连接酶链反应检测宫颈沙眼衣原体感染

为评价连接酶链反应(LCR)诊断宫颈沙眼衣原体(CT)感染的意义，用质粒LCR和聚合酶链反应(PCR)检测170例STD门诊女性就诊者宫颈拭子标本中的CT，对两项检测结果不一致的标本进行校正，对PCR阳性而LCR阴性者，将LCR标本稀释10倍重复LCR或用PCR反应的DNA模板作LCR检测。对PCR阴性而LCR阳性者，用另一对针对沙眼衣原体主要外膜蛋白(MOMP)基因的引物作PCR测试。将以上两项检测结果阳性的标本判断为真阳性，确定LCR和PCR的敏感性和特异性。发现170例患者中24例LCR检测阳性(14.2％)，26例PCR阳性(15.3％)，对8例两项结果不一致的标本作了校正。LCR检测的敏感性和特异性分别为92％，99.3％；而PCR分别为92％，97.9％。结果提示LCR诊断女性宫颈CT感染具有较高的敏感性和特异性。

质粒缺口-连接酶链反应-酶联免疫吸附法检测沙眼衣原体

目的:建立高度灵敏特异的质粒缺口-连接酶链反应-酶联免疫吸附法(Gap-LCR-ELISA)检测沙眼衣原体(Chlamy-diatrachomatisCT)。方法:根据CT共有隐蔽性质粒设计并标记4条寡核苷酸探针,对6型CT标准株和鹦鹉热衣原体及其他常见泌尿生殖道病原菌行Gap-LCR-ELISA。结果:质粒Gap-LCR-ELISA可检测出6型CT,并与其他病原体无交叉反应,其最低检测限为2.5个原体(elementarybodiesEB)比PCR敏感10倍。结论:质粒Gap-LCR-ELISA对检测CT感染具有极高的灵敏度和特异度,适宜于我国进行大规模CT流行病学调查。

连接酶链反应检测女性尿标本中的奈瑟淋球菌

目的评价连接酶链反应（ＬＣＲ）技术诊断女性淋病的价值。方法对 １７０例 ＳＴＤ门诊女性就诊者作宫颈拭子淋球菌培养和尿标本ＬＣＲ检测，对两项检测结果不一致的标本作聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测，参照“扩大的金标准”确定ＬＣＲ技术和培养的敏感性和特异性。结果１７０例患者中１６例ＬＣＲ检测阳性（９． ４％），１４例培养阳性（８． ２％），对８例两项结果不一致的标本作了ＰＣＲ检测。ＬＣＲ检测的敏感性、特异性、阳性预期值和阴性预期值分别为９４．１％、１００％、１００％和９９．４％；而培养法分别为８２．４％、１００％、１００％和９８．１％。结论尿标本ＬＣＲ检测对诊断女性淋病具有较高的敏感性和特异性，适宜作大规模的ＳＴＤ普查，使筛查女性无症状感染者的机会大大增加。

涂片、培养、聚合酶链反应和连接酶链反应几种方法检测宫颈淋球菌感染

目的:评价4种方法检测宫颈淋球菌的临床应用价值。方法:用美蓝染色涂片、培养、聚合酶链反应(PCR)淋球菌试剂盒和连接酶链反应(LCR)4种方法对比检测宫颈淋球菌感染情况。结果:4种方法相应的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为:涂片方法是56.2%、97.6%、69.2%、95.5%;细菌培养方法是68.8%、100.0%、100.0%、97.1%;PCR方法是:68.8%、97.6%、73.3%、97.0%;LCR方法是:93.8%、92.3%、53.6%、99.4%。如果把涂片和细菌培养并联检测淋球菌,即两者之一阳性即为阳性,则这两种方法并联起来的敏感性为81.3%,特异性为97.6%。结论:涂片和培养并联检测淋球菌比单独涂片和培养的敏感性有所提高,而特异性并没有明显的降低。

缺口-连接酶链反应-酶联免疫吸附法检测孕妇沙眼衣原体感染

目的:用缺口-连接酶链反应-酶联免疫吸附(Gap-LCR-ELISA)法检测重庆地区孕妇沙眼衣原体感染,以了解围生期沙眼衣原体(CT)的感染现状。方法:以512名孕妇首段尿(FVU)及配对宫颈刮片为研究对象,按照扩大金标准,采用质粒探针和外膜蛋白探针Gap-LCR-ELISA法用于不同类型临床标本检测CT感染。结果:①孕妇的CT感染呈很强的隐匿性,由扩大金标准所确证的CT真阳性共42例,所检重庆地区孕妇的CT感染率为8.2%(42/512),其中88.1%(37/42)可同时从尿道和生殖道检出CT,而另9.5%(4/42)和2.4%(1/42)仅能单独分别从生殖道或尿道检出。②Gap-LCR-ELISA用质粒与外膜蛋白作为探针检测FVU中CT的敏感性分别为90.48%和71.43%(P<0.05),质粒Gap-LCR-ELISA用于宫颈刮片和FVU两种标本的敏感性分别为97.62%和90.48%(P>0.05),特异性均为100%。结论:质粒Gap-LCR-ELISA法用于孕妇FVU以检测围生期无症状CT感染患者,是一种非侵袭性的、高度敏感特异的、适合于发展中国家和地区进行大规模流行病学调查的方法。

连接酶链反应和细胞培养检测男性尿液中沙眼衣原体

目的 评价连接酶链反应(LCR)检测男性尿液标本中沙眼衣原体(Ct)的敏感性和特异性。方法 取 852例患者尿道拭子作Ct培养;同时取患者较长时间(2h以上)不排尿后的首次尿 (FVU)标本,用质粒LCR检测Ct。对培养法和质粒LCR检测结果相异的标本,用另一针对Ct主要外膜蛋白基因的引物进行LCR确证,参照“扩大的金标准”确定检测结果。结果 质粒LCR敏感性和特异性分别为 98. 6%和 99. 4%,而培养法分别为 77. 4%和 99. 5%,前者敏感性高于后者 (P<0. 001)。有、无尿道症状的患者间LCR敏感性和特异性无显著性差异。结论 LCR是一种既敏感又特异的Ct感染诊断方法。

质粒缺口-连接酶链反应-ELISA法检测重庆地区围生期孕妇沙眼衣原体感染及基因分型

目的:用质粒缺口-连接酶链反应(Gap-LCR)-ELISA法研究重庆地区围生期孕妇沙眼衣原体(CT)感染的现状及流行的主要基因型别,为其疫苗的研制提供分子流行病学依据。方法:以512例孕妇的首段尿(FVU)及其配对新生儿的鼻咽拭子为标本,用质粒Gap-LCR-ELISA法检测CT感染者,对阳性母、婴配对标本DNA行omp1-VS4-PCR扩增,产物行双链DNA直接测序并作基因分型。结果:所检重庆地区孕妇CT感染率为7.42%,母婴垂直传播率为15.79%,以阴道分娩为主要传播途径。6对阳性母婴配对标本的CT基因序列一致,其中5对为E型,1对为H型,再次证实了CT的垂直传播途径。结论:质粒Gap-LCR-ELISA法可用于围生期无症状CT感染孕妇的大规模流行病学调查。重庆地区围生期CT流行型别仍以E型为主。

连接酶链反应检测结膜沙眼衣原体

目的了解活动性沙眼患者的年龄分布,评价WHO简易沙眼分级法和连接酶链反应(LCR)诊断沙眼衣原体的意义.方法根据WHO简易沙眼分级法,对89例受检者进行沙眼分级,并应用刮擦拭子采集上睑结膜标本,进行连接酶链反应以诊断沙眼衣原体.结果10岁以下的沙眼占56.18%,20岁以下占26.94%;84例沙眼及可疑沙眼中,16例LCR阳性(19.05%),各抽样点的LCR阳性率为7.14%～34.38%. 结论应加强对青少年活动性沙眼的防治;WHO的简易分级活法适合在基层农村推广;连接酶链反应可用于早期沙眼的诊断及批量样本的检测,需注意采样方法及转送温度条件的控制.

连接酶链反应检测尿标本中沙眼衣原体

采用连接酶链反应(LCR)检测尿标本中沙眼衣原体(CT),并对阳性标本以聚合酶链反应(PCR)、Clearview法对照,结果发现LCR检出的44例均为真阳性,表明LCR是检测CT的一种非侵入性、敏感性及特异性很高的方法。

缺口连接酶链反应检测沙眼衣原体DNA的实验研究

目的 :建立缺口连接酶链反应方法检测沙眼衣原体。方法 :根据编码CT主要外膜蛋白的基因 (ompl)的稳定区设计2对互补的寡核苷酸探针。采用G -LCR和常规PCR扩增CT标准株DNA ,并对二者检测CT的敏感性进行比较。结果 :对5种CT标准株进行G -LCR扩增 ,均出现 5 4bp长度的DNA片段。敏感性实验可检测出 2个CT原体 ,而PCR可检测出2 0EBs。G -LCR较PCR敏感 10倍 ;在特异性方面 ,不扩增肺炎衣愿体及其他细菌DNA ,具有很高的特异性。结论 :G -LCR用于检测沙眼衣原体特异、敏感、快速、准确 ,可为CT感染的临床诊断提供依据。

连接酶链反应检测沙眼衣原体的准确性Meta分析

目的评价连接酶链反应技术与培养法诊断沙眼衣原体的准确性。方法计算机检索PubMed、EMBASE、Cochrane图书馆、中国生物医学文献数据库、中国期刊全文数据库和万方数据库等,收集连接酶链反应诊断沙眼衣原体的试验研究,依据QUADAS质量评价标准评价纳入研究的质量,采用MetaAnalyst软件进行Meta分析。结果共纳入22个研究,共16073例受试者。Meta分析结果显示:与诊断沙眼衣原体感染的"金标准"细胞培养相比,连接酶链反应诊断沙眼衣原体感染的合并敏感度、特异度、阳性似然比、阴性似然比、诊断比值比和综合受试者工作特征曲线下面积分别为0.934(95%可信区间0.891～0.961)、0.983(95%可信区间0.972～0.990)、52.88(95%可信区间32.297～86.583)、0.069(95%可信区间0.043～0.110),1234.549(95%可信区间545.900～2791.925)和0.986。结论连接酶链反应可作为确诊沙眼衣原体感染的一项新技术,在检测沙眼衣原体感染中有着重要意义。

连接酶链反应(LCR)技术检测男性尿标本的淋病奈瑟菌

目的应用连接酶链反应(LCR)技术检测男性尿标本中的淋病奈瑟菌,初步评价其敏感性和特异性。方法采集受检者晨起或较长时间(2小时以上)不排尿后的首段尿(FVU)标本1 131例,利用LCR检测此尿液标本中的淋球菌,针对Cut-off值在灰区以上的标本进行聚合酶链反应(PCR)检测。对LCR和PCR结果相异的标本,用另一LCR试剂复检,参照“扩大的金标准”来确定检测结果。结果LCR的敏感性和特异性分别为100%和99.9%。结论LCR作为一种探针检测技术,是一种既敏感又特异的诊断方法,可避免取尿道标本给患者带来的痛苦,可作为筛检男性淋病奈瑟菌感染的一种非损伤性方法。

连接酶链反应检测男性就诊者尿标本中的沙眼衣原体(英文)

目的评价连接酶链反应(LCR)检测性病专科门诊男性就诊者尿标本中沙眼衣原体(CT)的敏感性和特异性。方法取852例患者尿道拭子作CT培养;同时取患者较长时间(2 h以上)不排尿后的首次尿(FVU)标本,用质粒LCR检测CT。对培养法和质粒LCR结果相异的标本,用另一针对CT主要外膜蛋白基因的LCR进行确证,参照“扩大的金标准”来确定检测结果。结果质粒LCR敏感性和特异性分别为98.6%和99.4%,而培养法分别为77.4%和99.5%,前者敏感性高于后者(P<0.001)。在伴或不伴尿道症状的就诊者间LCR敏感性和特异性无显著性差异。结论LCR是一种既敏感又特异的CT诊断方法。FVU可作为筛检男性CT感染的一种非损伤方法。

应用连接酶链反应检测沙眼衣原体DNA

目的 建立检测沙眼衣原体感染的具有高度敏感性和特异性的缺口 连接酶链反应 酶联免疫吸附测定法。方法 根据CT主要外膜蛋白稳定区设计 2对互补探针并分别对其两端标记生物素和地高辛 ,对 6种CT标准株、鹦鹉热衣原体标准株和其他细菌进行Gap LCR反应并以ELISA和EB染色电泳检测扩增产物以比较两者的检测限度。 结果 Gap LCR可检出 6种CT标准株并不与其他细菌发生交叉反应 ,ELISA可检出 1 0fgDNA模板的扩增产物 ,较EB电泳法敏感 1 0倍。结论 Gap LCR ELISA是一高度敏感特异的检测CT感染的核酸扩增技术 。

连接酶链反应检测沙眼衣原体诊断泌尿生殖系感染

目的：研究应用连接酶链反应方法（LCR）检测沙眼衣原体（CT）在诊断泌尿生殖道感染中的临床意义。方法：应用LCR对4024份患者的尿标本进行CT的检测，其中有47份尿道拭子或宫颈拭子同时进行培养法和LCR的检测，并对两种方法的检测结果进行了比较分析，结果：LCR法检测4024份尿标本，CT阳性率为17．50％（704／4024），417份拭子标本LCR检测阳性率为20．62％（86／417），培养法检测阳性率为8．39％（35／417），LCR法与培养法之间差异有极显著性（P＜0．005），结论：LCR法与培养法比较具有敏感，快速和特异的特点，用于检测拭子标本和尿标本在检测CT诊断泌尿生殖道感染中有着重要的意义。

用尿液标本连接酶链反应诊断泌尿生殖道沙眼衣原体感染研究进展

连接酶链反应 (LCR)是一种新的基因扩增技术 ,应用两对引物对靶基因进行扩增 ,可用于淋球菌、沙眼衣原体、人类乳头瘤病毒等多种病原体检测 ,也适用于尿道拭子、宫颈拭子和尿液等多种标本。本文综述了LCR的原理 ,及其以尿液作为检测标本时的标本收集和处理 ,在沙眼衣原体诊断中的应用和影响因素。

连接酶链反应在人Amelogenin基因座检验中的初步研究

目的建立连接酶链反应(Ligase Chain Reaction,LCR)应用于法医学领域的初步方法探索。方法选择人Amelogenin基因座进行连接酶链反应。针对人染色体Amelogenin基因座Xp22.1-.3、Yp11.2上M55418、M55419的序列,自行设计特异引物,建立LCR最佳体系,对男性和女性Amelogenin基因座进行分型。结果巢式LCR能够对男性和女性Amelogenin基因座正确分型。结论 LCR技术能够应用于人Amelogenin基因座分型,但尚需进一步简化和改进。

连接酶链反应检测尿液中的淋病奈瑟球菌

目的评价连接酶链反应(LCR)技术对尿液中淋病奈瑟球菌诊断的意义。方法对在性传播疾病(STD)门诊就诊的276例尿道/宫颈炎患者进行分泌物细菌培养及尿液淋病奈瑟球菌LCR检测,对两项结果不符合的标本进行聚合酶链反应(PCR)检测,确定细菌培养、LCR法检测尿液中淋病奈瑟球菌的敏感性、特异性。结果276例患者中,24例LCR检测阳性(87%),21例培养阳性(76%),5例两项结果不符合者进行PCR检测。LCR的敏感性及特异性分别为923%、1000%。结论LCR分析法检测尿液中的淋病奈瑟球菌具有较高的敏感性及特异性。

连接酶链反应评估酶免疫法验测泌尿生殖道沙眼衣原体感染

目的对目前最常用的检测泌尿生殖道沙眼衣原体感染的快速酶免疫法(ClearviewEIA)进行临床评估。方法共检测临床标本96例,其中男56例,女40例。每例患者取尿道拭子(US)或宫颈拭子(CS)拭子1支行ClearviewEIA检测,同时留取20～30ml长时间不排尿后的首次尿(FVU)行连接酶链反应(LCR)检测。结果LCR检测96份尿标本,EIA检测96份尿道/宫颈拭子,CT阳性率分别为26.0%(25/96)和12.5%(12/96),两者差异有显著性(χ2=30.7,P<0.001);以LCR为参照,ClearviewEIA敏感性为43.8%,特异性为98.6%。结论ClearviewEIA敏感性较低,容易造成临床漏诊。