用提供工具。方法利用Cytomegalovirus(CMV)启动子驱动PiggyBac转座酶基因的表达,经显微注射法建立C57BL/6J表达PiggyBac转座酶的转基因小鼠。... 目的建立表达PiggyBac转座酶转基因小鼠模型,为研究PiggyBac转座子介导基因修饰在小鼠中的应用提供工具。方法利用Cytomegalovirus(CMV)启动子驱动PiggyBac转座酶基因的表达,经显微注射法建立C57BL/6J表达PiggyBac转座酶的转基因小鼠。PCR鉴定转基因小鼠的基因型,RT-PCR检测PiggyBac转座酶在小鼠生殖系睾丸中的表达情况。PiggyBac转座酶转基因小鼠活性的检测,是通过与转座子供体转基因小鼠杂交检测供体位置变化来确定的。结果显微注射产生7只转基因小鼠并能传代,经RT-PCR筛选出一株在睾丸中相对高表达PiggyBac转座酶的转基因小鼠。随后与转座子供体转基因小鼠杂交,子代双阳小鼠与野生型小鼠杂交基因型分离,产生的子代转座子供体单阳性小鼠中具有转座子供体片段的转座反应。结论成功建立了表达Piggy-Bac转座酶转基因小鼠动物模型,该模型为PiggyBac转座子技术在小鼠中的应用提供了有价值的工具动物。 展开更多
关键词 DNA转座 PIGGYBAC 转座酶 基因小鼠
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不同启动子控制下Ac转座酶基因的表达对玉米Ds因子在水稻中切离频率的影响 被引量:2
4
作者 陈游 张景六 《植物生理与分子生物学学报》 CAS CSCD 2001年第3期207-214,共8页
用水稻愈伤组织比较了Ac启动子、3 5S启动子与Ubi启动子控制下Ac转座酶基因 (Ts)的表达对Ds因子切离频率的影响。结果表明Ubi启动子与Ac转座酶编码区嵌合基因 (Ubipro Ts)反式激活Ds因子的切离频率最高 ,达到了 72 .9%。通过杂交将Ubipr... 用水稻愈伤组织比较了Ac启动子、3 5S启动子与Ubi启动子控制下Ac转座酶基因 (Ts)的表达对Ds因子切离频率的影响。结果表明Ubi启动子与Ac转座酶编码区嵌合基因 (Ubipro Ts)反式激活Ds因子的切离频率最高 ,达到了 72 .9%。通过杂交将Ubipro Ts基因导入Ds因子转化植株 ,得到 9株Ubipro Ts基因与Ds因子共存的F1代杂交水稻植株 ,其中有 8株Ds因子发生了切离。用Inverse PCR的方法从其中一株杂交植株中克隆到Ds因子的旁邻序列 ,其DNA顺序与亲本中Ds因子原插入位点的序列不同 ,表明Ds因子转座到了新的基因组位点。 展开更多
关键词 水稻 启动子 Ac转座酶基因 Ds因子 转座
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萘降解细菌的分离及其降解和转座基因的分子检测 被引量:5
5
作者 蔡宝立 丁蕊 +3 位作者 任河山 雷虹 严冰 赵化冰 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期1-6,共6页
用富集培养法,从工业废水和活性污泥中分离到9个高效降解萘的细菌菌株(ND7~ND15).对菌株ND7、ND8、ND9和ND10所进行的16SrDNA序列分析表明,它们都属于假单胞菌属(Pseudomonas).PCR实验结果表明,上述4个菌株都含有蔡降解基因na... 用富集培养法,从工业废水和活性污泥中分离到9个高效降解萘的细菌菌株(ND7~ND15).对菌株ND7、ND8、ND9和ND10所进行的16SrDNA序列分析表明,它们都属于假单胞菌属(Pseudomonas).PCR实验结果表明,上述4个菌株都含有蔡降解基因nahAc、nahG、nahH和catA,ND7和ND8菌株还含有萘降解基因nahU.DNA杂交实验结果表明,上述9个萘降解菌株都含有转座酶基因tnpA1和解体酶基因tnpR.这些结果表明,萘降解细菌的降解基因和转座基因具有高度的保守性.酶学实验证明,ND7、ND8、ND9和ND10菌株都具有儿茶酚1,2-双加氧酶活力和儿萘酚2,3-双加氧酶活力,但在不同菌株中这两种酶的比活力有明显不同. 展开更多
关键词 假单胞菌 萘降解基因 转座酶基因tnpal 解体酶基因tnpR 儿茶酚1 2-双加氧酶 儿茶酚2 3-双加氧酶
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链霉菌DDE转座酶基因的克隆及生物信息学分析
6
作者 苏爱珍 薛永常 《现代食品科技》 CAS 北大核心 2021年第11期167-174,共8页
从实验室保藏的菌株中筛选出一株产DDE转座酶的菌,经形态及生理生化、16S rDNA及建树分析比对,该菌株属链霉菌属灰褐类群,暂将其命名为Streptomyces labedae sp.X1。从Streptomyces labedae sp.X1基因组DNA扩增一401 bp的DDE转座酶基因... 从实验室保藏的菌株中筛选出一株产DDE转座酶的菌,经形态及生理生化、16S rDNA及建树分析比对,该菌株属链霉菌属灰褐类群,暂将其命名为Streptomyces labedae sp.X1。从Streptomyces labedae sp.X1基因组DNA扩增一401 bp的DDE转座酶基因,通过Blast和ISfinder数据库进行序列比对,结果显示其与ISAzo13家族转座酶的基因有88%的相似度。通过对其进行生物信息学分析,发现该基因可编码133个氨基酸,且该DDE转座酶的保守的氨基酸三联体分别位于Asp^(43)、Asp^(49)、Glu^(91)上,理化性质结果显示编码产物为稳定的亲水蛋白;二级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主,不存在信号肽和跨膜结构域,为非分泌蛋白;有14个磷酸化位点且仅有一个糖基化位点;高级结构以α-螺旋为主;通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,结果显示在27 ku处出现条带。该研究结果为研究链霉菌DDE转座酶基因的表达机制提供了重要信息,对以后鉴定DDE转座酶活性以及它的结构和功能奠定基础。 展开更多
关键词 链霉菌 DDE转座酶 菌种鉴定 基因克隆 生物信息学
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CRISPR相关转座酶及其细菌基因组编辑应用
7
作者 周晓杰 杨思琪 +2 位作者 张译文 徐佳琪 杨晟 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期49-58,共10页
CRISPR-Cas能够在RNA引导下靶向DNA或RNA的特定序列,改变RNA序列即可改变靶向位点,利用这一可重编程特性已开发出了各种强大的遗传学工具。最近发现CRISPR元件在进化过程中被Tn7转座子劫持,由此衍生出的CRISPR相关转座酶(CRISPR-associa... CRISPR-Cas能够在RNA引导下靶向DNA或RNA的特定序列,改变RNA序列即可改变靶向位点,利用这一可重编程特性已开发出了各种强大的遗传学工具。最近发现CRISPR元件在进化过程中被Tn7转座子劫持,由此衍生出的CRISPR相关转座酶(CRISPR-associated transposases, CASTs)系统具有RNA引导DNA整合的能力,被部署为靶点可重编程的基因组整合工具,在大片段和多重基因整合上具有广阔的应用前景。本文追溯了CASTs的发现历程,总结了不同类型CASTs的基因座结构特点、介导基因整合的机制模型以及其在多种革兰氏阴性细菌中的部署和应用。 展开更多
关键词 CRISPR相关转座酶 移动遗传元件 基因组编辑 多重基因整合
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绵羊高效转基因通用型piggyBac转座子载体构建及功能验证 被引量:1
8
作者 胡广东 郝科兴 +3 位作者 黄涛 曾维斌 谷新利 王静 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2018年第8期647-656,共10页
piggy Bac(PB)是一种能在多种动物细胞中进行转座的DNA转座子,作为一种转基因工具已被广泛应用于各种哺乳动物转基因研究中。针对不同物种对PB转座子进行改造,是提升其通用性的必要手段。为构建基于绵羊细胞进行转基因操作的通用型PB转... piggy Bac(PB)是一种能在多种动物细胞中进行转座的DNA转座子,作为一种转基因工具已被广泛应用于各种哺乳动物转基因研究中。针对不同物种对PB转座子进行改造,是提升其通用性的必要手段。为构建基于绵羊细胞进行转基因操作的通用型PB转座子载体,本研究对PB转座酶(PBase)基因进行绵羊密码子偏好性优化并将其克隆到p BNW-TP1载体中,成功构建了PB转座子载体p BNW-TP2。将p BNW-TP2转染到绵羊成纤维细胞和乳腺上皮细胞中,利用G418筛选获取稳定转染细胞株;利用Tail-PCR检测稳定转染细胞株的PB转座位点,对细胞阳性克隆进行亚甲蓝染色;利用非配对t检验确认其转座效率。结果表明,p BNW-TP2成功介导了绵羊成纤维细胞和乳腺上皮细胞转基因阳性细胞株的生产;PB转座位点检测表明p BNW-TP2能特异性整合到绵羊基因组TTAA位点,其整合位点倾向于功能基因间;亚甲蓝染色统计分析结果提示p BNW-TP2介导的转基因效率显著提升。本研究成功构建了绵羊通用型PB转座子载体p BNW-TP2,并在绵羊体细胞中对其特性进行验证和分析,为PB转座子在绵羊体细胞中开展转基因相关研究提供了科学依据。 展开更多
关键词 PIGGYBAC转座 转座酶 基因 绵羊成纤维细胞 绵羊乳腺上皮细胞
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转座酶TN3体外定向进化研究概况
9
作者 马围围 曾素先 +5 位作者 宋尚桥 王睿敏 严瑾 孙翠翠 李鑫 黎宗强 《动物医学进展》 北大核心 2020年第2期109-113,共5页
Tn3是存在于生物体内的一种非常重要的转座酶,其是基因组中具有一段特异的转位特性的独立的DNA序列,从而对目的基因起调控作用。转座酶Tn3具有基因敲除的功能,Gal4能识别DNA启动子上游两端保守的17bp长的一段序列,因此将Tn3与Gal4相组合... Tn3是存在于生物体内的一种非常重要的转座酶,其是基因组中具有一段特异的转位特性的独立的DNA序列,从而对目的基因起调控作用。转座酶Tn3具有基因敲除的功能,Gal4能识别DNA启动子上游两端保守的17bp长的一段序列,因此将Tn3与Gal4相组合,实现靶向敲除目的基因的目的。论文综述了转座酶Tn3的结构及其转座机制、Gal4的结构及其机制、Tn3-Gal4系统的简介和酶分子的定向进化,旨在为今后靶向基因的敲除以及靶向基因的修复提供研究思路。 展开更多
关键词 Tn3 转座酶 Gal4 基因敲除 定向进化
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“睡美人”转座子及其在肿瘤研究中的应用 被引量:1
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作者 李永文 姚毅冰 +1 位作者 万海粟 周清华 《中国肺癌杂志》 CAS 2008年第6期816-820,共5页
转座子,或者叫跳跃基因,最早由美国的细胞遗传学家Mc-Clintock在研究玉米时发现的[1],是指一些能够从一个染色体位置转移到另外的位置的核酸序列。
关键词 转座 DNA 小鼠 介导 小家鼠 肿瘤研究 转座酶基因 插入突变
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基因组上的可动因子
11
作者 洪孟民 《中国生物工程杂志》 CAS 1986年第1期21-27,共7页
可动因子或称可动的遗传因子(Mobile Genetic Element)是存在于基因组上一些有特定结构的DNA片段,它们没有固定的位置,能在基因组内或基因组间来回移动,其中包括转座因子(Transposable Element)与一些在分子结构与移动机理上同转座因子... 可动因子或称可动的遗传因子(Mobile Genetic Element)是存在于基因组上一些有特定结构的DNA片段,它们没有固定的位置,能在基因组内或基因组间来回移动,其中包括转座因子(Transposable Element)与一些在分子结构与移动机理上同转座因子不同的DNA片段,如沙门氏菌中同相变有关的DNA片段与Mu噬菌体中同宿主域有关的G片段等。这些DNA片段有的像一个生物诱变剂。 展开更多
关键词 基因 果蝇 血清型 鞭毛 同向 染色体组 血清变种 转座因子 可移动的遗传因子 基因表达 染色体断裂 转座酶 DNA 噬菌体 锥虫 位点
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多药耐药鲍氏不动杆菌tnp513转座酶基因研究 被引量:21
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作者 朱健铭 禇雪莲 +3 位作者 姜如金 吴康乐 孔海深 糜家睿 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第20期2678-2681,共4页
目的了解分离自浙江大学医学院附属第一医院的多药耐药鲍氏不动杆菌(MDR-ABA)转座酶基因(tnp513)存在状况。方法对2007年11月-2008年2月从住院患者中分离的62株MDR-ABA,采用聚合酶链反应及序列分析的方法检测tnp513基因。结果62株中有3... 目的了解分离自浙江大学医学院附属第一医院的多药耐药鲍氏不动杆菌(MDR-ABA)转座酶基因(tnp513)存在状况。方法对2007年11月-2008年2月从住院患者中分离的62株MDR-ABA,采用聚合酶链反应及序列分析的方法检测tnp513基因。结果62株中有35株阳性,阳性率56.45%;任选2株tnp513基因PCR阳性产物经直接全自动荧光法测序,并作BLASTn比对,与美国NCBI中已登录的94条tnp513(orf513)一致。结论MDR-ABA存在严重的β-内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类、四环素和复方新诺明等多药耐药状况,与tnp513转座酶基因携带率高有关,在MDR-ABA中检出的tnp513基因为中国大陆地区首次报道。 展开更多
关键词 鲍氏不动杆菌 多药耐药 转座酶 基因
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大熊猫肠道菌抗生素抗性菌转座酶的基因克隆和表达 被引量:1
13
作者 余丛 张义正 +3 位作者 侯蓉 张志和 严悦 谭雪梅 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期715-722,共8页
对大熊猫肠道大肠杆菌抗生素抗性质粒pAm08CD7339全序列的生物信息学分析结果表明,该质粒中存在一个编码转座酶的DNA片段,两条DNA链均可编码转座酶,其编码区长度分别为717 bp和600 bp,编码238个和199个氨基酸残基(分别命名为Transposase... 对大熊猫肠道大肠杆菌抗生素抗性质粒pAm08CD7339全序列的生物信息学分析结果表明,该质粒中存在一个编码转座酶的DNA片段,两条DNA链均可编码转座酶,其编码区长度分别为717 bp和600 bp,编码238个和199个氨基酸残基(分别命名为Transposase-238和Transposase-199).以pAm08CD7339质粒DNA为模板,利用PCR方法对2个转座酶基因进行扩增,构建相应表达质粒,转化不同大肠杆菌菌株进行表达,结果表明:Transposase-199可以在E.coli BL21(DE3)中表达,而Transposase-238则只能在E.coli BL21 Rosetta(DE3)中表达.它们表达产物几乎全是包涵体. 展开更多
关键词 大熊猫 大肠杆菌 质粒 转座酶 基因克隆 基因表达
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Wolbachia中一个新的可转移遗传因子的分离和鉴定 被引量:3
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作者 周伟国 甘波谊 +2 位作者 赵新燕 赵寿元 李昌本 《自然科学进展(国家重点实验室通讯)》 北大核心 2001年第1期105-109,共5页
Wolbachia是一类寄生于许多节肢动物细胞质内的类立克次氏体细菌.该细菌与广泛存在于节肢动物群体内的生殖、发育异常现象相关.为了研究这些现象的分子机制,利用RDA(representational difference analysis)方法分析了不同表型Wol-bachi... Wolbachia是一类寄生于许多节肢动物细胞质内的类立克次氏体细菌.该细菌与广泛存在于节肢动物群体内的生殖、发育异常现象相关.为了研究这些现象的分子机制,利用RDA(representational difference analysis)方法分析了不同表型Wol-bachia的基因组差异.发现在强烈诱导胞质不相容性的Wolbachia品系wRi(存在于果蝇Drosophila simulans Riverside DSR品系)的基因组中,存在一个潜在的可转移遗传因子,将其命名为WISE(Wolbachia insertion sequence element). 展开更多
关键词 WOLBACHIA 胞质不相容 可转移遗传因子 类立克次氏体细菌 昆虫 细胞质遗传 转座酶基因 分离 鉴定
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染色质转座酶可及性测序及其在木本植物中的应用前景
15
作者 王子玥 甄艳 +1 位作者 刘光欣 席梦利 《南京林业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期1-10,共10页
染色质转座酶可及性测序(assay for transposase-accessible chromatin with high-throughput sequencing,ATAC-seq)是2013年在人类免疫细胞中建立的用于研究表观遗传调控的重要技术。该技术已在人类及小鼠等模式动物的基因组调控元件... 染色质转座酶可及性测序(assay for transposase-accessible chromatin with high-throughput sequencing,ATAC-seq)是2013年在人类免疫细胞中建立的用于研究表观遗传调控的重要技术。该技术已在人类及小鼠等模式动物的基因组调控元件鉴定、转录因子结合位点识别及转录调控机制的解析等研究领域发挥了重要作用。然而,ATAC-seq技术在植物领域中的研究应用还处于起步阶段,相关研究主要集中在拟南芥和水稻等模式植物中。笔者主要概述了ATAC-seq技术在植物中的应用,包括染色质可及性图谱绘制、抗逆机制解析、表观修饰鉴定及调控元件识别等领域的研究进展,并进一步阐述了ATAC-seq在木本植物中的应用潜力,以推动ATAC-seq技术在木本植物表观基因组学研究中的应用。 展开更多
关键词 染色质转座酶可及性测序 木本植物 染色质可及性 表观基因组学
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类Tc1转座子研究进展 被引量:3
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作者 刘东 唐文乔 +1 位作者 杨金权 刘少军 《中国科学:生命科学》 CSCD 北大核心 2011年第2期87-96,共10页
转座子广泛存在于各种生物基因组中,能在染色体不同位点间转座,并在基因组中大量扩增.转座子的活动能引起生物基因组或基因的重组和变异,加速生物多样性及其进化速率,被视为生物基因组进化的内在驱动.转座子分2类:反转座子和DNA转座子.... 转座子广泛存在于各种生物基因组中,能在染色体不同位点间转座,并在基因组中大量扩增.转座子的活动能引起生物基因组或基因的重组和变异,加速生物多样性及其进化速率,被视为生物基因组进化的内在驱动.转座子分2类:反转座子和DNA转座子.类Tc1转座子是DNA转座子超级家族中种类最多、分布最广的一类.本文简要概述了类Tc1转座子的结构特征,及其扩增、转座和迸发的机制,并展望了其应用和研究方向. 展开更多
关键词 基因 转座 转座酶 类Tc1 进化
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