金边瑞香花芽形态分化研究

金边瑞香花芽由顶芽发育而成 ,花芽分化包括花序分化和小花分化两个过程 ,分为未分化、开始分化、花序原基分化、小花原基分化、花瓣分化、雄蕊分化和雌蕊分化 7个时期 ,分化的顺序是向心的 ;分化的临界期为 5月中旬 ,分化时期长达 7个月 ,花芽分化既持续又表现出两个分化高峰 ,还受温度等因素的影响。

金边瑞香鲜花中瑞香素的超临界萃取及条件的优化

目的 :研究超临界CO2 流体萃取 (SFE)法萃取金边瑞香鲜花中有效成份之一瑞香素的最佳条件。方法 :采用均匀设计方法。以萃取压力、萃取温度、解析压力、解析温度 4个因素为考察条件 ,每个因素设 7个水平进行实验。结果 :在SFE中最佳萃取条件为 :萃取压力 2 0MPa ,萃取温度 39℃ ,解析压力 8MPa ,解析温度 36℃。结论 :本法是一种简便、高选择性、高效率地萃取金边瑞香鲜花有效成份的方法。

金边瑞香浸膏体内外抗肿瘤作用

目的：探讨金边瑞香浸膏的体内外抗肿瘤作用。方法：采用流式细胞术观察不同浓度金边瑞香浸膏对SMMC7721细胞周期的影响。采用MTT法检测不同浓度金边瑞香浸膏对SMMC7721，NKM45，A549和S180肿瘤细胞增殖的影响。利用小鼠皮下移植性肿瘤模型观察不同浓度金边瑞香浸膏的体内抗肿瘤作用。结果：金边瑞香浸膏可使SMMC7721 G0／C1期细胞增多，S期细胞减少，以0．5g·mL^-1剂量作用最明显，G0／G1期细胞达80．64％。金边瑞香浸膏浓度在0．03125～1．0g·mL^-1范围内对体外培养的SMMC7721，NKM45，A549和S180肿瘤细胞增殖均有一定程度的抑制作用，0．5g·mL^-1浓度时对此4种肿瘤细胞的增殖抑制率分别为65．82％，60．38％，42．36％和49．94％。金边瑞香浸膏对荷S180小鼠的肿瘤生长有抑制作用，20和40g·kg^-1·d^-1金边瑞香剂量组抑瘤率分别为43．57％和28．13％。结论：金边瑞香浸膏在体内外具有抗肿瘤作用。

金边瑞香无土栽培研究初报

选用 4种不同的基质和 5种不同的营养液 ,比较其对金边瑞香生长的影响。试验结果表明 :以经特殊处理的锯木屑与河沙组成的C基质搭配I营养液配方的处理效果最佳。

金边瑞香插穗形态、POD与可溶性蛋白含量变化研究

分析金边瑞香扦插生根过程中插穗形态变化、POD活性和可溶性蛋白含量的变化规律与生根的关系,为其生产和生根机理研究提供理论依据。结果表明,600 mg.L-1的NAA溶液能有效抑制金边瑞香插穗基部变褐和腐烂,促进愈伤和生根的发生,最高生根率达86.8%,生根率与皮层开裂呈正相关。生根过程中,插穗体内POD活性总体呈"升高-降低-升高"趋势,最高峰值较CK提早了8 d,与愈伤高峰出现一致;可溶性蛋白总体呈"降低-升高"趋势,各处理下降的速度较CK要快。

金边瑞香茎尖脱毒及快繁技术

报道了金边瑞香顶芽在MS＋0，05mg／L6-BA＋0．1mg／LNAA培养基中预培养20d，再在34℃（11h）＋23℃（13h）的昼夜温度交替下处理30d后，剥离0．2-0．3mm大小的茎尖在MS＋0，1mg／L6-BA＋0．1mg／LNAA培养基中的诱导成活率为80．0％，并获得脱毒苗。继代和增殖培养基为MS＋0．5-1．0mg／L6-BA＋0．1mg／LNAA，增殖系数4，1。试管苗在适宜培养条件下平均生根率为82．6％，在珍珠岩：泥炭=2：1基质中生根苗移栽成活率达到96．46％。

金边瑞香对荷S180瘤小鼠免疫功能的影响

目的探讨金边瑞香对荷S180瘤小鼠免疫功能的影响。方法MTT比色法测定小鼠T淋巴细胞增殖反应;鸡红细胞吞噬实验检测小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能,红细胞C3b受体花环(RBC-C3bRR)法检测小鼠红细胞免疫功能。结果20g/(kg.d),40 g/(kg.d)金边瑞香能提高荷S180瘤小鼠的T淋巴细胞增殖刺激指数、腹腔巨噬细胞的吞噬率和吞噬指数,20 g/(kg.d)金边瑞香可提高荷S180瘤小鼠的红细胞C3b受体花环结合率。结论金边瑞香对荷S180瘤小鼠的细胞免疫、非特异性免疫、红细胞免疫功能均有不同程度的促进作用。

金边瑞香的扦插生根研究

研究表明金边瑞香插穗所带叶片数与生根关系极大，在插穗体内吸水与蒸腾平衡状况下，一定长度的枝条其叶片数越多，生根率及根系发达程度越高；同一枝条分３段扦插，以梢部生根率及根系发达程度最高，中部次之，基部最差；不同树龄的金边瑞香插穗以“低龄”母株生根最好。

植物药金边瑞香对小鼠肠道Peyer’s结的影响

目的:采用环磷酰胺所致小鼠肠道黏膜相关淋巴组织损伤模型,观察植物药金边瑞香浸膏对小鼠肠道Peyer’s结的影响。方法:实验于2005-01/2005-08在赣南医学院分析实验室完成。44只昆明种小鼠随机分为正常组、金边瑞香组、金边瑞香+环磷酰胺组及环磷酰胺组4组,每组11只,给予正常组小鼠生理盐水灌胃,每天1次,每次0.02mL/g,连续7d;环磷酰胺组小鼠第7天1次腹腔注射100mg/kg环磷酰胺,其他同正常组;金边瑞香组用金边瑞香浸膏(浓度400g/L,由江西省中医药研究院提供,含生药量5g/mL,临用时用蒸馏水稀释至所需浓度,批号:050310)灌胃,每天1次,每次0.02mL/g,连续7d;金边瑞香+环磷酰胺组,方法同金边瑞香组和环磷酰胺组。第8天麻醉下脱颈椎处死全部动物,立即小心取出全小肠,肉眼观察其形态并计数小肠Peyer’s结的数量、随后用生理盐水冲洗肠腔,用针头小心取出Peyer’s结按常规方法制备细胞悬液后计数细胞。观察正常组、金边瑞香组、金边瑞香+环磷酰胺组及环磷酰胺组4组小鼠Peyer’s结,计数Peyer’s结细胞总数,比较Peyer’s结的数量及细胞数。结果:①正常组、金边瑞香组、金边瑞香+环磷酰胺组Peyer’s结的数目及结内细胞总数明显高于环磷酰胺组[(5.818±1.991),(7.273±1.678),(6.364±1.690),(3.818±0.874);(4.223±1.197)×109L-1,(6.658±3.758)×109L-1,(6.884±1.807)×109L-1,(1.451±1.024)×109L-1,F=14.28,9.044,P<0.05～0.001]。②金边瑞香+环磷酰胺组、金边瑞香组及正常组之间两两比较Peyer’s结的数目及结内细胞总数差别无统计学意义(P>0.05)。结论:金边瑞香可对抗环磷酰胺诱导的小鼠肠道Peyer’s结的损伤,提示金边瑞香可能对肠道黏膜免疫具有改善作用。

金边瑞香提取物抗氧化及清除自由基活性研究

采用不同的化学模型评价了金边瑞香(Daphne odora var.marginata)乙醇提取物的乙酸乙酯组分(EA)及其三个子组分(乙酸乙酯组分上硅胶柱层析,用石油醚-丙酮按照体积比为8:3、4:3和1:4梯度洗脱得到,分别命名为F1、F2和F3)的抗氧化及清除自由基的能力。研究结果表明,组分F2清除超氧自由基和羟基自由基的能力最强,组分F1清除DPPH.的能力最强,EA还原铁离子和螯合亚铁离子的能力最强,所有组分对羟基自由基所致DNA损伤均有很好的保护作用,预测了活性较强的组分F2可能含有活性先导物。

金边瑞香对小鼠免疫细胞的影响

目的探讨金边瑞香对小鼠免疫细胞的影响。方法测定腹腔巨噬细胞的吞噬功能,红细胞C3b受体花环结合率,MTT比色法测定T淋巴细胞增殖反应。结果4～8g/(kg·d)金边瑞香能提高T淋巴细胞增殖刺激指数、腹腔巨噬细胞的吞噬率和吞噬指数,1～16g/(kg·d)金边瑞香能提高红细胞C3b受体花环结合率。结论金边瑞香对小鼠的细胞免疫、非特异性免疫、红细胞免疫功能有促进作用。

金边瑞香活性成分瑞香黄烷-Ⅰ,瑞香素对SMMC-7721和MCF-7细胞作用的研究

目的研究金边瑞香活性成分瑞香黄烷-Ⅰ(E002)、瑞香素(E003)抗肿瘤活性,为进一步研究抗肿瘤机制提供依据。方法用噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度E002、E003对SMMC-7721和MCF-7细胞的抑制率。结果①E002、E003浓度为250~1.95μg/m l时,作用SMMC-7721细胞,两者的抑制率为:(86.9±2.2)%^(50.8±0.6)%。②E002浓度为250~62.5μg/m l时,作用MCF-7细胞,其抑制率为:(72.3±2.1)%^(52.48±1.65)%。③E002对SMMC-7721和MCF-7细胞的IC50值分别为:(1.96±0.03)和(22.89±3.04)μg/m l;E003对SMMC-7721细胞的IC50值为:(1.23±0.11)μg/m。l结论金边瑞香活性成分瑞香黄烷-Ⅰ对SMMC-7721、MCF-7细胞,瑞香素对SMMC-7721细胞的增殖均有显著抑制作用,且呈现良好的剂量依赖性。

均匀设计对超临界提取金边瑞香鲜花香水条件的优化

目的 :研究超临界CO2 流体提取 (SFE)金边瑞香鲜花中有效成分的最佳条件。方法 :采用均匀设计方法 ,以提取压力、提取温度 ;解析压力、解析温度 4个因素 ,每个因素 7个水平进行实验。结果 :在SFE中最佳提取条件 :提取压力2 0MPa ,提取温度 39°C ;解析压力 8MPa以上 ,解析温度 36°C。结论 :本法是一种简便。

金边瑞香的组织培养与快繁技术研究

以金边瑞香幼嫩茎段为外植体进行组织培养与快繁技术研究。结果表明,金边瑞香茎段离体培养的基本培养基为WPM,幼嫩茎段诱导芽的适宜培养基为WPM+NAA 0.1 mg/L+6-BA 2 mg/L,幼芽根诱导的适宜培养基为1/2MS+NAA 0.4 mg/L。研究结果为金边瑞香的快速离体繁殖及工厂化生产奠定了基础。

金边瑞香有机相提取物库的构建及活性成分分离纯化研究

采用逆流提取-系统溶剂组分化-高效液相色谱法(high-performance liquid chromatography,HPLC)检测组分化效果-高速逆流色谱技术(High-Speed Counter-Current Chromatography,HSCCC)分离制备高纯度化合物的研究思路,对金边瑞香化学成分进行研究得到4个高纯度单体化合物。通过现代谱学方法分别鉴定为:瑞香素(daphnetin,1)、瑞香黄烷I(daphnodorin I,2)、对羟基苯甲酸(p-hydroxybenzonic acid,3)和瑞香黄烷D1(daph-nodorin D1,4),化合物2～4均为首次从该种植物中分离得到。

金边瑞香浸膏对小鼠血清IFN-γ、IL-4、IL-18表达的影响

目的观察金边瑞香(daphne odora var.marginata,DOVM)浸膏对小鼠血清干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素18(IL-18)表达的影响。方法选用昆明系小鼠60只,随机分为生理盐水组(对照组)和1、2、4、8、16 g/(kg.d)DOVM浸膏组共6组,每组10只。DOVM浸膏不同浓度组分别灌胃给药0.02 mL/g,1次/d,连续14 d;生理盐水组给予生理盐水灌胃0.02 mL/g,1次/d,连续14 d。常规分离血清后,采用生物素双抗体ELISA夹心法(ABC-ELISA)测定各组小鼠血清IFN-γ、IL-4、IL-18的水平。结果1 g/(kg.d)DOVM浸膏组血清IL-4水平明显高于生理盐水组(P<0.05)。生理盐水组与DOVM浸膏不同浓度组血清IFN-γ、IL-18水平比较差异均无统计学意义(P均>0.05),DOVM浸膏不同浓度组间血清IFN-γ、IL-18水平比较差异也均无统计学意义(P均>0.05)。结论1 g/(kg.d)DOVM浸膏对小鼠IL-4的表达有一定促进作用。

金边瑞香试管苗高频生根诱导研究

针对金边瑞香脱毒组培苗在增殖培养中存在壮苗率低、生根不稳定、生根率低以及试管苗生根移植周期性长等问题,采用MS基本培养基,添加不同种类和水平的激素,筛选出培养壮苗、诱导生根的最佳激素组合,同时进行不同基质试管苗生根移植试验。试验结果表明:金边瑞香壮苗率由原30%提高到90%,生根诱导率90%以上,移植成活率达93%。

金边瑞香对SMMC7721,NKM45,A549,S180肿瘤细胞增殖的影响

目的探讨金边瑞香对SMMC7721，NKM45，A549，S180肿瘤细胞增殖的影响。方法采用流式细胞术，观察不同浓度金边瑞香浸膏对SMMC7721细胞增殖周期的影响；采用MTT法检测不同浓度金边瑞香浸膏对SMMC7721，NKM45，A549，S180肿瘤细胞株增殖作用的影响。结果①金边瑞香浸膏可使SMMC-7721细胞增殖周期G0／G1细胞增多，S期细胞减少，且0．5g／ml金边瑞香浸膏作用最明显，G0／G1期细胞达80．64％；1g／ml，G0／G1期达到72．19％。②金边瑞香浸膏浓度在0．03125～1g／ml范围内对体外培养的SMMC7721，NKM45，A549，S180肿瘤细胞生长均有一定程度的抑制作用，其抑制作用与剂量呈正相关，0．5g/ml金边瑞香浸膏对SMMC7721，NKM45，A549，S180肿瘤细胞生长抑制率为65.82％，60．38％，42．36％，49．94％，但随着浓度增加，这种抑制作用反而减弱，在1g／ml其生长抑制率均有所减弱。结论金边瑞香能使体外培养的SMCC7721细胞周期阻滞在G0／G1期，金边瑞香对体外培养的SMMC7721，NKM45，A549，S180肿瘤细胞株的增殖均有较强的抑制作用。

金边瑞香花粉活力和柱头可授性研究

[目的]研究金边瑞香花粉活力和柱头可授性。[方法]采用I-KI法、TTC法和固体培养基法测定金边瑞香花粉的活力,并用联苯胺-过氧化氢法测定柱头的可授性。[结果]金边瑞香从初花期至盛花期,I-KI法未对花粉内部染色,使用TTC法花粉未变红色,离体培养法未见有花粉管萌发,均表明花粉不具生活力。柱头表面有少量气泡产生的,且柱头变色,表明金边瑞香柱头可授性较低。[结论]金边瑞香花粉无活力,柱头可授性低。