核孔蛋白160基因对肾病综合征小鼠肾脏辅助性T细胞17/调节性T细胞免疫平衡的影响

目的探讨核孔蛋白160(NUP160)基因对肾病综合征小鼠肾脏辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)免疫平衡的影响。方法将30只小鼠随机分为空白组(n=10)和造模组(n=20)。造模组小鼠经尾静脉注射阿霉素溶液(7.5 mg·kg-1)制备原发性肾病综合征(PNS)模型,空白组小鼠经尾静脉注射等容积的生理盐水。造模成功后将造模组小鼠随机分为PNS组和NUP160组,每组10只。NUP160组小鼠经尾静脉注射NUP160(10 mg·kg-1),每日1次;PNS组和空白组小鼠经尾静脉注射等量生理盐水,每日1次;3组小鼠均连续干预4周。给药0、2、4周时,应用生化自动检测仪检测小鼠24 h尿蛋白定量(24 h HUPQ);给药结束后,采用酶联免疫吸附试验法检测各组小鼠血清白细胞介素(IL)-17和IL-10水平;苏木精-伊红(HE)染色、过碘酸希夫(PAS)染色、Masson染色法观察各组小鼠肾组织病理学变化;流式细胞术检测各组小鼠肾组织中Th17、Treg细胞比例。结果给药0、2、4周时,PNS组和NUP160组小鼠24 h HUPQ显著高于空白组(P<0.05)。给药0周时,PNS组与NUP160组小鼠24 h HUPQ比较差异无统计学意义(P>0.05);给药2、4周时,NUP160组小鼠24 h HUPQ显著低于PNS组(P<0.05)。与空白组比较,PNS组和NUP160组小鼠血清IL-17水平显著升高,IL-10水平显著降低(P<0.05);与PNS组比较,NUP160组小鼠血清IL-17水平显著降低,IL-10水平显著升高(P<0.05)。空白组小鼠肾组织无明显病理学变化。与空白组相比,PNS组小鼠HE染色发现肾小球细胞排列紊乱,肾小球轻度萎缩,少许炎症细胞浸润,球囊壁轻度增厚,小球囊腔轻度扩张;PAS染色发现系膜出现增生,肾间质可见炎症细胞浸润;Masson染色发现小鼠肾小球基底膜和间质蓝色胶原沉积明显增多,组织纤维化程度显著升高。与PNS组相比,NUP160组小鼠肾组织以上症状均得到明显改善。与空白组比较,PNS组和NUP160组小鼠肾组织中Th17占比、Th17/Treg比值显著增加,Treg占比显著降低(P<0.05);与PNS组比较,NUP160组小鼠肾组织中Th17占比、Th17/Treg比值显著降低,Treg占比显著增加(P<0.05)。结论NUP160可调节PNS小鼠的Th17/Treg免疫平衡,进而发挥改善PNS的作用。

靶向调节哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路对心力衰竭小鼠调节性T细胞/辅助性T细胞17免疫自稳失衡的影响

目的:探究哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的拮抗剂雷帕霉素(RAPA)调节mTOR信号通路对心力衰竭(心衰)小鼠调节性T细胞(Treg)/辅助性T细胞17(Th17)免疫自稳失衡的影响。方法:选用34只健康C57BL/6小鼠,采用冠状动脉左前降支结扎术构建心肌梗死后心衰小鼠模型。按随机数字表法将其随机分为假手术组、心衰组、低剂量RAPA组(RAPAL组)、中剂量RAPA组(RAPAM组)、高剂量RAPA组(RAPAH组),除心梗后心衰造模手术过程中死亡4只,最终每组6只小鼠。假手术组采取同样手术操作但不结扎。采用尾静脉给药的方式,RAPAL组、RAPAM组、RAPAH组的给药剂量分别为1、2、4 mg/(kg·d),其余组尾静脉注射等量生理盐水,持续干预4周。超声心动图检测小鼠心脏结构和功能;苏木素-伊红(HE)染色观察心肌组织病理形态;天狼星红染色观察心肌纤维化程度;流式细胞技术检测外周血Treg、Th17水平;蛋白免疫印迹(Western blot)法检测心肌组织mTOR、磷酸化mTOR(p-mTOR)蛋白表达水平。结果:超声心动图检测发现,与假手术组相比,心衰组左心室射血分数(LVEF)、左心室短轴缩短率(LVFS)均显著降低(P均<0.01),左心室舒张末期容积(LVEDD)、左心室收缩末期容积(LVEDS)均显著升高(P均<0.05);RAPAL、RAPAM、RAPAH组LVEF、LVFS均显著高于心衰组(P均<0.05)。RAPAM、RAPAH组LVEDS均显著低于心衰组(P均<0.05)。HE染色、天狼星红染色发现,与假手术组相比,心衰组小鼠的心肌组织排列紊乱、断裂,心肌纤维化。与心衰组相比,RAPAL组、RAPAM组、RAPAH组小鼠的心肌组织排列紊乱、断裂,心肌纤维化等现象有所改善;流式细胞技术、Western blot法检测发现,与假手术组相比,心衰组小鼠外周血Treg百分比降低,Th17细胞百分比升高(P<0.01),Treg/Th17比值降低(P<0.01)、心肌组织p-mTOR蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。与心衰组相比,RAPAL组、RAPAM组、RAPAH组小鼠的外周血Treg百分比均升高(P均<0.01),Th17细胞百分比均降低(P均<0.05),RAPAM组、RAPAH组的Treg/Th17比值均升高(P均<0.01),心肌组织p-mTOR蛋白表达水平均降低(P均<0.01)。结论:靶向抑制mTOR信号具有调节心衰小鼠Treg/Th17免疫自稳失衡,改善心肌纤维化及心功能的作用,其中高剂量RAPA的作用最显著。

复方万年青胶囊联合化疗对中晚期非小细胞肺癌患者辅助性T细胞17/调节性T细胞失衡和血清凋亡因子的影响

目的 探讨复方万年青胶囊联合吉西他滨+顺铂(GP)化疗方案对中晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)失衡和血清凋亡因子的影响。方法 选择2018年3月至2021年2月西安医学院第一附属医院收治的98例中晚期NSCLC患者。按照随机数字表法将患者分为对照组和观察组,各49例。对照组接受GP化疗方案治疗;观察组在对照组基础上联合复方万年青胶囊口服治疗。以21 d为1个疗程,完成4个疗程的化疗。比较2组临床疗效以及治疗前后血清Th17、Treg、Th17/Treg比值、肿瘤标志物水平、凋亡因子水平。观察2组治疗期间不良反应发生情况。所有患者随访2年,记录无进展生存期(PFS)和总生存期。结果 治疗后,观察组客观缓解率和疾病控制率均高于对照组(均P<0.05)。治疗后,2组Treg均低于治疗前、且观察组低于对照组[(2.9±0.5)%比(4.8±0.8)%],2组Th17、Th17/Treg比值均高于治疗前、且观察组均高于对照组[(1.42±0.13)%比(1.25±0.11)%、(0.49±0.10)比(0.26±0.08)](均P<0.05);2组癌胚抗原、细胞角蛋白19片段、糖类抗原125、B淋巴细胞瘤基因2(Bcl-2)水平均低于治疗前、且观察组均低于对照组,2组Bcl-2相关X蛋白水平均高于治疗前、且观察组高于对照组(均P<0.05)。2组治疗期间不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。观察组中位PFS、中位总生存期均长于对照组(均P<0.01)。结论 复方万年青胶囊联合GP化疗方案治疗中晚期NSCLC患者,可有效控制疾病进展,延长生存期,调节血清肿瘤标志物和血清凋亡因子水平,改善免疫功能。

血清自分泌运动因子、甲壳质酶蛋白40与妊娠期肝内胆汁淤积症患者辅助性T细胞17/调节性T细胞失衡和妊娠结局的关系研究

目的探讨血清自分泌运动因子(ATX)、甲壳质酶蛋白40(YKL-40)与妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)患者辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)失衡和妊娠结局的关系。方法选取2017年8月至2022年8月宝鸡市妇幼保健院收治的ICP患者178例作为观察组,根据患者病情严重程度分为轻度组(n=126)和重度组(n=52);且患者根据妊娠结局分为正常妊娠组(n=128)和不良妊娠组(n=50)。另选同期健康孕妇80例作为对照组。检测血清ATX、YKL-40水平并计算Th17/Treg比值。采用Pearson相关性分析血清ATX、YKL-40与Th17/Treg的关系。采用多因素Logistic回归分析ICP患者不良妊娠结局的危险因素。结果重度组ATX、YKL-40、Th17、Th17/Treg高于对照组和轻度组,且轻度组高于对照组(P<0.05);重度组Treg水平低于对照组和轻度组,且轻度组低于对照组(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,ATX、YKL-40与Th17/Treg均呈现显著正相关(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,高Th17/Treg、高YKL40、高ATX、高TBA、高TBil为ICP患者不良妊娠结局的独立危险因素(P<0.05)。结论血清ATX、YKL-40与ICP患者Th17/Treg失衡相关,高TBil、高TBA、高ATX、高YKL40、高Th17/Treg为ICP患者不良妊娠结局的独立危险因素。

外周血辅助性T细胞17细胞水平、单核细胞/淋巴细胞比值联合预测结直肠癌患者预后的价值分析

目的探究外周血辅助性T细胞17(Th17)水平、单核细胞/淋巴细胞比值(MLR)联合预测结直肠癌患者预后的价值。方法选取江苏省南通市肿瘤医院在2015年1月至2017年12月收治的结直肠癌患者89例(至少完成5年随访),根据预后情况将其分为预后良好组(58例)与预后不良组(31例),收集两组临床相关资料及外周血Th17、MLR。分析结直肠癌患者预后的影响因素,采用受试者操作特征(ROC)曲线评估Th17、MLR及联合检测对患者预后的预测价值。结果预后不良组临床分期为Ⅲ~Ⅳ期占比、低分化占比及外周血Th17、MLR均高于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素分析显示,临床分期(OR=1.985,95%CI:1.167~3.376)、Th17水平(OR=2.126,95%CI:1.310~3.449)、MLR(OR=2.353,95%CI:1.276~4.337)是影响结直肠患者预后的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析显示,Th17、MLR单独及二者联合预测患者预后的曲线下面积分别为0.732、0.746、0.939。结论外周血Th17、MLR是影响结直肠癌患者预后的独立危险因素,且二者联合检测可有效预测患者预后。

辅助性T细胞17/调节性T细胞及维甲酸相关孤儿受体γt/叉头框转录因子P3失衡在妊娠相关疾病中的研究进展

在免疫学领域,妊娠相当于一次成功的半同种移植现象,母体对半异体胎儿的免疫耐受情况关乎妊娠的结局。辅助性T细胞17(Th17)和调节性T细胞(Treg)是最新发现的CD^(+)_(4)T淋巴细胞亚群,相关转录因子维甲酸相关孤儿受体γt和叉头框转录因子P3的表达水平与Th17/Treg之间的平衡密切相关。Th17/Treg免疫失衡会导致母体对胎儿的异常攻击,造成母胎耐受紊乱,并与复发性流产、先兆子痫、妊娠糖尿病等病理妊娠有关。

传染性单核细胞增多症患儿调节性T细胞/辅助性T细胞17免疫失衡与治疗后Epstein-Barr病毒-DNA仍阳性的相关性研究

目的探讨传染性单核细胞增多症患儿调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)/辅助性T细胞(helper T cell,Th)17免疫失衡与治疗后Epstein-Barr病毒(EBV)-DNA仍阳性的相关性,为传染性单核细胞增多症的治疗及预后评估提供重要标志物。方法以2021年1月至2023年6月就诊于秦皇岛市工人医院的88例传染性单核细胞增多症患儿作为研究对象。患儿接受基于阿昔洛韦或更昔洛韦的标准化治疗并持续随访,根据治疗14d时患儿EBV-DNA载量是否仍为阳性分为EBV-DNA阴性组(n=70)和EBV-DNA阳性组(n=18)。对比两组患儿一般临床资料、治疗相关特征、治疗前T细胞亚群、炎性细胞因子、免疫球蛋白等指标的差异。将单因素分析有意义的指标进行Spearman相关性分析及多因素Logistic回归分析,评价各差异性指标与传染性单核细胞增多症患儿治疗14d后EBV-DNA仍阳性的相关性和危险因素。结果EBV-DNA阳性组患儿平均住院时间、平均体温恢复时间、淋巴结肿大恢复时间均显著长于EBV-DNA阴性组患儿(P<0.05);EBV-DNA阳性组患儿平均CD4^(+)T淋巴细胞比例、CD4^(+)/CD8^(+)比值、Treg细胞比例、Treg/Th17比值、血清IL-4水平均显著低于EBV-DNA阴性组患儿,平均Th17细胞比例及血清IFN-γ水平均显著高于EBV-DNA阴性组患儿(P<0.05);多因素Logistic回归分析表明传染性单核细胞增多症患儿CD4^(+)T淋巴细胞比例及Treg细胞比例较低、Th17细胞比例较高及Treg/Th17比值较低均是规范治疗14d后EBV-DNA仍阳性的危险因素(P<0.05)。结论传染性单核细胞增多症患儿治疗前T细胞亚群比例特征、Treg/Th17免疫失衡严重程度、Th1/Th2细胞因子水平及免疫球蛋白水平与治疗14d后EBV-DNA仍阳性具有显著相关性,密切监测并促进患儿免疫-炎症水平恢复平衡对于提高传染性单核细胞增多症治疗预后具有重要临床意义。

衣康酸二甲酯对树突状细胞分泌促炎因子以及实验性自身免疫性葡萄膜炎小鼠辅助性T细胞17的影响

目的探究衣康酸二甲酯(DMI)对树突状细胞(DCs)分泌促炎因子的作用,并初步研究其对实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)小鼠光感受器间维生素A类结合蛋白1-20(IRBP_(1-20))特异性辅助性T细胞17(Th17)的影响。方法分离C57BL/6J小鼠双侧股骨和胫骨得到骨髓细胞,利用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素(IL)-4将其定向诱导分化为骨髓来源的DCs。诱导分化6 d,将细胞分为DMI组和PBS组,分别用250μmol·L^(-1)DMI及等量的磷酸盐缓冲液(PBS)预处理3 h后,每组加入100μg·L^(-1)脂多糖(LPS)刺激24 h。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测两组DCs中促炎因子IL-6、IL-1β和IL-23 mRNA相对表达量。采用IRBP_(1-20)、弗氏不完全佐剂及结核分枝杆菌H37RA主动免疫小鼠构建EAU模型,免疫后13 d,将分离的EAU小鼠脾脏及淋巴结T细胞与PBS或DMI处理的DCs在含有IRBP_(1-20)的培养基中共培养,并向Th17方向极化。流式细胞仪检测共培养细胞中Th17细胞比例。ELISA检测共培养上清液中IL-17水平。qRT-PCR检测共培养细胞中维甲酸相关核孤儿受体γt(RORγt)、IL-17、IL-23R和GM-CSF mRNA相对表达量。结果qRT-PCR检测结果显示,DMI组DCs中IL-6、IL-1β和IL-23 mRNA相对表达量均明显低于PBS组,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。流式细胞仪检测结果显示,DMI组共培养细胞中Th17细胞比例明显低于PBS组,差异有统计学意义(P<0.05)。ELISA检测结果显示,DMI组共培养上清液中IL-17水平明显低于PBS组,差异有统计学意义(P<0.05)。DMI组共培养细胞中IL-17、RORγt、IL-23R和GM-CSF mRNA相对表达量均明显低于PBS组,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论DMI能够抑制DCs中促炎因子IL-6、IL-1β和IL-23的表达,进而负向调控IRBP_(1-20)特异性Th17细胞反应。

HPV DNA负荷量、辅助性T细胞17、FoxP3+调节性T细胞及炎症因子与高危型HPV感染的相关性分析

目的探讨人乳头瘤病毒(HPV)DNA、辅助性T细胞17(Th17)、叉头状转录因子3阳性(FoxP3^(+))调节性T细胞(Treg)及宫颈灌洗液中炎症因子与高危型HPV感染的相关性,为高危型HPV感染防治提供新思路。方法将2020年9月至2021年2月该院收治的高危型HPV感染患者100例纳入研究作为研究组,然后将其中50例高危型HPV16/18阳性患者作为HPV16/18组,50例其他12种高危型阳性病例作为其他亚型组。另外,选取同期体检的健康女性作为对照组(n=50)。比较研究组和对照组HPV DNA负荷量、Th17、FoxP3^(+)Treg及宫颈灌洗液中炎症因子[白细胞介素(IL)-10、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-17A]水平,比较HPV16/18组和其他亚型组各项指标水平,比较不同宫颈病变患者各项指标水平。分析各项指标与高危型HPV感染、宫颈病变的相关性,以及对宫颈病变患者高危型HPV感染的诊断价值。结果研究组HPV DNA负荷量、Th17、FoxP3^(+)Treg及宫颈灌洗液中IL-10、TNF-α、IL-17A水平均高于对照组(P<0.05),HPV16/18组各项指标水平均高于其他亚型组(P<0.05)。不同宫颈病变患者各项指标水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。HPV DNA负荷量、FoxP3^(+)Treg、Th17及宫颈灌洗液中IL-10、TNF-α、IL-17A水平与高危型HPV感染分型(HPV16/18=1,其他亚型=2)均呈负相关(P<0.05),与宫颈病变(宫颈上皮内瘤变Ⅰ级=1,宫颈上皮内瘤变Ⅱ级=2,宫颈上皮内瘤变Ⅲ级=3,宫颈癌=4)均呈正相关(P<0.05)。各项指标联合诊断高危型HPV16/18阳性的曲线下面积(AUC)为0.911(95%CI:0.837~0.959),大于各指标单独诊断。结论高危型HPV感染患者HPV DNA负荷量、Th17、FoxP3^(+)Treg及炎症因子水平异常,与高危型HPV感染分型、宫颈病变密切相关,而且HPV DNA负荷量与Th17、FoxP3^(+)Treg、炎症因子相关,各项指标联合检测可为临床防治高危型HPV持续感染提供可靠依据。

汉黄芩素调节磷脂酰肌醇3激酶/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶/核因子κB信号通路对慢性阻塞性肺疾病大鼠辅助性T细胞17/调节性T细胞平衡的影响

目的探讨汉黄芩素(Wog)调节磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(Akt)/核因子κB(NF-κB)信号通路对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡的影响。方法2022年8-12月,大鼠采用随机数字表法分为Model组、低剂量Wog组(Wog-L组,50 mg/kg)、高剂量Wog组(Wog-H组,100 mg/kg)、阳性药物氨茶碱组(Ami组,2.3 mg/kg)、IGF-1(PI3K激活剂)组(1.33 mg/kg)、Wog-H+IGF-1组(100 mg/kg+1.33 mg/kg)、对照组(CK组),每组12只。除CK组外,其他组大鼠均需利用烟熏法联合气管滴注脂多糖(LPS)的方法构建COPD模型,建模成功24 h后,进行给药处理,每天1次给药,持续4周。检测呼气峰流量(PEF)、每分钟通气量(MV)、吸气峰流量(PIF);流式细胞术检测外周血中Th17/Treg;HE染色检测肺组织病理;酶联免疫吸附法检测大鼠肺组织中白细胞介素(IL)-17、IL-10水平;蛋白质印迹法检测肺组织中维甲酸相关孤核受体γt(RORγt)、叉头框蛋白P3(Foxp3)、磷酸化PI3K(p-PI3K)、磷酸化Akt(p-Akt)、磷酸化NF-κB p65(p-NF-κB p65)蛋白。结果与CK组比较,Model组大鼠PEF(12.56±0.47比8.72±0.39)、PIF(9.35±0.32比7.24±0.17)、MV(132.26±5.78比96.63±3.28)、Treg(31.18±2.62比15.52±1.01)比例、IL-10(23.35±1.16比8.85±0.27)明显降低(均P<0.05);Th17(3.14±0.13比18.86±1.67)比例、Th17/Treg(0.10±0.01比1.22±0.11)、肺泡间隔(33.36±1.48比49.78±1.73)、气道炎症评分(0比4.56±0.23)及IL-17(75.83±3.60比185.56±8.62)水平明显升高(均P<0.05)。与Model组比较,Wog-L组、Wog-H组PEF(9.66±0.40,11.49±0.51)、PIF(8.28±0.19,9.03±0.22)、MV(105.54±4.11,126.67±5.72)、Treg(19.93±1.18,27.73±2.05)比例、IL-10(11.56±0.33,20.72±0.59)水平明显升高(均P<0.05);Th17(3.14±0.13比18.86±1.67)比例、Th17/Treg(0.10±0.01比1.22±0.11)、肺泡间隔(43.45±1.26,35.78±1.12)、气道炎症评分(3.75±0.17,0.86±0.07)、IL-17(162.27±7.14,103.35±4.33)水平明显降低(均P<0.05)。与CK组比较,Model组大鼠RORγt(0.15±0.01比1.34±0.11)、p-PI3K(0.22±0.01比0.86±0.07)、p-Akt(0.18±0.01比0.75±0.06)、p-NF-κB p65(0.11±0.01比0.69±0.06)蛋白表达升高,Foxp3(1.45±0.27比0.35±0.02)蛋白表达降低(均P<0.05)。与Model组相比,Wog-L组、Wog-H组RORγt(1.08±0.10,0.36±0.02)、p-PI3K(0.71±0.06,0.35±0.03)、p-Akt(0.62±0.06,0.28±0.02)、p-NF-κB p65(0.52±0.05,0.26±0.02)蛋白表达明显降低,Foxp3(0.57±0.04,1.13±0.09)蛋白表达明显升高(均P<0.05)。Wog-H组与Ami组大鼠上述各指标水平近似,均差异无统计学意义(P>0.05)。IGF-1逆转了高剂量Wog对COPD大鼠Th17/Treg的影响。结论Wog促进COPD大鼠Th17/Treg平衡的机制可能与下调PI3K/Akt/NF-κB通路有关。

老年COPD患者外周血辅助性T细胞17/调节性T细胞失衡对继发真菌感染的影响

目的 探讨老年慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者外周血辅助性T细胞(Th)17/调节性T细胞(Treg)失衡对继发真菌感染的影响。方法 选择老年COPD患者117例为研究组,依据真菌病原学检查结果,并参照《感染性疾病诊疗指南》,将研究组分为继发真菌感染COPD组(n=31例)和单纯COPD组(n=86例),另选择同期体检健康者90例为对照组。检测并对比研究组与对照组、继发真菌感染COPD组和单纯COPD组外周血Th17、Treg、Th17/Treg水平。收集研究组临床病理资料,行Logistic回归分析老年COPD患者继发真菌感染的高风险因素,行一般线性回归检验分析Th17/Treg水平变化与老年COPD患者感染真菌的相关强度。结果 研究组Th17水平显著高于对照组,Treg水平显著低于对照组,Th17/Treg比值显著上调(P<0.001);继发真菌感染COPD组和单纯COPD组激素使用剂量、激素使用时长、抗菌药使用时长、血浆白蛋白、住院时长及外周血(Th17、Treg、Th17/Treg)水平呈明显差异(P<0.05,P<0.001);行Logistic回归分析得出大剂量激素使用、长期激素和抗菌药使用、长期住院、Th17/Treg比值下调是真菌侵袭老年COPD患者的高风险因素(P<0.05);线性回归分析显示,Th17/Treg细胞失衡对真菌侵袭老年COPD患者有重要影响(P<0.001),并得到线性回归方程:Y=-1.418-0.737X。结论 Treg与Th17在COPD的发生发展中发挥重要作用,同时Treg/Th17细胞失衡为真菌侵袭老年COPD患者提供重要契机,临床可结合患者实际情况,将Treg/Th17作为老年COPD患者继发真菌感染辅助参考指标。

辅助性T细胞17及白介素-17在呼吸道合胞病毒毛细支气管炎的表达及作用

目的探讨呼吸道合胞病毒(RSV)毛细支气管炎(毛支)患儿急性期外周血辅助性T细胞17(Th17)和白介素17(IL-17)水平的变化及作用。方法选取RSV毛支急性期患儿(n=28,其中轻度组16例、重度组12例)为毛支组,以哮喘急性发作儿童(n=12)为哮喘组,近期无感染的小儿外科术前患儿(n=10)为对照组。以流式细胞术检测外周血Th17表达,ELISA方法检测外周血IL-17;分析RSV毛支患儿急性期外周血Th17细胞和IL-17表达与病情严重程度的关系。结果毛支重度组外周血Th17细胞比例和IL-17水平分别高于轻度组和对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);但与哮喘组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 RSV毛细支气管炎患儿急性期外周血Th17细胞和IL-17表达水平增加,Th17细胞和IL-17可能参与RSV毛细支气管炎的发病机制。

辅助性T细胞17和调节性T细胞在哮喘小鼠中的失衡表达及其意义

目的探讨辅助性T细胞17(Th17)和CD4+ CD25+ Foxp3+调节性T细胞(Treg)的表达失衡在哮喘小鼠发病机制中的作用。方法将24只BALB/c小鼠随机分为哮喘组和正常对照组,每组12只。哮喘组采用卵白蛋白致敏和激发的方法制作小鼠哮喘模型,对照组用等量的生理盐水代替。采用体积描记法测定气道反应性;对BALF中炎性细胞进行计数;流式细胞术检测脾脏单个核细胞中Th17及Treg细胞占CD4+ T细胞比例;ELISA法检测BALF及肺匀浆中Th17及Treg相关细胞因子IL-17和IL-10水平。结果与对照组比较,哮喘组平均气道阻力显著升高(P<0.01),Th17细胞比例显著升高[(5.68±1.99)%比(2.80±0.82)%,P<0.01],而Treg细胞比例显著降低[(2.88±0.46)%比(6.10±2.44)%,P<0.01],Th17/Treg比值显著升高(1.93±0.41比0.50±0.15,P<0.01),BALF及肺匀浆中IL-17水平均显著升高[(22.37±3.00)pg/mL比(11.42±2.15)pg/mL,(52.93±5.39)pg/mL比(19.38±2.65)pg/mL,P均<0.01],而IL-10水平均显著降低[(6.05±1.25)pg/mL比(14.23±2.94)pg/mL,(9.33±1.79)pg/mL比(21.40±2.44)pg/mL,P均<0.01]。结论哮喘小鼠Th17细胞数量增多及IL-17水平增高,而Treg细胞数量减少及IL-10水平降低,Th17/Treg细胞比例失衡可能在哮喘的发病机制中具有重要作用。

辅助性T细胞17相关细胞因子在育龄期人乳头瘤病毒亚临床感染女性中的表达分析

目的·观察人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)感染早期过程中宫颈、阴道局部免疫微环境的变化。方法·收集120例高危型HPV感染的育龄期女性(25~46岁)的阴道灌洗液,并经活检病理诊断排除宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)及CIN以上病变;选择同时期妇科门诊HPV阴性、液基薄层细胞检测阴性者20人,作为对照组。应用液相微珠悬浮蛋白芯片技术检测辅助性T细胞17(T helper cell 17,Th17)相关细胞因子白细胞介素-17(interleukin 17,IL-17)、IL-6、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)及IL-10、IL-4的表达情况。结果·HPV感染者阴道局部IL-17、IL-6、TGF-β、IL-4表达量较HPV阴性者明显升高;HPV16/18型感染者阴道局部IL-4、IL-10的表达量较HPV非16/18型感染者明显降低;HPV持续感染者阴道局部IL-17、IL-6、TGF-β的表达量,与HPV非持续感染者比较,差异无统计学意义,但较HPV阴性者显著升高。结论·HPV感染早期即可激发机体免疫应答,引起局部免疫微环境的变化。Th17相关免疫因子与HPV感染关系密切,可为指导HPV高危型持续感染的处理及预防提供新的方向。

辅助性T细胞17与肿瘤免疫

辅助性T细胞(Th17细胞)是近年新定义的一类CD4+效应T细胞,其与肿瘤的发生、发展密切相关。在不同的免疫背景下,Th17细胞表型存在可塑性。这种可塑性与Th17细胞及其相关细胞因子在肿瘤免疫中作用的双向性密切相关。进一步明确Th17细胞表型重塑过程中所需的各种细胞因子的结构及功能,将有助于提高肿瘤免疫治疗的疗效。

原发性肝癌患者外周血辅助性T细胞17及白介素17水平的临床意义

目的观察原发性肝癌(PHC)患者外周血中辅助性T细胞17(Th17)与细胞因子白介素17(IL-17)的分泌水平,探讨Th17细胞及IL-17与PHC病理发展的关系。方法选取PHC患者80例以同期40例健康体检健康者作为对照组,收集两组的外周血后采用流式细胞术检测Th17细胞亚群的比例,ELISA法检测血清中的IL-17水平,RT-PCR检测转录因子RORγT m RNA水平,并分析RORγT表达水平与PHC临床病理学特征的关系。结果 PHC患者外周血中Th17占CD4+T细胞比例为(4.09±0.33)%,显著高于对照组(1.38±0.27)%,差异有统计学意义(P<0.05);PHC患者外周血中IL-17水平为(57.73±6.21)pg/ml,显著高于对照组(33.98±4.47)pg/ml,差异有统计学意义(P<0.05);PHC患者外周血转录因子RORγT m RNA水平显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.001)。肝癌组织中RORγT m RNA的表达水平与肝癌组织Edmondson病理分级显著相关(r=0.685,P<0.05),且外周血中RORγT m RNA表达水平与HCC分化程度显著正相关(r=0.603,P<0.05)。结论 Th17及IL-17及转录因子RORγT m RNA水平在PHC患者外周血表达增加,且RORγT与PHC的病理分级程度明显相关。

补肾活血方对不明原因复发性流产患者外周血中辅助性T细胞17/调节性T细胞平衡的影响

目的探讨补肾活血方对不明原因复发性流产(URSA)患者外周血中辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡的影响。方法选取2016年2月至2017年2月于黑龙江中医药大学附属第一医院妇科就诊的URSA保胎患者61例作为研究对象,采用随机数字表法分为观察组和对照组,在研究过程中1例脱落患者未计入数据统计,每组各30例。观察组患者给予补肾活血方联合地屈孕酮口服治疗4周。对照组患者单独给予地屈孕酮口服治疗4周。治疗前以及治疗4周后采集2组患者空腹静脉血,酶联免疫吸附试验检测血清中白细胞介素(IL)17A和IL-35水平,并检测2组患者治疗前后血清雌二醇、孕酮和β-人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)水平变化。结果治疗前观察组和对照组IL-17A和IL-35水平比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。治疗后观察组和对照组IL-17A均较治疗前明显下降[(12±5)ng/L比(25±8)ng/L、(17±6)ng/L比(27±9)ng/L],IL-35均较治疗前明显升高[(54±14)ng/L比(33±7)ng/L、(42±9)ng/L比(33±4)ng/L],且观察组IL-17A明显低于对照组、IL-35明显高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.01)。治疗前2组雌二醇、孕酮、β-HCG水平比较差异无统计学意义(P>0.05),治疗后均较治疗前明显升高,且观察组明显高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论补肾活血方可以下调肾虚血瘀型URSA患者外周血中IL-17A,并上调IL-35的含量,起到调节免疫及抑制炎性反应的作用;还能够明显升高URSA患者外周血雌二醇、孕酮、β-HCG的含量。

外周血辅助性T细胞17与调节性T细胞的平衡与白癜风临床特征的相关性

目的分析白癜风患者外周血辅助性T细胞17(Th17)与调节性T细胞(Treg)的平衡与临床特征的关系。方法选取白癜风患者109例,其中进展期患者56例,稳定期患者53例,另选取同期本院健康体检者59例为对照组。采用流式细胞术检测3组受试者外周血Th17、Treg细胞数量;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测3组受试者白介素-17(IL-17)、叉头盒蛋白P3(Foxp3)水平;采用Pearson法分析白癜风患者Th17、Treg细胞及IL-17、Foxp3的关系。结果对照组、稳定期组、进展期组Th17细胞含量、Th17/Treg、IL-17水平逐渐升高,Treg细胞含量、Foxp3水平逐渐降低,差异有统计学意义(P<0.05)。随着白癜风皮损面积的增加,Th17细胞含量、Th17/Treg、IL-17水平逐渐升高,Treg细胞含量、Foxp3水平逐渐降低,差异有统计学意义(P<0.05)。白癜风患者Th17细胞与Treg细胞、IL-17与Foxp3均呈显著负相关(r=-0.449、-0.497,P<0.05)。结论Th17/Treg细胞平衡可能与白癜风的发生及临床特征有关。

HIV/HCV共感染者外周血辅助性T细胞17和IL-17A水平检测

目的探讨HIV/HCV共感染者外周血辅助性T细胞17(Th17)及白细胞介素(IL)-17A的免疫调节作用。方法随机选取HIV/HCV共感染者、HIV感染者、HCV感染者和健康人各30例,使用流式细胞仪检测外周血CD4+T细胞数量和Th17数量,采用ELISA法检测血清IL-17A水平。结果 HIV感染者和HIV/HCV共感染者CD4+T淋巴细胞分别为(310.23±114.35)个/μl和(218.42±112.47)个/μl,均较健康人明显降低[(735.46±121.52)个/μl,P<0.05],HIV/HCV共感染者较HIV感染者CD4+T淋巴细胞更低(P<0.05),HCV感染者CD4+T淋巴细胞数为(719.47±123.72)个/μl,与健康人比较无显著性差异;HIV感染者Th17百分比和IL-17A水平分别为(2.48±0.90)%,和(25.18±12.63)pg/ml,均较健康人显著降低[(3.95±1.23)%和(39.15±16.30)pg/ml,P<0.05],HCV感染者Th17百分比和IL-17A为(5.48±0.90)%和(45.24±15.72)pg/ml,显著高于健康人(P<0.05),而HIV/HCV共感染者Th17百分比为(1.76±0.42)%,IL-17A为(16.49±7.54)pg/m L,均显著低于HIV感染者[(2.48±0.90)%和(25.18±12.63)pg/m L,P<0.05]。结论合并HCV感染可能通过影响Th17及其细胞因子IL-17A进一步影响HIV患者的免疫功能。

辅助性T细胞17、辅助性T细胞17/辅助性T细胞1比例在急性冠状动脉综合征的变化及临床意义

目的探讨急性冠状动脉综合征(ACS)患者外周血辅助性T细胞(Th)17、Th17/Th1比例及血浆中白细胞介素17(IL-17)和IL-22的变化及意义。方法选择冠心病患者50例,其中急性心肌梗死(AMI)组20例,不稳定型心绞痛(UA)组15例,稳定型心绞痛(SA)组15例;健康查体者15例作为正常对照组。采用流式细胞分析法,检测各组外周血Th17、Th17/Th1细胞占CD4+T细胞比例。采用酶联免疫吸附法检测患者血浆IL-17和IL-22的浓度。结果AMI组和UA组外周血Th17细胞比例[(2.98%±1.01%)和(2.63%±0.61%)]、Th17/Th1细胞比例[(0.71%±0.35%)和(0.66%±0.31%)]均明显高于SA组及正常对照组(均P<0.05)。AMI组血浆IL-17(24.41±7.95 ng/L)和IL-22(34.18±7.04 ng/L)浓度均显著高于SA组和正常对照组(均P<0.05);UA组血浆IL-17浓度(22.86±8.62ng/L)显著高于正常对照组,血浆IL-22浓度(28.98±4.35 ng/L)显著低于AMI组而高于正常对照组。ACS组IL-22浓度与IL-17浓度呈显著正相关(r=0.422,P<0.01),且ACS组Th17细胞与IL-17(r=0.722,P<0.01)、IL-22(r=0.400,P<0.01)浓度均呈显著正相关。结论 Th17细胞可能参与动脉粥样斑块不稳定和ACS的发病。Th17细胞及其相关炎性因子IL-17、IL-22可作为诊断急性心血管事件发生的辅助检测指标。