人脐血源基质细胞移植促进裸鼠造血损伤修复的实验研究

目的观察人脐血源基质细胞(hUCBSCs)移植对裸鼠造血损伤的修复效果。方法6.5Gy辐照裸鼠后,分别从尾静脉输入1×105个人脐血源基质细胞及生理盐水,分别于移植+1、+3、+5、+7、+10、+14、+21d观察裸鼠血象、骨髓象以及不同时相点CFU-F、CFU-GM、BFU-E、CFU-Meg动态变化。结果HUCBSCs移植组裸鼠在血象、骨髓象恢复时间、不同时相点骨髓CFU-F、CFU-GM、BFU-E、CFU-Meg等方面与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论HUCBSCs移植具有促进裸鼠造血损伤修复的作用。

小鼠骨髓基质细胞移植对急性辐射造血损伤的影响

目的：探讨小鼠骨髓基质细胞（marrow stromal cell,MSC）同种异体移植对接受全身大剂量辐射小鼠造血修复的影响。方法：在体外对小鼠骨髓基质细胞进行培养、扩增,并将第三代细胞通过尾静脉移植到同种接受全身大剂量射线照射的小鼠,测定移植后不同时期小鼠外周血白细胞（WBC）、红细胞（RBC）、血小板（PLT）、血红蛋白（HGB）值,观测各组脾集落形成单位（colony forming unit,CFU-S）,探讨同种异体骨髓基质细胞移植对急性辐射造血损伤修复的影响。结果：经骨髓基质细胞移植的小鼠,其WBC、RBC、PLT、HGB在移植后15-20 d较对照组明显增高（WBC、PLT、HGB：P〈0.01;RBC：P〈0.05）,移植组CFU-S明显高于对照组（P〈0.01）。结论：同种异体小鼠骨髓基质细胞移植,能促进小鼠造血干细胞在脾脏定居,增强造血干细胞形成集落的能力,并能显著提高外周血细胞数量,促进损伤后早期造血功能重建。

Toll样受体5激动剂CBLB502的辐射造血损伤保护作用

目的研究CBLB502对辐射造血损伤的防护作用。方法 C57BL/6J小鼠随机分为正常对照、60Coγ射线6.5Gy一次性全身照射对照和CBLB502照前30 min 0.2mg/kg皮下给药预防组,照前1 d和照后30 d定期检测外周血细胞数,照射后2和24 h取骨髓检测有核细胞数和集落形成数,竞争性移植方法观察骨髓造血细胞植入能力,流式细胞仪测定外周血中各系细胞比例。结果 CBLB502能显著减轻60Coγ射线6.5 Gy照射小鼠的外周血中白细胞、红细胞及血小板数的急剧降低并加速其恢复,照后2和24 h CBLB502预防给药组小鼠骨髓各系造血祖细胞集落形成数均显著高于照射对照组(P<0.01),且预防给药可明显提高受照射小鼠骨髓造血细胞的植入能力。结论 CBLB502具有明显的辐射造血损伤保护作用。

白蛋白融合型G-CSF对3.0 Gy ^(60)Co γ射线照射恒河猴造血损伤的作用

目的:观察重组人血清白蛋白-粒细胞集落刺激因子融合蛋白(HSA-G-GSF)对3.0Gy 60 Coγ射线照射恒河猴造血系统损伤的作用。方法:18只成年恒河猴给予3.0Gy 60 Coγ射线照射,随机分为照射对照,HSA-G-CSF,吉粒芬对照3组。吉粒芬对照组动物照射后0~13d每天1次皮下注射吉粒芬5μg/kg。HSA-G-CSF组动物分别于照射后0和7d皮下注射HSA-G-CSF 150μg/kg。观察各组动物外周血象、造血祖细胞数、造血组织病理学。结果:HSA-G-CSF可显著提高照射后恒河猴外周血中白细胞、中性粒细胞、网织红细胞和造血祖细胞的数量,可促进骨髓造血功能恢复,有效保护脾脏和淋巴结组织结构和细胞完整。结论:HSA-G-CSF融合蛋白可明显促进急性辐射损伤猴造血功能恢复,与吉粒芬相比,对3.0Gy 60 Coγ射线照射恒河猴造血损伤有更显著的治疗作用。

重组人骨形成蛋白成熟肽-2对辐射小鼠骨髓造血损伤的修复作用

目的:探讨重组人骨形成蛋白成熟肽-2(recombinanthumanbonemor-phogeneticprotein-2mrhBMP-2m)对辐射引起的小鼠骨髓造血损伤的修复作用。方法:通过60Coγ射线照射小鼠,建立骨髓造血损伤动物模型;经rhBMP-2m连续治疗后,比较照射对照组和rhBMP-2m治疗组之间,骨髓单个核细胞数和蛋白含量的差异;同时,通过酶联免疫吸附试验(ELISA),检测骨髓细胞中CD34分子表达水平的变化。结果:经rhBMP-2m治疗后的动物,其单个核细胞数、蛋白含量和CD34分子的表达水平明显高于照射对照组(P<0.05,n=5)。结论:辐射引起的小鼠骨髓造血损伤,rhBMP-2m能够增加造血细胞数量,促进骨髓细胞CD34分子表达,加速造血损伤的修复过程。

胎肌条件培养液对急性辐照小鼠造血损伤的防护和促恢复作用研究

观察了人胎肌条件培养液（ＦＭＣＭ）对６．５Ｇｙ６０Ｃｏ亚致死量照射小鼠造血损伤的保护和促恢复作用。结果证明：照射前小鼠腹腔注射ＦＭＣＭ２．５～５．０ｍｌ／ｋｇ·ｄ×５ｄ，能有效地预防和延缓因辐射所致的造血于细胞（ＣＦＵ－Ｓ）和外周血细胞的降低，照射后给予同样剂量的ＦＭＣＭ，对辐射所致的小鼠外周血细胞的减低有明显的促恢复作用，能显著促进辐射损伤小鼠的髓外造血重建。表明ＦＭＣＭ对照射造成的造血损伤具有良好的保护和治疗作用。

宫血灵对小鼠受^(60)Co照射所致造血损伤的治疗作用

宫血灵(Gongxueling)是以××动物蹄甲为原料,经化学提取所得有效成份。内含有精氨酸等十几种氨基酸、甾体及微量元素。药理研究表明该药有提升血红蛋白、白细胞及血小板等作用。本文就其对小鼠^(60)Co照射造血损伤的治疗作用进行了实验研究。一、材料宫血灵由药物研究所药物室提供,^(60)Co源由山东省农业科学院提供,小白鼠(昆明种)由山东省实验动物中心提供。二、方法与结果取18±2g健康小鼠30只,雌雄各半。

G-CSF对受照小鼠造血损伤的影响

Ｇ－ＣＳＦ对受照小鼠造血损伤的影响王元书侯金玲张秀芹朱燕李杰解砚英王艹凡徐淑兰（山东省医学科学院药物研究所，济南２５００６２）重组人粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）是应用重组ＤＮＡ技术所生产，其基本原理是将人类粒细胞集落刺激因子的基因插入大肠杆菌内，...

新型冠状病毒感染致造血损伤及潜在治疗药物的生物信息学分析

目的分析预测新型冠状病毒(SARS-CoV-2)感染所致造血损伤及潜在的治疗药物,为临床救治SARSCoV-2感染所致造血损伤提供理论依据。方法利用基因表达数据库(GEO)筛选SARS-CoV-2感染相关的全基因组表达数据,使用R语言包对数据进行差异分析以及基因本体论(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析。通过蛋白-蛋白相互作用数据库(STRING)在线分析网站进行蛋白互作(PPI)网络分析,筛选核心基因。应用自主研发的表观精准治疗预测平台(EpiMed)进行疾病、药物和关联靶基因分析。结果共筛选出差异基因222个,其中上调172个,下调50个。GO富集分析结果显示,差异基因主要与Ⅰ型干扰素反应、细胞周期调节、炎性细胞迁移、先天免疫反应、血液微粒和囊泡分泌、趋化因子及其受体等有关。KEGG富集分析结果显示,差异基因主要与病毒感染、心肌损伤、补体及凝血级联、细胞趋化、血小板活化、急性炎症、免疫反应、细胞信号转导等相关信号通路有关。PPI网络分析筛选得到STAT1、IL-6、IRF7、TNF、MX1、ISG15、IFIH1、IRF9、DDX58和GBP1等10个核心基因。EpiMed平台筛选出具有潜在治疗作用的药物包括冬凌草、西罗莫司、糖皮质激素、鱼腥草、何首乌、赤芍、维甲酸、甘草、环孢素A、氟伐他汀等。结论SARS-CoV-2感染可通过改变一系列基因的表达从而影响造血系统,据此筛选出的潜在治疗药物可为新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的基础和临床研究提供参考。

5-氟尿嘧啶诱导的造血损伤中骨髓基质重建相关基因的表达及其意义

目的:探究胞外基质重建相关基因在氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)诱导的造血损伤重建中的表达及其意义。方法:采用C57BL/6小鼠腹腔注射5-FU(200 mg/kg)建立造血损伤模型。注射后3、6、9、15、21、27 d常规检测外周血象;在相同时间点用TRIzol法提取骨髓总RNA,反转录后以实时荧光定量PCR(RT-q PCR)检测胞外基质重建相关基因的mRNA水平,包括细胞外基质(ECM-1)、明胶酶(MMP-2)、基质降解素(MMP-3)、胶原酶(MMP-13)、组织金属酶抑制剂(TIMP-1)基因。结果:小鼠经5-FU注射后外周血出现典型的造血损伤与修复过程,且红细胞、白细胞、血小板损伤修复的动态不同;RT-q PCR显示在5-FU损伤期骨髓胞外基质重建相关基因的表达均显著上调,MMP-2在注射5-FU后第3天时表达最高,MMP-3、MMP-13、TIMP-1、ECM-1在第6天表达最高;MMP-3在骨髓中表达较低,但损伤后上升幅度最大。结论:在5-FU建立的骨髓造血损伤模型中,胞外基质重建相关基因可能参与造血损伤和随后骨髓基质的重构过程,且不同基因发挥的时段和作用对象不同,但彼此协同为造血损坏后重建奠定基础。

FL与辐射造血损伤

FL(flt3ligand)是一种作用于早期造血细胞的生长因子,通过与其受体flt3特异性结合,促进造血干、祖细胞增殖分化。最近的研究表明,在骨髓造血功能障碍时,FL蛋白水平发生明显变化。机体辐射损伤后,血浆中FL水平升高;FL水平有可能作为辐射导致骨髓损伤的生物学指标。另外,FL单独、或与其他细胞因子联合应用具有辐射损伤防治作用。

rhIL-3、rhGM-CSF对γ线照射恒致河猴造血损伤的作用

观察了国产白介素３（ｒｈＩＬ－３）和市售粒巨噬系集落刺激因子（ｒｈＧＭ－ＣＳＦ）单用和伍用对恒河猴辐射后造血功能的改善作用。结果表明，单用ＩＬ－３２０μｇ／ｋｇ×２８天可提高３．５Ｇｙ照射猴白细胞最低值水平，缩短白细胞低水平的持续时间；减缓血小板的下降趋势。单用ＧＭ－ＣＳＦ使白细胞恢复提前，超常恢复时峰值可达照前的５００％。二者伍用兼有二种因子的效果，白细胞减少幅度小且时间短，恢复提前，回落平稳。两因子单用和伍用可使受照猴骨髓造血祖细胞比对照增多约３～９倍，但停药后迅速下跌。

Ge—132对小鼠电离辐射造血损伤的保护作用

体外试验中,Ge-132对正常及注射环磷酰胺后小鼠骨髓CFU-GM产率均有促进作用,本文观察了Ge-132在体内试验中对辐射所致造血损伤的保护作用。 BAL B/C小鼠由第一军医大学实验动物中心提供,雌雄各半,体重20±2g,8～12周龄,照射源为直线加速器,剂量率为0.896Gy/min,总剂量为5Gy。

白介素⁃6基因敲除对辐射诱导小鼠造血损伤的影响及相关机制研究

目的:研究白介素⁃6(IL⁃6)基因敲除对辐射诱导小鼠造血损伤的影响及其相关机制。方法:观察比较^(60)Coγ射线照射前后IL⁃6基因敲除(IL⁃6^(-/-))和野生型(IL⁃6^(+/+))小鼠的外周血象、骨髓中造血干/祖细胞含量、血清IL⁃6和G⁃CSF表达水平,分析经8.0 Gyγ射线照射后IL⁃6^(+/+)和IL⁃6^(-/-)小鼠30 d存活率。结果:IL⁃6^(+/+)小鼠血清中IL⁃6水平[(98.95±3.85)pg/ml]明显高于IL⁃6^(-/-)小鼠[(18.36±5.61)pg/ml](P<0.001)。照射前成年IL⁃6^(-/-)与IL⁃6^(+/+)小鼠外周血象、血清G⁃CSF水平均无明显统计学差异(P>0.05)。8.0 Gyγ射线照射后6 h,IL⁃6^(-/-)小鼠外周血白细胞、中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、血小板数和血清G⁃CSF水平较IL⁃6^(+/+)小鼠显著下降(P<0.001);8.0 Gyγ射线照射后30 d,IL⁃6^(+/+)和IL⁃6^(-/-)小鼠存活率分别为62.5%和12.5%,死亡鼠平均存活时间分别为16.0±1.0和10.6±5.3 d。6.5 Gyγ射线照射后14 d,IL⁃6^(+/+)和IL⁃6^(-/-)小鼠骨髓有核细胞计数分别为每根股骨(10.0±1.2)×10^(6)和(8.3±2.2)×10^(6)(P>0.05);与IL⁃6^(+/+)小鼠比较,IL⁃6^(-/-)小鼠骨髓中Lin-Sca⁃1-c⁃kit+(LK)比例无明显变化(P>0.05),但Lin-Sca⁃1+c⁃kit+(LSK)比例显著下降(P<0.05)。结论:IL⁃6对小鼠造血辐射损伤具有明显的调控作用,IL⁃6基因缺失抑制辐射诱导的内源性G⁃CSF水平升高,加重电离辐射引起的小鼠造血干细胞损伤和外周血成熟血细胞的减少,导致致死剂量照射小鼠存活时间缩短、存活率明显下降。

重组人IL-6和IL-3联合促进灵长类动物由化疗导致的造血损伤恢复的效应观察

肿瘤患者放、化疗后严重的毒副作用是造血功能受到严重抑制，以致外周血循环细胞数量减少。这样临床医生不得不降低化疗药物及放射线剂量，因而影响丁对肿瘤的疗效。重组人细胞因子，例如GM—CSF，G—CSF等可以减少肿瘤患者放、化疗导致的中性粒细胞减少，但不能改善血小扳减少。最近研究发现IL-6能刺擞骨髓粒细胞和臣核细胞造血祖细胞增殖，使外周血血小板及中性粒细胞上升。IL-3不仅是多克隆细胞刺激因子，而且是单细胞克隆刺激因子。

γ射线照射与环磷酰胺对骨髓造血系统损伤效应的比较研究——Ⅰ.放射与CTX对小鼠粒、巨噬系造血损伤的研究

本文观察了5Gy^(60)Coγ,射线急性照射和不同剂量环磷酰胺(CTX)对小鼠粒、巨噬系造血祖细胞的损伤特点,发现CFU-GM是观察造血损伤修复能力的最敏感指标;CTX有很强的拟放射线的特性,在本文所用的剂量范围内,其对粒系的损伤比放射所致的损伤持续时间短、恢复快,有明显的剂量效应关系;实验还表明,追踪观察白细胞的变化,在一定程度上可反应骨髓的造血恢复能力。

藤茶提取液对电离辐射损伤造血系统的防护作用研究

采用1,1-二苯基-2-苦基肼自由基(DPPH)和总抗氧化能力检测(ABTS)两种方法体外检测藤茶提取液的抗氧化能力;然后进行生存率实验,将40只雄性C57BL/6J小鼠随机分为照射组、照射+藤茶提取液低、中、高剂量组(0.8 g/kg、1.6 g/kg、2.4 g/kg),所有小鼠均进行致死剂量7.2 Gy照射,检测藤茶提取液对照射后小鼠的生存影响;随后在电离辐射损伤造血系统实验中将50只雄性C57BL/6J小鼠随机分为5组:空白对照组、照射组、照射+藤茶提取液低、中、高剂量组,经4 Gy全身照射后,观察藤茶提取液对电离辐射后小鼠脏器指数、造血指标等的影响,并测定肝脏中总超氧化物歧化酶(T-SOD)和谷胱甘肽(GSH)的变化。实验结果表明,藤茶提取液对DPPH自由基清除率为74.35%,对ABTS自由基清除率为93.14%,能够提高7.2 Gy照射下小鼠的生存率(照射组生存率为30%,低剂量组生存率为100%,中剂量组生存率为90%,高剂量组生存率为90%),并改善4 Gy全身照射所导致造血系统损伤小鼠的脏器指数和造血指标,还能升高照射小鼠肝脏中T-SOD活力以及GSH的含量。藤茶提取液具有较强的抗氧化能力,能提高电离辐射后小鼠的生存率,并改善其引起的造血系统损伤,有望成为电离辐射导致造血系统损伤的中药防护剂。