大型立式钠泵整机水介质试验台设计

本文通过对大型立式钠泵试验对象、试验内容的研究,结合以往大型核泵试验台的设计经验,对大型钠泵立式试验台进行了全面研究梳理,对此种新型试验台的试验原理、系统组成和主要设备进行了介绍,提出了大型立式钠泵试验台的主要功能要求,并总结了试验台设计过程中的关键技术和创新点,可为类似试验台位的设计和建造提供指导。

钠泵α1亚单位基因在盐敏感性高血压中的作用

目的 探讨钠泵α1亚单位基因在盐敏感性高血压中的作用,为探明盐敏感性高血压的发病机制及可能的治疗靶点提供思路。方法 选取原发性高血压Ⅰ、Ⅱ期患者,经限盐试验筛选盐敏感患者与非盐敏感患者各27例,选择血压正常的27例健康体检者作为对照组,比较三组之间的一般人口学资料、血生化、24 h尿电解质含量及钠泵α1亚单位基因的mRNA和蛋白表达水平等指标的差异。结果 盐敏感组及非盐敏感组的24 h收缩压、24 h舒张压及平均动脉压均无显著差异,但盐敏感组夜间收缩压及舒张压下降百分比显著低于非盐敏感组。盐敏感组的24 h尿钠含量显著高于非盐敏感组,三组患者的24 h尿钠钾代谢比存在显著差异,盐敏感组的尿钠钾排泄比显著高于对照组。盐敏感组和对照组的醛固酮肾素比值有统计学差异。盐敏感组的钠泵α1亚单位基因mRNA相对表达量低于对照组。盐敏感组、非盐敏感组钠泵α亚单位基因蛋白相对表达量低于对照组。结论 盐敏感高血压钠泵α1亚单位基因表达受限,其表达水平可能与盐敏感高血压的疾病进展紧密相关。

抗钠泵α2亚单位截断性片段多肽抗体的制备与鉴定

目的采用多肽制备技术和免疫学技术制备抗钠泵α2亚单位截断性片段及其抗体,为检测和研究钠泵α2亚单位的组织学分布及其功能研究提供实验基础。方法根据NCBI-Genebank获得大鼠钠泵α2亚单位M1~M2膜外区截断性片段目的多肽（LAAMEDEPSNDN）,采用9-氟甲氧羰基（Fmoc）固相合成法合成目的多肽,并采用碳化二亚胺法制备出多肽与孔戚血蓝素复合物,免疫新西兰大白兔,免疫4次后获得抗血清,测定其效价。随后采用protein A纯化Ig G抗体,并将其用于大鼠主动脉血管平滑肌细胞钠泵α2亚单的组织学检测。结果（1）人工合成的大鼠钠泵α2亚单位截断性片段长13氨基酸残基（LAAMEDEPSNDN-C）,理论相对分子质量：1408.48,质谱实测相对分子质量：1407.90;高效色谱分析纯度HPLC纯度〉85.5%;（2）ELISA法检测免疫后兔子的抗血清效价均大于1∶512 000,蛋白A亲和纯化获得亲和纯化抗体浓度为0.965 mg/ml,按照1∶1000稀释（终浓度1μg/ml）,ELISA检测抗体效价为1∶256 000;（3）该抗体按照1∶100~1∶200稀释可用于免疫细胞学检测。结论成功制备高效价抗钠泵α2亚单位截断性片段抗体可用于钠泵α2亚单位的ELISA和免疫细胞化学实验,为钠泵α2亚单位的组织细胞学检测和功能研究提供新的实验基础。

冬凌草甲素对肿瘤细胞钠泵活性的影响

以（８６）Ｒｂ示踪法，观察３种肿瘤细胞的钠系转运活性及冬凌草甲素（Ｏｒｉｄ．）对其的影响。结果表明：（Ｏｒｉｄ．）腹腔注射及体外作用均能显著抑制艾氏腹水瘤细胞的钠系转运功能；体外作用１２小时，半数抑制浓度约为５μｇ／ｍｌ，在此浓度下，药物作用１小时的抑制率为２２％。同时测定人癌细胞系７９０１，Ｈｅｐ－２的钠泵活性高于人胚肺纤维母细胞系ＳＬ，且对Ｏｒｉｄ．较敏感。本文结果提示Ｏｒｉｄ．抗癌机理可能与钠泵活性抑制有关，从生物膜转运角度进一步证明Ｏｒｉｄ．的抗肿瘤作用。

哇巴因抑制钠泵β1亚单位和VE-cadherin减弱血管内皮细胞连接功能

目的探讨钠泵抑制剂哇巴因对血管内皮细胞连接的影响及机制。方法以人脐静脉内皮细胞(HUVECs)为靶细胞,Hoechst33342/PI双荧光染色法观察哇巴因作用后细胞凋亡或坏死特征,透射电镜和光镜观察细胞形态结构变化。应用半定量聚合酶链反应检测钠泵α1亚单位、β1亚单位、VE-cadherin和SnailmRNA的表达。结果0.1μmol.L-1哇巴因作用HUVECs24～48h,细胞死亡以凋亡为主,10μmol·L-1哇巴因作用24h,引起细胞坏死;对照组细胞间的细胞连接数量多,结构清晰,而经哇巴因作用后,细胞连接丧失,细胞脱落。哇巴因作用HUVECs后,钠泵α1亚单位和Snail表达上调,β1亚单位和VE-cadherin表达下降,其改变均呈剂量和时间依赖性。结论哇巴因通过下调血管内皮细胞钠泵β1亚单位和VE-cadherin的表达使细胞连接功能减弱。

高血压对大鼠脑基底动脉收缩和钠泵活性的影响

目的探讨高血压对大鼠脑血管收缩性的影响及其与钠泵活性的关系。方法取♂Wistar大鼠(WR)和自发性高血压大鼠(SHR)基底动脉环,通过Multi Myograph张力换能系统记录血管张力变化,比较两种大鼠离体脑动脉对KCl和5-羟色胺(5-HT)的收缩反应,分析高血压病变对脑血管收缩性和钠泵活性的影响。结果与WR基底动脉相比,SHR基底动脉的KCl和5-HT量效曲线明显右移,再复K+所致血管舒张作用减弱,提示高血压病变可明显降低脑血管钠泵活性及KCl和5-HT的收缩反应;哇巴因(Ouabain,OUA)浓度依赖性收缩SHR脑血管,其量效关系曲线可经两点结合模型进行最佳拟合,Kd分别为:1.7×10^(-8)mol·L^(-1)和1.6×10^(-5)mol·L^(-1),表明SHR脑基底动脉上存在高、低亲和力两种不同功能的钠泵。用5×10^(-7)mol·L^(-1)和10^(-4)mol·L^(-1)的OUA分别抑制高、低亲和力钠泵,仅能在SHR而非WR脑血管明显左移KCl和5-HT量效曲线,表明OUA可明显增强KCl和5-HT对脑血管的收缩作用,且OUA增强5-HT收缩SHR脑血管的作用呈明显的浓度依赖性(r=0.9393,P<0.05);在SHR脑血管,这两个浓度OUA对KCl量效曲线的左移幅度无明显差别,而对5-HT收缩量效曲线的左移幅度却有明显不同,提示仅高亲和力钠泵介导了SHR脑血管对KCl的收缩反应,而SHR脑血管对5-HT的收缩反应则由高、低亲和力两种钠泵共同参与。结论高血压病变可明显降低脑血管对血管收缩剂的反应性,其机制可能与高血压所致钠泵活性降低或钠泵对OUA敏感性增加有关。

促甲状腺激素受体及碘钠泵在人甲状腺癌中的表达及临床意义

目的研究促甲状腺激素受体(TSHR)、碘钠泵(NIS)在甲状腺癌中的表达,探讨其在人甲状腺癌治疗中的作用。方法采用免疫组织化学SABC法,检测TSHR、NIS在45例人正常甲状腺组织、45例乳头状甲状腺癌及21例未分化甲状腺癌中的表达。结果TSHR及NIS在人正常甲状腺组织的表达均高于其在乳头状甲状腺癌和未分化甲状腺癌中的表达。在人正常甲状腺组织,TSHR和NIS蛋白均定位于滤泡上皮细胞膜上;在乳头状甲状腺癌组织,TSHR蛋白定位于细胞膜和细胞质中,NIS蛋白仅在细胞质中有阳性表达;在未分化甲状腺癌,TSHR和NIS均定位于细胞质。结论TSHR、NIS的定位及表达水平与甲状腺癌的分化程度密切相关,可能成为预测甲状腺癌促甲状腺激素抑制治疗及131I治疗是否有效的指标。

哇巴因对人血管内皮细胞死亡和钠泵α1、β1亚单位表达的影响

目的:研究钠泵抑制剂哇巴因(ouabain)对人血管内皮细胞死亡的影响及其作用机制。方法:以脐静脉内皮细胞系ECV304为靶细胞,应用MTT实验检测哇巴因对细胞生长的作用;采用Hoechst33342/PI双荧光染色、透射电镜和DNA琼脂糖凝胶电泳等分析细胞死亡特征,半定量RT-PCR法检测钠泵α1和β1亚单位mRNA的表达。结果:哇巴因以浓度和作用时间依赖的方式抑制ECV304细胞生长。10μmol/L哇巴因作用24 h,引起细胞坏死;0.1μmol/L哇巴因作用24~48 h,细胞明显脱落,细胞间连接丧失,细胞出现染色质凝集、分布于核膜内缘、DNA裂解等凋亡特征。哇巴因能明显上调ECV304细胞钠泵α1亚单位mRNA的表达,下调β1亚单位mRNA表达,且两者均呈时间依赖性。结论:哇巴因能诱导人血管内皮细胞ECV304死亡,其上调钠泵α1亚单位表达、下调β1亚单位表达,可能与亚单位介导信号传递、降低细胞黏附有关。

肝细胞膜钙泵与钠泵活性变化在胆红素钙结石形成中的作用

目的 探讨肝细胞膜钙泵和钠泵活性变化在胆红素钙结石形成中的作用。方法 建立胆红素钙结石兔模型 ,对照组 2 8只 ,胆道不全梗阻组 (BO) 36只 ,胆道不全梗阻加感染组 (BOI) 39只 ,各组再按术后处死时间 (3、7、14和 2 0天 )分组 ,动态测定各组各时相肝细胞膜钙泵、钠泵活性及肝细胞钙含量。结果 BOI组及 BO组肝细胞钙进行性增多 ,而肝细胞膜钙泵、钠泵活性呈进行性下降 ,与对照组相比差异有显著性 (P<0 .0 1) ,BOI组上述变化较 BO组明显 (P<0 .0 5 )。结论 兔胆红素钙结石形成过程中存在肝细胞膜钙泵和钠泵活性渐进性下降。钙泵、钠泵活性下降引起肝细胞钙超负荷 。

二回路系统钠泵流体动静压混合润滑轴承的润滑机制及动力学特性

对某型工程中的复杂二回路主循环系统钠泵流体动静压混合润滑轴承进行分析。采用流体动静压润滑理论,利用高级旋转机械动力学分析软件包ARMD对该型轴承进行建模和分析,揭示该型轴承相对于传统润滑轴承润滑机制的特殊性,研究不同外载荷、不同转速、不同初始偏心率下钠泵轴承的润滑性能参数及动力学特性参数的演化规律。研究结果表明:外载荷、转速和初始偏心率是影响钠泵轴承润滑性能的重要因素,最大压力、功耗、温升及刚度阻尼系数随外载荷的增大而增大,随初始偏心率增大而略有降低;最小膜厚则反之。该研究为进一步开展钠泵轴承-核主泵转子耦合系统的动力学特性的研究奠定基础。

芦荟多糖对荷瘤小鼠肿瘤细胞钠泵的影响

报道了库拉索芦荟多糖、木立多糖对S1 80 小鼠肿瘤细胞膜Na+ ,K+ -ATPase的活性影响。结果表明 ,二者均能明显抑制荷瘤小鼠肿瘤细胞膜上Na+ ,K+ -ATPase的活性。芦荟多糖的这一作用改变了荷瘤小鼠细胞膜的物质、能量平衡 ,进而降低了肿瘤细胞的恶性程度。

大鼠钠泵α2亚单位M1-M2膜外区多肽体外活性鉴定

本文旨在研究含大鼠钠泵α2亚单位M1-M2膜外区的多肽片段（peptide containing rat sodium pumpα2subunit M1-M2extramembrane fragment,RES2衍生物）是否具有与内源性钠泵抑制因子结合以及改善钠泵α亚单位活性的作用。采用Fmoc固相合成法合成多肽（Leu-Ala-Ala-Met-Glu-Asp-Glu-Pro-Ser-Asn-Asp-Asn-Gly-Gly-Gly-Ser）,产物经高效液相色谱技术纯化,并进行质谱分析。采用放射性配体-受体结合法检测其与哇巴因的结合能力,进而采用人红细胞86Rb摄取实验检测其生物学活性。结果显示,RES2衍生物与3H-哇巴因具有一定的结合能力,其平衡解离常数（Kd）为38.46nmol/L,IC50为6.353nmol/L。RES2衍生物可以阻断哇巴因对红细胞膜Na＋,K＋-ATPase的抑制作用,使红细胞86Rb摄取率从38.53%上升到83.69%左右,并呈一定的剂量依赖关系。因此,RES2衍生物不仅具有体外结合活性,而且具有改善钠泵活性的生物学效应,为其成为有效的抗高血压药物提供科学依据。

哇巴因与地高辛对大鼠垂体钠泵α亚单位基因表达影响的对比研究

目的 对比研究哇巴因与地高辛对大鼠垂体钠泵(Na+,K+ ATP酶 )α亚单位基因表达的影响 ,探讨内源性哇巴因 (EO)的生物学效应以及洋地黄类药物药理作用的分子机制。方法 长期给予大鼠注射小剂量哇巴因 (2 0 μg·kg-1·d-1)与地高辛 (32 μg·kg-1·d-1) ,动态观察大鼠血压变化 ;分别应用分子生物学RT PCR及免疫组织化学技术 ,探讨各组大鼠垂体钠泵α1、α2 及α3 亚单位mRNA及蛋白水平基因表达的改变。结果 哇巴因与地高辛对大鼠血压的影响存在着明显差别 ,长期给予大鼠注射小剂量哇巴因可使大鼠血压升高 ,而地高辛对大鼠血压无影响。哇巴因与地高辛对垂体钠泵α亚单位表达的影响存在明显不同 :在mRNA水平 ,哇巴因使α1、α2 及α3 亚单位的表达均明显减弱 ,而地高辛仅使α3 亚单位表达减弱 ;在蛋白水平 ,哇巴因使α2 及α3 亚单位表达减弱 ,α1亚单位无改变 ,而地高辛使α1及α3 亚单位表达减弱 ,α2 亚单位无改变。结论 哇巴因在高血压发病中可能起着重要作用 ;哇巴因与地高辛可导致不同的钠泵基因表达改变 ,为进一步揭示EO生理与病理作用以及洋地黄类药物药理与毒理作用的分子机制提供了理论及实验依据。

高钠盐摄入对钠泵抑制因子水平和钠-钾泵活性的影响

目的 :探讨长期摄入高钠盐饮食引发高血压的机理。方法 :以普通饲料和 1.5 % Na Cl溶液饲喂雄性 Sprague-Dawley大鼠 6周 ,颈动脉插管直接测量血压 ,EL ISA检测血浆中、肾上腺和下丘脑组织中哇巴因样物质 (oubain- likecom pound,OL C)和前海葱苷原 A样物质 (proscillaridin- likecom pound,PL C)免疫反应性 ,在有和无哇巴因存在的条件下水解 ATP测定 Na+ - K+ - ATP酶活性。结果 :高血压组动脉血压较对照组明显升高 (P<0 .0 0 1) ,体重、肾重、肾重 /体重比率、血浆中及肾上腺和下丘脑组织中OL C和 PL C水平分别明显高于对照组 (P<0 .0 0 1) ,肾脏Na+ - K+ - ATP酶活性明显低于对照组 (P<0 .0 0 1)。结论 :长期摄入高钠盐饮食可能通过体液容量扩张刺激肾上腺和下丘脑分泌 OL C和 PL C入血循环 ,抑制组织细胞特别是血管平滑肌细胞膜 Na+ - K+ - ATP酶活性 ,引起细胞内 Na+和游离 Ca2 +浓度升高而导致血压升高。

龙葵总碱对肿瘤细胞膜钠泵及钙泵活性影响的研究

目的:观察龙葵总碱对S180小鼠及H22小鼠肿瘤细胞膜Na+,K+-ATPase及Ca++,Mg++- ATPase活性的影响。方法:荷瘤小鼠分为治疗组(高剂量、中剂量、低剂量)和对照组(生理盐水组、环磷酰胺组),分别测定各组肿瘤细胞膜的Na+,K+-ATPase及Ca++,Mg++-ATPase活性。结果:龙葵总碱对S180小鼠及H22小鼠肿瘤细胞膜Na+,K+-ATPase及Ca++,Mg++-ATPase活性均有明显的抑制作用,并且其抑制作用呈量效正相关。结论:龙葵总碱这一作用可能是其抗肿瘤作用机理之一。

肝细胞膜钠泵活性变化在胆红素钙结石成石过程中的作用

目的 探讨肝细胞膜钠泵 (Na+ K+ ATPase)活性变化在胆红素钙结石成石过程中的作用。方法 采用胆红素钙结石兔模型进行研究 ,对照组 2 8只 ,胆道不全梗阻组 (BO组 ) 3 6只 ,胆道不全梗阻加感染组 (BOI组 ) 3 9只 ,各组再按术后处死时间 3d、7d、14d及 2 0d时相分组。动态测定各组各时相肝细胞膜钠泵活性、肝细胞钙及胆汁中胆汁酸含量。结果 BO组及BOI组肝细胞膜钠泵活性及胆汁中胆汁酸含量进行性下降 ,肝细胞钙含量呈进行性增多 ,与对照组相比差异有显著性意义 (P<0 .0 1) ,但BOI组上述变化较BO组明显 (P<0 .0 5 )。结论 胆红素钙结石成石过程中存在肝细胞膜钠泵活性的进行性下降 ,钠泵活性下降引起肝细胞钙超负荷及胆汁中胆汁酸含量下降 ,从而促进成石。细菌感染加重上述变化 。

“一肾一夹”高血压大鼠动脉平滑肌细胞钠泵α亚单位的基因表达

目的 探讨“一肾一夹 (1k1c)”高血压大鼠动脉平滑肌细胞钠泵α亚单位各异构体基因表达的改变 ,为高血压发病机制的深入研究提供理论及实验依据。方法 分别应用分子生物学RT PCR及免疫组化技术 ,探讨 1k1c高血压大鼠动脉平滑肌细胞钠泵α1、α2及α3亚单位mRNA及蛋白水平基因表达的改变。结果 1k1c高血压大鼠动脉平滑肌细胞钠泵α亚单位基因表达发生改变 :无论在mRNA或蛋白水平 ,α1亚单位表达增强 ,而α2与α3亚单位表达无改变。结论 1k1c高血压大鼠动脉平滑肌细胞钠泵α亚单位基因表达发生改变 ,这种改变可能参与了该模型的血压升高机制。

大鼠红细胞膜钠泵活性与造模实热证、虚热证的关系

目的:观察“实热证”、“虚热证”造模大鼠红细胞膜钠泵活性与机体能量代谢变化的关系。方法:采用红细胞溶血液细胞膜钠泵活性试剂盒测定法测定“实热证”、“虚热证”造模组大鼠及实热、虚热治疗组大鼠钠泵活性。结果:“虚热证”大鼠红细胞膜钠泵活性与正常大鼠相比无显著性差异,但与“实热证”大鼠相比活性显著下降(P<0001);而“实热证”大鼠钠泵活性与正常大鼠相比不仅显著增高(P<0001),且经清热解毒中药治疗后有下降趋势(P<005)。结论:大鼠红细胞钠泵在中医热证不同证型造模中活性有所不同,其中实热证与机体能量代谢变化趋势呈正相关。