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鹿源多杀性巴氏杆菌辽宁株的分离鉴定及耐药性分析
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作者 陈姝霖 李冰 +5 位作者 王辉暖 李宁 商业 罗剑通 周铁忠 赵刚 《现代畜牧兽医》 2024年第7期1-6,共6页
研究旨在确证鹿源多杀性巴氏杆菌的血清型和耐药性等特征,无菌采集某养鹿场发病鹿的心脏、肝脏、肺脏、脾脏等病料,进行细菌分离培养、分子生物学鉴定、生化试验及致病性试验、药敏试验。结果显示,通过细菌学和分子生物学方法进行鉴定,... 研究旨在确证鹿源多杀性巴氏杆菌的血清型和耐药性等特征,无菌采集某养鹿场发病鹿的心脏、肝脏、肺脏、脾脏等病料,进行细菌分离培养、分子生物学鉴定、生化试验及致病性试验、药敏试验。结果显示,通过细菌学和分子生物学方法进行鉴定,确认分离到一株鹿源多杀性巴氏杆菌,分离株在10%绵羊鲜血营养琼脂培养基上形成圆形光滑、半透明的菌落,瑞氏染色呈两极浓染的小短杆状菌;通过血清型特异引物鉴定方法确认分离株为荚膜血清型D型。致病性试验结果显示,小鼠感染分离株后发病率为100%,死亡率为50%,并表现肾脏、肝脏及肠道黏膜等多器官出血和变质性变化。分离株对氨苄西林、阿莫西林/克拉维酸、美罗培南等12种药物敏感。研究表明,试验分离的鹿源多杀性巴氏杆菌具有较强的致病性,且对大多数抗菌药物仍具有敏感性,可能与鹿的生存环境和日常很少用药有关。 展开更多
关键词 鹿 多杀性巴氏杆菌 分离鉴定 致病性 耐药性 辽宁株
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猪流行性腹泻病毒(PEDV)辽宁株序列测定及分析 被引量:1
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作者 李井春 王姗姗 +6 位作者 姚伟 谭立文 杨本勇 魏澍 张雅为 赵凤菊 顾贵波 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2016年第3期41-43,共3页
为弄清2014年沈阳某猪场腹泻原因,应用RT-PCR方法对采自该场样品进行猪流行性腹泻病毒(PEDV)S1基因扩增,并将产物纯化后测序、分析。结果得到长为2 376 bp的S1基因序列;本病毒与2013年美国暴发毒株以及我国2010年毒株核苷酸和氨基酸同... 为弄清2014年沈阳某猪场腹泻原因,应用RT-PCR方法对采自该场样品进行猪流行性腹泻病毒(PEDV)S1基因扩增,并将产物纯化后测序、分析。结果得到长为2 376 bp的S1基因序列;本病毒与2013年美国暴发毒株以及我国2010年毒株核苷酸和氨基酸同源性较高,而与疫苗株同源性较低;同时存在氨基酸的插入、缺失及糖基化位点的改变;在进化树上,与2010-2011年在我国暴发的猪流行性腹泻病毒为与同一亚群,与2013年美国毒株也有较近的亲缘关系。表明分离到猪流行性腹泻病毒,此病毒已发生部分变异,需给予密切重视。 展开更多
关键词 PEDV 辽宁株 序列分析 S1基因
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猪瘟病毒辽宁株E2蛋白部分基因片段的序列分析
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作者 张洪勇 李雪梅 +2 位作者 刘海鹏 吕宗吉 涂长春 《辽宁畜牧兽医》 2002年第2期1-3,共3页
应用RT-PCR方法对辽宁地区8份猪瘟临床病料进行了E2蛋白部分基因片段扩增,其中有5份病料扩增产物经2%的琼脂糖凝胶电泳获得大小约为210bp的目的基因片段。经对目的基因片段回收纯化后进行核苷酸序列测定,并与国内外发表的18株猪瘟病毒... 应用RT-PCR方法对辽宁地区8份猪瘟临床病料进行了E2蛋白部分基因片段扩增,其中有5份病料扩增产物经2%的琼脂糖凝胶电泳获得大小约为210bp的目的基因片段。经对目的基因片段回收纯化后进行核苷酸序列测定,并与国内外发表的18株猪瘟病毒株的核苷酸序列和氨基酸序列进行同源性比较表明,所分离的5株猪瘟病毒株核苷酸序列及氨基酸序列与C1W、C2W等8个毒株的同源性较高,而与国内的疫苗株和强毒株的同源性则较低,基因型差异比较明显,并不归属于同一个基因亚群。本研究通过对E2基因片段扩增以及相应的核苷酸序列和氨基酸序列分析,揭示了本地区猪瘟病毒的分子流行病学背景。 展开更多
关键词 E2蛋白基因 基因片段 RT-PCR 猪瘟 病毒 辽宁株 序列分析
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鸡传染性贫血病毒辽宁株全基因克隆及遗传进化分析 被引量:2
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作者 蔡静 何顺东 +2 位作者 王兴赫 常灵竹 吴长德 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2020年第17期85-87,170,共4页
为了评估辽宁地区鸡传染性贫血病毒(Chicken anemia virus,CAV)的变异情况及致病能力,试验提取鸡传染性贫血发病鸡肝脏总DNA,依据GenBank中德国株CUX-1(M55918.1)基因序列设计3对特异性引物进行PCR扩增、测序及序列分析;然后对鸡传染性... 为了评估辽宁地区鸡传染性贫血病毒(Chicken anemia virus,CAV)的变异情况及致病能力,试验提取鸡传染性贫血发病鸡肝脏总DNA,依据GenBank中德国株CUX-1(M55918.1)基因序列设计3对特异性引物进行PCR扩增、测序及序列分析;然后对鸡传染性贫血发病鸡肝脏进行常规处理,取菌液接种1日龄SPF雏鸡,观察其是否具有致病性。结果表明:成功分离出1株CAV(DD-2016),该毒株基因编码区全长为2 297 bp,共编码764个氨基酸,与GenBank中南韩株South Kores(JF507715.1)核苷酸序列的同源性最高(99.17%);该分离株能引起SPF雏鸡发生贫血、皮下出血、胸腺萎缩、骨髓黄化等典型病理学损伤。说明辽宁地区目前流行毒株基因发生了较大变异且致病力较强。 展开更多
关键词 鸡传染性贫血 鸡传染性贫血病毒 辽宁株 全基因 克隆 进化分析
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鹅星状病毒辽宁株分离鉴定及遗传变异分析与抗原表位预测
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作者 周慧 高慎阳 +8 位作者 李冰 董筱萍 孙弋雅 刘英姿 甄志刚 赵岩 刘丽颖 车立忱 周铁忠 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期2243-2250,共8页
从辽宁某鹅场无菌采集病死雏鹅肝脏、肾脏等病料,通过鹅胚接种、核酸检测、电镜观察等方法进行病原的分离鉴定,并对所分离的毒株进行遗传变异分析和抗原表位预测。经过接种病料鹅胚的病变特征观察、病毒PCR核酸扩增和序列分析以及透射... 从辽宁某鹅场无菌采集病死雏鹅肝脏、肾脏等病料,通过鹅胚接种、核酸检测、电镜观察等方法进行病原的分离鉴定,并对所分离的毒株进行遗传变异分析和抗原表位预测。经过接种病料鹅胚的病变特征观察、病毒PCR核酸扩增和序列分析以及透射电镜形态鉴定,确认成功分离到1株GAstV(goose astrovirus),暂命名GAstV/LN/202101(简称LN202101)。针对编码衣壳蛋白保守结构域N和P2 Capsid domain的核苷酸序列对该毒株进行遗传进化树和同源性分析,结果显示该毒株与江西株JX01(MZ576222.1)等近2年发现的毒株亲缘关系较近,在同一簇分支,且属于GAstV-Ⅱ型;但同源性已表现出差异。以HAstV(human astrovirus)已验证表位为参考,依据抗原抗体结合模型,结合生信方法推测以下4段序列可能为GAstV的抗原表位:453~467aa(PQADSRSRYNANITF)、508~513aa(VCNTLA)、525~553aa(TAVLRVNTSTTSTGGQITELRNRLNIADG)和585~597aa(DSNPGETFQSFKM)。结果表明,GAstV辽宁流行株与国内其他地区为同一来源,但已发生变异;辽宁株衣壳蛋白部分抗原优势表位较多,可以作为近2年流行毒株的代表。该研究结果为进一步明确该病毒遗传进化特点和抗原特征,开发相应亚单位疫苗和抗体等生物防控制品奠定了基础。 展开更多
关键词 鹅星状病毒 辽宁分离 变异分析 抗原表位
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猪圆环病毒2型辽宁分离株ORF2基因的克隆与序列分析 被引量:1
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作者 关淼 刘丽霞 沈国顺 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第9期85-86,共2页
关键词 猪圆环病毒2型 ORF2基因 分离 辽宁株 序列分析 断奶仔猪多系统衰竭综合征 开放阅读框 克隆
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猪2型圆环病毒辽宁分离株ORF2基因真核表达载体的构建及鉴定
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作者 关淼 《吉林畜牧兽医》 2013年第4期16-18,共3页
PCV2基因片段ORF2编码病毒衣壳蛋白,是主要的免疫原蛋白,并且基因序列比较保守,是构建核酸疫苗的首选基因片段。本试验构建真核表达载体pIRES-ORF2,并转染Hela细胞,进行了间接免疫荧光试验。结果表明,在荧光显微镜下可以看到转有pIRES-O... PCV2基因片段ORF2编码病毒衣壳蛋白,是主要的免疫原蛋白,并且基因序列比较保守,是构建核酸疫苗的首选基因片段。本试验构建真核表达载体pIRES-ORF2,并转染Hela细胞,进行了间接免疫荧光试验。结果表明,在荧光显微镜下可以看到转有pIRES-ORF2质粒的细胞玻片上有明显的黄绿色荧光。 展开更多
关键词 猪2型圆环病毒 辽宁分离 ORF2 真核表达载体
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F-Ⅶ型鹅副粘病毒辽宁强毒株对鸽的致病性研究
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作者 董国英 段亚良 +2 位作者 李惠兰 李胜杰 徐连壁 《辽宁畜牧兽医》 2003年第5期8-10,共3页
用F -Ⅶ型鹅副粘病毒DG0 1株人工感染 6周龄非免疫鸽 ,观察试验鸽的发病情况、临床症状 ,对病死鸽组织进行病毒分离和病理变化进行观察研究。结果表明 ,鹅副粘病毒人工感染 84小时后可致试验组鸽 1 0 0 %发病 ,6天后 1 0 0 %死亡。且从... 用F -Ⅶ型鹅副粘病毒DG0 1株人工感染 6周龄非免疫鸽 ,观察试验鸽的发病情况、临床症状 ,对病死鸽组织进行病毒分离和病理变化进行观察研究。结果表明 ,鹅副粘病毒人工感染 84小时后可致试验组鸽 1 0 0 %发病 ,6天后 1 0 0 %死亡。且从攻毒死亡鸽肝、脑、肺、气管和泄殖腔等组织中回收到接种毒。病鸽表现下痢、瘫痪、头颈扭转、点头或震颤等症状 ;病鸽各组织器官均有明显的组织损伤 ,表现显著的变化、坏死或出血等变化 ;病毒可以在鸽体内多种组织器官中增殖。 展开更多
关键词 F-Ⅶ型鹅副粘病毒 辽宁强毒 致病性
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B型副鸡嗜血杆菌的分离鉴定 被引量:31
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作者 张培君 苗得园 +4 位作者 龚玉梅 孙惠玲 Pat Blackall 包爱军 潘裕华 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期56-58,共3页
从辽宁某公司鸡场疑似鸡传染性鼻炎的病鸡眶下窦分离到一株副鸡嗜血杆菌 ,用Page程序和Kume程序对其进行血清型鉴定 ,确认为B型副鸡嗜血杆菌 ,这是首次在我国分离到B型副鸡嗜血杆菌。
关键词 辽宁株 传染性鼻炎 B型副鸡嗜血杆菌 分离 鉴定
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猪伪狂犬病病毒LN1301株分离鉴定及其gE和TK基因的变异分析 被引量:15
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作者 孙佳楠 王楠楠 +4 位作者 王瑞 高慎阳 刘丽颖 周铁忠 董筱萍 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1324-1329,共6页
通过查明辽宁省猪伪狂犬病(pseudorabies,PR)的传染来源及其病原变异情况,为建立有针对性的诊断与防制方法提供基础依据。采集辽宁某猪场疑似伪狂犬病病死仔猪的脑组织病料,应用非洲绿猴肾(Vero)细胞分离培养,通过电子显微镜观察、病毒... 通过查明辽宁省猪伪狂犬病(pseudorabies,PR)的传染来源及其病原变异情况,为建立有针对性的诊断与防制方法提供基础依据。采集辽宁某猪场疑似伪狂犬病病死仔猪的脑组织病料,应用非洲绿猴肾(Vero)细胞分离培养,通过电子显微镜观察、病毒中和试验、聚合酶链反应、病毒TCID50测定和动物试验对所分离的病毒进行鉴定。结果确认从辽宁省成功分离到1株猪伪狂犬病病毒野毒株,暂命名为PRVLN/1301株。应用猪伪狂犬病毒(PRV)标准株设计引物对分离到的病毒进行gE和TK基因PCR扩增、T-A克隆、测序,成功扩增克隆出猪伪狂犬病病毒辽宁株PRVLN1301的主要毒力基因gE和TK基因序列。通过系统进化树分析表明该毒株与国内外参考毒株的同源性均在97%以上,核苷酸序列分析结果显示所分离的PRVgE基因存在第995位点由C-A的突变、第999位点由T-G的突变,氨基酸序列比对结果显示存在1个氨基酸L-Q位点的变化,即由亮氨酸变为谷氨酰胺,TK基因没有变异和缺失。说明该毒株与其他地区毒株为同一来源,但存在部分位点的变异。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病病毒 辽宁分离 gE和TK基因 变异分析
原文传递
猪流行性腹泻病毒LN-2015-1株分离鉴定及其S基因的变异分析 被引量:3
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作者 王楠楠 王辉暖 +7 位作者 高慎阳 董筱萍 李晶 刘文军 刘全 李宁 刘丽颖 周铁忠 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期1457-1462,共6页
为了解辽宁猪流行性腹泻病毒(PEDV)来源及变异特性,经PCR诊断,细胞分离,细胞病变观察、RT-PCR以及S基因序列鉴定,成功分离1株PEDV毒株(LN-2015-1)。S基因序列分析显示,与CV777毒株相比,除点突变外,分离株还出现最长9bp的插入,6bp的缺失... 为了解辽宁猪流行性腹泻病毒(PEDV)来源及变异特性,经PCR诊断,细胞分离,细胞病变观察、RT-PCR以及S基因序列鉴定,成功分离1株PEDV毒株(LN-2015-1)。S基因序列分析显示,与CV777毒株相比,除点突变外,分离株还出现最长9bp的插入,6bp的缺失和13bp连续突变。氨基酸也存在最长3aa插入和2aa缺失,同时存在4处连续3个及以上的氨基酸突变,抗原表位分析表明在5个表位区共发生16个氨基酸的突变。同源性分析显示与HB-HA2015毒株的同源关系最近,序列相似性为99.2%,与2010年以来国内外代表变异毒株同源性较高,达到98.5%~98.8%,而与2010年以前的传统同源性较低,在93.2%~95.6%之间;进化树分析显示该毒株与近年来国内外流行的变异毒株属于同一群,并且与HB-HA2015形成一小的分支,而与传统毒株进化距离较远。 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 辽宁分离 S基因 抗原表位 变异分析
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