醛糖还原酶抑制剂筛选模型的建立和初步应用

本研究从牛晶状体中提取醛糖还原酶（AR），以DL-甘油醛为底物、还原型辅酶Ⅱ（NADPH）为辅酶，应用96孔石英板建立了醛糖还原酶抑制剂（ARI）微量高效筛选模型。酶促反应体系体积为200μ1，其组成成分为：50mmol/L磷酸盐缓冲液（pH6．2）、400mmol／L硫酸锂、5mmol／L 2-巯基乙醇、0． 24mmol／L NADPH、1、2mg粗酶、2mmol/L DL-甘油醛，用蒸馏水补足体积。反应温度为37°C，规定反应体系吸光度每分钟下降0．001为一个酶活力单位。以不含底物的样品为空白对照。开展了从微生物代谢产物中筛选ARI的工作，已经累计筛选真菌和稀有放线菌发酵样品约1500个，其中获得阳性样品6个，阳性率约为0．4％。

醛糖还原酶抑制剂治疗糖尿病周围神经病变的临床研究

目的观察醛糖还原酶抑制剂治疗糖尿病周围神经病变(DPN)的疗效。方法DPN患者158例,随机分为治疗组(口服依帕司他)88例,对照组(仅控制血糖)70例,各组治疗前、后测FPG、2hPG、HbA1c、血浆内皮素(ET)并进行神经电生理检查。结果治疗前后治疗组与对照组的正中神经与腓神经的神经传导速度及ET水平的差异均有统计学意义。结论醛糖还原酶抑制剂可以提高DPN神经传导速度,具有显著疗效。

植物中醛糖还原酶抑制剂的研究进展

醛糖还原酶抑制剂(ARIs)是治疗糖尿病并发症的重要药物之一。可通过抑制糖代谢的多元醇通路中的限速酶—醛糖还原酶的活性,减少体内山梨醇的蓄积,从而预防和延迟糖尿病并发症的发生和发展。AIRs可通过合成或从天然产物中分离得到。详细综述了近10年来从植物中分离提取的对醛糖还原酶有抑制作用的化合物及其药理活性,主要包括黄酮类化合物、酚类及其衍生物、萜类和生物碱等,它们在体外对醛糖还原酶均有不同程度的抑制作用,并对其发展前景进行了展望。

微生物来源的醛糖还原酶抑制剂F01-195A的研究

利用自建的高通量醛糖还原酶抑制剂的筛选方法,从数千株放线菌和真菌中筛选得到阳性菌株F01-195.对阳性菌株的发酵产物进行有机溶剂提取、硅胶柱色谱和ODS HPLC纯化,得到活性化合物F01-195A,其对醛糖还原酶有较强的特异性抑制活性,IC50为57.2μmol/L.通过对F01-195A的紫外、质谱、核磁等理化数据的分析,鉴定了其化学结构与化合物Flavomannin相同,Flavomannin已被报道作为了抗疟疾药物的先导化学物.

中草药来源的醛糖还原酶抑制剂的研究进展

中草药作为天然产物,无明显不良反应且来源广泛,以中草药为来源的醛糖还原酶抑制剂其不良反应远低于化学合成及微生物来源的醛糖还原酶抑制剂,在有效阻止和延缓糖尿病并发症如:糖尿病肾病、血管病变、视网膜病变、外周神经病变方面显示了良好的应用前景。作者主要综述了中草药活性成分黄酮类化合物及其衍生物,如:槲皮素、水飞蓟素、葛根素、黄芩苷、黄连素等和一些中药复方制剂,如:参丹健胰丸、筋脉通、六味地黄丸等在抑制醛糖还原酶的活性、降低山梨醇含量等方面取得的研究进展,并对其在治疗糖尿病并发症方面的现状进行了阐述。

醛糖还原酶抑制剂对实验性糖尿病大鼠周围神经病变的影响

从60只Wistar大鼠中随机取45只用链脲佐菌素制备糖尿病大鼠模型,共成模35只,随机分为糖尿病对照组(DC组)18只和糖尿病水飞蓟素治疗组(DT组)17只,余15只作为正常对照组(NC)。实验结束前测定大鼠运动神经传导速度、红细胞山梨醇含量及血小板聚集率,并进行坐骨神经形态学检查。结果有醛糖还原酶抑制活性的中药提取物水飞蓟素明显降低了DT组大鼠红细胞山梨醇含量,部分显著改善了运动或感觉神经传导速度和血小板聚集率,并改善了神经结构异常。认为水飞蓟素对糖尿病神经病变有防治作用。

黄酮类醛糖还原酶抑制剂的抑制机理研究

为了研究黄酮类醛糖还原酶抑制剂的抑制机理,选择了31个黄酮类化合物作为训练集,使用Catalyst软件包构建了此类抑制剂的药效团模型.并专门针对黄酮类化合物定制了氢键给体和受体模型,效果优于使用Catalyst内预定义的模型.最终的药效团模型由两个氢键给体和一个氢键受体组成,对训练集具有较好预测能力(Correl=0.9013).此外,使用InsightII/Affinity对6个黄酮类化合物进行了分子对接研究.综合药效团模型和分子对接研究的结果,发现黄酮类化合物的抑制活性主要源于黄酮骨架上的C4′或C3′位的羟基与醛糖还原酶活性口袋中的TYR48、VAL47、GLN49和C7位的羟基与HIS110,TRP111所形成的两组氢键.

药食同源植物醛糖还原酶抑制剂的筛选

选取50余种药食同源植物,根据糖尿病并发症的病发机理,筛选含有有效醛糖还原酶抑制剂(ARI)的天然成分,利用测定的IC_(50)值作为参考,比对各已知有抑制活性的样本植物的醛糖还原酶(AR)抑制效率.结果表明:柠檬、苦瓜、李子和石榴的ARI活性较强,其IC_(50)值分别为0.74,0.64,0.25,0.027mg/mL.

醛糖还原酶抑制剂非达司他与糖尿病神经病变

糖尿病性神经病变是糖尿病最常见的并发症之一 ,会导致组织的多种结构和功能障碍。醛糖还原酶是糖尿病神经病变等多种糖尿病并发症发病机制中的关键酶。非达司他对醛糖还原酶的抑制作用强而专一 ,而且不良反应小 ,是治疗糖尿病性神经病变的安全有效的药物。

醛糖还原酶抑制剂对实验性糖尿病周围神经病大鼠内源性NGF水平及生理功能的影响

目的探讨神经生长因子(NGF)在糖尿病周围神经病(DNP)发病中的作用以及醛糖还原酶抑制剂(ARI)改善生理功能和NGF水平的作用机制。方法采用链脲佐菌素(STZ)制成大鼠DNP模型后给予ARI治疗,检测大鼠治疗前后摇尾阈值、神经电生理和血清及坐骨神经NGF水平,并与DNP模型组和健康对照组相比较。结果与健康对照组比较,DNP模型大鼠摇尾阈值升高[(49.56±0.32)℃ vs.(47.60±1.37)℃,P<0.05],运动神经传导速度(MNCV)和感觉神经传导速度(SNCV)均下降[(32.82±2.96)m/s vs.(52.76±6.52)m/s,P<0.05;(39.22±8.15)m/s vs.(45.33±8.21)m/s,P<0.05],血清和坐骨神经中NGF水平下降[分别为(154.82±136.18)pg/mL vs.(313.71±156.99)pg/mL,P<0.05;(457.40±187.59)pg/mL vs.(688.93±1 6 7.85)pg/mL,P<0.05]。经ARI治疗后大鼠摇尾阈值显著低于DNP模型组(P<0.05),SNCV、血清及坐骨神经中NGF水平均显著高于DNP模型组(P<0.05),同时经ARI治疗后其摇尾阈值较治疗前显著降低,SNCV、MNCV较治疗前显著增高(P<0.05)。结论 NGF表达或运输水平下降在DNP发病中具有作用。ARI可促进NGF的表达并改善热痛觉和神经传导速度。

醛糖还原酶抑制剂对糖尿病周围神经病变患者NLRP3炎性体表达的影响

目的探讨醛糖还原酶抑制剂对糖尿病周围神经病变(DPN)患者NLRP3炎性体表达的影响。方法回顾性分析2019年7月至2020年1月滨海县人民医院内分泌科收治的90例2型糖尿病(T2DM)患者的临床资料,其中糖尿病周围神经病变(DPN)组患者45例,非糖尿病周围神经病变(NDPN)组患者45例,同时选择在本院体检的健康人群45例作为对照组。采用Luminex200检测三组受检者血清白细胞介素(IL)-1β、IL-18浓度;采用实时定量PCR法(RT-PCR)检测人外周血单个核细胞(PBMCs)中NLRP3 mRNA、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)mRNA、Caspase-1 mRNA表达水平;体外分离培养DPN患者PBMCs,并分三组[空白组(5 mmol/L葡萄糖)、高糖处理组(HG,25 mmol/L葡萄糖)、醛糖还原酶抑制剂非达司他(Fid)+HG组(Fid 10μmol/L+25 mmol/L葡萄糖)],通过RT-PCR法检测空白组、HG组及Fid+HG组NLRP3 mRNA、ASC mRNA、Caspase-1 mRNA,IL-1βmRNA、IL-18 mRNA水平。结果与对照组相比,DPN组及NDPN组患者的血清IL-1β、IL-18浓度均升高,且NDPN组升高更为明显,差异均有统计学意义(P<0.05);与对照组相比,NDPN组及DPN组患者PBMCs中NLRP3 mRNA、ASC mRNA、Caspase-1 mRNA表达升高,且NLRP3 mRNA表达在DPN组升高更为明显,差异均有统计学意义(P<0.05);DPN组患者PBMCs中NLRP3、ASC及Caspase-1表达与IL-1β(r=0.4051、0.3233、0.5430,P<0.01)、IL-18(r=0.3779、0.5022、0.3225,P<0.05)呈正相关;体外通过高糖刺激培养DPN患者的PBMCs,与空白组相比,HG组PBMCs中NLRP3 mRNA、ASC mRNA、Caspase-1 mRNA、IL-1βmRNA及IL-18 mRNA表达升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与HG组相比,Fid+HG组PBMCs中NLRP3 mRNA、ASC mRNA、Caspase-1 mRNA、IL-1βmRNA及IL-18 mRNA表达降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论醛糖还原酶抑制剂非达司他通过对DPN患者NLRP3炎性体的调控,可能有助于延缓该病的进程。

醛糖还原酶抑制剂对实验性糖尿病周围神经病大鼠内源性NGF及神经肽的影响

目的 探讨 NGF在 DNP发病中的作用和 ARI改善 DNP的作用机制。方法 用 STZ制成大鼠DNP模型后给予 ARI治疗 ,应用免疫组化和 elisa测量 DRG中 SP、CGRP和血清及坐骨神经 NGF含量 ,并与未治疗的 DNP模型和正常对照相比较。结果 实验性 STZ DNP大鼠 DRG中 SP、CGRP和血清及坐骨神经中 NGF水平下降 (P<0 .0 5) ,ARI治疗后均得到显著增高 (P<0 .0 5)。结论 NGF的产生和 /或轴突运输下降及其继发的神经肽缺乏在 DNP中起作用。 ARI可促进

醛糖还原酶抑制剂治疗糖尿病周围神经病变疗效观察

糖尿病周围神经病变（diabetic perineuropathy,DPN）是糖尿病最常见的慢性并发症之一,可表现为感觉障碍、感觉过敏、肢体疼痛,重者感觉减退甚至消失,是糖尿病足发生的重要原因之一,

黄酮类醛糖还原酶抑制剂的研究进展

醛糖还原酶是多元醇通路中的关键限速酶,高血糖浓度下,此通路代谢旺盛,与糖尿病并发症的发生和恶化有密切关系。醛糖还原酶抑制剂(ARIs)是治疗糖尿病并发症的重要药物之一,可通过抑制糖代谢的多元醇通路中的限速酶——醛糖还原酶的活性,减少体内山梨醇的蓄积,从而预防和延迟糖尿病并发症的发生和发展。文章详细综述了黄酮类醛糖还原酶抑制剂的筛选方法、对AR作用机制结构特点等,并对其发展前景进行了展望。

醛糖还原酶抑制剂和肌醇对糖尿病视网膜毛细血管周细胞的保护作用

目的观察醛糖还原酶抑制剂和肌醇对实验性糖尿病大鼠视网膜病变毛细血管周细胞的保护作用。方法给链脲佐菌素诱发的糖尿病大鼠分别管饲醛糖还原酶抑制剂或肌醇,于实验6个月末进行视网膜毛细血管消化铺片及透射电镜观察。结果糖尿病组的视网膜可见毛细血管内皮细胞/周细胞比值升高、无细胞毛细血管形成、周细胞线粒体肿胀、内皮细胞增生和毛细血管基底膜增厚;管饲醛糖还原酶抑制剂组的视网膜血管形态无明显改变;但管饲肌醇组的视网膜血管改变较管饲醛糖还原酶抑制剂组明显。结论醛糖还原酶抑制剂可有效预防实验性糖尿病性视网膜病变的形态学改变,肌醇能部分阻止视网膜形态学异常的发生。

醛糖还原酶抑制剂治疗糖尿病并发周围神经病变的临床观察

目的探讨醛糖还原酶抑制剂治疗糖尿病并发周围神经病变的临床疗效。方法将61例糖尿病并发周围神经病变患者随机分为醛糖还原酶抑制剂治疗组、甲钴铵对照组,比较两组治疗12周前后的临床疗效、神经运动传导速度、神经感觉传导速度、糖化血红蛋白(HbA1c)、内皮素(ET)、血栓素(TXB2)。结果治疗组显效率为26.1%,对照组为20.0%(p<0.01),治疗组总有效率为80.6%,对照组为46.6%(p<0.01),治疗组在治疗后,神经传导速度明显改善(p<0.01);空腹血糖、糖化血红蛋白略有下降(p>0.05);内皮素(ET)、血栓素(TXB2)有明显下降(p<0.05)。结论醛糖还原酶抑制剂多元醇代谢中葡萄糖转化为山梨醇,降低患者的内皮素(ET)、血栓素(TXB2)水平,从而达到改善血管细胞内皮功能,改善神经传导速度,治疗糖尿病周围神经病变。

中草药醛糖还原酶抑制剂筛选模型的建立

目的:通过观察中药知母对醛糖还原酶活性的抑制作用,建立一种适用于筛选中草药醛糖还原酶抑制剂的模型。方法:大鼠12只随机分成3组:空白对照组、知母组、阳性药物组,分别给予生理盐水、知母水提液、依帕司他水溶液灌胃。采用“通法”给药方案制备含药血清,部分血清经过丙酮预处理。将知母水提液和含药(知母)血清分别加入体外建立的以DL-甘油醛为底物、NADPH为辅酶的醛糖还原酶活性测定体系。结果:丙酮处理过的空白血清较未处理的空白血清对酶活性的影响更小;知母水提液对醛糖还原酶抑制率达99%,含药(知母)血清对醛糖还原酶抑制率达67%。结论:运用血清药理学实验方法建立的筛选模型能有效、可靠的进行中草药醛糖还原酶抑制剂的筛选。

醛糖还原酶抑制剂对大鼠肾脏醛糖还原酶基因表达的影响

目的:观察醛糖还原酶抑制剂(ARI)依帕司他对大鼠肾脏ARmRNA水平和肾功能相关指标的影响。方法:运用在单侧肾结扎的基础上注射STZ的方法建立大鼠糖尿病肾病模型,给予醛糖还原酶抑制剂依帕司他灌胃4周,RT-PCR的方法检测各组大鼠肾皮质ARmRNA水平,观察依帕司他对ARmRNA是否有影响以及血清和尿液中尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)和总蛋白(TP)的变化。结果:给药组大鼠肾脏ARmRNA水平明显高于对照组(P<0.05);给予醛糖还原酶抑制剂依帕司他4周后,低剂量组(L组)、高剂量组(H组)ARmRNA水平低于模型对照组(M组)(P<0.05),但L组和H组之间没有差别(P>0.05)。结论:糖尿病肾病大鼠肾脏ARmRNA水平明显升高,说明AR与糖尿病肾病的发生有关;醛糖还原酶抑制剂依帕司他对糖尿病肾病大鼠肾功能没有影响,但可降低ARmRNA水平。

醛糖还原酶抑制剂对糖尿病周围神经病变的影响

目的观察口服依帕司他(唐林)对糖尿病周围神经病变(DPN)的疗效。方法选择糖尿病周围神经病变患者38例,给予唐林片50mg,3次/d口服,疗程4周。结果四肢麻木、肢体疼痛、感觉减退、畏寒、双足蚁行感、脚踏海绵感均明显改善,改善率分别是93%、95%、94%、87%、100%、83%;38例患者治疗后神经传导速度(MCV、SCV)均较治疗前显著增快(P<0.01);体感诱发电位(SEP)潜时N20、P40、N50均较治疗前显著减慢(P<0.01)。结论唐林可有效缓解糖尿病周围神经病变症状,提高周围神经传导速度,减慢体感诱发电位潜时。