载脂蛋白E敲除(ApoE^(-/-))小鼠整装(whole-mount)主动脉免疫荧光组织化学染色的血管外膜淋巴管成像

目的 探索载脂蛋白E敲除(ApoE^(-/-))小鼠整装(whole-mount)主动脉免疫荧光组织化学染色法显示血管外膜淋巴管的可行性。方法 制备ApoE^(-/-)小鼠整装主动脉,进行淋巴管内皮受体1(LYVE1)、 α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)免疫荧光组织化学染色,染色后组织经5 g/L苏丹黑B处理30 min、组织透明液透明,移至自制的样本容器中,荧光显微镜下成像。结果经5 g/L苏丹黑B处理的整装主动脉可见血管自发荧光显著降低,外膜淋巴管的特异性荧光强度显著增强,更易观察且不会对其他通道荧光产生干扰。结论 建立的ApoE^(-/-)小鼠整装主动脉免疫荧光组织化学染色显示血管外膜淋巴管的方法操作简便,特异性好。

载脂蛋白E联合临床相关指标预测阿尔兹海默病模型的建立与验证

目的 以载脂蛋白E(ApoE)为基础,结合阿尔茨海默病发病危险因素及临床常见指标,构建阿尔兹海默病发病风险的临床预测模型。方法 从南京市中医院大数据平台中,检索时间为2019年1月至2021年1月两年时间内,阿尔兹海默病患者61例,模糊匹配健康体检者111例。利用LASSO回归筛选危险因素,构建logistic回归预测模型,10折交叉进行区分度验证,bootstrap法进行校准度验证,临床决策曲线评判预测模型的临床指导性,最后以列线图可视化呈现临床预测模型。结果 筛选出12个变量,最终纳入4个危险因素:年龄、游离三碘甲状腺素(FT3)、性别、ApoE。全样本ROC曲线下面积为0.879,10折交叉9次验证后ROC曲线下平均面积为0.864;采用Bootstrap法抽样及Hosmer-Lemeshow校准度检验,结果χ^(2)=6.496,P=0.592>0.05。临床决策曲线阈值概率区间为1%~88.6%。结论 利用年龄、游离三碘甲状腺素、性别、 ApoE构建的临床预测模型对患者进行个体化评估,可以预警阿尔兹海默病,开展早期预防干预,减缓该病的发生发展。

载脂蛋白E基因多态性与颅脑损伤后认知功能障碍的相关性研究

目的探讨载脂蛋白E(ApoE)基因多态性与颅脑损伤后认知功能障碍的关系。方法前瞻性选取2018年1月—2023年2月重庆医科大学附属巴南医院神经外科收治的57例颅脑损伤后认知功能患者为认知功能障碍组,同期收治的不伴有认知功能障碍的颅脑损伤患者51例为对照组。取患者抗凝静脉全血2~4 mL进行核酸提取,使用APOE基因检测试剂盒,采用多重荧光PCR法对提取的DNA进行APOE基因ε2、ε3和ε4位点的检测,比较两组基因型分布差异。用Logistic回归分析对两组患者一般资料及携带ε2、ε3和ε4基因进行筛选,得出颅脑损伤后认知功能障碍的基因危险因素。结果两组患者基因型分布差异有统计学意义(P<0.05),两组ε3基因携带者和ε4基因携带者占比有明显差异(P<0.05)。单因素Logistic回归分析提示,仅携带ε4为颅脑损伤后认知功能障的危险因素[P=0.005,OR=0.317(95%CI:0.142~0.711)]。把单因素Logistic回归中P值最低的5个变量(GCS、性别、损伤程度及ε3、ε4携带者)所有因素纳入多因素Logistic回归分析,发现携带ε4基因是颅脑损伤后认知功能障的危险因素[P=0.039,OR=0.379(95%CI:0.150~0.954)]。结论ApoEε4基因与颅脑损伤后认知功能障碍有关。

高热量饮食和年龄对载脂蛋白E基因敲除小鼠脑功能的影响

目的探讨高热量饮食和年龄对载脂蛋白E基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠脑功能的影响。方法选取8月龄成年ApoE^(-/-)小鼠和18月龄老年ApoE^(-/-)小鼠共20只,随机分为正常饮食成年组、正常饮食老年组、高热量饮食成年组、高热量饮食老年组,每组5只。正常饮食成年组、正常饮食老年组小鼠喂食实验室标准饲料,高热量饮食成年组、高热量饮食老年组小鼠喂食高脂饲料,干预8周。用体质量监测和葡萄糖耐量实验测试小鼠体质量、血糖变化,核磁共振波谱检测海马和下丘脑N-乙酰天冬氨酸(NAA)、胆碱(Cho)含量,Y迷宫和旷场实验检测认知功能,Western blot检测脑组织突触体相关蛋白25(SNAP-25)、突触素(synaptophysin)、突触后致密蛋白95(PSD-95)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、白细胞介素1β(IL-1β)表达。结果与正常饮食成年组比较,高热量饮食成年组海马NAA、下丘脑Cho和NAA、自发交替率、SNAP-25、synaptophysin、PSD-95表达降低,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),iNOS、IL-1β表达升高,差异有统计学意义(P<0.01);与正常饮食成年组比较,正常饮食老年组海马NAA、下丘脑Cho、SNAP-25、synaptophysin、PSD-95表达降低(P<0.05,P<0.01),iNOS、IL-1β表达升高(P<0.01);与正常饮食老年组比较,高热量饮食老年组海马和下丘脑Cho和NAA、中心路程/总路程、SNAP-25、synaptophysin、PSD-95表达降低(P<0.05,P<0.01),iNOS、IL-1β表达升高(P<0.01);与高热量饮食成年组比较,高热量饮食老年组海马NAA、中心路程/总路程、平均速度、synaptophysin表达降低(P<0.05,P<0.01),iNOS、IL-1β表达升高(1.61±0.10 vs 1.35±0.13,2.04±0.08 vs 1.54±0.11,P<0.05,P<0.01)。结论高热量饮食导致ApoE^(-/-)小鼠代谢障碍和神经炎症,抑制突触蛋白表达引起认知功能障碍;长期高热量饮食和年龄增加促进ApoE^(-/-)小鼠脑功能衰退。

血清中载脂蛋白E、sST2及游离脂肪酸水平对急性缺血性脑卒中患者病情转归的预测价值

目的:探究血清中载脂蛋白E(Apolipoprotein E,ApoE)、可溶性的生长刺激表达基因2蛋白(Soluble growth stimulation expressed gene 2,sST2)及游离脂肪酸(Free fatty acid,FFA)水平对急性缺血性脑卒中患者病情转归的预测价值。方法:选取本院2020年1月至2022年12月神经内科收治的163例急性缺血性脑卒中(Acute ischemic stroke,AIS)患者作为研究对象,根据发病后90 d的转归情况分成转归良好组和转归不良组。收集患者的基线资料;检测对比两组患者血清FFA、ApoE及sST2水平;分析影响AIS患者病情转归的因素;分析ApoE、sST2及FFA表达单独及联合检测对AIS患者转归的预测价值。结果:转归不良组的高血压和高血脂情况显著增多;血清ApoE、sST2及FFA的表达均明显低于转归不良组(P<0.05)。多因素Logistic分析显示,高血压、高血脂、ApoE、sST2及FFA表达均为病情转归的影响因素(P<0.05)。经ROC曲线分析可得,ApoE、sST2及FFA预测AIS患者转归的AUC值分别为0.768、0.740、0.801;联合检测的AUC值为0.874。结论:高血压、高血脂、ApoE、sST2及FFA表达均为病情转归的影响因素,且ApoE、sST2及FFA三项指标联合预测AIS患者的病情转归更有效。

中医药干预载脂蛋白E及其信号通路治疗冠心病的研究进展

综述中医药干预载脂蛋白E(Apo E)及其相关信号通路治疗冠心病的研究进展。Apo E与冠心病具有密切关系,目前西医治疗冠心病的方式主要为手术治疗及药物治疗,但均有较明显的副作用。中药可多靶点地调控NF-κB、NLRP3炎症小体、eNOS/NO、LXRα-ABCA1-ApoA-I等信号通路,发挥抗炎、调节脂质代谢、稳定斑块、减轻血管内皮功能障碍、调节胆固醇逆转运的作用,从而达到治疗冠心病的目的。

嗅三针对帕金森病痴呆小鼠海马CA1区载脂蛋白E和病理底物表达的影响

目的:观察嗅三针干预对帕金森病痴呆(Parkinson’s disease dementia,PDD)小鼠海马CA1区载脂蛋白E(apolipoprotein E,Apo E)、胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)以及相关核心病理底物表达的影响,探讨嗅三针改善PDD认知功能的部分作用机制。方法:将雄性C57BL/6小鼠随机分为空白组(Control)、假手术组(Sham)、模型组(Model)和电针组(AE),每组10只;采用单侧内侧前脑束(medial forebrain tract,MFB)注射6-羟多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)建立PD模型并筛选PDD小鼠。建模筛选成功后,电针组选取嗅三针进行电针治疗,各组小鼠干预14天后采用Morris水迷宫实验和穿梭箱实验评估各组小鼠学习记忆能力;HE染色观察海马CA1区细胞病理改变;免疫印迹法检测海马CA1区α-syn、Aβ、Apo E蛋白的表达;免疫荧光双标观察海马CA1区Apo E与GFAP的共定位率。结果:与模型组比较,电针组小鼠水迷宫逃避潜伏期缩短(P<0.01),穿越平台次数增加(P<0.05),穿梭箱主动回避次数增加(P<0.05),电击刺激平均时间减少(P<0.01)。模型组小鼠海马CA1区神经细胞排列稀疏、变性坏死,细胞核体积变小、浓染、结构不清,呈核固缩表现;而电针组小鼠海马CA1区神经元病变有明显改善,大部分细胞排列规则,细胞核圆而大,染色浅,形态清晰。电针组小鼠海马CA1区α-syn、Aβ、Apo E蛋白以及Apo E与GFAP共定位率均较模型组减少(P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.05)。结论:嗅三针可提高PDD小鼠认知能力并改善神经元形态结构与功能,机制可能与其抑制星形胶质细胞Apo E表达从而减少海马CA1区α-syn、Aβ沉积有关。

老年冠心病患者载脂蛋白E基因多态性与尿酸及血脂的相关性研究

目的分析老年冠心病患者载脂蛋白E(ApoE)基因多态性与尿酸及血脂的相关性。方法回顾性选取2021年1月至2022年12月于徐州医科大学附属医院接受冠状动脉造影并确诊为冠心病的患者290例,根据患者ApoE基因型结果分为ApoEε2组41例(ε2/ε2、ε2/ε3基因型)、ApoEε3组180例(ε3/ε3基因型)、ApoEε4组69例(ε3/ε4、ε4/ε4基因型),分析比较3组尿酸及血脂分布差异;根据尿酸值二分位法分为低尿酸组146例(尿酸≤278μmol/L)和高尿酸组144例(>278μmol/L)。通过多因素logistics回归分析ApoE与尿酸之间的关系。结果ApoEε3组、ApoEε4组总胆固醇水平高于ApoEε2组;ApoEε4组三酰甘油水平高于ApoEε3组;ApoEε3组高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平高于ApoEε2组,ApoEε4组HDL-C水平低于ApoEε3组;ApoEε4组低密度脂蛋白胆固醇水平高于ApoEε2组、ApoEε3组(P<0.05)。高尿酸组男性、体质量指数、收缩压、舒张压、高血压、三酰甘油、肌酐显著高于低尿酸组(P<0.05,P<0.01)。多因素logistics回归分析显示,总胆固醇、三酰甘油、肌酐与高尿酸独立相关(P<0.05,P<0.01);以ApoEε3组基因型为参照,ApoEε2组基因型(OR=2.868,95%CI:1.194~6.890,P=0.018)、ApoEε4组基因型(OR=0.268,95%CI:0.132~0.544,P=0.000)与高尿酸显著相关。结论ApoE基因多态性与老年冠心病患者血脂及尿酸代谢相关,ApoEε2(ε2/ε2、ε2/ε3)基因型与尿酸水平升高相关,ApoEε4(ε3/ε4、ε4/ε4)基因型与尿酸降低相关,可为临床老年心血管病患者干预提供参考。

载脂蛋白E在阿尔茨海默病发病机制中的作用研究进展

阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)是一种神经系统退行性疾病,其发病机制复杂,临床上主要依靠药物治疗来减缓AD的病程发展,目前尚无根治AD的药物。载脂蛋白E(apolipoprotein E,APOE)的遗传变异作为散发性AD发生最常见的风险因素,受到越来越多的关注。胶质细胞作为脑内APOE的主要来源,其功能改变在AD发生发展中起到十分重要的作用。现就APOE介导胶质细胞功能改变、血脑屏障损害以及突触功能异常在AD发病机制中的作用研究进展进行综述,为AD的早期筛查及防治提供理论依据。

载脂蛋白E基因多态性与急性冠状动脉综合征关系的研究进展

急性冠状动脉综合征(ACS)是由不稳定的冠状动脉粥样硬化斑块(AP)破裂或糜烂导致血栓形成而引发的一系列缺血性疾病,其病理基础为AP形成,这一过程受到脂质代谢紊乱的驱动。血脂水平是ACS预后的关键因素,载脂蛋白E(ApoE)作为脂质代谢的关键调控因子,其多态性与血脂异常密切相关。而ApoE4基因型患者ACS后强化他汀治疗效果不佳是ACS的独立危险因素。未来明确ApoE基因多态性与ACS的关系,有助于为ACS患者制订个体化降脂方案提供更为精准、安全的策略。

载脂蛋白Eε4基因与阿尔茨海默病关系的研究进展

目前研究认为,载脂蛋白E(apolipoprotein E,APOE)ε4基因是与晚发性阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)发病及预后关联最强的风险基因,与较高的发病风险、较差的认知功能预后有关。APOEε4可通过引起脑内神经病理蛋白沉积、加剧神经炎症和氧化应激、破坏血-脑屏障和脂质稳态等机制造成突触损伤,从而导致AD的发生和进展。现就APOEε4与AD流行病学、临床症状、神经病理和发病机制的关系进行综述,旨在为AD的早期诊治提供新思路。

载脂蛋白E在恶性肿瘤中的作用机制

载脂蛋白E(apoE)是脂质代谢中的重要分子,通过调节细胞增殖、能量代谢、氧化应激、机体固有免疫等方式,在多种恶性肿瘤的发生发展中发挥重要作用,并影响患者的治疗效果,已成为潜在的肿瘤标志物和有潜力的治疗靶点,对于深入理解多种恶性肿瘤的病因学,推动恶性肿瘤的预防及开发新的治疗策略具有重要意义。本文对apoE的生物化学与分子生物学属性进行介绍,并梳理apoE在各个癌种的发生发展中发挥的作用,总结apoE与肿瘤的各种生物学特性之间的关系,探讨其作为肿瘤标志物与治疗靶点的潜力和应用价值。

载脂蛋白E基因单核苷酸多态性与老年原发性高血压并发心房颤动的关联性研究

目的探讨载脂蛋白E(ApoE)基因单核苷酸多态性(SNP)与老年原发性高血压(PH)并发心房颤动(房颤)的关系。方法前瞻性观察性研究。连续纳入2020年8月至2023年8月贵州医科大学附属医院收治的678例老年PH患者为研究对象,根据患者房颤发生情况,分为房颤组(256例)与非房颤组(422例)。收集患者临床资料,比较两组间差异。通过MassARRAY平台检测患者ApoE基因SNP,分析两组ApoE基因SNP位点的基因型和等位基因分布情况。采用多因素logistic回归分析ApoE基因SNP位点与老年PH并发房颤的关系。结果房颤组年龄、吸烟史占比、24 h平均收缩压、高血压病程、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、左心房内径(LAD)和左心室舒张末期内径(LVEDD)均大于非房颤组(均为P<0.05),左心室射血分数(LVEF)小于非房颤组(P<0.001)。房颤组ApoE基因rs440446位点A等位基因频率以及rs439401位点AA基因型频率和A等位基因频率高于非房颤组(均为P<0.05);房颤组ApoE基因rs405509位点GG基因型频率和G等位基因频率低于非房颤组(均为P<0.05)。多因素logistic回归分析结果显示,年龄、24 h平均收缩压、高血压病程、LDL-C、LAD、LVEDD以及ApoE基因rs440446位点A等位基因、rs439401位点AA基因型与A等位基因均是老年PH并发房颤的危险因素(均为P<0.05),ApoE基因rs405509位点G等位基因是其保护因素(P=0.046)。进一步校正混杂因素(年龄、24 h平均收缩压、高血压病程、LDL-C、LAD、LVEDD)后,多因素logistic回归分析显示,ApoE基因rs440446位点A等位基因、rs439401位点AA基因型与A等位基因、rs405509位点G等位基因仍是老年PH并发房颤的影响因素(均为P<0.05)。结论ApoE基因rs440446、rs439401、rs405509位点多态性与老年PH患者并发房颤存在关联,对老年PH患者防治房颤具有一定的指导意义。

载脂蛋白E基因多态性及脂质代谢水平与胆囊结石形成的关系研究

目的探讨载脂蛋白(Apo)E基因多态性及脂质代谢水平与胆囊结石形成的关系。方法回顾性选取2022年6月至2023年6月在温州市人民医院诊断为胆囊结石的100例患者作为胆囊结石组,另选取同期在本院体检的100名健康者作为对照组。使用基因检测试剂盒进行多通道荧光定量分析Apo E基因多态性。比较两组Apo E基因型分布、等位基因频率分布以及血清TG、TC、HDL-C、LDL-C、非高密度脂蛋白胆固醇及脂蛋白水平差异。采用logistic回归分析胆囊结石形成的独立危险因素,采用ROC曲线评估危险因素对胆囊结石的预测效能。结果胆囊结石组患者TC、HDL-C、LDL-C水平均高于对照组(均P<0.05)。Apo E基因多态性分析显示,胆囊结石组ε2、ε4等位基因频率均高于对照组(均P<0.01)。胆囊结石组E2/3、E2/4、E3/4、E4/4及E2/4+E3/4+E4/4基因型频率均高于对照组(均P<0.01)。logistic回归分析显示,E2/3、E2/4及E3/4基因型、性别、HDL-C水平及吸烟史均是胆囊结石形成的独立危险因素(均P<0.05)。而E2/4、E3/4、TG、HDL-C可作为胆囊结石的预测指标,其联合预测的灵敏度为0.710,特异度为0.910,约登指数为0.620,截断值为0.600,AUC为0.880。结论胆囊结石患者存在Apo E基因多态性,且Apo E基因多态性、性别、HDL-C水平及吸烟史与胆囊结石的形成密切相关,E2/4、E3/4、TG、HDL-C可作为预测胆囊结石形成的潜在指标。

载脂蛋白E在阿尔茨海默病病理过程中的病理机制研究进展

阿尔茨海默病(AD)是以认知功能减退为特征的老年人常见的神经系统变性疾病,是导致老年人痴呆最常见的病因。目前阿尔茨海默病发病机制尚不明确,尚无针对病因的治疗手段。载脂蛋白E(APOE)是目前唯一公认的AD风险基因,其编码的ApoE蛋白在β淀粉样蛋白(Aβ)沉积、tau蛋白的过度磷酸化和神经炎症反应等AD病理发生过程中起到重要作用。本文就ApoE的结构、功能及其在AD发生的病理过程中的作用进行综述,为寻找AD新的干预靶点提供思路和方向。

阿尔茨海默病中载脂蛋白E基因型依赖性脑组织蛋白质组特征

目的 探讨阿尔茨海默病(AD)患者脑组织蛋白组是否存在载脂蛋白E(ApoE)基因型依赖性特异性改变。方法 利用2020年宗教团体研究和记忆与老龄化项目尸检脑组织,根据阿尔茨海默病登记协会联盟病理学诊断标准和布拉克分期系统纳入阿尔茨海默病患者和正常对照的背外侧前额皮质的蛋白组学数据,分析不同ApoE基因型携带者的脑内蛋白表达特征。对各组差异表达蛋白再进行基因本体、京都基因与基因组百科全书和Reactome通路富集分析,并进一步对目标蛋白进行受试者操作特征曲线分析,评估所选蛋白对不同ApoE基因型携带者发生AD的预测准确性。结果本研究共纳入93例尸检背外侧前额皮质脑组织。串联质谱标签蛋白组结果显示ApoE4基因型携带者AD与对照组比较,共有22种蛋白质的表达差异有统计学意义,ApoE3基因型携带者AD与对照组比较,共有53种蛋白质的表达差异有统计学意义。不同ApoE基因型携带者的AD患者均表现出细胞黏附分子和氮代谢的改变,但是各自又有其独特的变化特征,ApoE4携带者还表现出胆固醇代谢改变,而ApoE3携带者有补体和凝血级联反应的改变。ApoE4携带者显著变化的22种蛋白的曲线下面积为1,可很好地预测发生AD的风险。结论 不同ApoE基因型患者在AD发病过程中的作用机制有所不同,AD患者可能需要根据其ApoE基因型进行个体化精准治疗。

甘油三酯葡萄糖指数和胰岛素抵抗代谢评分与携带载脂蛋白Eε4等位基因人群冠心病严重程度的相关性

目的分析冠状动脉粥样硬化性心脏病(CAD)患者胰岛素抵抗代谢评分(METS-IR)和甘油三酯葡萄糖指数(TyG)与携带载脂蛋白E(ApoE)ε4等位基因的CAD人群冠状动脉狭窄程度的相关性。方法回顾性分析2021年1月至2022年12月于徐州医科大学附属医院经冠状动脉造影确诊为冠心病,且ApoE基因检测结果为ApoE4(ε3ε4,ε4ε4)的308例冠心病患者的临床资料,计算TyG与METS-IR。采用2019年改良Gensini评分(GS)评价CAD狭窄程度,并将患者分为低GS组(106例)、中间GS组(100例)与高GS组(102例)。采用SPSS 27.0统计软件进行数据分析。根据数据类型分别采用单因素方差分析、Kruskal-Wallis H检验或χ2检验进行比较。采用logistic回归分析评估ApoE4冠心病患者冠状动脉狭窄程度的影响因素。采用Spearman相关性分析评估METS-IR和TyG与Gensini评分的相关性。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,采用Delong检验比较METS-IR和TyG对冠状动脉狭窄程度的预测价值。结果高GS组METS-IR明显高于非高GS组;高GS组TyG明显高于低GS组,差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关性分析显示,METS-IR和TyG与Gensini评分呈正相关(r=0.210,0.658;P<0.001)。logistic回归分析显示,METS-IR是携带ApoEε4等位基因冠心病患者狭窄程度的独立预测因子(OR=1.147,95%CI 1.077~1.221;P<0.001)。ROC曲线显示,METS-IR与TyG预测携带ApoEε4等位基因的冠心病人群冠状动脉狭窄程度曲线下面积分别为0.824和0.608,METS-IR预测效能明显更高。结论METS-IR相比于TyG对携带ApoEε4等位基因的CAD患者冠状动脉狭窄程度有更高预测价值。

橙皮素调控Nrf2/ARE通路改善载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化的实验研究

目的:基于核因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应原件(ARE)通路探讨橙皮素对载脂蛋白E基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠动脉粥样硬化(AS)的影响。方法:将48只ApoE^(-/-)小鼠用高脂饮食喂养12周后,采用左颈总动脉缩窄性套管法建立ApoE^(-/-)小鼠AS模型。模型制备成功后将ApoE^(-/-)小鼠随机分为模型组、橙皮素低剂量组、橙皮素高剂量组、鸦胆子苦醇组,每组12只。另取12只雄性C57BL/6J小鼠作为对照组,给予普通饲料喂养。橙皮素低、高剂量组小鼠分别给予50 mg/kg、100 mg/kg橙皮素灌胃,每日1次;鸦胆子苦醇组小鼠灌胃100 mg/kg橙皮素,隔天腹腔注射Nrf2抑制剂鸦胆子苦醇2 mg/kg,连续给药12周;对照组和模型组给予等量0.5%羧甲基纤维素钠灌胃。检测各组血清血脂水平以及丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平;油红O染色观察主动脉斑块形成和主动脉窦脂质沉积情况,并计算损伤面积百分比;荧光探针测定主动脉中活性氧(ROS)的生成;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测主动脉中Nrf2/ARE通路相关蛋白表达。结果:与对照组相比,模型组小鼠主动脉ROS增加,血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)、MDA、主动脉斑块损伤和主动脉窦脂质损伤面积百分比、Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)的表达均明显升高,血清SOD、GSH-Px活性、主动脉Nrf2、还原型辅酶/醌氧化还原酶(NQO1)、血红素加氧酶1(HO-1)的表达明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,橙皮素低、高剂量组小鼠ROS降低,血清TC、TG、LDL-C、ox-LDL、MDA水平、主动脉斑块损伤和主动脉窦脂质损伤面积百分比、Keap1均明显下降,HDL-C、SOD、GSH-Px活性、Nrf2、NQO1、HO-1的表达均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);鸦胆子苦醇可逆转高剂量橙皮素减轻ApoE^(-/-)小鼠AS病变的作用。结论:橙皮素可能通过激活Nrf2/ARE通路,维持内皮细胞中的氧化还原平衡,减轻ApoE^(-/-)小鼠AS病变,具有较好的抗AS作用。

载脂蛋白E在胆固醇逆向转运中作用的研究进展

载脂蛋白E(ApoE)是一种多功能蛋白质,参与血浆脂蛋白的清除、荷脂细胞的胆固醇外流及逆向转运等多种生理过程,降低人体低密度脂蛋白和极低密度脂蛋白的含量,从而降低患动脉粥样硬化(As)等心血管疾病的概率。基于对ApoE结构功能和作用机制的认识,ApoE模拟肽类药物为治疗As等心血管疾病提供新的方向。本文主要对ApoE在细胞胆固醇流出及胆固醇逆向转运等生理过程中的作用机制和ApoE模拟肽类药物研究进展进行综述,以期为As的防治提供新的思路。

载脂蛋白E在脂蛋白代谢、健康和心血管疾病中的作用

载脂蛋白E [1](ApoE)是一种含有299个氨基酸的34 kDa循环糖蛋白,主要在肝脏中合成,与富含甘油三酯的脂蛋白结合,在介导循环中酶解脂肪后对其残留物的清除。它在巨噬细胞中的合成启动高密度样脂蛋白的形成,从而影响胆固醇向肝脏的反向运输。在神经系统中,载脂蛋白E形成类似的脂蛋白,在细胞间发挥分配脂质的功能。ApoE通过影响低密度脂蛋白浓度和动脉粥样硬化风险的三种常见变体(同种异构体)解释了血浆脂蛋白的大部分变异。一般来说,ApoE2对心血管和神经系统健康最有利,而ApoE4最不利。ApoE变异与112位和158位的不同氨基酸有关:ApoE2的两个位点上都有半胱氨酸,ApoE4的两个位点上都有精氨酸,ApoE3的位点上分别有半胱氨酸和精氨酸,被视为野生型。矛盾的是,在代谢应激下,ApoE2的纯合性可能导致成人脂蛋白异常血症,这是由于残余脂蛋白与LDL受体和相关蛋白以及硫酸肝素蛋白聚糖的结合受损。这种高度致动脉粥样硬化的情况也见于载脂蛋白E的其他突变,但具有常染色体显性遗传。ApoE突变也可能引起脂蛋白肾小球病。在中枢神经系统中,ApoE结合淀粉样蛋白b蛋白和tau蛋白,片段可能导致细胞损伤。