新型钙调神经磷酸酶抑制药伏环孢素临床研究进展

伏环孢素是一种口服新型钙调神经磷酸酶抑制药,是环孢素A的衍生物,主要用于治疗自身免疫性疾病,如银屑病、非感染性葡萄膜炎和器官移植后排斥反应。2021年1月,基于两个Ⅱ期和Ⅲ期临床试验的积极结果,FDA批准伏环孢素与标准治疗方案联合用于治疗成人活动性狼疮肾炎。目前,也有研究在探索伏环孢素用于新型冠状病毒感染的肾移植患者。本文对伏环孢素的作用机制、药动学和药效学、用法用量、联合用药和疾病中应用进行归纳总结,为其临床用药提供参考。

激素、钙调磷酸酶抑制剂和吗替麦考酚酯三联用药治疗激素耐药型肾病综合征患儿的疗效和安全性

背景少数病初即表现为激素耐药型的儿童原发性肾病综合征,临床治疗较困难,对于无明确遗传因素证据患儿,临床多采用激素联合一种或多种免疫抑制剂进行治疗,但目前尚无统一的药物添加原则或规范的治疗方案。目的观察激素联合钙调磷酸酶抑制剂、吗替麦考酚酯对初治激素耐药型肾病综合征患儿的治疗效果和安全性。设计回顾性非随机对照研究。方法纳入2014年1月至2020年12月北京大学第一医院儿科收治的初治激素耐药型肾病综合征患儿,除外遗传因素后,分为A组(激素+钙调磷酸酶抑制剂+吗替麦考酚酯三联治疗,三种药按先后顺序依次添加)、B组(激素+钙调磷酸酶抑制剂+吗替麦考酚酯三联治疗,激素联合钙调磷酸酶抑制剂治疗3个月以上无效,改为激素联合吗替麦考酚酯治疗3个月以上仍无效,最后三者联用)、C组(钙调磷酸酶抑制剂+吗替麦考酚酯治疗,因类固醇性糖尿病或青光眼停用激素)和D组(激素+钙调磷酸酶抑制剂+美罗华),比较各组的治疗效果。主要观察指标尿蛋白转阴时间、尿蛋白阴性时间百分比、平均复发次数。结果39例患儿纳入分析,A、B、C、D组分别为16、8、3、12例。A、B、C、D组尿蛋白转阴率分别为75.0%(12/16)、75.0%(6/8)、100%(3/3)和75.0%(9/12),组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。A、D组平均尿蛋白转阴时间低于B、C组,尿蛋白阴性时间百分比高于B、C组,差异均有统计学意义(P<0.05)。A和D组间平均尿蛋白转阴时间和尿蛋白阴性时间百分比差异均无统计学意义(P>0.05)。各组患儿用药期间未报告药物相关不良反应。结论对于少数原发性激素耐药型肾病综合征患儿,激素联合钙调磷酸酶抑制剂、吗替麦考酚酯三联治疗有较好的效果。

钙调神经磷酸酶抑制剂在性器官部位白癜风中的临床疗效及对TNF-α的影响

目的:观察钙调神经磷酸酶抑制剂在性器官部位白癜风患者的临床效果及对机体TNF-α水平的影响。方法:选取2013年8月至2016年8月医院诊治的性器官部位白癜风患者100例,采用随机数字方法分为对照组(n=50)和观察组(n=50)。对照组采用窄谱中波紫外线照射治疗,观察组联合钙调神经磷酸酶抑制剂治疗,采用平衡法利用r技术其对TNF-α水平进行测定,比较两组临床疗效及对TNF-α水平的影响。结果:两组治疗前皮损面积、色素积分差异无统计学意义(P>0.05);观察组治疗后皮损面积、色素积分、首次复色累及照射剂量、治疗次数少于对照组(P<0.05)。观察组治疗后TNF-α水平,显著低于对照组(P<0.05)。观察组治疗后不良反应发生率为6.0%,显著低于对照组的12.0%(P<0.05)。结论:与窄谱中波紫外线照射治疗相比,性器官部位白癜风患者利用钙调神经磷酸酶抑制剂治疗能降低TNF-α水平,值得推广应用。

钙调磷酸酶抑制剂预防经内镜逆行胰胆管造影术后胰腺炎的研究进展

急性胰腺炎是经内镜逆行胰胆管造影(ERCP)术后最常见的不良事件,尽管使用了多种预防性措施,其仍是临床面临的一个棘手问题。近年来,钙调磷酸酶在胰腺炎发病机制中的作用受到关注,其特异性抑制剂为ERCP术后胰腺炎的预防提供了新的很有前景的方向。本文就近年来钙调磷酸酶及其抑制剂与ERCP术后胰腺炎预防相关的基础和临床研究进展作一综述,以期为后续研究提供更多思路。

钙调神经磷酸酶信号通路相关抑制因子研究进展

钙调神经磷酸酶(calcineurin,CaN)信号通路是介导心肌肥厚的一条重要通路,随着研究的不断深入, 其相关抑制因子的研究也受到了更多关注.综述了Ca2+CaN-NFAT信号通路上、下游及CaN本身的部分抑制因子在抗心肌肥大过程中的作用,这些因子的研究开发对心肌肥厚的治疗具有重要意义.

钙调神经磷酸酶的抑制参与大鼠心脏缺血后处理的保护作用

目的:研究缺血后处理(I-postC)对缺血/再灌注(I/R)大鼠心肌钙网蛋白(CRT)及其下游钙调神经磷酸酶(CaN)信号转导途径的影响,探讨I-postC保护I/R心脏的机制。方法:采用Wistar大鼠在体心脏I/R模型,检测血流动力学及血浆乳酸脱氢酶(LDH)和肌酸激酶(CK-MB)含量,以TTC法和TUNEL法分别检测心肌梗死面积和细胞凋亡,发色底物法测定心肌CaN活性,免疫印迹法检测心肌组织CaN和CRT蛋白表达。结果:CaN抑制剂环孢霉素A显著缩小I/R所致的心肌梗死面积(P<0.05),抑制细胞凋亡(P<0.01),但对心功能无明显改善(P>0.05);与I/R组比较,I-postC组心功能改善(P<0.01),心肌梗死范围缩小(P<0.01),LDH和CK-MB漏出减少(P<0.01),细胞凋亡率降低(P<0.01),并显著抑制I/R诱导的心肌组织CaN活性升高(P<0.05)及CaN和CRT表达上调(P<0.05),与缺血预处理组比较差异无显著,但对I/R心肌的保护作用强于单纯环孢霉素A组。结论:I-postC至少部分通过抑制CRT-CaN信号途径,减轻大鼠心肌I/R损伤。

醛固酮上调大鼠组织钙调神经磷酸酶活性及抑制血浆一氧化氮水平

目的 研究醛固酮对大鼠重要脏器心、脑、肾、脾、肺和肝脏中钙调神经磷酸酶(CaN)活性及血浆血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、内皮素(ET-1)和一氧化氮(NO)水平的影响，探讨醛固酮在CaN依赖的信号传导通路中的作用。方法 取21只雄性Wistar大鼠随机分为3组：醛固酮(Ald)组(腹腔内注射Ald 18μg／d 4周)、环孢霉素A(CsA)干预组(以Ald处理同时腹腔内给予CsA 5mg／kg·d注射共4周)及正常对照组。采用放免法测定血浆AngⅡ、Ald和ET-1浓度，采用比色测定NO浓度及大鼠各组织器官CaN活性。结果 Ald组大鼠血浆NO_3^-浓度较对照组明显下降(P＜0.05)，CsA干预后血NO_3^-浓度明显回升(P＜0.05)。各组AngⅡ、ET-1浓度无明显变化。Ald组大鼠心、脾、肾、肺、脑和肝脏中CaN活性较正常对照组分别上升147％、65％、38％、100％、43％和50％(均P＜0.05)，CsA干预显著缓解上述组织器官CaN活性的上升(P＜0.05)。结论 醛固酮能上调大鼠重要组织脏器CaN活性并抑制血浆NO水平，可能在激活CaN依赖的信号传导通路中具有重要作用。

应用尿微量蛋白检测评价钙调磷酸酶抑制剂类抗排异药物对肝移植受者的肾毒性损伤

目的用尿微量蛋白检测评价肝移植受者使用钙调磷酸酶抑制剂（CNI）类抗排异药物他克莫司（FKS06）及环孢素A（CsA）治疗后对肾脏毒性损伤程度的差异。方法用免疫散射比浊法检测138例使用FKS06、CsA的肝移植受者和30例健康对照者尿β2-微球蛋白（β2-MG）、α1-微球蛋白（α1-MG）、微量白蛋白（mAlb）、转铁蛋白（TF）和IgG浓度；用酶放大免疫分析法（EMIT）检测所有肝移植受者FKS06、CsA的血药浓度，分析FKS06组和CsA组尿微量蛋白的结果，比较2组间肾毒性损伤的特点。结果除CsA治疗组β2- MG与健康对照组比较无差异外，其他项目2组结果均显著高于健康对照组（P〈0．05）。FKS06治疗组5项结果均显著高于CsA治疗组（P〈0．05）。2组的肾脏损害都以单纯肾小管损害和混合性损害为主（P〈0．025）。术后0—1年和1～3年受者FKS06组5项尿微量蛋白结果均显著高于CsA组（P〈0．05）。肾小球蛋白尿、肾小管蛋白尿和混合蛋白尿在不同用药组之间无差异（P〉0．05）。但总异常率FKS06组显著高于CsA组（P〈0．05）。结论CNI对肝移植受者有明显的肾毒性损伤，其药物毒性损害以肾小管损害和混合性损害为主；FKS06对肝移植受者的肾毒性作用明显强于CsA；尿微量蛋白是评价CNI。肾毒性损伤的敏感指标，可为临床观察提供早期客观依据。

钙调神经磷酸酶抑制剂对过氧化氢诱导的干细胞凋亡的影响

目的比较钙调神经磷酸酶(CaN)抑制剂FK-506和环孢菌素A(CsA)保护脂肪组织来源干细胞(AT-DSCs)抗凋亡作用及可能机制。方法采用过氧化氢(H2O2)[分浓度0(对照组)、50、100、200、300、400μmol/L H2O26组]体外诱导AT-DSCs凋亡模型,凋亡模型的评价采用磷脂酰丝氨酸结合蛋白-异硫氰酸荧光素(AnnexinV-FITC)/碘化丙啶(PI)双染流式细胞术和线粒体内跨膜电位测定法;观察AT-DSCs凋亡细胞形态;AT-DSCs细胞活性检测采用CCK-8试剂;细胞色素C的表达采用Western blot分析。结果与对照组比较,引起细胞凋亡率最高的是浓度100μmol/L H2O2(15.60%±8.50%vs 4.50%±0.88%;P<0.01);但CaN抑制剂FK-506(质量浓度1mg/mL)(9.8%±1.3%vs17.0%±1.6%,P<0.01)和CsA(质量浓度1mg/mL)(12.2%±1.2%vs 17.0%±1.6%,P<0.01)预处理后细胞凋亡率均明显下降,细胞存活率明显提高(P<0.01)。Western blot结果显示,CaN抑制剂FK-506(质量浓度1 mg/mL)和CsA(质量浓度1 mg/mL)可完全抑制H2O2诱导的细胞色素C释放。结论 CaN抑制剂能保护H2O2诱导的干细胞凋亡。可能机制是CaN抑制剂能抑制细胞凋亡,提高细胞存活率,下调细胞色素C的释放。

阿尔茨海默病药物治疗的新靶点钙调神经磷酸酶

简要介绍了钙调神经磷酸酶的结构特征和生化特性 ,综述了近几年来它在突触可塑性和阿尔茨海默病方面的研究进展 ,说明了其在记忆形成中所起的重要作用及其活力降低时出现的脑部疾病。基于这些理论基础 。

替米沙坦抑制钙调神经磷酸酶调控牵张刺激诱导乳鼠心房肌细胞Cav1.2mRNA的表达

目的探究牵张刺激对乳鼠心房肌细胞L型钙离子通道(Ca-L)Cav 1.2 mRNA表达的影响以及替米沙坦(Tel)的调控作用。方法 1 d龄SD乳鼠,分离心房肌细胞,于细胞牵引装置培养24 h分组干预:(1)对照组:不予牵张刺激;(2)牵张组:牵张增加16%硅胶膜面积48 h;(3)Tel组:予Tel 1μmol/L干预1 h,继之牵张48 h;(4)环孢素A(CsA)组:CsA 10μg/mL干预1 h,继之牵张48 h。定量分析牵张组与对照组细胞蛋白/DNA比值,行牵张有效性鉴定。免疫印迹法检测钙调神经磷酸酶A亚基(CaNA)表达;适时荧光定量逆转录PCR检测Cav 1.2 mRNA表达。结果牵张刺激明显增加心房肌细胞蛋白/DNA比值,促CaNA蛋白表达,抑制Cav 1.2 mRNA表达;Tel和CsA干预明显抑制牵张刺激此效应。结论替米沙坦可通过抑制钙调神经磷酸酶进而调控静态牵张刺激诱导的心房肌细胞Cav 1.2 mRNA表达。

环孢霉素A抑制肾性高血压大鼠重要脏器钙调神经磷酸酶活化

目的研究一肾一夹肾性高血压大鼠组织钙调神经磷酸酶(calcineurin,CaN)活性变化及环孢霉素A(CyclosporineA,CsA)的调控作用。方法取20只Wistar大鼠随机分为3组:假手术组(n=6),一肾一夹手术组(n=7)和CsA干预组(n=7)。采用放免法测定血浆血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)、醛固酮(Aldosterone,Ald)和内皮素(endothelin,ET1)浓度,采用比色测定一氧化氮(NO)浓度。以PNPP为底物测定术后4周大鼠各组织器官CaN活性。结果肾性高血压大鼠心脏、脾、肾脏、肺、脑CaN活性较假手术组显著升高(均P<0.05),干预组上述组织器官CaN活性较手术组显著下降(P<0.05)。肾性高血压大鼠组肝脏CaN活性较假手术组显著下降,环孢霉素A干预组肝细胞CaN活性较手术组继续显著下降(P<0.05)。各组大鼠主动脉中CaN活性无明显变化。各组大鼠血浆Ald、AngⅡ、ET1及NO浓度亦无明显变化。结论肾性高血压大鼠心、脑、肾、脾、肺脏组织CaN活性均显著升高,CsA对肾性高血压大鼠上述各组织脏器CaN活性具有广泛的抑制作用。

泛素蛋白酶体抑制剂抑制钙调神经磷酸酶依赖的心肌细胞肥大

目的研究泛素蛋白酶体抑制剂MG262对钙调神经磷酸酶信号通路的影响,探讨其抑制心肌细胞肥大的机制。方法在去甲肾上腺素诱导培养的乳鼠肥大心肌细胞中加入MG262,通过Phalloidin染色观察细胞的形态,RNA Dot Blot检测胚胎蛋白基因表达,Western blot检测细胞中钙调神经磷酸酶蛋白含量,免疫荧光标记观察活化T细胞核因子c4(NFATc4)蛋白在细胞内分布。结果去甲肾上腺素使细胞面积增大近1.1倍,胚胎基因心房利钠因子(ANF)、脑钠肽(BNP)、β肌球蛋白重链(β-MHC)的mRNA表达上调,细胞核内NFATc4蛋白表达水平增加。MG262明显抑制去甲肾上腺素诱导的细胞肥大(P<0.05)和ANP、BNP、β-MHC的mRNA表达上调(P<0.05),细胞面积下降了33%;同时MG262使去甲肾上腺素诱导的细胞钙调神经磷酸酶蛋白表达水平下降,抑制NFATc4核内转位。结论 MG262可能通过抑制钙调神经磷酸酶信号通路,减轻心肌细胞肥大。

造血干细胞移植术后钙调神经磷酸酶抑制剂相关的后部可逆性脑病综合征临床分析

目的:分析并探讨钙调神经磷酸酶抑制剂(CNI)相关的后部可逆性脑病综合征(PRES)的临床特点、处理方法和预后。方法:对171例异基因造血干细胞移植术患者中发生PRES的临床资料、治疗及转归等进行分析总结。结果:5例(2.9%)在进行造血干细胞移植后合并CNI相关的PRES,年龄16～28岁,中位年龄20岁。5例均为非亲缘及亲缘非全相合移植,其中2例接受非血缘全相合移植,3例接受亲缘非全相合移植。5例的临床表现以意识障碍、抽搐为主,2例CNI浓度偏高,5例头颅MRI的T2加权像均表现为白质区多发或片状高信号病灶。出现PRES后,所有患者均停用CNI并予对症治疗。1例患者因脑出血死亡,4例患者病情缓解且无复发。结论:PRES是CNI少见的中枢神经系统并发症,及早发现,处理及时,预后较佳。

阿托伐他汀抑制大鼠心肌成纤维细胞钙调神经磷酸酶的表达

目的探讨钙调神经磷酸酶(CaN)在心肌纤维化中的作用及阿托伐他汀(Ato)抗心肌纤维化的机制。方法采用体外新生SD大鼠心肌成纤维细胞(CFs)培养,以醛固酮(Ald)诱导其增殖和胶原合成,并加入Ato干预,应用RT-PCR和Westernblot分别测定CaNmRNA和蛋白表达,并观察加入焦磷酸法尼酯(FPP)和焦磷酸牛儿基牛儿酯(GGPP)分别干预Ato对RAS和RHO蛋白的抑制作用。结果Ald促进CFs增殖和增加羟脯氨酸含量,同时CaNmRNA和蛋白表达均升高,而Ato显著缓解上述变化。Ald+Ato+FPP组的CaNmRNA和蛋白表达均高于Ald+Ato组。结论Ato可通过CaN依赖的信号通路抑制Ald诱导的心肌纤维化,其作用与Ato通过甲羟戊酸通路抑制RAS蛋白活性有关。

醋柳黄酮通过钙调神经磷酸酶途径抑制心肌肥厚的研究

目的探讨醋柳黄酮是否通过钙调神经磷酸酶途径抑制心肌肥厚。方法通过腹主动脉缩窄法构建高血压心肌肥厚大鼠模型,随机分成4组(n=8):对照组(Control组,饮用水10 mL/(kg·d)),卡托普利组(CP组,100 mg/(kg·d)),醋柳黄酮组(TFH组,TFH 30mg/(kg·d)),联合组(Com组,CP 60 mg/(kg·d)+TFH 20 mg/(kg·d)),另8只大鼠作为假手术组(Sham组,饮用水10 mL/(kg·d)),连续灌胃干预6周。采用套尾法测量术前,术后1周、7周大鼠尾动脉血压。测量术后7周各组大鼠左心室质量/体质量比、钙调神经磷酸酶(CaN)活性及CaN-mRNA表达。结果腹主动脉缩窄术后的大鼠血压、左心室质量/体质量比、CaN活性及CaN-mRNA表达均明显升高(P均<0.05),TFH能够明显抑制这些变化(P均<0.05),并且TFH和CP有协同作用。结论醋柳黄酮具有显著降压功效,能抑制心肌肥厚的发生,其机制可能与抑制钙调神经磷酸酶的表达及其活性相关,醋柳黄酮与卡托普利具有协同作用。

吴茱萸总碱抑制大鼠左室肥厚及对钙调神经磷酸酶信号通路的影响

目的观察吴茱萸总碱对大鼠腹主动脉缩窄术后压力超负荷所致心肌肥厚的抑制作用,及对钙调神经磷酸酶信号通路的影响。方法采用腹主动脉缩窄制备SD大鼠左室肥厚模型。实验分为假手术组,模型组,吴茱萸总碱低(10 mg/kg),中(20 mg/kg)、高剂量组(40 mg/kg)和L-arg(200 mg/kg)阳性药对照组。模型制备次日大鼠灌胃给药4周,记录大鼠体重(BW),测量左室重量(LVW),计算左室肥厚指数(LWHI),行病理切片观察心肌肥厚,以明确吴茱萸总碱防治左室肥厚效应。检测左室血流动力学参数,实时荧光定量PCR检测心肌ANF、CaN mRNA的表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠明显增加LVW和LWHI(P<0.05),病理学见左室心肌结构和心肌细胞严重受损,左室内压峰值(LVSP)和舒张期末压(LVEDP)明显升高(P<0.05),而±dp/dt max显著降低(P<0.01)。与模型组比较,吴茱萸总碱中、高剂量明显抑制大鼠因腹主动脉缩窄所致LVW、LWHI增加,LVSP、LVEDP的升高和±dp/dt max降低,明显减轻心肌病理损伤,下调ANF mRNA和CaN mRNA的表达(P<0.01)。结论吴茱萸总碱20 mg/kg和40 mg/kg可防治腹主动脉缩窄所致大鼠心肌肥大,其机制可能与抑制钙调磷酸神经酶信号通路有关。

二苯乙烯苷通过降低钙调神经磷酸酶的活性抑制心肌成纤维细胞的增殖

目的:研究二苯乙烯苷(2,3,4’,5-tetrahydroxystilbene-2-O-β-D-glucoside,TSG)对精氨酸加压素(argininevasopressin,AVP)引起的心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasts,CFs)增殖的抑制作用及其相关信号通路。方法:采用MTT法观察TSG对AVP引起的CFs增殖的抑制作用。定磷法检测细胞内钙调神经磷酸酶(calcineurin,CaN)的活性,WesternBlot测定其蛋白表达。结果:30μmol/L、100μmol/L的TSG明显抑制100 nmol/L AVP引起的CFs的增殖(P<0.01),而3μmol/L、10μmol/L的TSG则对CFs的增殖无明显影响。CaN的活性在100 nmol/L AVP刺激30 min后达到最高(P<0.05),而30μmol/L TSG能抑制CaN活性的增高(P<0.05);CaN蛋白水平在AVP刺激48 h后明显升高(P<0.05),而这种升高作用能被30μmol/L TSG抑制(P<0.05)。结论:TSG可以抑制AVP诱导的CFs的增殖。TSG可能是通过减少CaN活化和蛋白表达抑制CFs的增殖。

钙调磷酸酶抑制剂长期治疗对Ⅴ型狼疮性肾炎患者肾功能的影响

目的:回顾性分析长期使用钙调磷酸酶抑制剂(CNI)对膜性狼疮性肾炎(MLN)患者的临床疗效及对血清肌酐(SCr)的影响。方法:收集2010年1月至2020年1月在国家肾脏疾病临床医学研究中心确诊为MLN的患者。根据CNI使用情况,分为长期治疗组、短期治疗组及未使用CNI组。观察CNI诱导期疗效,并比较三组患者基线临床病理特点及治疗期间SCr变化情况。结果:本研究共纳入456例MLN患者。平均随访78月,累积411例(90.1%)患者获得肾脏缓解,有297例患者使用CNI诱导治疗,缓解率84.2%。长期治疗组患者肾病综合征患者占比(P<0.001)、尿蛋白定量(P<0.001)、估算的肾小球滤过率(eGFR)(P<0.001)及血红蛋白(P=0.033)及总胆固醇(P=0.001)高于其他组,而年龄(P<0.001)、血清白蛋白(P<0.001)及球蛋白(P<0.001)更低;未使用CNI组的肾小球球性硬化比例(P=0.011)及慢性指数(P=0.016)更高,三组患者其他基线特征无统计学差异。至随访末,SCr较基线增高30.4%,三组SCr分别升高22.0%(67.18μmol/L vs 55.69μmol/L)、35.2%(76.02μmol/L vs 56.58μmol/L)和38.9%(92.82μmol/L vs 66.3μmol/L),三组SCr的增长率无统计学差异。结论:CNI诱导治疗MLN临床缓解率高,长期使用对SCr影响小。

钙调磷酸酶抑制剂类药物在难治性肾病综合征中的应用

钙调磷酸酶抑制剂（CNI）是近年来出现并在临床上广泛应用的一类免疫抑制剂，其中环孢素A（CsA）和他克莫司（TAC）是最常用于肾脏病治疗的CNIs。它们对细胞免疫和体液免疫具有相似的抑制作用。药物一受体复合物特异性和竞争性结合并抑制钙调酶是迄今发现的唯一受Ca^2＋／钙调素调节的丝／苏氨酸蛋白磷酸酶，