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温经通络汤含药血清对小鼠软骨细胞损伤及IκB-ζ/HIF-1α/LDHA轴的影响研究
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作者 魏伟 彭晨健 +4 位作者 顾任钧 颜习武 叶嘉鹏 黄桂成 孙鲁宁 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期469-478,共10页
目的研究温经通络汤含药血清对白细胞介素-1β(IL-1β)诱导的小鼠原代软骨细胞损伤的影响及机制。方法采用IL-1β诱导小鼠原代软骨细胞损伤模型,检测细胞中炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α,软骨降解相关蛋白酶基质金属蛋白酶(MMP)3、MMP9... 目的研究温经通络汤含药血清对白细胞介素-1β(IL-1β)诱导的小鼠原代软骨细胞损伤的影响及机制。方法采用IL-1β诱导小鼠原代软骨细胞损伤模型,检测细胞中炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α,软骨降解相关蛋白酶基质金属蛋白酶(MMP)3、MMP9、MMP13、ADAM金属肽酶含血小板反应蛋白1基元4(ADAMTS4)以及糖酵解相关酶乳酸脱氢酶A(LDHA)、M2型丙酮酸激酶(PKM2)、还原型辅酶Ⅱ氧化酶2(NOX2)、还原型辅酶Ⅱ氧化酶4(NOX4)的mRNA表达;测定细胞内MMP3、MMP13、P65、IκB-ζ、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)以及LDHA蛋白表达水平;进一步检测细胞上清液中一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)和乳酸的浓度,测定细胞内辅酶Ⅰ(NAD)的还原态(NADH)和氧化态(NAD+)的比率,以及细胞内活性氧(ROS)水平。结果温经通络汤含药血清可显著抑制IL-1β软骨细胞内IL-1β、IL-6、TNF-α的mRNA表达(P<0.01),降低细胞上清液中NO浓度(P<0.05,P<0.01),下调IκB-ζ(P<0.05)和P65蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。温经通络汤含药血清可显著下调MMP3、MMP9、MMP13以及ADAMTS4 mRNA表达(P<0.01),抑制MMP13(P<0.05,P<0.01)和MMP3(P<0.05)的蛋白表达。氧化应激方面,它可显著抑制软骨细胞内ROS的产生,提高NADH/NAD+比率,降低上清液中MDA浓度,下调HIF-1α蛋白表达(P<0.01)。温经通络汤含药血清可显著降低乳酸浓度,下调LDHA、PKM2、NOX2、NOX4的表达,降低细胞内糖酵解水平(P<0.05,P<0.01)。结论温经通络汤含药血清可通过抑制炎症、软骨降解、氧化应激和糖酵解,缓解IL-1β诱导的小鼠原代软骨细胞损伤,其机制可能与调控IκB-ζ/HIF-1α/LDHA轴有关。 展开更多
关键词 温经通络汤含药血清 IκB-ζ/HIF-1α/LDHA轴 细胞介素-1Β 软骨细胞损伤
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串珠镰刀菌素致软骨细胞损伤及硒保护作用的实验研究
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作者 徐艺 王治伦 +3 位作者 曹峻玲 代晓霞 谭希旺 耿冬 《中国地方病防治》 CAS 2001年第2期68-71,共4页
本实验以串珠镰刀菌素MON和硒Se共同作用于体外培养的软骨细胞,观察其对软骨细胞及基质代谢的影响。结果显示:加 MON 0.4、0.7、1.0mg/L组,随着毒素浓度的增加,软骨细胞损伤加重,NDA合成和细胞分裂增殖能... 本实验以串珠镰刀菌素MON和硒Se共同作用于体外培养的软骨细胞,观察其对软骨细胞及基质代谢的影响。结果显示:加 MON 0.4、0.7、1.0mg/L组,随着毒素浓度的增加,软骨细胞损伤加重,NDA合成和细胞分裂增殖能力减低,细胞膜流动性逐渐降低,基质中葡萄糖醛酸含量逐渐减少,加Se0.1mg/L后以上影响有所减弱,但不能阻止损伤的发生。光学显微镜下观察各组细胞变化不大,电镜下毒素组细胞损伤明显,与对照组有显著差别。 展开更多
关键词 串珠镰九菌素 软骨细胞培养 软骨细胞损伤 实验 大骨节病
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成软骨细胞损伤与细胞因子的调节作用
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《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2012年第28期M0001-M0001,共1页
成软骨细胞就是指间充质细胞首先收回其突起,聚集成团,此细胞团中间的细胞经分裂分化转变成的一种大而圆的细胞,是软骨组织发生过程中最原始的细胞,它由间充质细胞分化而来。成软骨细胞产生基质和纤维,当基质的量增加到一定程度时... 成软骨细胞就是指间充质细胞首先收回其突起,聚集成团,此细胞团中间的细胞经分裂分化转变成的一种大而圆的细胞,是软骨组织发生过程中最原始的细胞,它由间充质细胞分化而来。成软骨细胞产生基质和纤维,当基质的量增加到一定程度时,成软骨细胞就被分隔在陷窝内,分化为成熟的软骨细胞。 展开更多
关键词 软骨细胞损伤 细胞因子 软骨细胞 间充质细胞 调节 细胞分化 发生过程 软骨组织
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本期专题:成软骨细胞损伤与细胞因子的调节作用
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《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2012年第28期5195-5195,共1页
4碱性成纤维细胞生长因子可拮抗过氧化氢对软骨细胞的损伤赵文斌(华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科,湖北省武汉市430030)推荐理由:氧自由基在类风湿性关节炎和骨关节病的发病机制中起重要的作用,是骨性关节炎发病的重要机制... 4碱性成纤维细胞生长因子可拮抗过氧化氢对软骨细胞的损伤赵文斌(华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科,湖北省武汉市430030)推荐理由:氧自由基在类风湿性关节炎和骨关节病的发病机制中起重要的作用,是骨性关节炎发病的重要机制。Panasiuk等对单层培养的软骨细胞研究表明:氧自由基可抑制软骨细胞的增殖,减少软骨细胞胶原的合成:氧自由基和蛋白酶一起能明显增加细胞的脱壁和细胞问基质的破坏。国内亦有学者报道,氧自由基可抑制关节软骨细胞DNA的合成,引起软骨细胞膜严重损伤。 展开更多
关键词 软骨细胞损伤 细胞因子 碱性成纤维细胞生长因子 类风湿性关节炎 培养的软骨细胞 软骨细胞DNA 氧自由基 调节
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本期专题:成软骨细胞损伤与细胞因子的调节作用
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《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2012年第28期5184-5184,共1页
1转化生长因子133重组腺病毒载体转染退变髓核细胞后的增殖活性,见2012年第24期4408-4412页2胰岛素样生长因子1及血小板源性生长因子对人退变髓核细胞生物学活性的影响,见2012年第2期223-226页3基质细胞衍生因子1对骨关节炎软骨Ⅱ型... 1转化生长因子133重组腺病毒载体转染退变髓核细胞后的增殖活性,见2012年第24期4408-4412页2胰岛素样生长因子1及血小板源性生长因子对人退变髓核细胞生物学活性的影响,见2012年第2期223-226页3基质细胞衍生因子1对骨关节炎软骨Ⅱ型胶原及分泌基质金属蛋白酶的影响。 展开更多
关键词 软骨细胞损伤 细胞因子 血小板源性生长因子 胰岛素样生长因子1 基质细胞衍生因子1 腺病毒载体转染 细胞生物学活性 基质金属蛋白酶
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LINC00052靶向miR-145发挥对TNF-α诱导人关节软骨细胞损伤的保护作用 被引量:4
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作者 阿布都艾尼·热吾提 周文正 +2 位作者 车立新 徐江波 孙俊刚 《实用骨科杂志》 2021年第9期804-810,共7页
目的明确长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)LINC00052在肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)诱导人关节软骨细胞损伤中的作用,并阐明其对miR-145的调控机制。方法利用0、10及30 ng/mL TNF-α诱导建立人C-20/A4关... 目的明确长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)LINC00052在肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)诱导人关节软骨细胞损伤中的作用,并阐明其对miR-145的调控机制。方法利用0、10及30 ng/mL TNF-α诱导建立人C-20/A4关节软骨细胞损伤模型。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(real time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测LINC00052与miR-145的表达及二者的相关性。通过特异性短发夹RNA干扰C-20/A4细胞中LINC00052的表达,采用四唑盐比色法[3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT]检测细胞增殖能力。采用蛋白质印迹检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase 3,CASP3)、cleaved CASP3、Bcl-2相关X(Bcl-2 associated X,BAX)蛋白的表达水平。采用酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测炎症因子白介素(interleukin,IL)-1β、IL-6及IL-13的浓度。采用双荧光素酶报告基因实验分析LINC00052对miR-145的直接调控作用。采用拯救实验验证LINC00052靶向miR-145在TNF-α诱导C-20/A4细胞损伤中的作用。采用t检验与方差分析进行统计比较。结果LINC00052在0、10及30 ng/mL TNF-α诱导C-20/A4细胞中的表达水平呈上调趋势,而miR-145呈下调趋势,二者表达水平呈负相关(P<0.05)。干扰LINC00052降低TNF-α诱导C-20/A4细胞增殖能力,增加CASP3、cleaved CASP3及BAX的蛋白表达水平,并提高IL-1β、IL-6及IL-13的浓度(P<0.05)。miR-145是LINC00052的直接靶基因,干扰LINC00052上调C-20/A4细胞中miR-145的表达水平(P<0.05)。干扰miR-145部分逆转LINC00052抑制对TNF-α诱导C-20/A4细胞增殖、凋亡及炎症反应的影响(P<0.05)。结论LINC00052靶向miR-145发挥对TNF-α诱导人关节软骨细胞损伤的保护作用,其机制可能与促进增殖并抑制凋亡与炎症反应有关。 展开更多
关键词 LINC00052 软骨细胞 损伤 MIR-145 调控
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高糖诱导软骨细胞损伤及其潜在机制研究
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作者 马翅 杨娜娜 +5 位作者 罗刚 赵峻 刘唐浩 彭秀娟 彭俊 谭扬帆 《中华实验外科杂志》 CAS 北大核心 2023年第7期1297-1297,共1页
本研究旨在观察高糖对关节软骨细胞的损伤作用,探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)在高糖诱导软骨细胞损伤中的作用。
关键词 高糖诱导 关节软骨细胞 损伤作用 潜在机制 软骨细胞损伤
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雪腐镰刀菌烯醇致软骨细胞的损伤作用 被引量:3
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作者 熊咏民 曹峻岭 张矢远 《中国地方病学杂志》 CAS CSCD 1994年第5期257-260,共4页
应用不同浓度的雪腐镰刀菌烯醇(NIV)作用于培养的兔软骨细胞,动态观察NIV对软骨细胞生长代谢的影响。结果显示NIV能使软骨细胞中的DNA,基质中的葡萄糖醛酸(GLcUA)和碱性磷酸酶(AKP)含量降低。表明NIV对... 应用不同浓度的雪腐镰刀菌烯醇(NIV)作用于培养的兔软骨细胞,动态观察NIV对软骨细胞生长代谢的影响。结果显示NIV能使软骨细胞中的DNA,基质中的葡萄糖醛酸(GLcUA)和碱性磷酸酶(AKP)含量降低。表明NIV对软骨细胞具有明显的毒性损伤作用,能够引起软骨细胞的形态结构和代谢功能的改变。 展开更多
关键词 雪腐镰刀菌 烯醇 软骨细胞损伤
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circ_0010729通过靶向调控miR-330-5p影响IL-1β诱导的软骨细胞损伤
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作者 秦夏冰 文科 姚忠军 《现代医学》 2021年第10期1166-1172,共7页
目的:探讨环状RNA 0010729(circ_0010729)是否靶向调控miR-330-5p影响白细胞介素(IL-1β)诱导的软骨细胞损伤。方法:实时定量PCR(RT-qPCR)分析IL-1β诱导后软骨细胞中circ_0010729和miR-330-5p表达量。双荧光素酶报告实验和RT-qPCR确定c... 目的:探讨环状RNA 0010729(circ_0010729)是否靶向调控miR-330-5p影响白细胞介素(IL-1β)诱导的软骨细胞损伤。方法:实时定量PCR(RT-qPCR)分析IL-1β诱导后软骨细胞中circ_0010729和miR-330-5p表达量。双荧光素酶报告实验和RT-qPCR确定circ_0010729对miR-330-5p的靶向调控作用。流式细胞术分析circ_0010729和miR-330-5p表达对IL-1β诱导软骨细胞凋亡的影响。试剂盒测定IL-6和γ干扰素(IFN-γ)水平。蛋白质印迹法(Western blotting)分析Bcl-2和Bax表达量。结果:IL-1β诱导后软骨细胞中circ_0010729表达量显著升高(P<0.05),而miR-330-5p表达量显著降低(P<0.05)。circ_0010729可通过与miR-330-5p特异性结合并负调控miR-330-5p表达。抑制circ_0010729或过表达miR-330-5p显著降低IL-1β诱导的软骨细胞凋亡,下调Bax蛋白表达,上调Bcl-2蛋白表达,降低IL-6和IFN-γ水平(P<0.05)。下调miR-330-5p表达显著减弱抑制circ_0010729对IL-1β诱导的软骨细胞凋亡以及炎症反应的影响(P<0.05)。结论:抑制circ_0010729通过靶向miR-330-5p能够减弱IL-1β诱导的软骨细胞损伤。 展开更多
关键词 环状RNA 0010729 miR-330-5p 细胞介素 软骨细胞损伤
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基于生物信息学分析骨关节炎中软骨生成祖细胞损伤的差异基因及中药预测
10
作者 梁爽 郭赛 +1 位作者 葛殊伟 孙绍裘 《湖南中医杂志》 2023年第2期160-168,共9页
目的:通过生物信息学方法分析骨关节炎(OA)中软骨生成祖细胞(CPC)损伤的差异基因表达,并找出关键基因来预测可用于诊断或治疗CPC损伤的生物标志物及中药。方法:从GEO数据库下载CPC数据。共包含样本8例。以R语言处理数据,得到差异表达基... 目的:通过生物信息学方法分析骨关节炎(OA)中软骨生成祖细胞(CPC)损伤的差异基因表达,并找出关键基因来预测可用于诊断或治疗CPC损伤的生物标志物及中药。方法:从GEO数据库下载CPC数据。共包含样本8例。以R语言处理数据,得到差异表达基因。再使用DAVID数据库对差异表达基因进行基因本体(GO)功能及京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。对显著差异表达的前100个差异表达基因进行分析后绘制蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络图。比较关键基因在OA组织及正常组织中的表达水平。筛选网络中显著模块及关键基因,最后预测作用于关键基因的中药。结果:共筛选出DEGs 1027个,其中上调基因327个,下调基因700个。DEGs显著富集于细胞外基质(ECM)受体相互作用、金黄色葡萄球菌感染、粘着斑、人乳头瘤病毒感染、磷脂酰肌醇-3-激酶-蛋白激酶B(PI3K-Akt)信号通路、肺结核等通路。前7个关键基因为:基质金属肽酶3(MMP3)、脂多糖结合蛋白(LBP)、基质金属肽酶1(MMP1)、脂质运载蛋白(LCN2)、人血浆丝氨酸蛋白激酶(SERPINA5)、成纤维细胞生长因子23(FGF23)、颗粒酶B(GZMB)。其中MMP3和LBP为核心基因。MMP3和LBP出现显著表达,预测出治疗CPC损伤的潜在代表中药有黄芩、淫羊藿、桃仁等。结论:MMP3和LBP的显著表达有助于区分OA中的CPC,并且有望成为诊断和治疗CPC损伤的生物标志物。 展开更多
关键词 骨关节炎 软骨生成祖细胞损伤 关键基因 生物信息学 中药预测
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酸敏感离子通道1a介导的钙离子内流在酸诱导的终板软骨细胞凋亡中的作用
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作者 袁凤来 李霞 +2 位作者 姜东林 何新龙 徐瑞生 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1474-1474,共1页
椎间盘退行性疾病形成的关键因素之一是软骨终板退变.椎体软骨终板退变与椎间盘退变呈正相关,而终板软骨细胞是终板生理功能维持的关键.如何阻止软骨终板内软骨细胞损伤,将是预防软骨终板乃至整个椎间盘退变的关键.酸敏感离子通道1a (A... 椎间盘退行性疾病形成的关键因素之一是软骨终板退变.椎体软骨终板退变与椎间盘退变呈正相关,而终板软骨细胞是终板生理功能维持的关键.如何阻止软骨终板内软骨细胞损伤,将是预防软骨终板乃至整个椎间盘退变的关键.酸敏感离子通道1a (ASIC1a)是新发现的一类对酸敏感的阳离子通道,其主要通过介导钙离子内流发挥作用[1],在脑缺血等病理过程中发挥作用.我们前期研究结果显示ASICs在终板软骨细胞的表达[2].本实验旨在观察ASIC1 a介导的钙离子内流在酸诱导的终板软骨细胞凋亡中的作用. 展开更多
关键词 酸敏感离子通道 软骨细胞凋亡 钙离子内流 软骨终板 介导 椎间盘退变 椎间盘退行性疾病 软骨细胞损伤
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MAPK信号通路与骨关节炎 被引量:13
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作者 窦天旭 李旭 《解剖科学进展》 2017年第6期649-652,共4页
丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,MAPK)是真核细胞信号传递的重要途径之一,在调节控制细胞结构和功能活动中发挥关键作用。MAPK包括多个亚家族,与骨关节炎(osteoarthritis,OA)软骨细胞损伤,凋亡,诱导产生基质金属... 丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,MAPK)是真核细胞信号传递的重要途径之一,在调节控制细胞结构和功能活动中发挥关键作用。MAPK包括多个亚家族,与骨关节炎(osteoarthritis,OA)软骨细胞损伤,凋亡,诱导产生基质金属蛋白酶密切相关的有p38、JNK、ERK三条通路,MAPK通路的异常激活可加速OA的进展。 展开更多
关键词 MAPK信号通路 骨关节炎 丝裂原活化蛋白激酶 PROTEIN 基质金属蛋白酶 细胞信号传递 软骨细胞损伤 MAPK通路
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Effect of basic fibroblast growth factor and hyaluronic acid on proliferation of rabbit chondrocytes in vitro 被引量:3
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作者 沈雁 李斯明 +3 位作者 唐毅 钟灿灿 梁佩红 陈鸿辉 《Chinese Journal of Traumatology》 CAS 2004年第1期42-44,共3页
Objective: To investigate the effect of basic fibroblast growth factor (bFGF) and hyaluronic acid (HA) on the proliferation of rabbit chondrocytes in vitro. Methods: Chondrocytes from the knee joints of New Zealand wh... Objective: To investigate the effect of basic fibroblast growth factor (bFGF) and hyaluronic acid (HA) on the proliferation of rabbit chondrocytes in vitro. Methods: Chondrocytes from the knee joints of New Zealand white rabbits were cultured. bFGF or HA or both were added into the culture medium respectively, and the proliferation of the chondrocytes was measured with MTT 3 (4, 5 dimethylthiazol 2 yl) 2, 5 diphenyl tetra zolium bromide. (MTT, Sigma, M2128). Results: Basic fibroblast growth factor (10 ng/ml) with low concentration of fetal bovine serum in the culture medium promoted the proliferation of chondrocytes significantly, and this effect reached its maximum when concentration of bFGF reached 50 ng/ml. HA itself had no effect on the proliferation of chondrocytes. However, when bFGF was used in combination with HA, especially when the concentration of bFGF was 50 500 ng/ml and that of HA was 10 50 ng/ml, the effect on the proliferation of chondrocytes was much more than when bFGF or HA was used alone. Conclusions: bFGF can promote the proliferation of chondrocytes. HA, which has no effect on the proliferation of the cells, can maintain a normal growth of chondrocytes. When bFGF is used in combination with HA, more proliferation is obtained. 展开更多
关键词 Basic fibroblast growth factor Hyaluronic acid CHONDROCYTES
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