H3和IDH野生型弥漫性儿童型高级别胶质瘤6例临床病理分析

目的探讨中枢神经系统H3和IDH野生型弥漫性儿童型高级别胶质瘤的临床病理学及分子特征。方法收集上海交通大学医学院附属新华医院病理科诊断的6例H3和IDH野生型弥漫性儿童型高级别胶质瘤的临床病理资料,采用免疫组化(全自动免疫组化染色仪)检测GFAP、Olig2、Syn、NeuN、IDH1、H3K27M等蛋白的表达,FISH法检测EGFR、MYCN基因扩增,Sanger测序检测IDH、H3F3A、TERT基因突变,并复习相关文献。结果本组6例患者年龄范围5~11岁,中位年龄7.5岁。其中男性2例,女性4例,男女比1∶2。临床症状表现为肢体乏力、偏瘫、呕吐、抽搐、视物模糊等。肿瘤发生部位:5例位于幕上,1例位于幕下脑干和小脑。组织学形态:3例表现为高级别胶质瘤形态学特征,其中2例伴有瘤巨细胞;2例表现为胚胎性肿瘤样特征,1例同时具有高级别胶质瘤及胚胎性肿瘤样形态学特点。5例伴有微血管增生和(或)坏死;1例间质黏液变/微囊形成。免疫表型:肿瘤细胞GFAP(6/6)和Olig2(6/6)部分或局灶阳性,Syn(3/6)和NeuN(1/6)局灶或散在阳性,IDH1、H3K27M、H3G34V和H3G34R均阴性,ATRX、H3K27me3、INI1、BRG1均弥漫阳性(6/6)。p53阳性5%~95%不等,Ki67增殖指数40%~90%。分子检测示6例均为IDH1/2和H3F3A野生型;2例MYCN扩增;2例EGFR扩增伴多倍体;1例同时伴有EGFR扩增和MYCN扩增;1例PDGFRA扩增。治疗及随访情况,术后放疗和(或)替莫唑胺化疗;3例于术后1~5个月死亡;2例存活,随访截至2024年1月,分别随访4个月和7个月;1例失访。结论H3和IDH野生型弥漫性儿童型高级别胶质瘤是一种高度恶性肿瘤,组织学表现为胶质母细胞瘤样或胚胎性肿瘤样特征,根据分子遗传学特征分为RTK1、RTK2、MYCN三种分子亚型,其中MYCN亚型预后最差。诊断时应注意与其他儿童型或成人型高级别胶质瘤及胚胎性肿瘤鉴别。

MYCN基因扩增的H3和IDH野生型儿童型弥漫性高级别胶质瘤1例

患者男性,17岁,因“突发头痛6天”入院。头颅MRI示右侧额叶异常信号,内伴囊变坏死,实性部分T1WI呈等低信号,T2WI呈等高信号,DWI实性部分明显高信号,增强可见明显强化(图1),考虑高级别胶质瘤;术中见肿瘤位于脑白质浅层,灰红色质软,血供丰富,伴囊性变,内侧沿大脑镰下向对侧生长,肿瘤全切。

卡瑞利珠单抗联合培美曲塞和奈达铂治疗EGFR/ALK野生型晚期非鳞状NSCLC的临床观察

目的观察卡瑞利珠单抗联合培美曲塞和奈达铂治疗表皮生长因子受体(EGFR)和间变性淋巴瘤激酶(ALK)野生型晚期非鳞状非小细胞肺癌(NSCLC)的疗效和安全性。方法回顾性收集2021年8月至2023年5月于重庆医科大学附属第一医院就诊的92例EGFR/ALK野生型晚期非鳞状NSCLC患者资料,根据治疗方案的不同分为奈达铂组(46例)和卡铂组(46例)。奈达铂组患者给予注射用卡瑞利珠单抗+注射用奈达铂+注射用培美曲塞二钠;卡铂组患者给予注射用卡瑞利珠单抗+卡铂注射液+注射用培美曲塞二钠。两组均以21 d为1个周期,所有患者至少完成2个周期的治疗。观察两组患者的近期疗效和不良反应发生情况,分析影响患者无进展生存期(PFS)的因素。结果两组患者的客观缓解率、疾病控制率、中位PFS、3~5级治疗相关不良事件(TRAE)发生率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。奈达铂组患者的1~2级肾脏和泌尿系统TRAE、心慌、心包积液发生率均显著低于卡铂,恶心、呕吐和食欲降低发生率显著高于卡铂组(P<0.05)。患者的性别、年龄、有无吸烟史、美国东部肿瘤协作组织评分和TNM分期均不是影响患者PFS的因素(P>0.05)。结论卡瑞利珠单抗联合培美曲塞和奈达铂治疗EGFR/ALK野生型晚期非鳞状NSCLC的疗效显著,安全性较好。

Neuritin野生型蛋白的制备及活性、稳定性的检测及分析

目的制备符合药典结构要求的无标签Neuritin野生型(wild type,WT)蛋白,并完成其存在形式、活性及稳定性鉴定及分析。方法利用基因重组技术构建符合药典结构要求的Neuritin WT酵母重组子,利用SDS-PAGE还原电泳及Western blot对其进行高表达筛选及鉴定;摸索建立无标签Neuritin WT蛋白纯化方法,对纯化后的蛋白进行SDS-PAGE还原电泳分子量鉴定、Western blot免疫原性鉴定、SEC-HPLC精细鉴定及宿主DNA、宿主蛋白残留量检测;利用SDS-PAGE非还原电泳完成存在形式的鉴定;通过参照药典建立的重组Neuritin蛋白活性鉴定方法,检测并分析Neuritin WT纯化蛋白的活性,并观察37℃下不同时间Neuritin WT纯化蛋白的稳定性。结果制备了纯度高达98%以上的Neuritin WT纯化蛋白,蛋白相对分子质量为9.7 kDa,宿主DNA残留量为0.0094 ng/剂,宿主蛋白残留量占比0.0008%;经检测,该纯化蛋白存在单体、二聚体2种形式。活性鉴定结果表明该蛋白具有维持神经元存活的生物学活性;且37℃下3 d内降解率小于10%、7 d内未到达半衰期(蛋白降解率小于35%)。结论成功制备了纯度高达98%、杂质含量及结构符合药典要求的无标签Neuritin WT蛋白,分析了Neuritin WT蛋白的存在形式,并明确了该蛋白具有较好的生物学活性及稳定性,为Neuritin进一步功能、药学研究及生物制品的研制提供了物质基础。

RAS野生型转移性结直肠癌抗表皮生长因子受体单抗维持治疗中国专家共识(2024版)

对于接受标准一线治疗达到疾病控制的转移性结直肠癌(mCRC),后续治疗策略的制订应在维持疗效的同时注重改善患者生活质量。化疗联合抗表皮生长因子受体(EGFR)单抗是RAS野生型mCRC患者的标准一线治疗方案。当一线含抗EGFR单抗诱导治疗达到最佳疗效、且处于疾病缓解或稳定状态时,含抗EGFR单抗维持治疗方案可在维持疗效获益的同时,降低毒副反应和提高患者生活质量。本共识基于循证医学和临床实践,进一步明确抗EGFR单抗维持治疗的应用时机、方案选择、不良反应管理和后续策略选择,为抗EGFR单抗维持治疗提供临床应用规范化标准和指导,以期使患者的治疗最大化获益。

栽培型和野生型灯盏花对Cd添加的生理响应

栽培驯化改变植物生物学和生理生态特性,但其如何影响药用植物对重金属污染的响应知之甚少。为研究Cd添加对栽培型和野生型灯盏花(Erigeron breviscapus(Vant.)Hand.-Mazz.)生物学性状、Cd吸收分配特征及生理响应的影响。采用盆栽试验,设置0、2.5、5和15 mg·kg^(-1)共四个Cd浓度梯度,采用隶属函数法综合评价两种类型灯盏花对Cd的耐性。结果表明:随Cd浓度增加,灯盏花植株Cd含量显著增加,但株高、SPAD值有降低趋势,而叶长宽、可溶性蛋白和MDA含量变化较小。在较高Cd添加浓度(15 mg·kg^(-1))下,两种类型灯盏花生物量显著高于不添加Cd处理,野生型SPAD值显著高于栽培型。同一Cd添加浓度的两种类型灯盏花SOD、POD、CAT活性和GSH、NPT、PCs含量无显著差异。两种类型灯盏花Cd的耐性指数大于1,平均Cd富集系数和转移系数大于0.5,但两种类型间无显著差异。栽培型和野生型灯盏花均具有较强的Cd富集能力和耐Cd特性,其中栽培型属中耐Cd型,野生型属高耐Cd型。栽培驯化后灯盏花耐Cd能力降低,转移和富集能力变化不明显。

盐碱地栽培条件下8份野生型番茄种质田间综合性状评价

为了对中国科学院遗传发育研究所提供的8份野生番茄种质在盐碱地栽培条件下的田间综合形状进行评价,通过对盐碱地种植条件下8份供试野生番茄种质的生长、产量和果实品质等13个农艺性状进行观测,并运用主成分分析法结合隶属函数法,评价野生番茄种质材料的田间综合性状。经主成分分析,最终提取5个主成分;隶属函数法分析结果表明,在盐碱地栽培条件下,8份野生番茄材料的田间综合性状从优到劣排序为新盐14号>新盐13号>新盐16号>新盐18号>新盐12号≈新盐15号>新盐17号>新盐11号。其中,新盐14号和新盐13号的综合性状评价值(D值)最高,分别为0.73和0.62,说明这2个野生番茄材料在盐碱地上具有明显的生长优势,综合表现最佳。

基于机器学习方法构建IDH野生型胶质母细胞瘤预测模型研究

目的建立异柠檬酸脱氢酶(IDH)野生型胶质母细胞瘤生存概率的列线图模型及随机生存森林模型。方法回顾性分析2017年1月—2020年12月在空军军医大学附属西京医院手术治疗的127例IDH野生型胶质母细胞瘤患者临床资料,进行预后因素分析并建立列线图模型及随机生存森林模型,通过C指数,校准曲线,决策曲线评价模型的区分度,校准度以及临床净获益率。结果使用Cox比例风险模型进行多因素分析发现,患者术前卡氏功能状态评分(KPS)、是否接受同步放化疗、年龄、O^(6)-甲基鸟嘌呤甲基转移酶(MGMT)蛋白表达,是独立的预后因素(P<0.05)。通过Cox回归模型建立列线图预测模型;通过R软件建立随机生存森林模型,两个模型均具有良好的区分度和校准度,随机生存森林模型的临床净获益优于列线图模型。结论建立的列线图模型及随机生存森林模型有助于临床医生判断患者特定时间点的生存概率。

野生型p53基因与双脱水二乙酰卫矛醇联合诱导肝癌HLE细胞凋亡的研究

背景和目的:p53基因是抑癌基因,研究发现在人类肿瘤中p53基因常发生突变。实验证明野生型p53基因不但抑制肿瘤细胞增殖,而且诱导肿瘤细胞凋亡。但是,单独应用野生型p53基因诱导肿瘤细胞凋亡的作用不很明显。因此,野生型p53基因与药物的联合作用来提高肿瘤细胞凋亡率是目前对肿瘤研究的一新领域。本实验通过转染野生型p53基因联合双脱水二乙酰卫矛醇(1,2:5,6-dianhydro-3,4-diacetylgalactitol,DADAG)作用于肝癌细胞株HLE,研究联合诱导肿瘤细胞的凋亡作用。方法:野生型p53基因通过脂质体Lipofectamine介导转染人肝癌细胞株HLE,同时加入DADAG。96h后,用流式细胞仪、DNA电泳方法进行细胞凋亡分析。结果:流式细胞仪分析细胞凋亡结果:阴性对照组为1.4%、转染pUHD10-3组为3.5%、DADAG处理组为32.6%、转染pUHD10-3-p53组为43.4%、转染p53基因及DADAG处理组为74.6%。DNA电泳发现,转染p53基因及DADAG处理组有到DNA梯形条带。结论:野生型p53基因与DADAG均可诱导人肝癌细胞HLE发生凋亡,转染野生型p53基因与DADAG联合作用,有促进肝癌细胞凋亡的作用。

盐胁迫下外源硅对硅突变体与野生型水稻种子萌发的影响

为深入了解盐胁迫下外源硅(Si)对水稻种子萌发的作用,采用溶液培养法研究了外源Si对盐胁迫下野生型和硅突变体水稻(不能正常吸收Si)种子萌发各指标的影响.结果表明,随着NaCl浓度的提高(0～150mmol·L-1),两种水稻的芽长、发芽势、发芽率均不断降低.在150mmol·L-1NaCl胁迫下,野生型和硅突变体水稻的芽长分别为0.33cm和0.55cm,仅为对照的8.0%和11.1%;发芽率仅为对照的29.7%和53.7%;发芽势则分别降低至0%和2%.外源Si可以提高盐胁迫下两种水稻的发芽指标,且对硅突变体水稻的影响显著大于野生型水稻.2mmol·L-1Si浸种+2mmol·L-1Si处理可使野生型水稻芽长、芽重和发芽率分别比对照增加127.27%、169.23%和55.17%,发芽势则由对照时的0%提高至23.33%;硅突变体水稻芽长、芽重和发芽率分别比对照增加307.27%、285.71%和80.29%,发芽势则由对照时的2%提高至82.22%.

Hg^(2+)、Pb^(2+)对野生型绿豆种子萌发、幼苗生长及抗氧化酶活性的影响

为了解重金属污染对野生型绿豆和栽培型绿豆的不同影响,采用水培方法,以去离子水培养为对照(CK),研究了重金属离子Hg2+、Pb2+、(Hg2++Pb2+)污染对野生型绿豆E和栽培型绿豆P种子萌发、幼苗生长及抗氧化酶活性的影响。结果表明:Hg2+、Pb2+和(Hg2++Pb2+)污染均能抑制绿豆种子的萌发和幼苗的生长,伤害程度为(Hg2++Pb2+)>Hg2+>Pb2+,其中(Hg2++Pb2+)质量浓度为(2.0+100)mg/L时,品种P的发芽率、幼苗苗高和根长分别比其CK降低25.8%、48.1%和79.7%,品种E分别比其CK降低22.4%、44.7%、70.0%;一定质量浓度的Hg2+、Pb2+、(Hg2++Pb2+)污染下,绿豆叶片内的抗氧化酶活性提高,其中(Hg2++Pb2+)质量浓度为(2.0+100)mg/L时,品种P叶片内SOD、POD、CAT的活性比其CK分别增加了113.7%、304%、254%,品种E叶片内SOD、POD、CAT的活性比其CK分别增加了131.0%、333%和278%。可见,Hg2+、Pb2+、(Hg2++Pb2+)胁迫下野生绿豆E品种的萌发能力、幼苗生长及其抗氧化能力均高于栽培绿豆P品种。

EGFR野生型晚期非小细胞肺癌的治疗进展

肺癌是癌症死亡的主要原因。肺癌的治疗仍是医疗界最具挑战性的任务之一。表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(epidermal growth factor receptor-tyrosine kinase inhibitor,EGFR-TKI)的发现和发展,对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的治疗产生了重大影响。但EGFR-TKI对EGFR野生型NSCLC的疗效较差,而有限的EGFR突变率也促使研究者们不断探索EGFR野生型NSCLC的最佳的治疗选择。本文将对EGFR野生型NSCLC的治疗现状进行综述。

贝伐珠单抗联合培美曲塞/顺铂方案一线治疗EGFR野生型晚期肺腺癌的效果分析

目的探讨贝伐珠单抗联合培美曲塞/顺铂方案一线治疗表皮生长因子受体(EGFR)野生型晚期肺腺癌的疗效及安全性。方法收集本院2014年6月至2017年1月经病理确诊的62例晚期肺腺癌患者(首次基因检测为EGFR野生型),其中研究组32例接受贝伐珠单抗联合培美曲塞/顺铂方案,对照组30例仅接受培美曲塞/顺铂方案,分别采用实体瘤的疗效评价标准(RECIST)1.1和美国国立癌症研究所通用毒性反应标准(NCI-CTC)3.0版评价疗效和不良反应,Kaplan-Meier法进行生存分析。结果全组均可评价近期疗效。研究组的有效率和疾病控制率分别为65.6%(21/32)和90.6%(29/32),高于对照组的33.3%(10/30)和66.7%(20/30),差异均有统计学意义(P<0.05)。研究组的中位无进展生存期和总生存期分别为8.0个月(95%CI:7.2～9.0个月)和19.0个月(95%CI:16.9～21.1个月),均长于对照组的6.0个月(95%CI:4.9～7.1个月)和15.0个月(95%CI:13.7～16.3个月),差异有统计学意义(P<0.05)。两组的药物不良反应主要表现为骨髓抑制、胃肠道反应、肝肾功能损伤。研究组的高血压发生率较对照组高,但差异接近有统计学意义(P=0.053)。结论贝伐珠单抗联合培美曲塞/顺铂方案对EGFR野生型晚期肺腺癌具有较好的疗效,且患者的耐受性较好,在临床治疗中有一定推广价值。

野生型桑树内生细菌的多样性分析及ME0717菌株的抑菌活性测定

从多年生野生鲁桑的枝条中分离出190株内生细菌,并分析其多样性指数(H)、丰度(D)、均匀度(J),发现在不同发育时间的桑树枝条中,内生细菌的种类、数量和多样性指数明显不同,枝条发育时间越长,越不利于内生菌的生长,而1年生枝条最有利于内生细菌的生长。分离得到1株优势内生细菌,命名为ME0717。经培养性状观察、形态鉴定、染色反应等生化特性测定以及16S rDNA序列分析,鉴定ME0717为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。ME0717菌体和发酵液对桑炭疽病菌(Colletotrichum morifolium Hara.)、桑漆斑病菌(Myrothecium roridum Todeet Fr.)的菌丝生长和孢子萌发均有明显的抑制作用,随着培养时间的延长,菌株的发酵液对两种病原菌的菌丝生长和孢子萌发的抑制作用增强。

黄化大麦与野生型大麦三种同工酶的比较研究

利用聚丙烯酰胺凝胶电泳，对黄化大麦和野生型大麦三种同工酶的对比研究结果表明，黄化大麦叶片与种子中的过氧化物酶和细胞色素氧化酶的活性均高于野生型大麦；黄化大麦种子中酯酶同工酶的活性高于野生型大麦，但叶片中低于野生型大麦．

野生型-p53与JunB融合基因对裸鼠肝细胞肝癌移植瘤的抑制作用

目的探讨野生型(wt)-p53与JunB融合基因抑制裸鼠肝细胞肝癌(肝癌)移植瘤的作用。方法将18只BALB/c裸鼠按随机数字表法随机分为实验组、阴性对照组和空白对照组,每组6只,分别接种wt-p53与JunB融合基因质粒、携带GFP的空质粒及单纯肝癌细胞HepG2,于注射后的28d处死荷瘤裸鼠,测量肿瘤体积、肿瘤重量,计算肿瘤抑制率。结果 3组裸鼠移植瘤位于背侧皮下,实验组裸鼠移植瘤较小,阴性对照组与空白对照组裸鼠移植瘤均明显隆起于裸鼠背部皮下。实验组移植瘤的体积、重量明显小于阴性对照组,差异均有统计学意义(LSD-t=4.63,P=0.006;LSD-t=19.56,P<0.01);实验组移植瘤的体积、重量也明显小于空白对照组,差异均有统计学意义(LSD-t=5.74,P=0.002;LSD-t=27.22,P<0.01);阴性对照组与空白对照组间移植瘤的体积、重量差异无统计学意义(LSD-t=1.59,P=0.171;LSD-t=2.00,P=0.101)。实验组平均肿瘤抑制率为84%。结论 wt-p53和JunB融合基因可明显抑制裸鼠肝癌移植瘤的生长。

野生型枯草芽孢杆菌N4的spizizen转化法优化

采用经典Spizizen方法将已构建的大片段重组质粒p HT01-nit(nit为腈水解酶基因)转化野生型枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis N4,无法获得转化子。研究对Spizizen方法进行改进,分别在感受态制备及转化过程中加入有机溶剂及溶菌酶,并对有机溶剂种类、浓度,溶菌酶浓度,质粒与感受态共培养时间进行优化,提高转化效率,构建Bacillus subtilis N4-p HT01-nit。经IPTG诱导,通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(Polyacryamide gel electrophoresis,PAGE)验证nit在野生型枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis N4中的表达。结果表明,最优条件为在感受态制备过程中添加4%的Tween-80,转化过程中添加5μg·m L-1溶菌酶,感受态与质粒共培养时间为1 h,条件优化后可得到37个转化子·μg-1DNA。在SDS-PAGE上可以看到与腈水解酶分子质量一致的蛋白条带。说明该优化后的方法效果明显,适合于大片段重组质粒转化野生型枯草芽孢杆菌。

野生型P53、P16基因协同对肺腺癌细胞系生长抑制作用的研究

为了探讨野生型P5 3基因及P16基因在恶性肿瘤基因治疗中的作用 ,用腺病毒为载体将野生型P5 3基因转入高、低转移的肺腺癌细胞系Anip973、AGZY83 -a和经野生型P16基因质粒转染的高、低转移肺腺癌细胞系Anip973(Anip973P16 )、AGZY83-a(AGZY83-aP16 )。对各组转染细胞进行生长曲线、MTT生长抑制率、原位末端标记、Western -blotting等技术检测分析。结果发现 (1)野生型P5 3蛋白的过表达对上述肺腺癌细胞系均呈现出较强的生长抑制作用。 (2 )野生型P5 3蛋白的过表达对高转移肺癌细胞系Anip973的抑制作用明显高于低转移细胞系AGZY83 -a。 (3)野生型p5 3蛋白的过表达对经野生型P16基因转染的高、低转移的肺癌细胞Anip973、AGZY83-a抑制作用明显高于未经P16基因转染的细胞。野生型P5 3基因可以作为肺腺癌基因治疗的候选基因。肿瘤抑制基因P5 3、P16的联合转染可能是对肺腺癌进行基因治疗的有效手段。

野生型P53及其调控基因与子宫颈癌发病机制

P53基因是迄今发现与人类肿瘤的发生相关性最高的抑癌基因,在人类癌症中发生突变的频率高达50%。在子宫颈癌组织中表达则降低,且以野生型(wt)为主。wtP53第4外显子72密码的基因多态性与子宫颈癌发病机制密切相关。wtP53蛋白在子宫颈癌细胞中半衰期短,功能易失活,具有调节细胞周期、促进肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤细胞生长的功能。其功能失活与多种基因,如E6,E7,MDM2和STAT3等基因的降解作用有关。