金铁锁总皂苷抗类风湿性关节炎作用及其作用机制研究

目的:考察金铁锁总皂苷(TSPT)抗类风湿性关节炎(RA)的药理作用及作用机制。方法:建立佐剂性关节炎(AA)动物模型,观察TSPT对AA大鼠足肿胀、关节炎指数及炎性组织液中促炎细胞因子IL-1β,TNF-α水平的影响。结果:TSPT能有效抑制关节肿胀率及关节指数,降低AA大鼠炎性组织液中促炎细胞因子L-1β,TNF-α的水平。结论:TSPT具有良好的抗RA作用,其作用机制与抑制促炎细胞因子L-1β,TNF-α的水平有关。

金铁锁总皂苷抗炎镇痛作用及作用机理研究

目的:通过实验观察和探讨金铁锁总皂苷(TSPT)抗炎作用及其作用机理。方法:建立佐剂性关节炎(AA)动物模型,观察TSPT对AA大鼠炎性痛阈及炎性组织液中丙二醛(MDA)和皮质醇(Cor)水平的影响来探讨其镇痛抗炎作用及其作用机理。结果:TSPT能有效提高AA大鼠致炎足的痛阈,降低炎性组织液中MDA,双向调节AA大鼠血中Cor的水平。结论:TSPT具有良好的抗炎镇痛作用,其作用机理与降低MDA,调节Cor水平有关。

基于MH7A细胞迁移、凋亡及NLRP3炎性小体探讨金铁锁总皂苷治疗类风湿关节炎的作用机制

目的:探讨金铁锁总皂苷对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(MH7A)增殖、迁移、凋亡及相关炎性因子的影响及其机制。方法:培养MH7A细胞,给予不同浓度的金铁锁总皂苷(0.05、0.10、0.15μg/mL)干预后,采用Annexin V/PI染色后流式细胞仪检测MH7A细胞凋亡;细胞划痕法测定MH7A细胞迁移;接着将细胞分为空白对照组、模型组、mcc950(1μmol/L)阳性对照组及金铁锁总皂苷各浓度(0.05、0.10、0.15μg/mL)组,采用MTS比色法检测MH7A细胞增殖;蛋白免疫印迹法、免疫荧光、q-PCR检测各组细胞NLRP3、ASC、Caspase-1 mRNA及蛋白表达;ELISA试剂盒及q-PCR检测炎性因子IL-1β、IL-18、IL-6炎性因子的释放及mRNA表达。结果:与空白对照组比较,金铁锁总皂苷呈浓度依赖性显著升高MH7A细胞凋亡率(P<0.01);中、高浓度金铁锁能显著抑制MH7A细胞迁移(P<0.01)。与模型组比较,不同浓度金铁锁总皂苷能显著降低TNF-α导致的炎症因子IL-1β、IL-18、IL-6的释放及其mRNA表达,并能抑制TNF-α诱导的MH7A细胞内NLRP3、ASC mRNA及蛋白表达(P<0.01)。结论:金铁锁总皂苷能抑制NLRP3炎性小体激活,其机制可能与抑制MH7A细胞的增殖、迁移和诱导其凋亡有关。

金铁锁总皂苷提取工艺的优化

本文以优化金铁锁总皂苷提取工艺为目的。在单因素实验基础上,以提取乙醇浓度、超声次数、料液比为影响因素,以浸膏得率、总皂苷转移率的综合评分为评价指标,响应面法优化金铁锁总皂苷提取工艺。实验结果为金铁锁总皂苷最佳提取条件是提取乙醇浓度80%,超声2次,料液比30:1,浸膏得率为23.01%,总皂苷转移率为99.48%,综合评分为93.2133分。得出结论为优化的金铁锁总皂苷提取工艺稳定可行,可为后续金铁锁的总皂苷制剂开发研究奠定理论基础。

金铁锁总皂苷醇质体凝胶的制备及评价

目的优化金铁锁总皂苷醇质体凝胶的制备工艺,并对其进行质量及安全评价。方法以综合评分为主要考察指标,以卡波姆940、甘油、丙二醇用量为考察因素设计响应面实验,优化金铁锁总皂苷醇质体凝胶处方,对最优处方凝胶进行质量评价,对比醇质体凝胶及普通凝胶透皮性能,并以家兔皮肤刺激性实验对其进行用药安全评价。结果金铁锁总皂苷醇质体凝胶最优处方为卡波姆940比例1.95%、甘油比例7.69%、丙二醇比例5.75%。所制得的金铁锁总皂苷醇质体凝胶外观为乳白色、半透明状,且具有良好的物理稳定性和光稳定性,平均综合评分为91.0933分。金铁锁总皂苷醇质体凝胶的Q_(12h)为118μg/cm^(2),金铁锁总皂苷凝胶的Q_(12h)为83μg/cm^(2)。皮肤刺激性实验显示家兔皮肤刺激评分为0,病理切片无组织病理学改变。结论建立的金铁锁总皂苷醇质体凝胶制备方法稳定可行,所制备的醇质体可有效促进药物的透皮性能,并具有用药安全性,具备进一步应用于临床用药的潜能。

金铁锁总皂苷镇痛作用及其对佐剂性关节炎大鼠c-fos基因的表达的影响

目的:探讨金铁锁总皂苷(TSPT)镇痛作用及其机制,进一步揭示金铁锁总皂苷抗类风湿关节炎的药理作用基础。方法:采用热板法初步评价TSPT的镇痛效果,建立大鼠佐剂性关节炎(AA)模型,运用免疫组化研究TSPT对c-fos基因表达产物FOS蛋白水平的影响。结果:TSPT具有明显的镇痛作用,大剂量组优于中药阳性对照组;TSPT还能明显抑制AA大鼠炎性疼痛中枢及外周组织中c-fos基因的表达。结论:TSPT具有良好的镇痛效果,其镇痛作用可能与抑制中枢和外周神经c-fos基因的表达有关,为深入研究其抗类风湿关节炎作用奠定了基础。

金铁锁镇痛有效部位的分离提取及活性研究

目的:探讨金铁锁的镇痛作用及镇痛活性部位。方法:用热板法、扭体法观察金铁锁各提取分离物对昆明种小鼠的镇痛作用。结果:金铁锁70%乙醇总提取物与金铁锁总皂苷对扭体法模型有明显的镇痛作用。结论:金铁锁具有明显镇痛作用,其镇痛作用部位可能在外周,镇痛成分与所含的总皂苷有关。