传统酸马奶优势菌群互作及与风味物质的关联性

为研究酸马奶的优势菌群的互作以及菌群与特征风味的关系,对传统酸马奶中分离得到的4株乳酸菌和2株酵母菌进行单菌和混菌发酵,测定14组发酵组酸度,pH值,乳酸菌、酵母菌菌量变化,采用HS-SPME-GC-MS技术分析不同发酵组的挥发性风味物质的差异,并利用Lotka-Volterra模型和偏最小二乘法回归(PLSR)分析酸马奶中乳酸菌和酵母菌的相互作用系数以及优势菌群与特征风味物质形成的关联性。乳酸菌中干酪乳杆菌产酸速率最快,在发酵后期pH值达到3.89;酵母菌中,马克斯克鲁维酵母在发酵后期pH值降至4.16,混菌发酵组的产酸优于单菌发酵组。乳酸菌和单孢酿酒酵母混菌发酵促进单孢酿酒酵母的生长,其中植物乳杆菌、副干酪乳杆菌分别与单孢酿酒酵母混合发酵72 h后,酵母菌菌落数达到1.91×106CFU/mL和1.66×106CFU/mL;并能够促进辛酸、正癸酸等酸类风味物质的产生。而乳酸菌和马克斯克鲁维酵母混菌发酵形成竞争抑制,两者共发酵体系下对酯类物质辛酸乙酯、癸酸乙酯的产生有抑制作用,马克斯克鲁维酵母对产酸速率较快的干酪乳杆菌和副干酪乳杆菌的抑制作用强于瑞士乳杆菌和植物乳杆菌。

利用宏转录组学技术分析酸马奶发酵过程中活性微生物功能基因表达的变化特征

[目的]探究酸马奶不同发酵时期活性微生物功能基因表达的变化特征。[方法]收集发酵初期(12 h)、中期(48 h)、后期(96 h)酸马奶样品,构建宏转录组文库,进行RNA-Seq高通量测序;对测序数据进行组装和功能注释后,分析差异表达基因,确定GO和KEGG信号通路中显著差异表达基因的静态富集。[结果]3个发酵时期酸马奶样品的宏转录组高通量测序共产生12.17 GB的高质量短序列。序列组装后进行数据分析,发现酸马奶发酵过程中代谢过程相关基因表达占主导地位。差异表达基因的筛选与分析显示,发酵前期、中期、后期酸马奶样品间两两相比,下调表达基因数量多于上调表达基因数量。GO功能富集分析显示,发酵初期与中期酸马奶样品间差异表达基因高度富集的GO条目是细胞过程、代谢过程、有机环状化合物结合、杂环化合物结合;发酵中期与后期样品间差异表达基因高度富集的GO条目是细胞过程、细胞大分子代谢过程;发酵初期与后期样品间差异表达基因高度富集的GO条目主要涉及细胞过程、有机物质代谢过程、核苷结合、核糖核苷结合、嘌呤核苷酸结合。KEGG通路富集分析显示,发酵前期与中期酸马奶样品间仅有1条差异表达基因显著富集的信号通路,即核糖体通路;发酵中期与后期酸马奶样品间差异表达基因显著富集的信号通路包括醚酯代谢、氨基苯甲酸降解、mRNA监测途径、类固醇生物合成;发酵前期与后期酸马奶样品间差异表达基因显著富集的信号通路包括类固醇生物合成、氨基苯甲酸降解、mRNA监测途径、核糖体、乙苯降解。[结论]酸马奶发酵过程中涉及活性微生物多种功能基因的差异表达,不同发酵时期活性微生物功能基因的差异表达呈现动态变化。研究结果为深入了解酸马奶发酵机制、优化酸马奶发酵工艺提供了参考。

内蒙古自治区传统发酵酸马奶不同发酵时期真菌菌群结构分析

[目的]探究内蒙古自治区传统发酵酸马奶在不同发酵时期的真菌菌群结构演替变化特征。[方法]以采集自内蒙古自治区锡林郭勒盟镶黄旗的新鲜马奶为原料,采用传统发酵方法制备酸马奶;分别采集发酵0、12、24、36、48、96 h的传统发酵酸马奶样品,测定pH值,然后基于真菌rDNA内源转录间隔区(ribosomal DNA internal transcribed spacer,rDNA-ITS)序列,利用高通量测序及分析技术表征不同发酵时期真菌菌群结构变化。[结果]Chao1指数和香农-维纳多样性指数(Shannon-Wiener′s diversity index)分析表明,传统酸马奶发酵初期(0~12 h)真菌菌群丰度下降、菌群多样性变化不大;发酵12~24 h真菌菌群丰度和菌群多样性同时增加,24~72 h同时减小,72~96 h同时增加,在96 h时二者基本达到发酵初期水平。发酵12 h内,酸马奶发酵体系的pH值急剧下降,发酵12~48 h的pH值下降速度变慢,48~96 h的pH值下降速度继续变慢并趋于平缓。基于真菌rDNA-ITS序列高通量测序及分析,在传统酸马奶中共鉴定出子囊菌门(Ascomycota)和担子菌门(Basidiomycota)2个真菌门,相对丰度分别为99.77%和0.02%;在发酵过程中,子囊菌门一直处于绝对优势地位。属水平上鉴定出9个真菌属,其中,哈萨克斯坦酵母属(Kazachstania)和克鲁维酵母属(Kluyveromyces)为优势真菌属,二者的相对丰度分别为95.76%和3.75%;克鲁维酵母属的相对丰度在发酵12~96 h的变化趋势与哈萨克斯坦酵母属呈现出此消彼长的关系,二者在发酵96 h内始终存在。种水平上鉴定出9种真菌,其中,单孢哈萨克斯坦酵母菌(Kazachstania unispora)、乳酸克鲁维酵母菌(Kluyveromyces lactis)和马克斯克鲁维酵母菌(Kluyveromyces marxianus)为优势真菌种,相对丰度分别为95.76%、2.10%和1.63%;不同发酵时期3种优势真菌的相对丰度变化趋势不同。[结论]明确了内蒙古自治区传统发酵酸马奶发酵过程中的优势真菌种类以及真菌菌群多样性和群落结构的演替变化特征。研究结果为丰富酸马奶发酵机制研究,优化酸马奶发酵工艺、提高酸马奶发酵品质提供了参考。

新疆哈萨克酸马奶中功能性乳酸菌株的筛选、鉴定及功能评价

目的从新疆哈萨克传统发酵酸马奶中筛选和鉴定益生性性乳酸菌,并探究其胃肠道消化耐受性和抗氧化潜力。方法通过稀释涂布平板法和生理生化鉴定来分离纯化乳酸菌属,利用耐酸性和耐胆盐性筛选出潜在的胃肠道消化耐受性强的候选菌株,采用体外模拟消化、硫酸铁铵比色法和甘油三酯(triglyceride,TG)试剂盒评估候选菌株的胃肠道存活率、降胆固醇能力和降甘油三酯能力。同时,通过1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除能力、2,2’-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐[2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)ammonium salt,ABTS]阳离子自由基清除能力和铁还原能力测试候选菌株的抗氧化潜力,并与德式乳杆菌保加利亚亚种(Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus)进行比较分析。最后,采用16S rRNA高通量测序对候选菌株进行精确鉴定。结果从新疆哈萨克传统发酵酸马奶中分离纯化出96株菌株,40株被鉴定为乳酸菌属。10株候选菌株表现出较高的耐酸性和耐胆盐性,并被鉴定为鼠李糖乳杆菌(Lacticaseibacillus rhamnosus)、植物乳杆菌(Lactiplantibacillus plantarum)、戊糖乳杆菌(Lactiplantibacillus pentosus)和副干酪乳杆菌(Lacticaseibacillus paracasei)。其中,M2菌株(Lacticaseibacillus rhamnosus)表现出最佳的益生特性,胆固醇和甘油三酯降解率高,模拟胃肠液中存活率高,对DPPH和ABTS阳离子自由基的清除能力高于德式乳杆菌保加利亚亚种。结论本研究成功从新疆哈萨克传统发酵酸马奶中筛选鉴定出高耐受性、高抗氧化性的L.rhamnosus M2,为发掘和利用酸马奶中的功能性益生菌提供了理论依据。

酸马奶变温发酵工艺优化及其品质分析

该研究以鲜马奶为原料制备酸马奶,以感官评分为响应值,在单因素试验基础上,通过响应面试验对酸马奶变温发酵工艺进行优化,并对酸马奶的品质进行分析。结果表明,酸马奶的最佳变温发酵工艺为接种量4%、瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)MX6与马克思克鲁维酵母菌(Kluyveromyces marxianus)ML25接种比例1∶2、初发酵温度37℃、初发酵时间6 h,变温发酵时间30 h,总发酵时间相比主流发酵工艺缩短了12 h。在此最优工艺条件下,酸马奶的感官评分为92.8分、蛋白质含量为(1.75±0.04)g/100 g、脂肪含量为(1.42±0.11)g/100 g、酸度为(121.5±4.7)°T、酒精度为(1.4±0.26)%vol、瑞士乳杆菌MX6的活菌数为4.56×10^(9) CFU/mL、马克思克鲁维酵母菌ML25活菌数为3.27×10^(7) CFU/mL,均符合地方标准。从酸马奶中共检测出29种挥发性风味物质,其中酯类物质含量最高,是酸马奶中重要的风味物质。该研究结果缩短了传统酸马奶发酵时间,为其产业化生产提供了一定的理论基础。

复合益生菌酸马奶对AD大鼠记忆功能及肠道菌群的影响

文章探讨了复合益生菌酸马奶对AD大鼠的缓解作用及肠道菌群的影响。72只SD大鼠,随机分为正常对照组、模型组、阳性对照组(甘露特纳胶囊)、复合益生菌酸马奶高、中、低剂量组并建立AD大鼠模型。持续灌胃60 d并收集粪便供16S rRNA测序;检测大鼠行为学变化、海马CA1区神经元形态变化及海马区BDNF蛋白表达量;检测血清5-羟色胺(5-HT)、γ-氨基丁酸(GABA)、白细胞介素-1β、白细胞介素-18、肿瘤坏死因子-α的浓度。与模型组比较,阳性对照组和复合益生菌酸马奶高剂量组有效区域进入次数显著增加,逃避潜伏期缩短,原平台所在象限滞留时间百分比增加;阳性对照组和复合益生菌酸马奶各剂量组神经细胞受损程度低于模型组;与模型组相比,阳性对照组和复合益生菌酸马奶高剂量组AD大鼠海马区BDNF蛋白和血清5-HT、GABA含量显著增加,IL-1β、IL-18、TNF-α显著降低;阳性对照组、复合益生菌酸马奶高剂量组的肠道菌群多样性与正常对照组接近,复合益生菌酸马奶对海马体的学习及记忆力有积极影响。

酸马奶文化的传承与创新发展

本文在非物质文化遗产政策、文件精神的基础上,探讨酸马奶文化传承的重要性。通过介绍酸马奶及其加工用具,阐述酸马奶文化内涵,指出酸马奶文化遗产创新发展的重要意义和价值。

新疆酸马奶中酵母菌分离鉴定及安全性研究

自然发酵的酸马奶中含有大量的微生物,这些微生物主要是由酵母菌和乳酸菌组成,其中酵母菌在酸马奶发酵的过程中对活性物质增强起到了极为关键的作用。对新疆酸马奶中酵母菌进行分离鉴定,并对酸马奶发酵工艺及安全性进行了研究,为提高酸马奶产品质量及标准化规范化生产奠定基础。

蒙医酸马奶疗法对儿童自闭症谱系障碍肠道菌群影响的研究进展

酸马奶(策格)作为蒙古族传统乳制品,不仅是一种古老、圣洁、高尚的饮品,而且在蒙医学中占有重要地位。蒙医学理论中,治疗疾病主要采用饮食、起居、药物和疗术四种疗法,统称为治病四施。其中,酸马奶疗法作为蒙医饮食疗法中最具有代表性的一种疗法,已被临床研究证实对改善肠道菌群失衡和维持肠道环境稳定具有积极作用。近年来,研究逐渐揭示了肠道菌群生态平衡与儿童自闭症谱系障碍(ASD)症状之间的联系。基于“菌-肠-脑轴”理论,本文初步探讨了蒙医酸马奶疗法对ASD相关症状的潜在影响,特别是其在调节肠道菌群生态平衡方面的重要作用。本研究旨在为探索治疗ASD的自然疗法提供新思路,并为酸马奶疗法在未来治疗ASD方面的应用提供新的思路和理论基础。

酸马奶酒中有机酸的抑菌作用

测定了酸马奶酒中有机酸和酒精的组成 ,据此配制了人工模拟酸马奶酒 ,评价酸马奶酒中有机酸、酒精对细菌的作用。研究结果表明 ,有机酸对枯草芽胞杆菌有抑菌作用 ,其中乳酸起主要作用 ,醋酸和酒精起增效作用。当乳酸和醋酸其未解离部分的浓度分别大于 0 .6 83%和 0 .2 5 6 %时对枯草芽胞杆菌有抑菌作用。

酸马奶的营养价值和产业化发展探究

介绍了蒙古族礼俗中的酸马奶文化,分析了酸马奶的营养成分及其医疗价值,概述了酸马奶产业化发展的现状和障碍,并提出了几点具体的建议。

中国新疆地区酸马奶中乳酸菌生物多样性研究

研究了新疆地区传统发酵酸马奶中乳酸菌的生物多样性。从30份酸马奶中分离出152株乳杆菌,采用传统分类鉴定方法对其进行鉴定。结果表明：新疆地区酸马奶中的主要乳酸菌为Lactobacillus（L.）helveticus（占总分离株的51.3%）,其次为L.acidophilus（18.4%）和L.caseisubsp.pseudoplantarum（8.6%）,此外,L.gasseri、L.caseisubsp.casei、L.curvatus、L.sanfrancisco、L.coryniformissubsp.coryniformis、L.brevis、L.plantrum、L.homohiechill、L.fermentum、L.dellbrueckii subsp.bulgaricu、L.ruminis、L.crispatus、L.farciminis及L.hilgardii等乳杆菌在酸马奶中也有出现,但其数量较少（1～4株）,还有8株乳杆菌按目前的鉴定方法无法准确判断其归属。L.helveticus和L.acidophilu存在于所有的酸马奶样品中,L.helveticus为优势菌。

酸马奶中酵母菌的分离提纯及鉴定

实验从4个酸马奶样品中分离得到的39株酵母菌,并对其进行属的鉴定:包括形态学和生化鉴定。依据《酵母菌的特征与鉴定手册》将其归入6个属,分别是:酵母属、假丝酵母属、克勒克酵母属、酒香酵母属、德克酵母属和有孢圆酵母属。

酸马奶酒中微生物的分离鉴定及抗菌特性的研究

从内蒙古锡盟不同地区采集 15份酸马奶酒样品 ,经分离纯化、归属种鉴定 ,并单菌发酵液经调 p H值、蒸发酒精、浓缩后 ,对李斯特杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌进行抑菌研究。结果表明 ,酸马奶酒是由多种乳酸菌和酵母菌共同发酵的乳饮料。其中乳酸菌中有球菌 5个属 ,杆菌 6个属 ,酵母菌 6个属。乳酸菌中有 9株乳球菌和 12株乳杆菌对李斯特杆菌有抑制作用 ,对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌无抑制作用。酵母菌中有 4株对大肠杆菌有抑菌作用 ,其中有 2株同时对金黄色葡萄球菌有抑制作用 。

蒙古国传统发酵酸马奶(Koumiss)中乳杆菌潜在益生特性的研究

从分离自蒙古酸马奶样品(30株乳杆菌)中筛选出3株能够在pH值为3.0的酸性环境中生长良好的乳杆菌,分别为Lb.acidophilus MG2-1,Lb.acidophilus MG5-1和Lb.acidophilusMG1-12,但对pH值为2.0的人工胃液几乎不耐受。发酵乳中的乳杆菌对人工胃肠液的耐受性高于单纯菌体(P﹤0.05),乳蛋白对菌体起到一定的保护作用。3株Lb.acidophilus对胆汁都具有一定的耐受性,但所能耐受最高胆盐浓度有所差异;Lb.acidophilus MG2-1,Lb.acidophilus MG5-1和Lb.acidophilus MG1-12能耐受的最高胆盐浓度分别为6、4、3g/L;这3株Lb.acidophilus体外降胆固醇之间存在显著差异(P﹤0.05),其中Lb.acidophilus MG2-1对介质中胆固醇的脱除量达50%以上。

分离自内蒙古传统发酵酸马奶中L.casei Zhang潜在益生特性的研究

从内蒙古地区蒙古族家庭制作的16份酸马奶样品中分离得到的50株乳杆菌中,经耐酸性实验和人工胃肠消化液耐受性实验,筛选出1株对酸耐受性强的乳杆菌,为L.caseiZhang。将L.caseiZhang制成发酵乳后,其对人工胃肠消化液的耐受性要高于纯菌体,这是由于乳蛋白对消化液的缓冲作用和对菌体的保护作用所致。L.caseiZhang对介质中胆盐的最大耐受浓度为1.6g/100mL。L.caseiZhang具有一定的胆盐水解酶活性,可以分解培养介质中的牛磺胆酸钠释放出游离胆酸;L.caseiZhang在37℃培养24h可脱除培养介质中49.61%的胆固醇。这一结果表明,L.caseiZhang可以作为潜在的益生菌。

酸马奶中乳酸菌的分离、纯化与鉴定

分别从乌鲁木齐市水西沟镇、伊犁地区、吉尔吉斯斯坦和哈萨克斯坦采集的酸马奶样品中,分离纯化得到乳酸菌21株。经形态学、生理生化特性研究分别鉴定为乳杆菌属(Lactobacillus)17株,分别为干酪乳杆菌(L.casei)、消化乳杆菌(L.alimentarius)、詹氏乳杆菌(L.jensenii)、耐酸乳杆菌(L.acetotolerans)、戊糖乳杆菌(L.pentosus)、德氏乳杆菌德氏亚种(L.delbrueckiisubsp.delbruerkii)、玉米乳杆菌(L.zeae);乳球菌属(Lactococcus)1株,为植物乳球菌(L.plantarum);肠球菌属(Enterococcus)1株,为粪肠球菌(E.faecalis);明串珠菌属(Leuconostoc)1株,为肠膜明串珠球菌(L.mesentaroides)中的葡聚糖亚种(subsp. mesentaroides);链球菌属(Streptococcus)1株,为嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)。

新疆地区酸马奶中酵母菌的鉴定及其生物多样性分析

从新疆少数民族牧民家庭采集的28份传统工艺酿造酸马奶样品中分离出87株酵母菌,并对其进行了生理生化鉴定、分子生物学鉴定和生物多样性分析。生化试验结果表明,新疆地区酸马奶中的酵母菌为Saccharomyces unisporus(占总分离株的48.3%),Kluyveromyces marxianus(27.6%),Pichia membranaefaciens(15.0%)和Saccharomyces cerevisiae(9.2%)。选取其中的6株酵母菌和1株参考菌株,进行大亚基(26S)rDNA D1/D2区域(600bp左右)碱基序列分析,并通过GenBank进行同源序列搜索以确定各菌株的归属,进一步验证生理生化方法的正确性。从得到的结果中可以看出,S.unisporus和K.marxianus为新疆地区酸马奶中的优势菌。

酸马奶中乳杆菌MG2-1株的抗氧化作用研究

应用分离自酸马奶,并经过耐酸性实验、人工胃肠消化液中存活能力筛选的L.acidophilusMG2-1,制备成热致死菌体和活菌制剂后灌服大鼠至28d,测定大鼠肝脏组织匀浆和血清SOD,GSH-PX活力和MDA含量。结果表明,活菌制剂能够使大鼠肝脏组织匀浆中SOD活力和GSH-PX活力活力均明显提高,与对照组比较分别达到显著(P<0.05)和极显著(P<0.01)水平;大鼠血清中GSH-PX活力显著提高(P<0.05)。L.acidophilusMG2-1活菌制剂能够显著地降低大鼠血液和肝脏组织匀浆中MDA含量(P<0.05)。L.acidophilusMG2-1活菌制剂的抗氧化作用优于热致死菌体制剂。本研究证明来源于传统酸马奶的乳杆菌具有一定的抗氧化生理活性作用。

不同发酵时期酸马奶细菌群落结构

以聚合酶链式反应扩增16S r RNA基因序列采用454焦磷酸测序方法分析酸马奶传统发酵过程中细菌群落结构演替变化。结果表明:在发酵的初期细菌多样性最高,而细菌丰度在72 h时最高;硬壁菌门(Firmicutes)和变形菌门(Proteobacteria)为酸马奶中的优势细菌门;乳杆菌属(Lactobacillus)和乳球菌属(Lactococcus)为其优势细菌属;随着发酵时间的延长,各个细菌门与属都存在上升或下降的趋势变化。本研究可为其他乳制品发酵过程中细菌群落结构研究提供借鉴。