产金属β内酰胺酶大肠埃希菌感染3例

耐碳青霉烯类革兰阴性杆菌(CRGNB)的传播是一个全球性的公共卫生问题。CRGNB分离株通常具有广泛的耐药性,导致抗菌治疗选择有限,死亡率升高。在美国,碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌(CRE)每年引起超过13000例感染,并导致超过1000人死亡。CRE是指至少对一种碳青霉烯类抗生素耐药或产生碳青霉烯酶的肠杆菌目细菌,分为非产碳青霉烯酶和产碳青霉烯酶两类[1]。常见的碳青霉烯酶包括肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶(KPC)、新德里金属β内酰胺酶(NDM)、亚胺培南水解金属β内酰胺酶(IMP)、维罗纳整合子编码的金属β内酰胺酶(VIM)和苯唑西林酶(OXA-48)。NDM是肠杆菌科细菌中最常见的金属酶,主要见于大肠埃希菌、阴沟肠杆菌。我国碳青霉烯类耐药大肠埃希菌中产NDM比例超过70%,以NDM-1/5为主[2]。在制定抗感染方案时,除了考虑病原菌对抗菌药物的敏感性,还需要考虑抗菌药物在感染部位的组织浓度。本研究对福建医科大学附属泉州第一医院收治的产金属β内酰胺酶大肠埃希菌所致腹腔感染、尿路感染、骨髓炎的3个病例进行回顾性分析,总结其临床特征,为临床诊治提供参考。

臭鼻克雷伯和鲍曼不动杆菌中检出NDM-1型金属β内酰胺酶基因

目的调查对碳青霉烯类抗菌剂敏感性降低的肠杆菌和鲍曼不动杆菌中NDM-1型金属β内酰胺酶基因的存在情况。方法应用改良Hodge试验和EDTA协同试验对2007～2010年本院收集的对碳青霉烯类抗菌剂敏感性降低的肠杆菌和鲍曼不动杆菌进行碳青霉烯酶筛选。PCR法扩增NDM-1基因,并对PCR扩增阳性产物进行DNA测序分析。对NDM-1基因阳性菌株用PCR方法检测armA和rmtB16S rRNA甲基化酶基因,VIM、SPM、IMP和KPC碳青霉烯酶基因以及Ⅰ类整合子。Etests法进行药敏试验。结果 70株肠杆菌中10株Hodge Test和EDTA协同试验阳性,55株鲍曼不动杆菌中6株EDTA协同试验阳性。其中1株臭鼻克雷伯和3株鲍曼不动杆菌PCR扩增出NDM-1型金属β内酰胺酶基因目的片段,经测序比对为NDM-1型基因。其中1株臭鼻克雷伯和1株鲍曼不动杆菌检测出armA型16S rRNA甲基化酶基因,1株鲍曼不动杆菌检测出2000 bp左右的Ⅰ类整合子,未检出除NDM-1型外的其他碳青霉烯酶基因。NDM-1基因阳性菌除对替加环素、多黏菌素B敏感外,对其他检测的抗菌剂均耐药。结论臭鼻克雷伯和鲍曼不动杆菌中存在NDM-1型金属β内酰胺酶基因,有的携带armA型16S rRNA甲基化酶基因和Ⅰ类整合子,为该地区首次报道。

产金属β内酰胺酶铜绿假单胞菌呼吸机相关肺炎暴发临床分析

目的探讨呼吸重症监护病房（RICU）产金属口内酰胺酶（MBLs）铜绿假单胞菌暴发流行的可能原因。方法对2002年1—4月RICU内6例行气管插管机械通气，并于支气管灌洗液中多次分离到多重耐药铜绿假单胞菌（MRPA）的呼吸机相关肺炎（VAP）病人进行调查。结果6例分离到的MRPA菌株MBLs阳性，经DNA分析为同一菌株暴发流行所致。其中4例死亡，2例好转。调查发现呼吸机出气口和湿化瓶有MRPA生长。结论产MBLs铜绿假单胞菌为泛耐药菌株，目前尚缺乏有效的治疗手段，在RICU内一旦出现，如不注意隔离，可造成该菌株的暴发流行。

金属β内酰胺酶的检出及流行病学研究进展

近年来，临床抗生素的使用量不断增加，抗生素不合理应用的现象也日趋严重，由抗生素选择性压力带来的临床耐药菌株不断增多。对头孢菌素类、氨基糖苷类、喹诺酮类等常用抗菌药物多重耐药，甚至对包括亚胺培南或美罗培南在内的碳青霉烯类药物耐药的多重耐药菌不断出现，给临床治疗带来极大困难，已经引起了临床医师和微生物学工作者对多重耐药菌的广泛关注。

嗜麦芽窄食单胞菌所产L1型金属β内酰胺酶的序列分析及原核表达

目的对嗜麦芽窄食单胞菌所产L1型金属β内酰胺酶基因进行测序、原核表达。方法PCR扩增L1酶的编码基因,将其亚克隆入pUCmT载体后测定核苷酸序列,将L1酶基因克隆至表达载体pET41a(+)后在大肠埃希菌BL21(DE3)中表达,十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳检测表达情况,等电聚集电泳测定表达蛋白的等电点。结果本实验中L1的编码基因与国外同类酶的氨基酸同源性为92.44%。此L1酶基因可在大肠埃希菌BL21(DE3)中大量表达,等电点为6.7。结论对L1型金属β内酰胺酶的克隆测序及成功表达为进一步研究该酶的分子生物学特性奠定了基础。

介导VIM-2型金属β内酰胺酶的整合子的研究

目的 :分析 1株对亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌的耐药机制。方法 :用改良的三相水解试验分析该菌株所产的 β内酰胺酶 ,并进行初步分类 ;用聚合酶链反应 (PCR)扩增该菌的耐药基因 ,用PCR 限制片段长度多态性 (RFLP)初筛整合子并分型 ,用长片段PCR扩增整合子的可变区并测序 ,以确认 β内酰胺酶基因种类及其转移特性。 结果 :发现铜绿假单胞菌RJ2 1 3携带一个整合子介导的blaVIM 2基因。结论 :在上海和中国大陆地区首次发现铜绿假单胞菌产生的整合子介导VIM 2型金属 β内酰胺酶 。

金属β内酰胺酶及其抑制剂的研究进展

内酰胺类抗生素是临床上应用最广泛的抗感染药物。抗生素的过度使用导致耐药细菌的产生,细菌对抗生素的耐药成为越来越突出的临床问题,表达β内酰胺酶是细菌最主要的耐药机制。金属β内酰胺酶(MBLs)可以水解包括碳青霉烯类在内的β内酰胺类抗生素,其在全球范围内的广泛播散严重威胁人们的健康。目前临床中还没有药物或者药物与抑制剂的复合物可以有效治疗表达MBLs的细菌引起的感染性疾病。寻找抑制MBLs的抑制剂是使β内酰胺类抗生素恢复抗菌效力最重要手段。

VIM-2型金属β内酰胺酶的序列分析、原核表达及纯化

目的对铜绿假单胞菌所产blaVIM-2进行基因重组表达及纯化。方法以产blaVIM-2铜绿假单胞菌总基因组DNA为模板,PCR扩增blaVIM-2,将其克隆入pUCm-T载体后测定该核苷酸序列,再将blaVIM-2克隆入表达载体pET-41b(+),然后在大肠埃希菌BL21(DE3)中表达,表达产物再过Ni-NTA柱纯化。结果PCR扩增出大小为801bp的基因片段,与GenBank上同类酶的基因序列同源性为100%。此基因能在大肠埃希菌中大量表达,蛋白分子质量大约为56000u。结论对VIM-2金属酶的成功表达及纯化为进一步做酶动力学及酶的其他分子生物学特性研究奠定了基础。

获得性金属β内酰胺酶表型检测法的研究

目的探讨适用于临床微生物实验室常规初筛获得性金属β内酰胺酶（MBLs）的实验方法,为指导临床合理选择抗生素提供依据。方法以EDTA为MBLs的抑制剂,以亚胺培南IMP和头孢他啶CAZ为MBLs的底物,采用双纸片增效法作MBLs初筛试验,将两种初筛试验的结果与聚合酶链反应PCR的结果进行比较分析。结果应用PCR法,在70株耐IMP和或CAZ的鲍曼不动杆菌中检出VIM型MBLs阳性株4株,IMP型MBLs阳性株6株。IMP-EDTA纸片法的敏感性50%,特异性28.6%;CAZ-EDTA纸片的敏感性85.8%,特异性13.3%。结论IPM-EDTA纸片法方法简便、结果可靠,可作为获得性MBL的初筛方法在临床微生物室日常工作中开展。

鲍曼不动杆菌产金属β内酰胺酶的研究进展

1前言 鲍曼不动杆菌（Acinetobaeter baumannii．Ab）是医院感染的重要病原菌。近年来由鲍曼不动杆菌引起的感染在增多，且其耐药性日益严重。特别是多重耐药菌株引起的爆发感染和医院获得性感染的发生．已引起了临床医生和微生物学工作者对多重耐药鲍曼不动杆菌的广泛关注。

产金属β内酰胺酶铜绿假单胞菌的耐药性分析

目的 了解医院感染患者铜绿假单胞菌产金属β内酰胺酶情况,并对其耐药性进行分析。方法 用2 -巯基丙酸协同试验对两年中分离的2 38株铜绿假单胞菌进行产金属β内酰胺酶检测,用K -B法对13种抗生素进行敏感性测定。结果 共检出产金属β内酰胺酶菌71株,检出率2 9 8% ;药敏试验结果表明,产金属β内酰胺酶的铜绿假单胞菌耐药性增强,耐药谱扩大,全部为多重耐药菌。结论 细菌一旦获得产金属β内酰胺酶的能力,不但对几乎所有β内酰胺类抗生素,包括碳青霉烯类耐药,而且对β内酰胺酶抑制剂、氨基糖甙类、喹诺酮类,复方磺胺类等抗生素的敏感性下降。合理。

新型金属β内酰胺酶抑制剂ME1071体外增强碳青霉烯类抗生素对产金属β内酰胺酶铜绿假单胞菌的抗菌活性研究

ME1071,一种马来酸的衍生物,是新型金属β内酰胺酶抑制剂。本次研究的菌株来自1997年至2008年日本164所医院的非重复菌株,包括174株产金属β内酰胺酶的铜绿假单胞菌,其中166株产IMP-1金属β内酰胺酶,

2016-2017年印第安纳州获得的产VIM型金属β内酰胺酶肠杆菌科细菌

2016年1月,美国印第安纳州发现产VIM型金属β内酰胺酶(Verona integron-mediated metallo- β-1actamase)的碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌(CRE)。CRE是一种新发的抗生素耐药的公共卫生威胁。CRE传播的主要原因可能是产碳青霉烯酶的CRE(CP-CRE)的出现。碳青霉烯酶通常由质粒编码,该质粒容易在细菌之间转移。

澳大利亚出现产金属β内酰胺酶NDM-1的多重耐药大肠埃希菌

金属β内酰胺酶（MBLs）可以水解几乎所有β内酰胺类抗生素（除外氨曲南），包括碳青酶烯类。近来自曾去过印度的瑞典患者分离到的肺炎克雷伯菌（05—506）和大肠埃希菌菌株中鉴定出一种新的MBI，命名为NDM-1（新德里金属β内酰胺酶）。

产新德里金属β内酰胺酶-1的阴沟肠杆菌检测与鉴定

近年我国多重耐药细菌问题日益严重，特别是对碳青霉烯类抗生素耐药的肠杆菌科也开始逐渐增多。文献报道已知泛耐药肠杆菌科细菌的出现与KPC、IMI、NDM、IMP等耐药基因的获得有着密切关系[1]，其中NDM-1是一种新型金属β内酰胺酶[2]，是以二价金属离子为催化活性中心，对青霉素类、喹诺酮类、头孢类和碳青霉烯类抗生素均具有极强的降解能力。