过氧化物酶体生物发生因子5(PEX5)缺失导致小鼠精子发生失败和不育

目的:过氧化物酶体生物发生因子5(PEX5)对雄性小鼠精子发生及生育功能的影响。方法:利用CRISPR/Cas9及LoxP/Cre技术构建睾丸特异性Pex5基因敲除(Pex5 cKO)小鼠模型,通过苏木精-伊红染色(HE)、免疫蛋白印迹(Western blot)和免疫荧光(IF)染色分析评估雄性小鼠的生殖器官及精子发生的情况。结果:Pex5 cKO雄性小鼠正常成熟交配窝仔数为0,与野生型(WT)雄性小鼠窝仔数(6.32±0.26)相比差异有统计学意义(t=21.46,P<0.0001),且HE染色结果发现,Pex5 cKO小鼠附睾中无精子发生。结论:PEX5在小鼠精子发生过程中发挥重要作用。

多囊卵巢综合征病人血清Ⅲ型纤连蛋白域蛋白5、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助激活因子-1α水平与胰岛素抵抗的关系

目的探究多囊卵巢综合征(PCOS)病人血清Ⅲ型纤连蛋白域蛋白5(FNDC5)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助激活因子-1α(PGC-1α)表达水平与胰岛素抵抗的关系。方法选取2017年1月至2021年12月在重庆松山医院接受治疗的118例PCOS病人为PCOS组,另选取与PCOS病人年龄、身体质量指数(BMI)、腰臀比相匹配的同期健康体检者94例作为对照组。酶联免疫吸附测定(ELISA)检测两组血清FNDC5、PGC-1α表达水平;全自动生化分析仪检测空腹胰岛素(FINS)、空腹血糖(FBG)水平,并计算胰岛素抵抗相关指标胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);Pearson相关性分析研究病人血清FNDC5、PGC-1α水平与胰岛素抵抗相关指标之间的关系。结果与对照组相比,PCOS组FBG、FINS、三酰甘油(TG)、HOMA-β、HOMA-IR显著升高(P<0.05);与对照组相比,PCOS组FNDC5[(18.46±2.76)μg/L比(30.25±5.87)μg/L]、PGC-1α[(1.87±0.45)μg/L比(4.91±1.34)μg/L]表达水平显著降低(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,PCOS病人血清FNDC5、PGC-1α水平均与FBG、FINS、HOMA-β、HOMA-IR呈显著负相关(P<0.05)。结论PCOS病人血清FNDC5、PGC-1α表达水平降低,与胰岛素抵抗存在负相关。

过氧化物酶体生物发生及相关疾病研究进展

过氧化物酶体是真核细胞中保守的细胞器,是哺乳动物中调控氧化还原和脂质稳态的重要枢纽。过氧化物酶体在细胞脂质和活性氧的代谢中具有关键作用,对人类健康和发育至关重要。过氧化物酶体途径的调节主要与过氧化物酶体群的数量变化有关,其稳态的动态变化主要通过过氧化物酶体生物发生和选择性自噬维持。过氧化物酶体功能异常不仅导致过氧化物酶体生物发生障碍疾病,还与许多其他人类疾病有关,如神经退行性疾病、癌症、衰老和糖尿病等。

过氧化物酶体增殖物激活受体-γ通过调节炎症治疗肿瘤的研究进展

过氧化物酶体增殖物激活受体(PPARs)是一组核受体和配体激活的细胞内转录因子,在细胞代谢、增殖、分化、组织重塑、炎症和动脉粥样硬化等生理过程中发挥着关键作用。PPARs还充当着肿瘤抑制因子的角色。PPAR-γ是PPAR家族中最著名的一种,可在结肠癌、乳腺癌、膀胱癌、肺癌和前列腺癌中高表达。PPAR-γ的配体通过PPAR-γ依赖性和独立途径发挥作用,还能调节全身炎症和肿瘤微环境中的不同炎症介质和转录因子。通过激活PPAR-γ的合成配体和天然配体都能通过调节炎症途径抑制肿瘤细胞的生长和繁殖。恶性肿瘤和炎症是相互关联的过程,可通过降低癌细胞带来的风险和负担来抑制肿瘤。因此,PPAR-γ可以作为一个有前途的靶点,用于开发抑制癌细胞增殖的临床药物分子。本文旨在综述强调PPAR-γ作为药物开发的潜在靶点,旨在抗炎从而抑制肿瘤的研究进展。

过氧化物酶体生物发生研究进展

过氧化物酶体是存在于真核细胞中的一种亚细胞器,主要功能是参与脂肪酸等脂质的代谢过程和氧化应激的调节。近年来研究发现,多种疾病都与过氧化物酶体的生物发生异常有关。过氧化物酶体的生物发生指过氧化物酶体的形成过程,包括从头合成和分裂增殖两条途径。两条途径中,参与过氧化物酶体生物发生的蛋白质,即peroxin(PEX)的基因发生突变,会导致过氧化物酶体生成障碍,引起疾病的发生。因此,就过氧化物酶体生物发生的研究进展进行综述,有助于为相关疾病的诊断和治疗提供参考和依据。

过氧化物酶体增生物激活受体-γ激动剂对糖尿病大鼠视网膜核因子-κB表达和视网膜神经节细胞凋亡的影响

背景糖尿病视网膜病变（DR）作为糖尿病最常见的眼部微血管并发症，已成为人类最重要的致盲性眼病之一。核因子-κB（NF-κB）可通过激活一系列的炎性因子，参与DR的发生与发展。目的观察过氧化物酶体增生物激活受体-γ（PPAR-γ）激动剂罗格列酮对链脲佐菌素（STZ）诱导的早期糖尿病大鼠视网膜中NF-κB的表达及其对视网膜神经节细胞（RGCs）凋亡的影响。方法选择90只健康雄性SPF级Wistar大鼠，应用随机数字表法随机将大鼠分为3个组：正常对照组、糖尿病对照组和罗格列酮治疗组，其中糖尿病对照组和罗格列酮治疗组均采用一次性腹腔注射50mg／kgSTZ的方法建立糖尿病大鼠模型。自糖尿病模型成模后第3天起，罗格列酮治疗组大鼠每日给予罗格列酮3mg／kg灌胃，正常对照组和糖尿病对照组每日给予等体积的生理盐水灌胃。3个组分别于给药后4、8、12周各取10只大鼠处死，处死前检测各组大鼠的血糖，然后摘除眼球制作眼杯标本，并进行常规组织病理学检查，采用免疫组织化学法检测视网膜中NF-κBp65蛋白的表达，采用TUNEL法测定RGCs的凋亡指数（AI）。结果给药后4、8、12周，糖尿病对照组和罗格列酮治疗组大鼠血糖水平均明显高于正常对照组，差异均有统计学意义（P〈O．01），罗格列酮治疗组与糖尿病对照组大鼠血糖相比，差异均无统计学意义（q=0．81、0．82、1．23，P〉O．05）。正常对照组大鼠视网膜结构完整、排列规则，糖尿病对照组大鼠视网膜细胞水肿，排列紊乱，但罗格列酮治疗组大鼠视网膜结构接近正常。正常对照组大鼠视网膜中NF—KBp65呈弱表达，糖尿病对照组和罗格列酮治疗组大鼠视网膜NF-κBp65蛋白的表达（A值）均较正常对照组明显增加，差异均有统计学意义（P〈O．01）；给药后8周和12周时，罗格列酮治疗组大鼠视网膜NF-κBp65的表达均较糖尿病对照组明显降低，差异均有统计学意义（q=17．77、15．30，P〈0．01）。正常对照组大鼠RGCs层仅见少量凋亡细胞，罗格列酮治疗组大鼠RGCs的AI较糖尿病对照组明显降低，差异均有统计学意义（q=19．28、27．39、49．92，P〈0．01），糖尿病对照组和罗格列酮治疗组大鼠RGCs的AI均明显高于正常对照组（P〈O．01）。结论外源性PPAR-γ激动剂罗格列酮可能通过下调NF-κB的表达抑制糖尿病大鼠RGCs的凋亡，对早期糖尿病大鼠的视网膜具有保护作用。

过氧化物酶体增生物激活受体γ共激活因子1,能量代谢的共激活因子

转录共激活因子过氧化物酶体增生物激活受体γ共激活因子1(PGC1)家族是一类特异性存在于高能量代谢组织器官的因子,它们通过对转录因子的辅助作用促进下游基因的表达,从而调节糖异生、脂肪酸氧化、脂蛋白的合成与分泌、线粒体生物合成及氧化磷酸化解耦联等。PGC1蛋白序列无DNA结合结构域,通过与转录因子的相互作用完成对基因的表达调控。机体对PGC1的活性调节可以通过转录水平或蛋白磷酸化、乙酰化/去乙酰化、甲基化、泛素化等多种共价化学修饰完成。PGC1的表达失调与糖尿病、肥胖、高血脂症、动脉硬化、脑神经元坏死性疾病等有密切关系。

过氧化物酶体的稳态维持机制与膜接触位点

过氧化物酶体是保守存在于真核生物中的一种细胞器,参与多种生化代谢过程,包括脂肪酸β氧化反应、活性氧的产生和降解等。过氧化物酶体在生物发生和应对环境胁迫过程中,通过数量和时空分布的规律性动态变化,实现质量控制,以维持其生化代谢的稳态,从而保持机体的正常生命活动。同时,作为真核细胞的代谢枢纽,过氧化物酶体功能的正常发挥与稳态维持需要与其他细胞器相互协作。过氧化物酶体膜接触位点在过氧化物酶体与各细胞器相互连接和交流中发挥着重要作用。近年来,过氧化物酶体稳态维持机制和膜接触位点的组成和功能成为国内外相关研究的热点,本文对相关研究的进展进行了综述。

外源多胺对宁夏枸杞离体形态发生过程中可溶性蛋白组分和过氧化物酶同工酶酶谱的影响

利用已建立的宁夏枸杞 ( Lycium barbarum L.)器官发生和体细胞胚发生体系 ,对多胺在高等植物离体形态发生中的作用以及部分生化特征进行了研究 .将不同多胺预处理过的愈伤组织诱导器官发生的实验中 ,Spd能显著提高不定芽的再生频率 ,而 CHA的预处理对不定芽形成产生的阻碍最为严重 .在体细胞胚发生体系中 ,Spd,Put的处理能促进体细胞胚成苗 ,而 MGBG,CHA的处理明显降低了成苗率 .不同的多胺及其生物合成抑制剂均能影响两种再生体系的可溶性蛋白组分和过氧化物酶 ( POD)同工酶谱的表达 ;但对器官发生和体细胞胚发生途径特异多肽 ( 4 6.3,36.2 k D)的合成没有明显影响 ;而对存在于器官发生全过程、仅出现于体细胞胚发生后期阶段的 4 4k D多肽 ,MGBG在两种途径中都能阻碍它的表达 ,Put仅在体细胞胚发生中有抑制作用 .这些结果显示多胺可能在高等植物离体形态发生中起“第二信使”作用 .

过氧化物酶体增生物激活受体激动剂对大鼠角膜新生血管的影响

目的探讨过氧化物酶体增生物激活受体(PPAR)γ在大鼠碱烧伤角膜中的表达及PPARγ激动剂吡格列酮对血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达的调节作用。方法96只大鼠随机分为烧伤组和烧伤治疗组,在碱烧伤不同时期检测角膜新生血管(CNV)的长度、面积;结膜下注射生理盐水和吡格列酮,免疫组织化学和Westernblot方法检测两组不同时期的PPARγ、VEGF、bFGF的表达。结果PPARγ在正常角膜中不表达,随着CNV的发生发展,PPARγ、VEGF、bFGF的表达均增加。吡格列酮治疗组CNV发生延迟、生长抑制,VEGF、bFGF表达较对照组下降。结论PPARγ参与CNV的发生、发展。吡格列酮对鼠CNV的抑制作用是通过下调VEGF、bFGF的表达而实现的。

白藜芦醇通过SIRT1/PGC-1α影响牛肌管细胞线粒体生物发生和肌纤维类型转化

以牛肌管细胞为研究对象,通过添加白藜芦醇探究其对牛肌管细胞肌纤维类型转化的影响及其作用机制。通过噻唑蓝法和比色法对细胞活力和相关代谢酶活力进行测定,对成肌调节因子、肌球蛋白重链(myosin heavy chains,MyHCs)以及线粒体生物发生相关分子的基因和蛋白表达量进行测定。结果表明,白藜芦醇处理显著提高了Myf5、Myf6、MyoG和MyoD的基因表达水平(P<0.05),促进了牛肌管细胞分化。白藜芦醇处理显著提高了慢肌纤维蛋白(slow MyHC)的表达,降低了快肌纤维蛋白(fast MyHC)表达,同时上调了MyHC I和MyHC IIa基因表达水平,下调了MyHC IIx和MyHC IIb基因表达水平(P<0.05)。白藜芦醇还能显著提高牛肌管细胞中的琥珀酸脱氢酶和苹果酸脱氢酶活性,降低乳酸脱氢酶活性(P<0.05),此外,白藜芦醇显著提高了沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α(peroxisome proliferator-activated receptor-gamma coactivator-1α,PGC-1α)、核呼吸因子(nucleus respiratory factors,NRF)-1、线粒体转录因子A(mitochondrial transcription factor A,TFAM)的基因和蛋白表达水平(P<0.05)。添加SIRT1抑制剂6-氯-2,3,4,9-四氢-1H-咔唑-1-甲酰胺(1H-carbazole-1-carboxam,EX527)后,显著削弱了白藜芦醇诱导的肌纤维类型转化(P<0.05),白藜芦醇对SIRT1、PGC-1α、NRF-1和TFAM的基因和蛋白表达的促进作用被EX527显著削弱(P<0.05)。综上所述,白藜芦醇通过激活SIRT1/PGC-1α信号通路促进线粒体生物发生,进而促进牛肌管肌纤维类型的转化。

过氧化物酶体生物发生缺陷病1B型疾病1例报告

目的探讨peroxin 1(PEX1)复合杂合突变致过氧化物酶体生物发生缺陷病(PBD)的临床及基因特征。方法回顾分析1例PBD患儿的临床资料,并复习相关文献。结果患儿,男,4岁6个月,智力发育迟缓,无其他明显异常。基因检测发现患儿PBD相关PEX1基因存在2个尚未报道的杂合突变,c.539A>C(p.Lys180Thr)和c.27042708delTTTAT(p.Phe902fs),符合常染色体隐性遗传模式。确诊为PBD1B型。结论 PBD患者临床表型多样,其严重程度与PEX1基因的突变类型有关,基因检测可确诊。

诱导性低温复苏失血性休克大鼠肾组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助激活因子、法尼酯衍生物X受体表达研究

目的探讨诱导性低温复苏对失血性休克大鼠肾组织中过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助激活因子(PGC-1)、法尼酯衍生物X受体(FXR)表达的影响。方法选取40只成年SD大鼠,随机分为对照组(n=8)、常温复苏组(n=16)及低温复苏组(n=16)。常温复苏组、低温复苏组大鼠建立失血性休克模型,并于维持休克状态60 min后,分别以常温(38℃)、低温(32℃)复苏。对照组仅进行相关手术操作,不建立休克模型。采用蛋白质印迹法和聚合酶链式反应检测复苏3 h后大鼠肾组织中PGC-1、FXR蛋白及mRNA表达情况。结果建模前,3组大鼠心率、平均动脉压比较,差异无统计学意义(P>0.05)。建模后,常温复苏组、低温复苏组大鼠心率均较建模前明显升高,平均动脉压均较建模前明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。复苏后,常温复苏组、低温复苏组大鼠心率均较建模后降低,平均动脉压均较建模后升高,差异有统计学意义(P<0.05)。复苏结束后3 h,常温复苏组大鼠肾组织中PGC-1 mRNA表达量高于对照组,而低温复苏组大鼠肾组织中PGC-1 mRNA表达量低于对照组、常温复苏组,差异均有统计学意义(P<0.01)。复苏结束后3 h,常温复苏组、低温复苏组大鼠肾组织中FXR mRNA表达量均低于对照组,且低温复苏组低于常温复苏组,差异均有统计学意义(P<0.01)。复苏结束后3 h,常温复苏组、低温复苏组大鼠肾组织PGC-1、FXR蛋白表达均低于对照组,且低温复苏组低于常温复苏组,差异有统计学意义(P<0.05)。常温复苏组、低温复苏组大鼠在休克模型期、复苏期均无死亡。Kaplan-Meier生存分析结果显示,低温复苏组大鼠72 h存活率显著高于常温复苏组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论诱导性低温可调节失血性休克大鼠模型肾组织中PGC-1和FXR基因表达,从而改善能量代谢失衡。

去泛素化酶组成型光形态发生因子9信号复合体5上调甲硫氨酸腺苷转移酶2A表达促进肝癌细胞增殖

目的研究去泛素化酶组成型光形态发生因子9信号复合体5(CSN5)调控肝癌细胞增殖的的分子机制。方法采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法以及免疫组织化学法检测并比较CSN5在肝癌和癌旁组织表达的差异性。在肝癌细胞转染CSN5干扰片段并采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法验证CSN5和甲硫氨酸腺苷转移酶2A(MAT2A)表达的变化,同时用EdU法检测肝癌细胞增殖的变化。结果CSN5在肝癌组织和肝癌细胞中的表达水平明显增高(P<0.05)。干扰CSN5后肝癌细胞中CSN5 mRNA及蛋白的水平和肝癌细胞增殖能力显著降低(P<0.001)。在肝癌细胞中干扰CSN5的表达可以明显降低MAT2A蛋白水平(P<0.01)并进而影响肝癌细胞的增殖能力。结论CSN5可以通过调控甲硫氨酸腺苷转移酶2A的表达进而调控肝癌细胞的增殖。

过氧化物酶体降解与疾病

过氧化物酶体是细胞中一种参与脂肪酸代谢、缩醛磷脂合成和氧化应激等功能的细胞器,其数量会根据细胞和细胞所处微环境的不同而发生变化,这种变化又与过氧化物酶体本身的降解密切相关。虽然一直以来,过氧化物酶体都被线粒体的光芒所掩盖,但是近年来,随着过氧化物酶体研究的逐渐增多,人们对于过氧化物酶体的降解也有了更全面的了解。本文主要对哺乳动物过氧化物酶体的降解过程及其与疾病的关系作一综述,重点阐述过氧化物酶体自噬的基本过程,以加深对过氧化物酶体降解及其在疾病中作用的认识。

微RNA-181a-5p介导Sirt1/PPARγ信号通路促进肾病综合征大鼠细胞凋亡的机制研究

目的旨在探究微RNA(miR)-181a-5p对肾病综合征大鼠细胞凋亡的调控机制。方法该研究起止年限为2021年1月至2022年12月。使用阿霉素(ADR)构建肾病综合征大鼠模型及体外肾病综合征损伤模型,转染miR-181a-5p inhibitor/NC至体外细胞模型。使用生化分析仪分析血清肌酐、血尿素氮、血清白蛋白和尿蛋白,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRTPCR)检测肾组织及大鼠肾足细胞miR-181a-5p表达水平,通过TargetScan(http://www.targetscan.org/vert_72/)预测miR-181a-5p的下游靶基因,双萤光素酶报告实验来验证miR-181a-5p与沉默信息调节因子1(Sirt1)靶向结合关系。使用CCK-8试剂盒检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,通过蛋白质印迹法检测Sirt1及过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)蛋白水平。结果肾病综合征大鼠miR-181a-5p相对表达水平为3.50±0.30,敲低miR-181a-5p,使得Sirt1蛋白表达水平从0.36±0.02上调至0.87±0.06,PPARγ蛋白表达水平从0.26±0.02上调至0.78±0.05。结论miR-181a-5p通过抑制Sirt1/PPARγ信号通路活性促进肾足细胞凋亡。

慢性阻塞性肺疾病大鼠骨骼肌过氧化物酶体增生物激活受体γ辅激活因子-1α表达对线粒体合成的影响

目的 观察慢性阻塞性肺疾病（COPD）模型大鼠外周骨骼肌过氧化物酶体增生物激活受体γ辅激活因子-1α（PGC-1α）与线粒体合成相关基因的表达,探讨COPD骨骼肌线粒体生物合成的变化及影响因素.方法 用2次气管内注入脂多糖（LPS）和反复烟熏的方法制作COPD大鼠模型.检测对照组和模型组大鼠外周血及骨骼肌肿瘤坏死因子-α（TNF-α）浓度,实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）分析方法检测骨骼肌PGC-1α、核呼吸因子1（NRF1）、线粒体转录因子A（Tfam）、细胞色素C氧化酶亚基Ⅳ基因（COX Ⅳ）mRNA表达,Western blot检测骨骼肌PGC-1α、NRF1、Tfam、COXⅣ蛋白相对含量.结果 模型组大鼠外周血和骨骼肌TNF-α浓度（ng/L,378.09±26.34和330.56±23.79）较对照组升高（154.70±12.98和129.77士11.79）;模型组PGC-1α（0.17±0.05）、NRF1（0.20士0.08）、Tfam（0.21 ±0.04）、COXⅣ（0.25±0.07） mRNA相对表达量较对照组PGC-1α（1.00 ±0.00）、NRF1 （1.00 ±0.00）、Tfam（1.00 ±0.00）、COX Ⅳ（1.00±0.00） mRNA相对表达量明显降低.骨骼肌TNF-α表达和PGC-1α mRNA呈负相关.结论 COPD大鼠骨骼肌PGC-1α及线粒体合成相关基因表达降低,其机制可能与TNF-α高表达有关.