异钩藤碱减轻帕金森病小鼠多巴胺能神经元损伤的作用机制

目的探讨异钩藤碱对帕金森病(PD)小鼠多巴胺能神经元损伤及凋亡的影响及其可能作用机制。方法2020年6月至2022年6月选取40只小鼠建立PD模型,造模成功小鼠按照随机数字表法分为模型组、异钩藤碱低、中和高剂量组,每组各10只,另设对照组10只。异钩藤碱低、中和高剂量组小鼠分别灌胃给药20、40、80 mg/kg的异钩藤碱混悬液(0.9%氯化钠溶液配制),对照组及模型组给予等量0.9%氯化钠溶液。采用爬杆实验和旷场实验评定各组小鼠行为学变化;ELISA法检测小鼠血清中白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平以及脑组织中多巴胺(DA)水平;TUNEL法检测黑质区神经细胞凋亡;逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测黑质区微RNA-376b-3p(miR-376b-3p)、转录因子SP1(SP1)和亮氨酸重复序列激酶2(LRRK2)的mRNA相对表达量;蛋白质印迹法检测黑质区SP1、LRRK2、α-突触核蛋白(α-syn)和酪氨酸羟化酶(TH)蛋白表达情况。结果与对照组(4.58±0.27)μg/L比较,模型组(1.35±0.13)μg/L小鼠DA水平显著降低(P<0.05)。与模型组比较,异钩藤碱低剂量组(1.86±0.17)μg/L、中剂量组(2.56±0.21)μg/L和高剂量组(3.40±0.29)μg/L小鼠DA水平显著升高(均P<0.05),且以异钩藤碱高剂量组最佳。与模型组比较,异钩藤碱低、中和高剂量组小鼠爬杆时间、IL-1β、TNF-α水平、神经细胞凋亡率、SP1和LRRK2 mRNA和蛋白表达水平、α-syn蛋白水平降低,运动总距离、miR-376b-3p以及TH蛋白水平升高(P<0.05),且以异钩藤碱高剂量组效果最佳(P<0.05)。结论异钩藤碱能够在一定程度上改善PD小鼠运动功能障碍,减轻神经炎症反应,降低神经细胞凋亡率,可能是通过影响miR-376b-3p/SP1/LRRK2信号系统发挥作用。

耳穴压豆联合天麻钩藤饮加减治疗对眩晕肝阳上亢证患者的中医证候积分及预后效果的影响

目的探究耳穴压豆联合天麻钩藤饮加减治疗对眩晕肝阳上亢证患者眩晕情况及预后效果的影响。方法选取2023年1月至2024年3月期间南京市溧水区中医院(扬州大学医学院临床学院)收治的68例眩晕肝阳上亢证患者,以随机数字表法分为对照组(采用倍他司汀持续治疗2周)和观察组(在倍他司汀治疗的基础上联合耳穴压豆结合天麻钩藤饮加减持续治疗2周),各34例。比较两组患者治疗前后眩晕发作情况、中医证候积分、眩晕障碍量表(DHI)评分,以及治疗后1、2、3个月内复发情况。结果与治疗前比,治疗后两组患者眩晕发作持续时间均缩短,且观察组短于对照组;两组患者眩晕发作频率、中医证候积分均降低,且观察组均低于对照组;与治疗前比,治疗后两组患者躯体、功能及情绪等DHI评分均降低,且观察组均低于对照组(均P<0.05);观察组患者治疗后1、2、3个月内的复发率均低于对照组,但差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论耳穴压豆联合天麻钩藤饮加减疗法能够改善眩晕肝阳上亢证患者眩晕表现,减少疾病的复发。

UPLC法同时测定钩藤提取物中4种生物碱类成分的含量

目的：建立UPLC法同时测定钩藤提取物中钩藤碱、异钩藤碱、去氢钩藤碱、异去氢钩藤碱的含量。方法：采用BEH C18色谱柱（100 mm×2.1 mm,1.7μm）;以5 mmol/L醋酸铵缓冲液（0.01%氨水调p H=9）（A）-甲醇（B）-乙腈（C）三元体系为流动相进行梯度洗脱;流速：0.44 m L/min;柱温：30℃;检测波长：245 nm。结果：钩藤碱、异钩藤碱、去氢钩藤碱、异去氢钩藤碱的质量浓度在2.97~296.67μg/m L、1.31~450.00μg/m L、1.58~433.33μg/m L、1.28~438.33μg/m L的范围内线性关系良好,r为0.9993~0.9995;各成分平均加样回收率在97.34%~101.85%,RSD≤2.65%。钩藤提取物中钩藤碱、异钩藤碱、去氢钩藤碱、异去氢钩藤碱的含量分别为23.48、6.19、6.73、9.22μg/g。结论：该方法准确可靠,便于操作,可用于同时测定钩藤提取物中4种生物碱的含量。

高效液相色谱法同时测定钩藤中4种生物碱的含量

为了建立一种同时测定钩藤中钩藤碱、异钩藤碱、去氢钩藤碱和异去氢钩藤碱含量的高效液相色谱法,在色谱柱Phenomenex Gemini C18(250 mm×4.6 mm,5μm),甲醇-0.1%三乙胺水(68∶32∶0.1)为流动相,检测波长为254nm,流速为1mL/min的条件下进行钩藤中4种生物碱含量的测定。结果表明:4种生物碱分离良好,钩藤碱、异钩藤碱、去氢钩藤碱和异去氢钩藤碱分别在0.017 8～0.142 4μg、0.017 2～0.172μg、0.016 6～0.132 8μg和0.023 4～0.234μg的线性良好,4种生物碱的平均加样回收率分别为96.40%、99.24%、97.56%和98.60%,RSD均小于3%(n=6),该方法操作简便,分离度好,适合于测定钩藤中钩藤碱、异钩藤碱、去氢钩藤碱和异去氢钩藤碱的含量。

钩藤中不同成分降压作用的差异

目的 :比较钩藤中提取的异钩藤碱、钩藤碱、钩藤总碱及非生物碱部分的降压作用。方法 :大鼠麻醉后经颈总动脉插管记录外周血压和经股静脉微量输注实验用药。结果 :实验表明钩藤中 4种成分的降压强度为异钩藤碱(4 2 .0 % ) >钩藤碱 (32 .1% ) >钩藤总碱 (2 1.3% ) >钩藤非生物碱 (12 .4% )。结论 :提示钩藤中主要降压成分为异钩藤碱和钩藤碱。

采用HPLC-MS-AIS法测定钩藤中四种生物碱含量

目的采用高效液相-质谱联用-自体内标法(HPLC-MS-AIS)测定钩藤中四种主要的吲哚类生物碱(钩藤碱、异钩藤碱、去氢钩藤碱、异去氢钩藤碱)含量。方法采用C_(18)色谱柱(3.0 mm×50 mm,3.3μm);0.1%甲酸水溶液∶乙腈=82∶18为流动相;流速0.5 mL/min;柱温30℃。质谱条件:电喷雾离子源;正离子多反应监测模式;毛细管电压为4000 v;选择质子数/电荷数(m/z):385.25/160.10(钩藤碱)、385.30/160.10(异钩藤碱)、383.25/160.15(去氢钩藤碱)、383.25/160.15(异去氢钩藤碱)作为检测离子对;进样量2μL。结果钩藤碱、异钩藤碱、去氢钩藤碱、异去氢钩藤碱线性范围分别为2.30~600.00 ng/mL(r=0.9993)、2.30~600.00 ng/mL(r=0.9992)、2.47~650.00 ng/mL(r=0.9994)、2.47~650.00 ng/mL(r=0.9992),精密度和稳定性的相对标准偏差(RSD)均<5.00%,准确度为92.40%~104.10%,加样回收率为95.90%~104.60%。结论采用HPLC-MS-AIS法测定钩藤中四种生物碱含量简便准确,可作为钩藤药材质量控制的新方法。

钩藤叶化学成分的研究

目的研究茜草科植物钩藤Uncaria rhynchophylla(Miq.)Jacks.叶的化学成分。方法用多种色谱方法和重结晶法进行分离和纯化,经理化、光谱和色谱分析等方法鉴定结构。结果从钩藤叶中分离得到5个化合物,鉴定为喜果苷(vincoside lactam,Ⅰ)、异去氢钩藤碱(isocorynoxeine,Ⅱ)、异钩藤碱(isorhynchophylline,Ⅲ)、去氢钩藤碱(corynoxeine,Ⅵ)、钩藤碱(rhynchophylline,Ⅴ)。结论化合物Ⅲ为首次从钩藤叶中分离得到,通过2D-NMR技术完善了化合物Ⅲ的核磁数据。

钩藤降压解郁方抑制TLR4/NF-кB信号通路对高血压并发抑郁症大鼠海马小胶质细胞极化的影响

目的探讨钩藤降压解郁方(钩藤、天麻、地龙、葛根等)调控TLR4/NF-кB信号通路对高血压并发抑郁症(HD)大鼠海马小胶质细胞极化的影响。方法将40只原发性高血压大鼠随机分为5组:模型组、阳性药组及中药(钩藤降压解郁方)高、中、低剂量组,每组8只;另取8只SD大鼠作为对照组。采用连续42 d慢性应激(CUMS)结合孤养的方式复制HD模型。造模同时给药干预,中药高、中、低剂量组分别给予钩藤降压解郁方29.61、14.81、7.40 g·kg^(-1)灌胃给药;阳性药组给予左旋氨氯地平0.45 mg·kg^(-1)+氟西汀1.8 mg·kg^(-1)灌胃给药;灌胃体积10 mL·kg^(-1),每天1次,连续42 d。采用无创血压计于给药前及每周最末日上午测量大鼠尾动脉收缩压;造模开始后的第2周和最后1周各进行1次糖水偏好行为学检测;造模结束后进行水迷宫实验;ELISA法测定血清炎性因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-10水平;HE染色法及尼氏染色法观察大鼠海马组织神经元病理变化;免疫荧光双染法检测海马区小胶质细胞M1(CD16)、M2(CD206)型表达情况;Western Blot法检测海马组织中TLR4、NF-κB p65蛋白的表达情况。结果与对照组比较,模型组大鼠第1~6周的尾动脉收缩压均显著升高(P<0.01);糖水偏好率显著下降(P<0.01);逃避潜伏期明显延长(P<0.05,P<0.01),穿越平台次数及目标象限停留时间占比显著降低(P<0.01);血清TNF-ɑ、IL-1β含量显著上升(P<0.01),IL-10含量显著下降(P<0.01);胞核深染,胞质固缩,细胞凋亡明显;海马小胶质细胞CD206/CD16荧光强度比明显降低(P<0.05);海马组织TLR4、NF-κB p65蛋白表达显著上调(P<0.01)。与模型组比较,给药组大鼠第1~6周的尾动脉收缩压均显著降低(P<0.01);糖水偏好率均明显上升(P<0.05);血清TNF-ɑ、IL-1β含量显著下降(P<0.01),IL-10含量显著上升(P<0.01);尼氏体丰富,细胞凋亡明显减少。阳性药组及钩藤降压解郁方高剂量组大鼠的逃避潜伏期明显缩短(P<0.05,P<0.01),穿越平台次数及目标象限停留时间占比明显增加(P<0.05);海马小胶质细胞CD206/CD16荧光强度比明显升高(P<0.05,P<0.01);海马组织TLR4、NF-κB p65蛋白表达明显下调(P<0.05,P<0.01)。结论钩藤降压解郁方可能通过抑制TLR4/NF-кB通路调节HD大鼠海马小胶质细胞极化状态,调控炎症因子分泌,减轻海马神经元损伤。

钩藤化学成分和药理作用研究进展

钩藤始载于《名医别录》,应用历史悠久。本文查阅钩藤化学成分和药理作用的相关研究文献,发现钩藤主要含有生物碱类、三萜类、酚类、甾醇类、黄酮类、醌类、香豆素类和木脂素类等成分,具有降压、抗氧化应激、抗神经细胞凋亡、调节炎症因子及其相关通路、降脂、抗脑缺血再灌注损伤、抗纤维化、抗抑郁、抗癌和调整肠道菌群等作用,主要作用于心血管和中枢神经系统,通过调节RhoA/ROCK1、ERK/MAPK、p38MAPK/MAPK、JNK/MAPK、Akt/eNOS、PI3K/Akt、ERK1/2、p27Kip1、PI3K/Akt/GSK-3β、Src/STAT3和HIF-1α/EMT信号通路,发挥治疗高血压、阿尔茨海默病、帕金森、肺纤维化等疾病的作用。

不同采收期毛钩藤药材中钩藤碱等3种成分的含量变化研究

目的测定不同采收期毛钩藤中钩藤碱、去氢钩藤碱、异去氢钩藤碱的含量变化,为毛钩藤的合理采收及品质评价提供依据。方法采用高效液相色谱法,色谱条件：Wonda Sil C18（4.6 mm×200 mm,5μm）色谱柱,以乙腈-0.2%氨水梯度洗脱,流速为1ml·min^-1,检测波长为254nm,柱温为25℃。结果 1-12月采收的毛钩藤中的钩藤碱、去氢钩藤碱、异去氢钩藤碱的含量得到准确测定。结论当年秋季至次年初夏采收的毛钩藤药材质量相对较好。

一测多评法同时测定钩藤饮片中4种生物碱类化学成分

目的:建立超高效液相色谱法(UPLC)一测多评(QAMS)同时测定钩藤饮片中钩藤碱、异钩藤碱、去氢钩藤碱、异去氢钩藤碱4种化学成分含量的方法,并验证该方法的可行性和准确性。方法:以钩藤饮片的4种成分为指标成分,以异钩藤碱为内标,分别计算得到钩藤碱、异去氢钩藤碱与去氢钩藤碱的相对较正因子,实现QAMS同时测定钩藤饮片中4种生物碱类成分含量。结果:在线性范围内,钩藤碱、异钩藤碱、去氢钩藤碱、异去氢钩藤碱的相对校正因子(RCF)分别为1.02、0.97、1.00、1.01,在不同实验条件下RCF的系统耐用性良好。结论:建立的以异钩藤碱为内标,同时测定4种钩藤生物碱的一测多评方法稳定、准确度高、适应性好,可用于钩藤饮片中4种生物碱类化学成分的含量测定。

钩藤茶预防足月新生儿皮肤中毒性红斑临床观察

目的评价口服钩藤茶预防足月新生儿皮肤中毒性红斑的疗效。方法选取2022年11月—2023年2月在南昌大学第二附属医院行剖宫产分娩的足月新生儿80例,以随机数字表法分为对照组与试验组,各40例。对照组予新生儿常规护理,试验组在第1次母乳喂养后口服钩藤茶5 ml,且2次/d,共服3 d。统计分析2组新生儿皮肤红斑、脓疱、新生儿经皮胆红素值情况及24 h二便情况。结果试验组皮肤红斑及脓疱发生比例低于对照组(P<0.05)。出生时和出生24 h,2组经皮胆红素比较比较,差异无统计学意义(P>0.05),出生48 h及72 h试验组均低于对照组(P<0.05)。出生24 h,试验组大便次数多于对照组(P<0.05);2组小便次数比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论口服钩藤茶对新生儿皮肤具有保护作用,促进24 h大便的排出并降低新生儿黄疸的发生。

天麻钩藤饮加减治疗肝阳上亢型眩晕患者的疗效观察

目的:探讨眩晕(肝阳上亢型)患者治疗中天麻钩藤饮加减的作用。方法:共计对象98例入组本研究,均为眩晕(肝阳上亢型),分组方式为随机数字表法,包括对照组与观察组,分别予以常规西药(倍他司汀)与中西医结合(倍他司汀+天麻钩藤饮加减)治疗,对比效果。结果:观察组总有效率高于对照组(P<0.05);两组治疗前中医证候积分与眩晕残障程度量表(DHI)评分无明显差异(P>0.05),治疗后观察组中医证候积分、DHI评分更低,与对照组有差异(P<0.05);两组安全性无差异(P>0.05)。结论:眩晕(肝阳上亢型)在常规西药治疗基础上配合天麻钩藤饮加减治疗,可进一步改善患者的症状,减轻眩晕残障程度,从而更好地提高临床疗效,且不会明显增加副作用,有应用价值。

毛细管电泳测定钩藤中钩藤碱、异钩藤碱、去氢钩藤碱的含量

建立了钩藤中钩藤碱、异钩藤碱、去氢钩藤碱的含量的测定方法：采用高效毛细管电泳法，运行缓冲液为25mmol／L磷酸盐缓冲液（磷酸调pH为2．5）-甲醇（体积比为4：1），运行电压21kV，柱温25℃，检测波长250nm。结果：钩藤碱、异钩藤碱、去氢钩藤、线性范围分别为0．00176～0．01760mg／mL（r=0．9998），0．00183～0．01830mg／mL（r=0．9996），0．00101—0．01010mg／mL（r=0．9998），加样回收率（n=6）分别为99．73％（RSD1．17％）、99．23％（RSD1．23％）、98．91％（RSD1．02％）。试验证明该法操作简便，分析快速，结果准确，重现性好，适用于立钩藤中钩藤碱、异钩藤碱、去氢钩藤碱的含量的测定。

天麻钩藤饮对自发性高血压大鼠血管重塑的抑制作用及对NOX2/ROS通路、内质网应激的影响

目的研究天麻钩藤饮对自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)血管重塑的抑制作用及机制。方法将大鼠随机分为正常对照组、模型组、厄贝沙坦组和天麻钩藤饮组。给药过程中每周测量大鼠尾动脉压;给药4周后,HE染色检测胸主动脉组织情况,测量与计算内膜-中层厚度(intima-media thickness,IMT)、内膜-中层厚度/管腔直径(lumen diameter,LD),同时扫描电镜检查组织形态变化;免疫组织化学测定NADPH氧化酶2(NADPH oxidase 2,NOX2)、C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)、葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulating protein 78,GRP78)蛋白的表达情况;ELISA测定血浆中活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量。结果(1)尾动脉压检测:与正常对照组比较,模型组大鼠收缩压均显著升高(P<0.05);与模型组比较,给药第1周起各治疗组大鼠收缩压均下降(P<0.05)。(2)胸主动脉组织形态学检测:扫描电镜可见模型组胸主动脉壁较正常对照组明显增厚;与模型组比较,各治疗组胸主动脉壁厚度均降低。HE染色观察可见正常对照组胸主动脉血管结构正常,未见动脉管壁增生;模型组胸主动脉壁明显增厚,单位面积细胞核数量增多;与模型组比较,各治疗组胸主动脉壁厚度、单位面积细胞核数量均减少。与正常对照组比较,模型组胸主动脉IMT、IMT/LD增加(P<0.05);与模型组比较,各治疗组胸主动脉IMT、IMT/LD下降(P<0.05)。(3)免疫组织化学检测胸主动脉中NOX2、CHOP、GRP78蛋白表达水平:与正常对照组比较,模型组血管壁NOX2、CHOP、GRP78蛋白表达水平显著上升(P<0.05);与模型组比较,各治疗组血管壁NOX2、CHOP、GRP78蛋白表达均下降(P<0.05)。(4)ELISA测定血浆中ROS含量:与正常对照组比较,模型组大鼠血浆中ROS含量显著上升(P<0.05);与模型组比较,各治疗组ROS含量显著下降(P<0.05)。结论天麻钩藤饮在降压的同时抑制血管重塑,其机制可能与抑制NOX2/ROS通路介导的内质网应激有关。

复方钩藤降压片(天苓降压片)对自发性高血压大鼠P2Y6受体及炎症因子水平的影响

目的以SHR和WKY大鼠为实验对象,通过测量相关指标,观察复方钩藤降压片对P2Y6受体的表达及炎症水平的影响。方法60只SHR随机分为5组,即模型对照组、缬沙坦组、阻断剂组、钩藤组、中西药组,另12只WKY大鼠设置为空白对照组,按相应的处理方法连续干预8周后取材,测算HMI和LVMI、HE染色观察左室心肌形态、免疫组化法检测心脏IL-1β、IL-6和TNF-α的蛋白表达、RT-PCR法测定IL-6、TNF-α、IL-1β、P2Y6 mRNA的表达、Western-Blotting法测定心肌IL-6、TNF-α、IL-1β、P2Y6的蛋白表达。结果⑴自发性高血压大鼠心室重量及左室质量较正常大鼠明显增加,是良好的高血压LVH的研究模型;⑵自发性高血压大鼠炎症因子IL-6、TNF-α、IL-1β血清浓度增加,相应的mRNA及蛋白表达增强,提示自发性高血压大鼠炎症活动增强;⑶阻断P2Y6受体,IL-6、TNF-α、IL-1β血清浓度、mRNA及蛋白表达均明显降低,提示P2Y6受体可能是自发性高血压大鼠炎症反应的关键位点;⑷经复方钩藤降压片治疗后,IL-6、TNF-α、IL-1β血清浓度、mRNA及蛋白表达均降低,提示复方钩藤降压片一定程度上能阻断P2Y6受体的表达,且与西药缬沙坦表现出协同作用。结论复方钩藤降压片一定程度上能阻断P2Y6受体的表达,从而降低SHR的慢性炎症水平。

黄力教授化裁天麻钩藤饮治疗高血压早期肾损害经验

总结黄力教授运用天麻钩藤饮加减辨治高血压早期肾损害的临证经验。黄力教授认为高血压早期肾损害的发病基础为肾虚肝亢、阴阳失调,瘀血、热毒、浊邪合而为病,为其病理关键,治疗以天麻钩藤饮为基础方,以补益肝肾、调和阴阳为法,辨明虚实,或活血凉血,通络除痹;或益本培元,固摄精微。黄力教授治疗高血压早期肾损害从肾虚肝亢的根本病机出发,善用天麻钩藤饮化裁,因机论治,同时注重病人教育,临床收效良好,其临床经验值得学习和推广。

一测多评法同时测定钩藤中4种生物碱的含量

目的建立一测多评法测定钩藤中4种生物碱的含量。方法采用Gemini-NX C18色谱柱(250cm×4.6 mm,5μm),以1%乙酸铵(A)-乙腈(B)为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1,检测波长245 nm,柱温25℃,进样量10μL。结果以异钩藤碱为对照品,钩藤碱、异去氢钩藤碱、去氢钩藤碱分别用校正因子进行含量测定,并进行了方法学验证。一测多评法计算值与外标法实测值间无明显差异(RSD <1%)。结论所建立的一测多评法简便快捷,准确度高,适合钩藤中生物碱的含量测定。

中医推拿联合天麻钩藤饮加减治疗椎动脉型颈椎病的效果观察

目的研讨中医推拿联合天麻钩藤饮加减治疗椎动脉型颈椎病的效果。方法选择80例因椎动脉型颈椎病收治入院的患者作为本次研究对象,根据临床实验要求,将患者随机分成对照组(40例)和观察组(40例)。对照组给予中医推拿治疗,观察组给予中医推拿联合天麻钩藤饮加减治疗。均经过为期3个月的规范化治疗。比较两组患者治疗前后症状改善情况、生活质量及治疗效果。结果治疗后,观察组头晕、头痛、肢体麻木、颈部不适评分分别为(2.63±0.47)、(2.35±0.61)、(2.54±0.23)、(2.20±0.14)分显著低于对照组的(3.83±0.71)、(4.17±0.50)、(3.86±0.74)、(3.98±0.07)分(P<0.05);观察组总有效率为92.50%,明显高于对照组的60.00%(P<0.05);治疗后,观察组躯体功能评分(84.41±13.22)分、情感变化评分(86.12±14.25)分、社会功能评分(93.17±18.14)分显著高于对照组的(63.31±9.56)、(72.01±10.12)、(80.13±13.12)分(P<0.05)。结论中医推拿联合天麻钩藤饮加减治疗椎动脉型颈椎病具有良好的治疗效果,值得临床普及使用。

建立2D-HPLC同时检测钩藤碱、异钩藤碱、去氢钩藤碱、异去氢钩藤碱的方法

目的建立二维高效液相色谱法(2D-HPLC)同时检测钩藤碱、异钩藤碱、去氢钩藤碱、异去氢钩藤碱四种钩藤生物碱含量的方法。方法采用Aston SC2(3.5 mm×25 mm,5μm)一维色谱柱,Aston SH C_(18)(3.5 mm×10 mm,5μm)中间色谱柱,Aston SCB(4.6 mm×125 mm,5μm)分析色谱柱,一维流动相为CAA-1,分析流动相为BPI-1∶MPI-1∶OPI=45∶14∶41,流速1.0 mL/min,柱温40℃,检测波长254 nm,进样量500μL,分析时间9.5 min。结果钩藤碱、异钩藤碱、去氢钩藤碱、异去氢钩藤碱线性范围分别为9.77~10000.00 ng/mL(r=0.9996)、10.74~11000.00 ng/mL(r=0.9997)、10.74~11000.00 ng/mL(r=0.9997)、10.74~11000.00 ng/mL(r=0.9996),精密度、稳定性和重复性相对标准偏差(RSD)<5.00%,准确度为95.20%~104.01%,方法回收率为93.63%~101.38%。结论建立的2D-HPLC同时检测钩藤中四种生物碱含量的方法简单准确,可作为钩藤药材质量控制的新方法。