新生儿型肉碱-酰基肉碱移位酶缺乏症1例

肉碱-酰基肉碱移位酶缺乏症(carnitine-acylcarnitine translocase deficiency,CACTD)是一种罕见的常染色体隐性遗传病,1992年由Stanley等[1]首次报道,当前在国内的文献中CACTD也被翻译为“肉碱-酰基肉碱转位酶缺乏症”[2]。根据文献统计,其在中国香港地区的发病率约为1∶60000,高加索人群的发病率为1∶750000~1∶2000000[3],然而目前暂无中国内地的发病率数据。CACTD是由于SLC25A20基因编码的肉碱-酰基肉碱移位酶(carnitine-acylcarnitine translocase,CACT)缺乏,导致中长链酰基肉碱无法转运入线粒体内进行β氧化而引起的脂肪酸氧化代谢障碍疾病。

丁酰基肉碱代谢异常新生儿的基因型和生化表型分析

目的:探讨丁酰基肉碱(C4)代谢异常新生儿的基因型和生化表型特征。方法:收集2018年1月至2023年6月在浙江大学医学院附属儿童医院经串联质谱法筛查单纯C4增高的120例新生儿初筛和召回复查的C4、C4/C3检测数据,并换算为C4增高倍数。采用液相捕获技术靶向捕获酰基辅酶A脱氢酶8(ACAD8)和短链酰基辅酶A脱氢酶(ACADS)基因的外显子及邻近50 bp区域,通过高通量测序和生物信息学分析获取基因变异信息,参考美国医学遗传学与基因组学学会分类标准进行致病性评估。采用威尔科克森秩和检验分析不同基因型新生儿C4增高倍数的差异。结果:共检出32种ACAD8基因变异型,其中7种变异型未见报道;检出41种ACADS基因变异型,其中17种变异型未见报道。ACAD8双等位基因变异39例,ACAD8单等位基因变异3例,ACADS双等位基因变异34例,ACADS单等位基因变异36例,ACAD8和ACADS双基因变异5例。ACAD8双等位基因变异组、ACADS双等位基因变异组C4增高倍数初筛值和召回值均高于ACADS单等位基因变异组(均P<0.01),且ACAD8双等位基因变异组C4增高倍数初筛值和召回值较ACADS双等位基因变异组更高(均P<0.01)。所有携带ACAD8或ACADS双等位基因变异新生儿的初筛C4增高倍数均大于1.5;而仅有25%(9/36)携带ACADS单等位基因变异的新生儿初筛C4增高倍数大于1.5。结论:ACAD8和(或)ACADS基因变异是浙江地区新生儿C4增高的主要遗传学原因,其变异型具有高度异质性。双等位基因变异者C4水平高于单等位基因变异者。常规串联质谱法新生儿筛查结果为单纯的C4增高时,其“筛查切值”可以适当提升。

基于靶向代谢组学探讨两种二羧酸酰基肉碱在乙肝相关性疾病中的应用价值

目的探讨辛二酰肉碱(suberylcarnitine,C8-DC)和十六碳二酰肉碱(hexadecanedioylcarnitine,C16-DC)诊断乙肝相关性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)和肝硬化(liver cirrhosis,LC)的价值。方法收集2018年5月至2019年5月于广西医科大学附属肿瘤医院就诊的41例HCC患者(HCC组)、18例LC患者(LC组)的血清,另选择30名同期于我院就诊的健康志愿者作为正常对照组(NC组)。采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱联用技术对C8-DC和C16-DC进行靶向分析。采用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线评价诊断效能。结果LC组和HCC组的C8-DC水平高于NC组(均P<0.001);LC组C16-DC水平高于NC组(P<0.001)和HCC组(P<0.05)。C8-DC诊断LC、HCC及区分LC和HCC的ROC曲线下面积(area under curve,AUC)分别为0.889、0.776和0.654;C16-DC诊断LC、HCC及区分LC和HCC的AUC分别为0.878、0.646和0.743。C8-DC和C16-DC联合诊断LC、HCC及区分LC和HCC的AUC分别为0.898、0.797和0.714。结论C8-DC和C16-DC与乙肝相关性HCC和LC密切相关,对诊断乙肝相关性HCC和LC有一定的价值。

晚期早产儿血中氨基酸和酰基肉碱含量的差异分析

目的研究晚期早产儿胎龄、出生体质量及营养支持方式与其血氨基酸和酰基肉碱含量的关系,为该阶段早产儿的营养管理提供针对性的指导。方法选择2017年1月至2021年12月住院的202例晚期早产儿为研究对象,根据胎龄与出生体质量的关系分为适于胎龄儿(appropriate for gestational age,AGA)组、小于胎龄儿(small for gestational age,SGA)组和大于胎龄儿(large for gestational age,LGA)组,根据采样当天的营养支持情况分为完全肠外营养(total parenteral nutrition,TPN)、部分肠外营养(partial parenteral nutrition,PPN)和完全肠内营养(total enteral nutrition,TEN),应用串联质谱技术检测其外周血中氨基酸和酰基肉碱的含量并进行比较。结果AGA组、SGA组与LGA组间缬氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、瓜氨酸、脯氨酸含量差异有统计学意义,其中LGA组的氨基酸含量普遍高于AGA组与SGA组。酰基肉碱含量在3组间差异均无统计学意义。TPN、PPN与TEN间甘氨酸、鸟氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、瓜氨酸含量差异均有统计学意义,其中鸟氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、瓜氨酸在TPN方式中相对偏低,而甘氨酸则在TEN中相对偏高。多种短链、长链及小部分中链酰基肉碱含量在不同营养方式中差异有统计学意义,以TEN中相对最高。结论在晚期早产儿中,AGA组、SGA组与LGA组血氨基酸谱存在差异,SGA组在早期可适量补充支链氨基酸、含硫氨基酸及芳香族氨基酸。血氨基酸和酰基肉碱含量易受营养支持方式的影响,应合理调整营养素配比,在肠外营养液中适当提高甘氨酸与肉碱含量,在肠内营养中酌情添加亮氨酸、甲硫氨酸、鸟氨酸及谷氨酰胺。

血酰基肉碱在Citrin缺陷致新生儿肝内胆汁淤积症诊断中的价值

目的 探讨Citrin缺陷致新生儿肝内胆汁淤积症(NICCD)患儿血串联质谱检测酰基肉碱水平变化在诊断中的价值。方法 回顾分析自2016年至2018年3年间,在我院确诊胆汁淤积症患儿相关临床资料,共144例,其中巨细胞病毒感染(CMV)致肝内胆汁淤积症组93例,先天性胆道闭锁(BA)组40例,及NICCD组11例;并对各组患儿的血酰基肉碱水平及部分生化结果进行统计分析。结果 与CMV组相比,NICCD组及BA组游离肉碱水平升高;与BA组、CMV组相比,NICCD组的部分长链酰基肉碱水平明显升高;与BA组、CMV组相比,NICCD组直接胆红素、间接胆红素多同时升高,且胆红素比趋近1:1;以上差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 儿童不同原因所致胆汁淤积症的血酰基肉碱具有差异性,NICCD患儿部分长链酰基肉碱水平明显升高,且胆红素比具有差异性,有助早期鉴别。

肉碱-酰基肉碱转位酶对胶质母细胞瘤细胞增殖和迁移的影响

目的:研究肉碱-酰基肉碱转位酶(CACT)对胶质母细胞瘤(GBM)细胞增殖和迁移的影响及其机制。方法:采用GEPIA(http://gepia.cancer-pku.cn/)在线数据库分析和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测CACT基因在GBM组织和癌旁正常脑组织的表达;采用siRNA敲低GBM细胞中CACT的表达水平,再通过平板克隆形成实验、CCK-8实验和EdU实验验证CACT对GBM细胞增殖能力的影响;通过划痕实验验证CACT对GBM细胞迁移功能的作用;最后通过Western blot检测CDK2、MMP-2和MMP-9的表达水平。结果:GBM组织中CACT的表达水平高于癌旁正常脑组织;敲低CACT可以抑制GBM细胞的增殖和迁移,CACT表达降低可以抑制GBM细胞系中CDK2、MMP-2和MMP-9的蛋白表达。结论:CACT可以调控GBM细胞的增殖和迁移,可能成为GBM潜在的治疗靶点。

佛山市顺德区地中海贫血患儿氨基酸及酰基肉碱的代谢特点分析

目的探讨广东顺德地区地中海贫血(简称地贫)患儿酰基肉碱、氨基酸代谢特点。方法回顾性收集2021年7-12月于广东医科大学顺德妇女儿童医院新生儿疾病筛查中心进行新生儿血红蛋白电泳筛查阳性且同时进行遗传代谢病筛查的349例新生儿的临床资料,地贫基因检测发现地贫基因阳性207例,其中α地贫组163例、β地贫组44例,另外142例地贫基因阴性新生儿为对照组。串联质谱法检测新生儿干血斑中11种氨基酸和12种肉碱水平,分析其在各组中的水平差异。结果α地贫组丙氨酸、甘氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸水平低于对照组;β地贫组甘氨酸、苯丙氨酸水平低于对照组,而瓜氨酸水平高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。α地贫组游离肉碱、乙酰肉碱、丁酰肉碱、异戊酰肉碱、辛酰肉碱、肉豆蔻酰肉碱、棕榈酰肉碱、十八碳酰肉碱水平高于对照组;β地贫组丁酰肉碱、异戊酰肉碱水平高于对照组,月桂酰肉碱水平低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。此外,丙氨酸、甘氨酸、蛋氨酸、缬氨酸、瓜氨酸、精氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸与胎龄、出生体重、母妊娠期、围生期疾病、手术史及新生儿期疾病史具有相关性,肉豆蔻酰肉碱、棕榈酰肉碱、十八碳酰肉碱与胎龄有关。结论佛山市顺德区地贫患儿体内氨基酸、肉碱水平与对照组相比呈现不同的代谢差异,孕期芳香族氨基酸和支链氨基酸的补充及生后动态监测氨基酸代谢水平是改善地贫患儿生长发育的有利措施。

甘肃省正常新生儿干血斑氨基酸及酰基肉碱串联质谱检测指标医学参考范围的调查

目的确立甘肃省正常新生儿干血斑中氨基酸及酰基肉碱串联质谱检测指标的医学参考范围,为该省新生儿遗传代谢病筛查中氨基酸及酰基肉碱检测结果的判读提供依据。方法采用非衍生串联质谱检测试剂盒,对甘肃省77 957例新生儿足跟血滤纸片进行遗传代谢病筛查。检测结果中的11种氨基酸和31种酰基肉碱按照95%的参考范围用SPSS19.0统计软件进行分析。结果甘肃省正常新生儿干血斑中氨基酸及酰基肉碱串联质谱检测指标医学参考值(μmoL/L)分别为:ALA(216.17~727.58),ARG(1.80~33.03),CIT(4.87~30.67),GLY(183.43~841.46),LEU(79.85~289.45),MET(3.32~25.86),ORN(34.09~225.15),PHE(27.04~83.37),PRO(79.44~337.59),TYR(37.61~177.79),VAL(59.31~250.95),C0(9.35~45.35),C2(2.62~25.40),C3(0.46~3.3),C3DC_C4OH(0.02~0.20),C4(0.08~0.31),C4DC_C5OH(0.10~0.32),C5(0.05~0.30),C5:1(0.00~0.01),C5DC_C6OH(0.04~0.22),C6(0.01~0.06),C6DC(0.03~0.13),C8(0.02~0.08),C8∶1(0.05~0.31),C10(0.02~0.12),C10∶1(0.03~0.10),C10∶2(0.01~0.10),C12(0.02~0.13),C12∶1(0.02~0.10),C14(0.07~0.30),C14∶1(0.03~0.13),C14∶2(0.01~0.03),C14OH(0.00~0.02),C16(0.59~4.91),C16∶1(0.03~0.30),C16∶1-OH(0.01~0.08),C16OH(0.01~0.03),C18(0.29~1.30),C18∶1(0.57~2.32),C18∶1-OH(0.01~0.05),C18∶2(0.08~0.51)和C18OH(0.00~0.02)。结论甘肃省正常新生儿干血斑氨基酸及酰基肉碱串联质谱检测指标医学参考范围的建立,为该省新生儿群体串联质谱检测的结果判断提供参考依据。

串联质谱检测氨基酸和酰基肉碱的室间质量评价

目的调查我国部分新生儿筛查实验室串联质谱检测氨基酸和酰基肉碱的水平和现状。方法向19家新生儿筛查实验室发放5个批号（201211、201212、201213、201214、201215）的血斑质控品,收集实验室回报的氨基酸和酰基肉碱检测值,对回报的结果按照方法分组进行统计分析,并评价其检测水平。结果 18家实验室回报了检测结果,回报率为94.7%。回报结果的18家实验室中有14家实验室采用衍生非配套的试剂检测氨基酸和酰基肉碱,有3家实验室采用衍生配套的试剂检测氨基酸和酰基肉碱,有1家实验室采用非衍生的方法检测氨基酸和酰基肉碱。按照方法学分组同时考虑是否使用配套试剂计算各组及格率,其中,瓜氨酸项目及格率为71.4%～100.0%,亮氨酸项目的及格率为71.4%～100.0%,甲硫氨酸项目的及格率为42.5%～100.0%,苯丙氨酸项目及格率为71.4%～100.0%,酪氨酸项目及格率为71.4%～100.0%,缬氨酸项目的及格率为66.7%～100.0%,游离肉碱项目的及格率为42.9%～100.0%,丙酰肉碱项目的及格率为28.6%～100.0%,异戊酰肉碱项目的及格率为33.3%～92.9%,辛酰肉碱项目的及格率为28.6%～100.0%,月桂酰肉碱项目的及格率为46.2%～100.0%,棕榈酰肉碱项目的及格率为64.3%～100.0%,十八碳酰肉碱项目的及格率为71.4%～100.0%。结论目前串联质谱检测氨基酸和酰基肉碱的质量水平差异较大,开展室间质评项目计划有利于提高我国遗传代谢病的检测领域整体水平。

北京地区新生儿全血13种酰基肉碱串联质谱法参考区间的调查

目的建立北京地区新生儿全血13种酰基肉碱含量的参考区间,为遗传代谢病的诊断提供实验依据。方法采用串联质谱法检测北京地区313例新生儿游离肉碱(C0),乙酰肉碱(C2),丙酰肉碱(C3),丁酰肉碱(C4),异戊酰肉碱(C5),己酰肉碱(C6),辛酰肉碱(C8),癸酰肉碱(C10),肉豆蔻酰肉碱(C14),棕榈酰肉碱(C16),十八碳酰肉碱(C18),戊二酰肉碱(C5DC)及3-羟基异戊酰基肉碱(C5-OH)等13种酰基肉碱水平。用美国临床和实验室标准化协会(CLSI)推荐的C28-A2文件提供的参考方法对所有数据进行分析。结果经过正态性检验发现,除C0之外,其他12种酰基肉碱均成偏态分布。各种酰基肉碱的参考区间分别为:C0 8.00～65.00μmol/L,C2 4.00～55.00μmol/L,C3 0.40～9.00μmol/L,C3/C0 0.02～0.30μmol/L,C3/C2 0.04～0.40μmol/L,C4 0.10～0.90μmol/L,C5 0.04～1.40μmol/L,C6 0.04～0.30μmol/L,C8 0.03～0.45μmol/L,C10 0.04～0.60μmol/L,C14 0.05～0.75μmol/L,C16 0.30～6.00μmol/L,C18 0.10～2.50μmol/L,C5DC 0.01～0.25μmol/L,C5-OH 0.00～0.60μmol/L。结论建立了北京地区新生儿的各种酰基肉碱的参考区间,为临床诊治和筛查遗传代谢病提供了参考依据。

非衍生化串联质谱法检测酰基肉碱方法的应用

目的建立非衍生化串联质谱检测酰基肉碱的方法,以便用于有机酸和脂肪酸代谢病的检测和筛查。方法使用含13种稳定同位素标记的酰基肉碱内标准品的溶剂萃取滤纸干血片中的游离肉碱和酰基肉碱,串联质谱仪直接进样,检测游离肉碱(C0)、乙酰基肉碱(C2)、丙酰基肉碱(C3)、丁酰基肉碱(C4)、异戊酰基肉碱(C5)、戊二酰基肉碱(C5DC)、己酰基肉碱(C6)、辛酰基肉碱(C8)、葵酰基肉碱(C10)、十二烷酰基肉碱(C12)、十四烷酰基肉碱(C14)、十六烷酰基肉碱(C16)和十八烷酰基肉碱(C18)的浓度。分析该方法的精确性、准确性及稀释回收率。结果低浓度酰基肉碱的批内变异系数(CV)为6.61%～10.97%之间,批间CV为13.31%～18.98%;高浓度酰基肉碱的批内CV为5.74%～12.13%,批间CV为12.70%～18.88%。除C5DC外,其余酰基肉碱的偏倚为-15%～20%;酰基肉碱不同稀释浓度的回收率在90%～115%之间,实测值与预测值的相关系数(r)为0.97～0.99。结论非衍生化串联质谱检测酰基肉碱有较高的精确性和准确度,有临床应用价值。此技术可以作为新生儿遗传代谢病筛查的常规技术。

串联质谱仪不同扫描方式对检测美国CDC酰基肉碱定值质控纸片检测结果的影响

目的通过探讨串联质谱仪不同扫描方式对检测美国CDC酰基肉碱定值质控纸片结果的影响，寻找检测酰基内碱的最适扫描方式。方法分别采用母离子扫描法（precursorion，Prec）和多反应监测法（multiplereactionmonitoring，MRM）对美国CDC提供的酰基肉碱定值纸片（包括4个浓度水平）进行检测。每天测定所有水平的酰基内碱，连续测定5d。计算不同扫描方式测得的酰基肉碱的批内、批间CV％和相对偏倚。结果Prec法检测C2的批内CV％高于MRM法检测的批内C-W％（f=5．053，P=0．002）；Prec法检测C6的批间CV％高于MRM法检测的批阃CV％0=2．737，P=0．034）；Prec法和MRM法的相对偏倚均在美国CDC要求的范围之内。结论与Prec法比较，MRM法在检测个别酰基内碱时的精密度更好，但同时，优化MRM法也比较费时、繁琐。因此，建议将两种方法搭配使用，从而达到结果准确、省时省力、节约成本的综合效果。

串联质谱技术检测羊水中丙酰基肉碱在甲基丙二酸血症产前诊断中的价值

目的探讨串联质谱技术检测羊水中丙酰基肉碱(C3)在甲基丙二酸血症(MMA)产前诊断中的价值。方法收集孕16~28周孕妇羊水样品并制成羊水滤纸片,进一步用非衍生化串联质谱方法定量检测样品中C3、乙酰基肉碱(C2)和游离肉碱(C0)水平,对疑似阳性的胎儿进行MMA基因诊断。结果共有730例孕妇自愿要求完善羊膜腔穿刺检测。其中有710例为对照组,初步制定本室相应指标的参考区间(C3:0.07~0.64μmol/L;C3/C0:0.01~0.07;C3/C2:0.08~0.45);另外20例为病例组,其中2例羊水中C3、C3/C0、C3/C2检测值明显高于参考区间,通过基因检测明确诊断该胎儿为MMA。质谱检测结果与基因检测结果符合率为100%。结论 MS/MS技术检测羊水中C3、C3/C0、C3/C2的水平可用于MMA的产前诊断,其中C3和C3/C0的区分度最好,C3/C2区分度最差。

妊娠期糖尿病患者氨基酸和酰基肉碱水平变化及胰岛素抵抗

目的:探讨妊娠期糖尿病(GDM)患者血清氨基酸和酰基肉碱水平的变化及与胰岛素抵抗的相关性。方法:本院产科门诊GDM孕妇63例和正常孕妇58例,于孕24~28周行75gOGTT试验过程中0h、1h及2h血糖检测。化学发光法测定血清胰岛素水平,高效液相色谱串联质谱法检测血清氨基酸和酰基肉碱水平。结果:GDM组与对照组比较,空腹血清丙氨酸(ALA)(266.2±53.6比245.1±43.7umol/l)、精氨酸(ARG)(21.1±5.6比18.5±5.8umol/l)、甘氨酸(GLY)(171.6±40.1比156.7±32.9umol/l)、蛋氨酸(MET)(13.6±2.8比11.9±2.5umol/l)和乙酰肉碱(C2)(7.68±2.44比5.84±1.76umol/l)、丙二酰肉碱(C3DC)+C4OH(0.05±0.02比0.04±0.01umol/l)、异戊二酰肉碱(C5DC)+C6OH(0.06±0.01比0.05±0.01umol/l)、己酰肉碱(C6)(0.03±0.01比0.02±0.01umol/l)水平均高(均P<0.05或0.01),肉碱包括游离肉碱(C0)(17.08±3.46比18.71±3.32umol/l)和己二酰肉碱(C6DC)(0.035±0.013比0.044±0.015umol/l)水平均低(P<0.01);Pearson相关分析,血清ALA、ARG、MET、C2、C3DC+C4OH、C5DC+C6OH水平均与空腹胰岛素、2h血糖、胰岛素抵抗指数(HOMA IR)呈正相关,而GLY和C6水平与2h血糖水平呈正相关(P<0.05)。结论:GDM存在氨基酸和酰基肉碱代谢异常,可能加重GDM胰岛素抵抗程度。

西安地区儿童血氨基酸、酰基肉碱的串联质谱检测结果分析

目的:建立西安地区0~12岁健康儿童血氨基酸、酰基肉碱的参考范围,为评价氨基酸、酰基肉碱营养状态和诊断氨基酸、脂肪酸β氧化代谢缺陷病提供依据。方法:选取2013年1月至2014年12月在西安市儿童医院就诊及健康体检的695例0~12岁健康儿童作为研究对象,按年龄分为7组:0~28d组、1~3个月组、>3~6个月组、>6~12个月组、>1~3岁组、>3~6岁组、>6~12岁组,采集干血滤纸片,利用串联质谱技术测定氨基酸、酰基肉碱浓度。结果:0~28d组儿童的氨基酸Ala、Glu、Met、Asp、Leu、Trp、Gly、Orn、His、Ser、Pro浓度均明显高于1~3个月组、>3~6个月组、>6~12个月组、>1~3岁组、>3~6岁组、>6~12岁组(均P<0.05);0~28d组儿童的酰基肉碱C2、C3、C4、C5、C14、C16浓度均明显低于1~3个月组、>3~6个月组、>6~12个月组(均P<0.05),与>1~3岁、>3~6岁组、>6~12岁组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:血氨基酸、酰基肉碱浓度的串联质谱检测结果,可为氨基酸、脂肪酸代谢障碍性疾病的早诊断、早治疗提供帮助。

河南省不同胎龄新生儿游离肉碱和酰基肉碱参考区间的建立

目的分析河南省早产儿、足月儿和过期产儿干血斑中游离肉碱和酰基肉碱水平并分别建立其参考区间。方法选取2015年1月至2019年6月于河南省出生的63799例新生儿作为研究对象,根据出生时胎龄分为早产儿组(n=10034)、足月儿组(n=51307)和过期产儿组(n=2458),采用串联质谱法对其游离肉碱和酰基肉碱进行检测及比较,根据出生时胎龄分别建立其参考区间。结果足月儿与早产儿的游离肉碱和除C4外的酰基肉碱水平的差异均具有统计学意义(P<0.05);足月儿的酰基肉碱水平显著高于过期产儿(P<0.05);早产儿与过期产儿的游离肉碱和除C2、C3 DC/C4 OH、C6、C10、C14和C18外的酰基肉碱水平的差异亦具有统计学意义(P<0.05);按照不同胎龄新生儿分别建立了其游离肉碱和酰基肉碱的参考区间。结论分别建立了河南省早产儿、过期产儿和足月儿游离肉碱和酰基肉碱的参考区间,为河南省新生儿脂肪酸和有机酸代谢障碍性疾病的筛查及诊断提供了参考依据。

串联质谱分析干血滤纸片中酰基肉碱质控

目的:串联质谱技术是近几年应用于临床检验的新技术,具有特异性强、灵敏度高,一次试验可检测数十种物质的优点。本文通过对近4年的质控结果进行分析,探讨影响检测结果的因素及应对措施。方法:美国CDC每年提供4批酰基肉碱质控干血滤纸片,酰基肉碱检测方法为取直径为3mm的质控干血滤纸片放入96孔聚丙烯板,经含酰基肉碱内标的甲醇萃取,盐酸正丁醇衍生后,进行串联质谱检测。分析本实验室质控结果与美国CDC检测结果的偏差及其他实验室质控结果(169个实验室的均值)与美国CDC检测结果的偏差之间的差异。结果:本实验室每次质控结果所有酰基肉碱均在美国CDC检测结果95%可信区间内,且每一批结果的临床评价与美国CDC质控临床评价完全一致。本实验室质控结果与美国CDC检测结果的偏差与其他实验室质控结果与美国CDC检测结果的偏差比较,无显著差异,丙酰基肉碱差异显著(Z=-2.638,P<0.005),戊二酰基肉碱差异亦显著(Z=-2.482,P<0.005)。结论:本实验室酰基肉碱质控结果,达到美国CDC的质控要求,丙酰基肉碱检测值偏高,其阳性判断切割值设定也相应增高,而戊二酰基肉碱检测值偏低,其阳性判断切割值设定也相应降低。

枸杞多糖对极长链酰基辅酶A脱氢酶缺陷症患者皮肤成纤维细胞长链酰基肉碱浓度的影响

目的研究枸杞多糖对极长链酰基辅酶A脱氢酶缺陷症(VLCADD)患者皮肤成纤维细胞长链酰基肉碱的作用。方法以体外培养的VLCADD患者及健康志愿者皮肤成纤维细胞为实验材料,以棕榈酸为特殊培养溶媒底物,经96h培养后应用串联质谱分析技术,分析在0.4mg·L-1枸杞多糖干预后皮肤成纤维细胞内相应长链酰基肉碱的浓度变化。结果患者组在枸杞多糖干预后皮肤成纤维细胞内长链酰基肉碱月桂酰肉碱(C12)、肉豆蔻酰肉碱(C14)、及棕榈酰肉碱(C16)均明显降低,乙酰肉碱(C2)明显增高(均P<0.05),而健康对照组在枸杞多糖干预后长链酰基肉碱C12、C14∶1、C14、C16以及乙酰肉碱与无枸杞多糖干预相比未见明显变化,差异无统计学意义。结论枸杞多糖降低经体外培养VLCADD患者皮肤成纤维细胞长链酰基肉碱的浓度,减轻长链酰基肉碱的蓄积,其作用机制可能与枸杞多糖的抗氧化应激的作用有关。

基于非靶标筛查的超高效液相色谱-三重四极杆质谱法检测尿液样品中的酰基肉碱

建立了一种基于母离子扫描模式的超高效液相色谱-三重四极杆质谱检测尿液中酰基肉碱的分析方法。对酰基肉碱类化合物所共有的m/z为60、85和144的碎片离子进行选择性检测,结合化合物母离子扫描的结果及其对应的保留时间,选取一致性较好的化合物进行筛选,再利用高分辨质谱确认,最终检测到37种酰基肉碱化合物,其中有14种尚未被HMDB和LIPID MAPS数据库收录。该方法可应用于其他生物样本(如血液、组织)中酰基肉碱的定性、定量分析,可作为检测酰基肉碱化合物的新选择。

串联质谱法检测妊娠疾病的氨基酸与酰基肉碱结果分析

目的检测临床孕妇外周血标本中49种常见氨基酸与酰基肉碱的浓度,分析主要妊娠疾病的氨基酸、酰基肉碱的表达水平。方法选取2015~2016年广州医科大学附属第三医院产科收治的78例孕妇病例资料作为研究对象,按照是否合并妊娠期疾病分为正常对照组31例、妊娠疾病组47例。妊娠疾病组又分为妊娠期糖尿病组(GDM组,16例)、妊娠期高血压疾病(HDP组,20例)和GDM+HDP组11例,利用液相串联质谱技术检测分析18种氨基酸与31种酰基肉碱表达水平,并进行统计学分析。结果各组检测的氨基酸及酰基肉碱水平比较,有12项指标组间有显著性差异(P<0.05),包括甘氨酸(Gly)、谷氨酰胺(Gln)、色氨酸(Trp)、丙酰基肉碱(C3)、丙二酰基肉碱/3-羟基丁酰肉碱(C3DC/C4OH)、丁酰基肉碱(C4)、异戊酰基肉碱(C5)、己酰基肉碱(C6)、己二酰基肉碱(C6DC)、辛烯酰基肉碱(C8∶1)、十四烷酰基肉碱(C14)、3-羟基十六烯酰基肉碱(C16∶1OH)。其中Gly、Trp、C3、C3DC/C4OH、C4、C5、C6、C6DC在正常对照组的表达水平显著低于妊娠疾病组(P<0.05)。结论妊娠疾病可以导致体内多种氨基酸和酰基肉碱的代谢水平表达差异,可能与其影响氨基酸与酰基肉碱的代谢通路有关。相关分子机制有待于进一步深入研究探讨。