凡纳滨对虾肌质钙结合蛋白纯化鉴定、理化特性及抗原表位分析

以凡纳滨对虾(Penaeus vannamei)为原料,分离纯化和鉴定过敏原肌质钙结合蛋白(sarcoplasmiccalcium-binding protein,SCP),对其理化性质(免疫活性、热稳定性、pH值稳定性及消化稳定性)、二级结构和抗原表位进行研究。结果表明:采用蛋白粗提、硫酸铵分级沉淀、阴离子交换层析等步骤纯化得到的蛋白分子质量为21.6 kDa,经鉴定,该蛋白为凡纳滨对虾SCP,肽段覆盖率达93.26%。凡纳滨对虾SCP具有较强的免疫活性,在热处理温度≥65℃和强酸强碱条件下免疫活性减弱;SCP对肠液消化具有较强的稳定性,而对胃液消化稳定性较差。凡纳滨对虾SCP的二级结构中α-螺旋、β-折叠、β-转角和无规卷曲的相对含量分别为26%、16.9%、17.5%、39.6%。利用生物信息学工具结合免疫学技术最终预测识别出8条凡纳滨对虾SCP抗原表位。

老年急性进展性脑梗死患者血清磷脂酶A2、S100钙结合蛋白B水平与颈动脉斑块的联系

目的探讨老年急性进展性脑梗死患者血清磷脂酶A2(PLA2)、S100钙结合蛋白B(S100B)和颈动脉斑块的关系。方法将2021年1月至2022年6月收治的120例老年急性进展性脑梗死患者纳入观察组,同期将115例非进展性脑梗死患者为非进展组,100例健康人员为健康组。将观察组分为无斑块组34例、斑块稳定组45例和斑块不稳定组41例。分析血清PLA2、S100B水平与颈动脉斑块的关系。ROC分析二者对颈动脉斑块的预测价值。随访1年,以复发和死亡为终点事件分析生存率。结果斑块稳定组、斑块不稳定组血清PLA2、S100B高于无斑块组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清PLA2、S100B与颈动脉斑块呈正相关。ROC显示二者联合预测的价值更高(P<0.05)。结论血清PLA2、S100B在老年急性进展性脑梗死患者水平升高,与颈动脉斑块关系密切。

颅脑术后继发颅内感染患者脑脊液膜联蛋白A2和S100钙结合蛋白A10表达水平及临床意义

目的探讨颅脑术后继发颅内感染患者脑脊液膜联蛋白A2(Annexin A2)和S100钙结合蛋白A10(S100A10)表达水平及临床意义。方法选取收治的颅脑术后继发颅内感染患者120例为试验组,选取同期颅脑术后未感染的120例患者为对照组。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测脑脊液中Annexin A2、S100A10水平;采用Pearson相关分析法分析Annexin A2、S100A10与各临床指标的相关性;采用Logistic回归分析法分析颅脑术后继发颅内感染的影响因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析Annexin A2、S100A10水平对颅脑术后继发颅内感染的预测价值。结果试验组的糖尿病占比、脑脊液渗漏占比、血乳酸脱氢酶(LDH)、脑脊液中Annexin A2及S100A10水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。颅内感染患者脑脊液中Annexin A2与S100A10、血LDH水平呈正相关,S100A10水平与LDH水平呈正相关(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,糖尿病、脑脊液渗漏、血LDH、脑脊液中Annexin A2和S100A10均是颅脑术后继发颅内感染的独立影响因素(P<0.05)。ROC曲线显示,脑脊液中Annexin A2、S100A10水平单独预测及二者联合预测颅脑术后继发颅内感染的曲线下面积(AUC)分别为0.788、0.768、0.865,其中联合预测AUC大于二者单独预测(P<0.05)。结论颅脑术后继发颅内感染患者脑脊液中Annexin A2、S100A10表达水平升高,是颅脑术后继发颅内感染的独立影响因素,二者联合预测价值较高。

S100钙结合蛋白β与α突触核蛋白与帕金森病患者抑郁及运动障碍的关系

目的研究帕金森病(PD)患者血清S100钙结合蛋白β(S100β)及α突触核蛋白(α-syn)水平与患者抑郁及运动障碍的关系。方法选择2022年1月至12月聊城市人民医院收治的PD患者194例,根据汉密尔顿抑郁量表评分分为非抑郁组102例(0~13分)及抑郁组92例(≥14分)。运动障碍采用Hoehn-Yahr(H-Y)分级及统一帕金森病评定量表Ⅲ(UPDRS-Ⅲ)进行评分,用多因素logistic回归分析PD患者抑郁的独立危险因素,用Spearman相关性分析血清S100β及α-syn水平与患者抑郁及运动障碍的关系。结果抑郁组体质量指数低于非抑郁组,H-Y分级、UPDRS-Ⅲ评分、S100β、α-syn均高于非抑郁组,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。多因素logistic回归分析显示,H-Y分级、UPDRS-Ⅲ评分、S100β、α-syn为PD患者抑郁的独立危险因素(P<0.05)。Spearman相关性分析显示,PD患者S100β水平与H-Y分级、UPDRS-Ⅲ评分呈正相关(r=0.698,P=0.005;r=0.637,P=0.011);α-syn水平与H-Y分级、UPDRS-Ⅲ评分呈正相关(r=0.654,P=0.021;r=0.611,P=0.035)。ROC曲线显示,S100β、α-syn诊断PD患者抑郁的截断值分别为486.65μg/L、3894.27 ng/L,曲线下面积分别为0.889(95%CI:0.812~0.923)、0.761(95%CI:0.714~0.828),S100β曲线下面积显著优于α-syn(P<0.05)。结论PD患者血清S100β、α-syn水平与其抑郁发生及运动功能障碍密切相关。

血清S100钙结合蛋白A12、可溶性晚期糖基化终末产物受体水平与维持性血液透析患者骨质疏松的相关性分析

目的探讨维持性血液透析(MHD)患者血清S100钙结合蛋白A12(S100A12)、可溶性晚期糖基化终末产物受体(sRAGE)的水平变化及与骨质疏松的关系。方法选取2020年1月~2022年6月在本院血透室治疗的MHD患者110例,根据T值将其分为骨质疏松组(42例,T值≤-2.5 g/cm2)及非骨质疏松组(68例,T值>-2.5 g/cm2),同期选取在本院健康体检者50例为对照组。收集所有受试者的一般资料(性别、年龄、BMI、透析龄)及临床资料并进行组间比较。相关性分析采用Pearson相关分析。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估血清sRAGE和S100A12水平对MHD患者骨质疏松的预测价值。采用多重线性回归分析探讨MHD患者发生骨质疏松的影响因素。结果与对照组相比,非骨质疏松组与骨质疏松组患者血钙、血磷、骨密度、sRAGE水平均降低,全段甲状旁腺激素(iPTH)、尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)、白蛋白(Alb)、S100A12水平均升高(P<0.05)。与非骨质疏松组相比,骨质疏松组患者血清iPTH、S100A12水平均升高,血磷、骨密度、sRAGE水平均降低(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,MHD患者血清sRAGE与S100A12表达呈负相关;血清sRAGE与血磷、骨密度均呈正相关,与iPTH呈负相关;血清S100A12与血磷、骨密度均呈负相关,与iPTH呈正相关(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清S100A12、sRAGE联合预测MHD患者骨质疏松的ROC曲线下面积(AUC)、特异度均高于二者单独预测。多重线性回归分析结果显示,MHD患者S100A12、sRAGE、iPTH均与骨质疏松发生有关(P<0.05)。结论MHD患者骨质疏松发生与sRAGE、S100A12密切相关,联合检测二者可作为诊断MHD患者骨质疏松发生的指标。

结肠癌病人血清S100钙结合蛋白A12、可溶性晚期糖基化终产物受体水平与肠道菌群失调及化疗效果的关系

目的探讨结肠癌病人血清S100钙结合蛋白A12(S100A12)、可溶性晚期糖基化终产物受体(sRAGE)水平与肠道菌群失调及化疗效果的相关性。方法选择2020年12月至2021年12月黄河水利委员会黄河中心医院收治的116例中、晚期结肠癌病人作为结肠癌组,另选取在该院同期健康体检人员120例作为对照组。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清S100A12、sRAGE水平,检测病人肠道菌群,并对病人化疗后进行随访,Pearson法分析结肠癌病人血清S100A12、sRAGE水平与菌群失调相关性,受试者操作特征曲线(ROC曲线)分析化疗前血清S100A12、sRAGE水平对结肠癌化疗效果的诊断价值。结果与对照组比较,结肠癌组病人化疗前血清S100A12、sRAGE水平显著升高(P<0.05)。与化疗前菌群正常组[(265.34±45.78)μg/L、(381.54±36.75)ng/L]比较,菌群失调Ⅰ度组[(301.52±56.95)μg/L、(440.63±48.71)ng/L]、菌群失调Ⅱ度组[(339.29±52.35)μg/L、(432.75±49.20)ng/L]病人血清S100A12、sRAGE水平显著升高(P<0.05);与菌群失调Ⅰ度组比较,菌群失调Ⅱ度组病人血清S100A12、sRAGE水平显著升高(P<0.05)。相关性分析显示,结肠癌病人血清S100A12、sRAGE水平与大肠杆菌、粪肠球菌数量呈正相关(P<0.05),与双歧杆菌、乳酸杆菌数量呈负相关(P<0.05)。与化疗前比较,结肠癌病人化疗后血清S100A12、sRAGE水平显著降低(P<0.05);与化疗缓解组[(272.33±55.36)μg/L、(403.24±40.54)ng/L]比较,化疗无效组[(330.09±42.64)μg/L、(482.85±43.61)ng/L]病人化疗前血清S100A12、sRAGE水平显著较高(P<0.05)。血清S100A12、sRAGE联合诊断结肠癌化疗无效的曲线下面积(AUC)为0.91[95%CI:(0.84,0.96),P<0.001],灵敏度为86.05%,特异度为80.82%。结论结肠癌病人血清S100A12、sRAGE升高,与肠道菌群失调及化疗效果有关,对化疗疗效评估与预后评价有一定指导意义。

抑郁症180例血清S100钙结合蛋白A8和S100钙结合蛋白A9表达与抑郁程度的相关性分析

目的探讨抑郁症病人血清S100钙结合蛋白A(S100A)8、S100A9表达水平,以及二者与抑郁程度的相关性。方法选取中国人民解放军空军第九八六医院2019年1月至2022年10月收治的180例抑郁症病人作为研究组,另外选取174例同期体检健康的志愿者作为对照组,采用酶联免疫吸附测定检测血清S100A8、S100A9水平,采用汉密尔顿抑郁量表(HAMD-17)评估抑郁症病人的抑郁程度,其中7~17分判定为轻度抑郁病人(78例)、18~24分为中度抑郁病人(53例)、>24分为重度抑郁病人(49例),采用Spearman法分析血清S100A8和S100A9与病人抑郁程度的相关性。Pearson法分析血清S100A8和S100A9与炎症因子的相关性。logistic回归分析影响病人抑郁程度的因素。结果研究组血清S100A8[(6.57±1.74)μg/L]、S100A9[(7.36±2.07)μg/L]以及炎症因子白细胞介素(IL)-6[(15.37±3.56)ng/L]、IL-1β[(9.57±2.89)ng/L]、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)[(24.24±5.28)ng/L]水平显著高于对照组[(3.98±1.18)μg/L、(4.14±1.25)μg/L、(12.98±3.86)ng/L、(6.98±1.45)ng/L、(18.45±4.19)ng/L],差异有统计学意义(P<0.05);研究组病人抑郁症家族史、体力活动时间与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);血清S100A8和S100A9水平在轻、中、重度抑郁病人中依次升高,差异有统计学意义(P<0.05);经Spearman法分析发现,血清S100A8和S100A9及IL-6、IL-1β、TNF-α均与病人抑郁程度呈正相关(r=0.54、0.44、0.41、0.44、0.51,P<0.05);经Pearson法分析,血清S100A8水平分别与IL-6、IL-1β、TNF-α呈正相关(r=0.35、0.41、0.45,P<0.05),血清S100A9水平分别与IL-6、IL-1β、TNF-α呈正相关(r=0.37、0.38、0.44,P<0.05)。logistic回归分析,结果显示S100A8、S100A9、IL-6、IL-1β、TNF-α是抑郁症病人抑郁程度的影响因素(P<0.05)。结论S100A8、S100A9在抑郁症病人血清中表达上调,与病人的抑郁程度密切相关。

肺泡灌洗液白介素-6、白介素-36α及S100钙结合蛋白A9水平在继发性肺结核进展加重患者中的表达水平及评估价值

目的分析支气管肺泡灌洗液中白介素-6(IL-6)、白介素-36α(IL-36α)、S100钙结合蛋白A9(S100A9)在继发性肺结核进展加重患者中的表达水平及其临床评估价值。方法选择2020年1月至2022年12月首都医科大学附属北京胸科医院收治的继发性肺结核患者65例,根据病情严重程度分为重症组(34例)与轻症组(31例),收集两组患者外周支气管肺泡灌洗液,应用酶联免疫吸附法检测IL-6、IL-36α、S100A9水平并进行比较。应用ROC曲线下面积评价IL-6、IL-36α、S100A9对继发性肺结核进展加重的评估价值。结果重症组患者支气管肺泡灌洗液IL-6、IL-36α、S100A9水平均高于轻症组,差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析显示,IL-6、IL-36α、S100A9评估继发性肺结核进展加重的AUC分别为0.707(95%CI 0.580~0.835)、0.676(95%CI 0.542~0.811)、0.740(95%CI 0.617~0.863)。结论肺泡灌洗液IL-6、IL-36α、S100A9在继发性肺结核进展加重期患者中的表达水平升高,IL-6与S100A9对于临床评估继发性肺结核进展加重具有一定价值。

尼罗罗非鱼钙结合蛋白S100P基因的克隆及功能分析

为探究尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)钙结合蛋白S100P基因(On S100P)的功能,根据从罗非鱼头肾转录组获得的On S100P序列设计特异性引物,克隆得到On S100P,并对其推导的氨基酸序列进行生物信息学分析,利用荧光定量PCR技术,研究其在不同组织中的定位和表达水平及Poly(I∶C)刺激后该基因在各个组织中的表达模式,并表达与制备了重组蛋白,用于孵育尼罗罗非鱼头、肾、淋巴细胞后研究其对炎症因子转录的调控作用。结果表明:On S100P基因CDS长度为288 bp,可编码96个氨基酸,含有S100蛋白家族的保守结构域;系统进化树结果分析表明,尼罗罗非鱼同斑马丽鱼(Maylandia zebra)的S100P具有较高的同源性;组织分布分析显示,On S100P在尼罗罗非鱼的不同组织中均有表达,其中以肌肉和鳃的表达量最高;经Poly(I∶C)刺激后,罗非鱼肠道、头肾和脑组织中On S100P表达水平显著升高且刺激24 h后达到高峰;制备的On S100P重组蛋白(rOn S100P)可诱导肾淋巴细胞MIF、IL8、TNF-β及IL1-β的表达。研究表明,On S100P氨基酸序列具有S100保守结构域,与其他S100蛋白家族成员类似,可通过调节淋巴细胞炎症因子的表达影响鱼类的免疫应答。

过敏原肌质钙结合蛋白在毕赤酵母中的表达、优化及免疫反应性研究

目的 利用毕赤酵母(Pichia pastoris, P. pastoris)高效表达三疣梭子蟹(Portunustrituberculatus)重要过敏原肌质钙结合蛋白(sarcoplasmic calcium binding protein, SCP),并检验其免疫反应性。方法 根据毕赤酵母的密码子偏好性优化SCP基因并构建重组质粒。将其热激转化至P. pastorisGS115菌株后经遗传霉素(geneticin,G418)筛选获得阳性高拷贝子。最后通过甲醇诱导表达重组SCP并结合免疫印记(western blotting,WB)和间接酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)验证其免疫反应性。结果 在摇瓶水平下,重组SCP在毕赤酵母中最佳的表达条件为:诱导温度为28℃,甲醇添加量为每24h添加1.0%甲醇,诱导pH为6.0,诱导时间为144 h。在此条件下, SCP(纯度为91.6%)的得率为1.5 mg/100 mL菌液,实现了可溶性高效表达。WB和间接ELISA结果表明,重组SCP具有免疫球蛋白G结合能力。结论 毕赤酵母表达系统可以得到纯度较高且免疫反应性良好的重组SCP。本研究可为SCP的理化研究及过敏原标准物质的应用奠定基础,并有望促进特异性甲壳类过敏原检测的发展。

非瓣膜性心房颤动患者血清S100钙结合蛋白A4和正五聚素蛋白3水平与左心耳血栓的关系

目的分析非瓣膜性心房颤动(NVAF)患者血清S100钙结合蛋白A4(S100A4)、正五聚素蛋白3(PTX3)水平与左心耳血栓形成的关系。方法选取2020年3月至2023年3月在我院治疗的老年NVAF患者120例,根据超声心动图筛查有无左心耳血栓形成分为形成组40例和非形成组80例。检测患者血清S100A4、PTX3水平;Spearman相关性分析血清S100A4、PTX3水平与左心耳血栓形成的关系;logistic回归分析影响左心耳血栓形成的因素。结果形成组血清S100A4、PTX3水平高于非形成组(P<0.01)。NVAF患者血清S100A4和PTX3水平与左心耳血栓形成均呈正相关(r=0.497,P=0.000;r=0.555,P=0.000)。心力衰竭、CHA_(2)DS_(2)-VASc评分、B型钠尿肽、尿酸、S100A4、PTX3是NVAF患者左心耳血栓形成的危险因素(P<0.05,P<0.01)。血清S100A4和PTX3联合预测NVAF患者左心耳血栓形成的ROC曲线下面积为0.949(95%CI:0.893~0.981)。结论NVAF患者血清S100A4、PTX3水平升高,与左心耳血栓形成有关,二者血清水平对左心耳血栓形成具有一定预测价值。

肺炎支原体肺炎患儿入院时血清S100钙结合蛋白、骨桥蛋白水平变化及其预后预测效能

目的观察肺炎支原体肺炎(MPP)患儿入院时血清S100钙结合蛋白A8/A9(S100A8/A9)、骨桥蛋白(OPN)水平,并分析其预后预测效能。方法MPP患儿211例[MPP组,其中重症肺炎支原体肺炎(SMPP)138例、一般肺炎支原体肺炎(GMPP)73例],同期健康体检儿童110例(对照组),采用酶联免疫吸附法检测两组入院时血清S100A8/A9、OPN。211例MPP患儿根据入院后28 d预后情况分为不良预后组(62例)和良好预后组(149例),采用单因素和多因素Logistic回归分析法分析MPP患儿入院后28 d不良预后的影响因素、危险因素,并绘制ROC评估血清S100A8/A9、OPN水平预测MPP患儿不良预后的效能。结果MPP组入院时血清S100A8/A9、OPN水平高于对照组(P均<0.05)。SMPP者血清S100A8/A9、OPN水平高于GMPP者(P均<0.05)。MPP患儿不良预后的独立危险因素为S100A8/A9、OPN、降钙素原及SMPP、住院时间延长(P均<0.05)。血清S100A8/A9截断值为1.01 ng/mL时,预测MPP患儿不良预后的AUC为0.789(95%CI 0.728~0.842),灵敏度为100.00%,特异度为48.32%;血清OPN截断值为24.13 ng/mL时,预测MPP患儿不良预后的AUC为0.781(95%CI 0.719~0.835),灵敏度为82.26%,特异度为60.40%;血清S100A8/A9联合OPN预测MPP患儿不良预后的AUC为0.867(95%CI 0.814~0.910),灵敏度为88.82%,特异度为76.81%。结论MPP患儿入院时血清S100A8/A9、OPN水平较健康儿童升高,SMPP患儿S100A8/A9、OPN水平较GMPP患儿升高,两指标与病情程度和不良预后有关,是MPP患儿入院后28 d不良预后的独立危险因素,联合检测较单独检测更有助于不良预后的评估。

肛瘘术后病人血清钙结合蛋白S100A8、促红细胞生成素表达与创面愈合、肛门功能的关系

目的 探究肛瘘术后病人血清钙结合蛋白S100A8(S100A8)、促红细胞生成素(EPO)表达与创面愈合、肛门功能的关系。方法 以2020年5月至2022年3月河北中医学院第二附属医院收治的96例肛瘘病人为研究对象,所有病人均接受肛瘘手术治疗。对比治疗前后病人血清S100A8、EPO水平及肛门失禁Wexner评分,比较不同血清S100A8、EPO水平病人疗效、创面愈合时间、14 d创面愈合率及Wexner评分;Pearson相关性分析血清S100A8、EPO与创面愈合时间、14 d创面愈合率及Wexner评分的相关性;多因素logistic回归分析肛瘘术效果的影响因素。结果 术后,病人血清S100A8较术前明显降低[(65.34±6.21)μg/L比(83.15±8.92)μg/L,P<0.05],EPO水平较术前明显升高[(52.36±5.67)U/L比(33.67±4.86)U/L,P<0.05],Wexner评分较术前明显降低[(9.74±2.22)分比(21.02±5.31)分,P<0.05]。术后血清S100A8低表达者较高表达者疗效更优(P<0.05),EPO高表达者较低表达者疗效更优(P<0.05)。术后血清S100A8高表达者较低表达者创面愈合时间更长(P<0.05),14 d创面愈合率更低(P<0.05),Wexner评分更高(P<0.05),血清S100A8与创面愈合时间呈正相关,与创面愈合率呈负相关,与Wexner评分呈正相关(均P<0.05)。术后血清EPO高表达者较低表达者创面愈合时间更短(P<0.05),14 d创面愈合率更高(P<0.05),Wexner评分更低(P<0.05),血清EPO与创面愈合时间呈负相关,与创面愈合率呈正相关,与Wexner评分呈负相关(均P<0.05)。多因素logistic回归分析显示,S100A8高表达、EPO低表达是影响肛瘘术后效果的危险因素。结论 肛瘘术后病人血清S100A8、EPO与病人创面愈合时间、14 d创面愈合率、Wexner评分显著相关,能够反应病人创面愈合及肛门功能情况。

S100钙结合蛋白β、视神经特异性烯醇化酶联合超声视神经鞘宽度对中重度创伤性颅脑损伤患者预后的预测价值

目的探讨S100钙结合蛋白β(S100β)、神经特异性烯醇化酶(NSE)联合超声视神经鞘宽度对中重度创伤性颅脑损伤患者临床预后的预测价值。方法选取2020年10月至2022年12月徐州医科大学附属宿迁医院收治的中重度创伤性颅脑损伤患者148例,根据治疗6个月后的格拉斯哥预后评分(GOS)分为预后良好组(4~5分)和预后不良组(1~3分)。检测患者入院时血清S100β、NSE水平及视神经鞘宽度,分析中重度创伤性颅脑损伤患者预后的影响因素,评估S100β、NSE联合超声视神经鞘宽度对中重度颅脑损伤患者临床预后的预测价值。结果148例中重度创伤性颅脑损伤患者中预后不良36例,占比24.32%。预后不良组患者的重度颅脑损伤占比、血肿体积≥40 ml占比及急性生理与慢性健康评分Ⅱ(APACHEⅡ)、S100β水平、NSE水平、视神经鞘宽度高于预后良好组(P<0.05)。严重程度(OR=4.509,95%CI:1.664~12.214)、血肿体积(OR=3.655,95%CI:1.349~9.901)、APACHEⅡ评分(OR=3.873,95%CI:1.429~10.491)、S100β(OR=4.586,95%CI:1.693~12.423)、NSE(OR=4.080,95%CI:1.506~11.052)、视神经鞘宽度(OR=4.540,95%CI:1.676~12.299)是中重度创伤性颅脑损伤患者预后不良的危险因素(P<0.05)。S100β、NSE及神经鞘宽度单一及三者联合预测颅脑损伤患者预后的曲线下面积分别为0.726、0.702、0.724、0.812。结论S100β、NSE联合超声下测量神经鞘宽度预测中重度颅脑损伤患者预后的效能良好。

钙结合蛋白S100A8在扩张皮肤中的实验研究

目的探究扩张皮肤中钙结合蛋白S100A8的分布特征及其在皮肤扩张过程中的作用。方法构建大鼠头部皮肤扩张模型,利用免疫荧光染色、qPCR、Western blotting等方法检测皮肤中S100A8的分布及表达水平。随后,体外实验对人角质形成细胞拉伸,模拟扩张皮肤在机械应力下的状态,利用qPCR、酶联免疫吸附测定等实验检测细胞中及其上清液中S100A8的含量。应用S100A8重组蛋白或角质形成细胞拉伸后的上清液对人成纤维细胞增殖、迁移、胶原蛋白合成进行检测。结果大鼠扩张表皮层S100A8表达水平较高(P<0.01);角质形成细胞经体外拉伸后分泌大量S100A8(P<0.05,P<0.01);重组蛋白S100A8能促进成纤维细胞的增殖、迁移及胶原合成(P<0.05,P<0.01),并且角质形成细胞拉伸后的上清液也能促进成纤维细胞胶原合成(P<0.01)。结论机械应力能上调扩张表皮层中S100A8的表达,并通过旁分泌作用促进成纤维细胞增殖、迁移及胶原合成。

维生素A、D对肉鸡血清钙结合蛋白浓度与胫骨和十二指肠组织中钙结合蛋白mRNA表达的影响

本试验主要研究不同的维生素A、D水平及其相互作用对肉鸡血清钙结合蛋白(CaBP)浓度与十二指肠和胫骨组织中CaBP mRNA表达的影响。采用4×4完全随机试验设计,选择8日龄健康AA雄性肉鸡384只按体重一致的原则分为16个日粮组,每组3个重复,每个重复8只鸡,试验期5周。维生素A设4个添加水平分别为1500、3000、15000和45000IU/kg,维生素D设4个添加水平分别为500、1250、2500和5000IU/kg。结果表明:1)随着日粮维生素A添加水平的增加,肉鸡血清CaBP含量、十二指肠和胫骨组织中CaBPmRNA表达量均呈现一次线性降低趋势(P=0.091,P=0.012,P=0.110),其中以45000IU/kg维生素A组最低;2)随着日粮维生素D添加水平的增加,肉鸡血清CaBP含量和十二指肠组织中CaBP mRNA的表达呈现一次线性增加趋势(P=0.310,P=0.140),其中以5000IU/kg维生素D组最高;3)维生素A、D相互作用对肉鸡血清CaBP浓度与十二指肠和胫骨组织中CaBP mRNA的表达均无显著的影响(P>0.05)。试验结果提示,过量维生素A引起肉鸡骨骼代谢异常的机理是过量维生素A抑制了肉鸡组织的CaBP mRNA表达,尤其对十二指肠组织的CaBP mRNA的表达有显著的抑制作用,引起血清CaBP浓度的降低,进而引起钙磷代谢发生紊乱。过量维生素A对肉鸡组织CaBP mRNA表达的抑制作用可能与过量维生素A对维生素D的拮抗作用有关。

血清N-乙酰神经氨酸、S100钙结合蛋白A1水平预测急性脑梗死患者预后的临床价值

[目的]探讨血清N-乙酰神经氨酸(Neu5Ac)及S100钙结合蛋白A1(S100A1)水平预测急性脑梗死(ACI)患者预后的作用.[方法]选择2021年8月—2022年8月间长葛市人民医院收治的80例ACI患者纳入研究组,根据病情分为轻度组(n=35)、中度型(n=30)和重度组(n=15),根据治疗后3个月的随访结果分为预后良好组(n=54)和预后不良组(n=26);另选择同时期行体格检查的70例健康者纳入对照组.所有研究对象均在入院后24 h内检测血清Neu5Ac、S100A1水平,并进行组间比较;采用受试者工作特征曲线(ROC)评估ACI患者预后临床效能.[结果]研究组血清Neu5Ac、S100A1水平均明显高于对照组(P<0.05);重度组血清Neu5Ac、S100A1水平明显高于中度组和轻度组(重度组>中度组>轻度组,P<0.05);预后不良组血清Neu5Ac、S100A1水平均明显高于预后良好组(P<0.05);血清Neu5Ac、S100A1预测ACI预后的AUC分别为0.830和0.882,二者联合预测的AUC为0.927.[结论]ACI患者血清Neu5Ac、S100A1水平均明显升高,其水平变化与病情及预后密切相关,两者联合应用预测ACI预后的效果更佳.

钙结合蛋白S100A8和S100A9的异源二聚体体外构建

目的体外构建S100A8和S100A9的异源二聚体(S100A8/S100A9),为其分子生物学功能研究提供依据。方法原核表达载体pET28 a-S100A8和pET28 a-S100A9分别转化感受态细胞BL21,并用异丙基硫化-β-D半-乳糖苷(IPTG)诱导表达蛋白,N i-NTA H is柱纯化蛋白,将等量纯化蛋白在一定钙离子浓度下室温孵育30 m in,通过SDS-PAGE和W estern b lot方法验证异源二聚体的形成。结果质粒pET28 a-S100A8和pET28 a-S100A9在相对分子质量约11 kD和14 kD处出现新生的蛋白条带,可溶性分析发现两个蛋白均可以以可溶的形式存在,纯化后得到了目的蛋白,S100A8和S100A9室温孵育后形成了异源二聚体。结论 S100A8和S100A9蛋白可以在体外形成异源二聚体。

可溶性耐药相关钙结合蛋白

可溶性耐药相关钙结合蛋白 (sorcin) ,是一种 2 2ku的胞浆蛋白 ,具有典型的“E Fhand”钙结合位点。sorcin可在多种耐药细胞株中高表达 ,推测可能是通过影响细胞内Ca2 + 浓度而参与耐药表型的维持 ,但sorcin表达的量与耐药程度之间的关系还不明了。在多种正常组织中也发现sorcin的表达 ,在心肌细胞中 ,sorcin通过影响Ca2 + 通道的活性而在兴奋 收缩偶联循环中发挥重要作用。