猪链球菌重组磷酸ABC转运体ATP酶的免疫保护效果评价

猪链球菌(S.suis)是一种重要的人畜共患病原菌,给养猪业造成重大的经济损失。为了评估猪链球菌磷酸ABC转运体ATP酶蛋白的免疫保护效果,本研究构建了猪链球菌磷酸ABC转运体ATP酶原核表达载体进行蛋白的重组表达,纯化并制备该重组蛋白的亚单位疫苗,加强免疫接种后两周,检测其血清抗体效价、免疫保护率、各脏器载菌量以及炎性因子表达情况。结果显示,该蛋白经大肠杆菌表达后主要以可溶形式存在。ELISA检测表明该蛋白可以诱发小鼠产生高水平IgG抗体,免疫组小鼠抗体水平显著高于对照组,该重组蛋白对小鼠感染2型猪链球菌(S.suis serotype 2,S.suis 2)的保护率达到60%,显著降低了小鼠大脑、心脏及肺脏的载菌量,免疫组小鼠细胞因子IL-1β、IFN-γ、IL-6、IL-8和TNF-α的mRNA表达显著上调。研究表明猪链球菌重组磷酸ABC转运体ATP酶蛋白具有较强的免疫原性,是猪链球菌病潜在的亚单位疫苗候选蛋白。

m^(6)A修饰对药物代谢酶和药物转运体的调控作用

m^(6)A修饰是RNA甲基化修饰中最丰富的一种修饰,受甲基转移酶和去甲基化酶的动态调控,被m^(6)A识别蛋白识别并结合后可影响mRNA的剪切、稳定性和翻译等生物学过程来调控靶基因的表达。最近的研究发现,m^(6)A修饰可通过多种途径来调控药物代谢酶和药物转运体表达,进而影响机体对药物的代谢速率或影响细胞中的药物浓度,最终导致药物治疗效果发生变化。该文综述了m^(6)A修饰调控药物代谢酶和药物转运体分子机制的研究进展,以期为临床上的合理用药、个体化用药提供新思路。

敲低PRDX6对利福平诱导HepG2细胞胆汁酸转运体适应性表达的影响

目的探讨敲低过氧化物还原酶-6(PRDX6)在利福平(RFP)诱导人肝癌细胞(HepG2)损伤及胆汁酸转运体适应性表达中的作用。方法将处于对数生长期的细胞均匀接种于6孔板中,使用特异PRDX6-siRNA、control-siRNA分别转染HepG2细胞构建敲低组及对照组。给予细胞100μmol/L RFP诱导24 h后,Western blot和qRT-PCR检测各组细胞PRDX6、多药耐药蛋白1(MDR1)、多药耐药相关蛋白2、3、4(MRP2、MRP3、MRP4)、Na+/牛磺胆酸协同转运蛋白(NTCP)的蛋白及基因表达水平;Annexin V-FITC/PI双染法检测各组细胞凋亡率;CCK-8法检测各组细胞增殖变化;试剂盒检测各组细胞培养上清液中细胞损伤标志物丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)、总胆汁酸(TBA)相对含量变化。结果RFP可诱导HepG2细胞MRP2、MRP3、MRP4、MDR1、NTCP及PRDX6的蛋白和基因表达水平升高(P<0.05),而敲低PRDX6后,MRP2、MRP3、MRP4、MDR1、NTCP的蛋白和基因表达水平均有不同程度的降低(P<0.05)。此外,PRDX6敲低后HepG2细胞凋亡率升高(P<0.05),细胞增殖能力下降(P<0.05),细胞培养上清液中细胞损伤标志物(ALT、AST、TBIL、DBIL、TBA)水平升高(P<0.05)。结论RFP可增加HepG2细胞胆汁酸转运体及PRDX6的蛋白和基因表达量,敲低PRDX6并用RFP诱导后胆汁酸转运体的蛋白及基因表达量降低,同时细胞损伤加重,表明PRDX6在RFP诱导的HepG2细胞适应性反应中发挥保护作用。

恐惧应激对妊娠期大鼠胎盘葡萄糖转运体表达水平的影响

目的 探讨孕期恐惧应激对胎盘葡萄糖营养物转运体(glucose transporter, GLUT)表达的影响,为孕期应激致胎损理论提供证据。方法 将20只Wistar孕鼠,随机分为对照组和模型组,每组10只。其中,模型组采取旁观电击法造模持续19 d,对照组正常饲养。实验结束后记录胎产数量、胎盘与胎鼠重量,计算胎盘效率。透视电镜观察胎盘细胞形态学变化。生物信息学分析筛选孕期恐惧应激胎盘的差异基因,进行基因富集分析(gene set enrichment analysis, GSEA)。蛋白质免疫印迹法(Western Blot)、实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)、免疫组化法检测葡萄糖转运蛋白1(glucosetransporter 1,GLUT1)、葡萄糖转运蛋白3(GLUT3)、葡萄糖转运蛋白6(GLUT6)和葡萄糖转运蛋白7(GLUT7)表达水平。结果 与对照组相比,模型组胎产数量和胎盘效率显著降低;模型组胎盘微绒毛稀疏短少,线粒体及内质网肿胀;GSEA分析发现,模型组胎盘基因显著富集在细胞葡萄糖稳态;Western Blot、Real-time PCR和免疫组化结果表明,模型组胎盘中GLUT1、GLUT6以及GLUT7表达均下降。结论 孕期恐惧应激暴露导致不良胎产结局,可能与胎盘中GLUT1、GLUT6、GLUT7三种关键葡萄糖转运体降低有关。

钠碘同向转运体表达与功能调控的研究进展

钠碘同向转运体(sodium iodine symporter)广泛分布于人体各个器官,是器官转运I-的结构和功能基础。钠碘同向转运体主要表达在细胞的基底侧膜上,为各种生命活动提供所需的I-。目前已知,钠碘同向转运体的调控机制涉及激素、细胞因子、转录因子及信号分子的作用。此外,钠碘同向转运体作为甲状腺癌的重要治疗靶点逐渐受到关注,然而在治疗过程中唾液腺等其他器官吸收放射性碘而产生的并发症也值得重视。本文重点综述了钠碘同向转运体的表达、作用及其调控机制的研究进展,旨在为临床干预钠碘同向转运体异常相关疾病进程提供新思路。

锌及锌转运体在恶性肿瘤中的作用及机制研究进展

锌离子是人体内含量仅次于铁,丰度排位第二的微量元素。锌离子在细胞中充当第二信使并且对于蛋白质的正常结构和功能非常重要,因此参与到多种重要细胞生理过程当中,包括细胞周期进程、细胞分裂等。细胞内维持锌离子平衡主要是通过两大金属转运体家族的共同调节:ZnT(SLC30A)和ZIP(SLC39A)家族。在癌症中,锌离子平衡失调和锌转运蛋白的异常表达被发现与肿瘤的发生、进展有着紧密的关系。但是关于锌离子和锌转运蛋白在癌症中的具体作用,不同研究之间存在争议。这种矛盾也成为围绕锌离子稳态的治疗研发和临床应用的主要障碍。该文总结并讨论了锌离子及锌转运体在癌症中发挥的作用并对围绕锌离子稳态研发的新兴治疗策略进行归纳分析。

佐剂性关节炎大鼠肾功能损伤及对肾脏有机阴离子转运体3表达的影响

目的研究佐剂性关节炎(AA)对大鼠肾脏功能和肾脏有机阴离子转运体3(OAT3)表达的影响。方法在大鼠右侧后足趾皮内注射弗氏完全佐剂建立AA模型。固定时间点收集大鼠血液和尿液,观察肾损伤指标的动态变化。通过肾脏的HE染色切片观察肾损伤情况。免疫组化和Western blot检测肾皮质OAT3蛋白和炎性因子白介素-6(IL-6)、白介素-1β(IL-1β)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达水平。结果与正常组相比,AA大鼠关节炎指数评分、继发性足爪肿胀、关节肿胀数、全身评分均显著增加(P<0.05)。X线检测结果显示,AA模型大鼠足爪骨关节出现软组织水肿以及骨畸形的特征。生化指标显示,AA大鼠的肾损伤指标出现明显异常。免疫组化与Western blot结果显示,AA大鼠肾皮质OAT3的表达水平显著降低,同时炎性因子IL-6、TNF-α和IL-1β的表达水平明显升高(P<0.05)。结论AA大鼠的肾功能损伤可能与肾脏OAT3的表达降低及炎性因子表达升高有关。

肾脏转运体在多黏菌素肾毒性中的研究进展

多黏菌素是治疗多重耐药革兰阴性菌感染的一线药物。多黏菌素的肾毒性是限制其临床剂量的主要因素,其肾毒性是由多黏菌素于肾近端小管处广泛重吸收后在肾脏中蓄积引起,多黏菌素跨细胞膜进入肾小管细胞的这一过程可能由一到多个转运体介导产生。该文综述多黏菌素在肾小管上皮细胞处重吸收所涉及到的多个肾脏转运体及其作用机制,以期为降低多黏菌素肾毒性的相关研究提供参考。

去甲肾上腺素转运体基因多态性与汉族抑郁症患者自我攻击行为的关系

目的:探讨去甲肾上腺素转运体(norepinephrine transporter,NET)基因的基因多态性与汉族抑郁症患者自我攻击行为的关系。方法:选取2018年1月至2021年5月天津安定医院门诊收治的161例汉族抑郁症患者为研究组,另选取同期健康体检的165名汉族人群作为对照组。比较2组相关基因型与等位基因分布情况。分析NET基因多态性与汉族抑郁症患者自我攻击行为的关系。结果:研究组相关基因型及等位基因分布频率均高于对照组(P均<0.05);伴自我攻击行为组相关基因及等位基因分布频率均高于未伴自我攻击行为组(P均<0.05);性别、精神疾病家族史等因素均是汉族抑郁症患者自我攻击行为的危险因素。结论:G1287A基因型AA、等位基因A及T182C基因型CC、等位基因C分布频率可能是汉族抑郁症患者伴发自我攻击行为的危险因素。

PXR/CAR-代谢酶/转运体解毒系统的功能及研究进展

目的综述孕烷X受体(PXR)和组成型雄甾烷受体(CAR)-代谢酶/转运体解毒系统的功能和研究进展。方法从肝脏代谢酶、肝肾转运体、PXR/CAR介导的药物解毒等多方面对PXR/CAR-代谢酶/转运体解毒系统及其在药物解毒方面的研究进展进行论述。结果与结论药物作为人体外源性物质,可能存在一定毒副作用,使用不当或毒性较强的药物易造成机体损伤。药物代谢酶和转运体是决定药物体内过程及暴露量的两大核心因素,在药物毒性与解毒方面扮演重要角色。随着对PXR和CAR研究的不断深入,发现其对药物解毒相关的代谢酶和转运体发挥核心调控作用,共同构成了机体最重要的防御解毒系统—PXR/CAR-代谢酶/转运体解毒系统。

膜转运体Megalin、Cubilin在C57小鼠肾发生发育中的时空表达研究

目的观察膜转运体Megalin、Cubilin在发生发育小鼠肾内的分布,从而揭示它们在肾发生发育中相应功能分化的时空规律。方法C57BL/6小鼠按雌雄1∶1合笼饲养,并于胚(胎)龄(Ed)E10、12、14、16、18 d,及生后日龄(Pd)P1、3、7、14、28、42 d,分离胎鼠、仔鼠或成鼠的肾脏。应用改良的块染技术对不同发育阶段的肾脏组织进行整体固定及染色,分别进行常规石蜡包埋,制成连续的石蜡切片(5μm)。选取连续切片中目标切片,采用免疫组织化学技术和免疫荧光技术对不同发育阶段的小鼠肾脏膜转运体Megalin和Cubilin进行定位,观察其在不同发育阶段的表达情况。结果Megalin和Cubilin在E10 d的中肾管上皮细胞开始有表达,E12 d时表达于肾脏输尿管芽上皮细胞的近腔面游离缘,二者主要以共表达模式存在。E14 d以后在发生发育小鼠肾脏的“逗号”小体、“S”型小体上皮细胞的游离缘呈弱表达,于肾脏近端小管的上皮细胞游离缘表达明显,偶尔可见在未发育成熟的血管球有弱表达。Megalin和Cubilin在细段、远端小管、集合管系统以及间质部分都未见表达。结论膜转运体Megalin和Cubilin在中肾管、输尿管芽、“逗号”小体、“S”型小体,以及近端小管的依次表达规律提示小鼠肾脏在中肾形成时期就开始有蛋白或多肽的转运功能。此外,二者稳定地出现在较为成熟的近端小管,较弱地出现在未成熟近端小管,表明其重吸收蛋白质的功能与近端小管结构的成熟度有关。

蒲公英与木通提取物对断奶仔兔生长性能、肠道健康和药物转运体基因相对表达量的影响

本试验旨在研究饲粮中添加蒲公英、木通提取物对断奶仔兔生长性能、腹泻情况、肠道形态结构、肠黏膜紧密连接蛋白和肝肠药物转运体蛋白基因表达的影响,探究二者联用对提高中药提取物生物利用度的效果。试验选取120只35日龄断奶仔兔,随机分为4个组,每组设置10个重复,每个重复3只兔。试验包括对照组(基础饲粮)、蒲公英组(基础饲粮添加0.5%蒲公英提取物)、木通组(基础饲粮添加0.5%木通提取物)和蒲公英+木通组(基础饲粮分别添加0.5%蒲公英和木通提取物)。试验时间为28 d。试验结果表明:1)第1周蒲公英组和木通组平均日增重显著高于对照组(P<0.05),料重比显著低于对照组(P<0.05)。2)蒲公英组仔兔空肠绒毛高度显著高于木通组(P<0.05)。3)蒲公英+木通组空肠黏膜总黄酮含量显著高于其它各组(P<0.05)。4)蒲公英+木通组闭合小环蛋白1(Z0-1)基因在回肠的相对表达量显著高于蒲公英组和木通组(P<0.05)。5)木通组空肠多药耐药相关蛋白2(MRP-2)、有机阴离子转运多肽2B1(organic anion transporting polypeptide 2B1,OATP2B1)基因的相对表达量显著低于对照组(P<0.05),蒲公英+木通组空肠OATP2B1基因相对表达水平显著低于对照组(P<0.05);蒲公英组和木通组多药耐药相关蛋白3(multidrug resistance-associated protein 3,MRP3)基因在回肠的相对表达量显著低于对照组(P<0.05);蒲公英+木通组乳腺癌耐药相关蛋白(BCRP)、MRP3基因在肝的相对表达量显著低于对照组(P<0.05),木通组和蒲公英+木通组OATP2B1基因在肝的相对表达量显著低于对照组(P<0.05)。综上所述,饲粮中分别添加蒲公英和木通提取物对断奶仔兔的生长性能有所改善,同时添加蒲公英和木通提取物能提高空肠组织总黄酮含量,饲粮中添加蒲公英和木通提取物能调节肝和肠黏膜组织中药物转运体基因表达水平。

基于肠道尿酸转运体探讨土藤草汤对高尿酸血症模型大鼠降尿酸的作用机制

目的:通过观察土藤草汤对高尿酸血症模型大鼠肠道尿酸转运体的影响,探讨土藤草汤治疗高尿酸血症的机制。方法:将30只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、阳性药组、土藤草汤高剂量组、土藤草汤低剂量组,除正常对照组外,其他组用腺嘌呤和酵母建立高尿酸血症模型;正常对照组及模型组每日予蒸馏水10 mL·kg^(-1)灌胃,阳性药组每日予别嘌呤醇23.33 mg·kg^(-1)灌胃,土藤草汤高剂量组、土藤草汤低剂量组每日分别按22.4 g·kg^(-1)·d^(-1)、11.2 g·kg^(-1)·d^(-1)灌胃给予土藤草汤,连续干预4 w,分别在治疗前、治疗3 w、4 w后称量各组大鼠体质量,进行大鼠眼眶内眦静脉取血检测血尿酸水平,并在治疗4 w后摘取十二指肠检测各组大鼠的肠道尿酸盐转运体(UAT)和浓度型核苷转运体(CNTs)中CNT2的信使核糖核酸(mRNA)转录水平。结果:治疗前,与正常组比较,模型组及各治疗组尿酸水平明显升高(P<0.05),提示造模成功;与正常组比较,治疗3 w、4 w后模型组血尿酸水平明显升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,各治疗组治疗4 w尿酸水平明显降低(P<0.05或P<0.01)。与正常对照组比较,模型组CNT2 mRNA转录水平显著升高(P<0.01),UAT mRNA转录水平显著降低(P<0.01);与模型组比较,各治疗组CNT2 mRNA转录水平明显降低(P<0.01),UAT mRNA转录水平明显升高(P<0.01)。结论:土藤草汤可显著降低HUA模型大鼠血尿酸水平,其作用机制可能与其作用于肠道尿酸转运体CNT2和UAT两个靶点有关,即有效抑制HUA大鼠肠道尿酸转运体CNT2的mRNA转录表达而减少嘌呤核苷酸在肠道的重吸收,提高HUA大鼠肠道尿酸转运体UAT的mRNA转录表达而增加尿酸随尿液排出。

大肠杆菌ABC超家族转运体YadGH药物外排作用及其转运药物的验证

大肠杆菌ABC转运体(ABC transporter)能够介导大肠杆菌耐药性,但有关大肠杆菌ABC转运体YadGH介导的耐药性以及转运何种药物尚未见报道。为探究YadGH转运体的外排功能,首先对YadGH进行生物信息学分析,然后采用Red重组技术构建缺失yadG基因的E.coli K-12菌株,并检测多种抗生素对基因缺失菌株的最低抑菌浓度;同时,对表达纯化的YadG蛋白进行ATP酶活性测定。结果显示,yadG基因缺失菌株对于大环内酯类抗生素罗红霉素、泰乐菌素、红霉素的外排转运能力下降,且YadG蛋白具有ATP酶活性。综上,YadGH是一种大环内酯类药物的ABC转运体。

具有尿酸转运体调控作用的天然产物的研究进展

尿酸是人体代谢产物之一,高尿酸血症与痛风、心血管疾病、糖尿病、卒中和慢性肾脏病等疾病密切相关。近年来,针对具有尿酸转运体调控作用的天然产物的研究引起广泛关注。本文总结植物类、动物类、真菌类和海洋生物类天然产物对尿酸转运体的影响,旨在为高尿酸血症新型药物的开发和疾病治疗策略的制订提供参考。

钠-葡萄糖转运体2抑制剂和胰高糖素样肽-1受体激动剂在糖尿病肾病的临床应用

慢性肾脏病以肾小球滤过率降低和尿白蛋白增加为主要特点,糖尿病肾病是慢性肾脏病的主要类型之一,可导致生活质量下降、肾衰竭甚至死亡,严重威胁了人类健康。近年来有关糖尿病肾病的保护药物有了重要研究进展,其中肾素-血管紧张素系统抑制剂、钠-葡萄糖转运体2抑制剂(sodium-glucose transporter 2 inhibitor,SGLT2i)、胰高糖素样肽-1(glucagon-like peptide-1,GLP-1)受体激动剂等药物表现优异,被国内外指南推荐应用于糖尿病肾病患者的治疗,以降低尿蛋白,保护肾功能,改善肾脏不良结局。

兴奋性氨基酸转运体家族及其在眼科疾病中的研究进展

谷氨酸是哺乳动物中枢神经系统中的主要兴奋性神经递质,谷氨酸酶系统的持续激活会导致神经元的兴奋性毒性,进而引起神经元损伤和细胞死亡。兴奋性氨基酸转运体家族成员是一种多次跨膜蛋白,位于突触前膜、突触囊泡和神经胶质细胞膜上,也是一种高亲和力的钠钾依赖性载体,能够不断清除细胞外残留的谷氨酸,维持正常的突触内外谷氨酸水平和细胞内氧化还原稳态,对于保护细胞免受兴奋性毒性以及氧化应激损伤至关重要,兴奋性氨基酸转运体家族成员表水平达的失调与多种中枢神经系统疾病神经退行性变的发生和发展密切相关。在视网膜组织中,兴奋性氨基酸转运体家族成员广泛表达。目前大量研究表明,兴奋性氨基酸转运体家族成员广泛参与了青光眼、视网膜缺血再灌注损伤、年龄相关性黄斑变性等眼部疾病的发病,但具体机制有待进一步阐明。为此,文章综述了兴奋性氨基酸转运体家族成员的生理功能及其在相关眼科疾病发生和发展中作用的研究进展,为进一步阐明相关眼病发病的分子机制及新的防治靶点的发现提供新的视角。

葡萄糖转运体1在肿瘤中的研究进展

葡萄糖转运体1(GLUT1)是糖代谢的关键调节剂之一,表达于细胞表面,是分布最广泛的葡萄糖转运蛋白,在细胞的增殖、生长和分化过程中发挥重要作用。近年来,越来越多的研究发现,GLUT1在肿瘤的发生发展中也发挥重要作用。本文重点阐述了GLUT1通过调节肿瘤细胞的糖酵解,影响肺癌、乳腺癌、胃癌、食管癌、鼻咽癌等多种肿瘤的发生发展,下调GLUT1的表达可以提高肿瘤细胞对放疗的敏感性,降低化疗耐药性,以期为肿瘤的诊断和治疗提供新的思路。

1例仅表现为肌阵挛性癫痫的葡萄糖转运体1缺陷综合征临床特点及诊疗体会

葡萄糖转运体1缺陷综合征(glucose transporter type 1 deficiency syndrome,GLUT1-DS)在1991年由De Vino首先报道^([1]),是一种常染色体显性遗传性疾病,致病基因为SLC2A1。该病临床多为癫痫发作、运动障碍及认知行为障碍的一种或多种组合。90%的患者合并癫痫,通常发生在婴儿期,最常见的是全面性强直阵挛发作,少见肌阵挛发作。GLUT1-DS患者首选生酮饮食治疗。

钠-葡萄糖耦联转运体2抑制剂对代谢综合征相关代谢紊乱的作用研究进展

代谢综合征是一组复杂的代谢紊乱症候群,其全球发病率不断升高,严重威胁人类的健康,但临床上尚无特效药。钠-葡萄糖耦联转运体2(SGLT2)抑制剂是一种新型口服降糖药物,它不仅可以通过抑制肾脏近曲小管上皮细胞对葡萄糖的重吸收促进尿糖排泄这种非胰岛素依赖方式降低血糖,还可以通过改善胰岛β细胞功能、降低炎症反应、抑制氧化应激来降低血糖。此外,SGLT2抑制剂还可以通过渗透性利尿、增加脂肪代谢以减轻体重;通过抑制交感神经系统过度激活、改善血管功能等作用降低血压;通过增加三酰甘油降解进而改善血脂;通过促进肾脏及肠道尿酸排泄和减少尿酸合成来降低血尿酸。本文就SGLT2抑制剂对代谢综合征相关代谢紊乱的改善作用及其相关调控机制进行综述。