食管癌组织微RNA-634、锌指蛋白ZBTB20表达与食管癌临床特征及预后的关系

目的 分析食管癌组织中微RNA-634(miR-634)和锌指蛋白ZBTB20的表达水平,并分析二者是否与食管癌发生发展及预后相关。方法 选取2018年1月至2019年4月湖北医药学院附属国药东风总医院接受手术的食管癌病人102例,从病人根治切除术手术标本切取癌组织及癌旁正常组织。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-634、ZBTB20 mRNA相对表达水平。Pearson相关性分析食管癌组织中miR-634与ZBTB20 mRNA表达水平的相关性。Kaplan-Meier生存曲线分析miR-634、ZBTB20与预后的关系。Cox回归分析食管癌病人预后危险因素。结果 与癌旁正常组织(1.02±0.06、1.01±0.05)相比,食管癌组织中miR-634低表达(0.69±0.15)(P<0.05),ZBTB20 mRNA高表达(1.64±0.26)(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,miR-634、ZBTB20 mRNA在食管癌病人的组织样本中表达水平负相关(r=-0.65,P<0.05);两者均与TNM分期、淋巴结转移、组织分化程度相关(P<0.05)。Kaplan-Meier法显示,miR-634高表达组(64.71%)无进展生存率较低表达(29.41%)高(χ^(2)=14.41,P<0.001),ZBTB20低表达组(62.75%)无进展生存率较高表达组(31.37%)高(χ^(2)=9.48,P=0.002)。多因素Cox回归分析表明,TNM分期(Ⅲ)、淋巴结转移、miR-634低表达、ZBTB20高表达是影响食管癌病人不良预后的危险因素(P<0.05)。结论 食管癌病人癌组织中miR-634表达水平降低,ZBTB20表达水平升高,两者与TNM分期、淋巴结转移、组织分化程度及预后密切相关。

抗新型锌指蛋白ZBTB20单克隆抗体的制备和鉴定

目的:制备新型锌指蛋白ZBTB20的单克隆抗体,建立敏感和特异的ZBTB20免疫学检测方法,为其生物学功能研究提供技术支持。方法:将经ZBTB20多肽免疫的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞进行融合,用ZBTB20的GST融合蛋白为包被抗原进行ELISA筛选,经4次亚克隆后建立稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,制备腹水并纯化抗体,鉴定其在免疫印迹、免疫沉淀和免疫组化中的应用效果。结果:成功制备了8株抗ZBTB20单克隆抗体,在不同的免疫学检测中均得到成功应用,尤其是单克隆抗体9A10具有敏感性高、特异性好和通用性强等优点。结论:首次成功制备了ZBTB20单克隆抗体,可应用于免疫印迹、免疫沉淀和免疫组化等免疫学检测,对ZBTB20的功能研究具有重要意义。

锌指蛋白ZBTB20生物学功能的研究进展

锌指蛋白ZBTB20是ZBTB锌指蛋白亚家族的新成员,与已知的BCL6和PLZF同源。通过基因打靶小鼠和疾病人群研究,学者们发现ZBTB20在肝脏、胰岛、神经系统和免疫系统等多个器官与系统中具有重要生理学功能,是个体发育、学习记忆、痛觉感受、糖脂代谢等正常生理过程所必需的调节分子。ZBTB20表达或功能异常可导致个体发育障碍,与智障、肿瘤和代谢性疾病等多种重大疾病的病理生理过程密切相关。作为甲胎蛋白基因的主要转录抑制因子,ZBTB20在出生后肝脏甲胎蛋白基因的表达失活中发挥了关键性作用,且与肝癌预后密切相关。人群中ZBTB20基因的缺失与多种肿瘤有关,其点突变可导致Primrose综合征。本文就ZBTB20的生物学功能研究进展作一综述。

锌指蛋白ZBTB20基因重组腺病毒表达载体的构建和鉴定

目的:构建含锌指蛋白ZBTB20基因的重组腺病毒载体,以研究锌指蛋白ZBTB20的生物学功能。方法:将带有FLAG标签的ZBTB20 cDNA片段(ZBTB20-FLAG)克隆至pAdTrack-CMV载体,将该载体与pAdEasy质粒进行细菌内同源重组从而获得重组腺病毒载体pAd-ZBTB20,之后在293细胞中进行包装以及扩增,并对病毒滴度进行检测;采用肝脏组织特异性ZBTB20基因敲除小鼠的原代肝细胞和肝脏组织模型,分别于离体和在体水平鉴定所制备的重组腺病毒Ad-ZBTB20介导的ZBTB20蛋白表达情况;并采用报告基因技术检测过表达的ZBTB20蛋白的功能活性。结果:成功制备了锌指蛋白ZBTB20重组腺病毒,该重组腺病毒感染原代肝细胞和小鼠肝脏组织能过表达ZBTB20蛋白,并且此ZBTB20蛋白能抑制其下游靶基因甲胎蛋白的转录。结论:所构建的ZBTB20重组腺病毒可以介导ZBTB20的过表达并具备转录调节活性,为今后研究ZBTB20的相关生物学功能奠定了基础。

锌指蛋白ZBTB20原核重组表达与纯化体系的优化

目的优化锌指蛋白ZBTB20的谷胱甘肽巯基转移酶(GST)融合蛋白表达体系和纯化条件,以获得足够的ZBTB20蛋白及其截短体的GST融合蛋白,为研究该蛋白的转录调控机制奠定基础。方法将ZBTB20蛋白及其截短体的GST融合蛋白表达质粒转化大肠杆菌BL21并进行异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。通过SDS-PAGE电泳和考马斯亮蓝染色鉴定融合蛋白的表达量;对诱导表达的温度与时间、包涵体裂解液的配方和裂解方法以及纯化方法进行优化。结果经SDS-PAGE和考马斯亮蓝染色发现在37℃诱导条件下全长ZBTB20-GST蛋白主要以包涵体形式表达且不易溶于包涵体裂解液中。采用低温诱导可以提高包涵体中全长ZBTB20-GST融合蛋白的溶解性。改良的纯化方法能够将包涵体裂解上清中的全长ZBTB20-GST融合蛋白纯化下来。ZBTB20蛋白截短体的溶解性比全长蛋白好,且截短体越短溶解性越好。结论优化后的融合蛋白诱导表达和纯化方法能够获得足够的ZBTB20蛋白及其截短体的GST融合蛋白用于后续研究。

锌指蛋白A20在低出生体重儿胎盘组织中的表达及其对滋养细胞炎症的影响

目的探讨胎盘组织锌指蛋白A20(A20)的表达水平与低出生体重儿(LBW)新生儿体重及胎盘体重的相关性及其在LBW发病机制中的作用。方法选取2021年9月—2022年5月在本院住院分娩的LBW孕妇30例为LBW组,同期健康妊娠分娩的孕妇30例为健康对照组(NP组);qRT-PCR和Western blot检测两组胎盘组织A20的表达,采用免疫组化检测胎盘组织中A20表达水平;然后分别将A20的表达水平与LBW组新生儿体重及胎盘体重做相关性分析。同时体外培养人源胎盘滋养细胞株(HTR-8/SVneo),分为对照组(NC组)和单纯LPS刺激组(100 ng/mL),转染A20基因腺病毒过表达后,Western blot检测各组胎盘滋养细胞A20蛋白、NF-κB结合蛋白p65、NF-κB亚单位磷酸化p65(p-p65)和TNF-α和IL-1β蛋白的表达,双抗体夹心酶联免疫吸附测定(ELISA)方法检测上清液TNF-α、IL-1β的表达。结果与NP组比较,LBW组年龄、孕周差异无统计学意义(P>0.05),而新生儿体重、胎盘重量、Apgar评分1 min,5 min差异均有统计学意义(P<0.05);A20在LWB组中明显低表达(P<0.01),免疫组化显示A20在LBW组胎盘组织中降低,且与新生儿体重及胎盘重量呈正相关(P<0.05);与NC组比较,单纯LPS刺激组细胞A20蛋白表达降低(P<0.05),而p-p65和TNF-α和IL-1β蛋白表达降低(P<0.05);转染A20基因腺病毒过表达后,A20表达增加(P<0.05),p-p65和TNF-α和IL-1β蛋白表达降低(P<0.05)。结论A20与LBW的发生发展密切相关,其过表达可有效抑制LPS诱导的滋养细胞炎症因子的产生,有望成为预测LWB的分子标记物和治疗靶点。

siRNA沉默锌指蛋白A20基因促进人类风湿关节炎成纤维细胞样滑膜细胞焦亡

目的探讨小干扰RNA(siRNA)沉默锌指蛋白A20基因对人类风湿关节炎(RA)成纤维细胞样滑膜细胞(HFLS-RA)焦亡的调节作用。方法培养人HFLS-RA细胞系(MH7A细胞),通过RNA干扰技术靶向敲降人类A20基因,合成siRNA-A20,用脂质体法将siRNA-A20(沉默组)和siRNA-NC(阴性对照组)转染MH7A细胞。RT-qPCR检测细胞中NLRP3和Caspase-1 mRNA的表达;Western blot法检测细胞中NLRP3和Caspase-1蛋白表达;ELISA法检测细胞培养液中IL-1β和IL-18的水平;透射电子显微镜(TEM)检测细胞焦亡。结果siRNA-A20组MH7A细胞中NLRP3和Caspase-1 mRNA和蛋白表达水平与对照组相比均显著增高(P<0.01);siRNA-A20组细胞培养上清液中IL-1β、IL-18浓度与对照组相比均显著增高(P<0.01)。与对照组相比,siRNA-A20组部分细胞肿胀和破裂,细胞膜的完整性也丧失,细胞内出现大面积水肿区,细胞核局部核膜凹陷模糊,异染色质固缩增加,分布不均匀并在核膜周围聚集。结论通过siRNA沉默A20表达后可促进HFLS-RA中NLRP3/Caspase-1介导细胞焦亡,为探讨RA临床治疗新方案提供了实验依据。

TNFAIP3/锌指蛋白A20参与系统性红斑狼疮发病机制的研究进展

作为核因子-κB(NF-κB)信号通路中最强有力的抑制因子,肿瘤坏死因子α诱导蛋白3(TNFAIP3)基因及其表达蛋白锌指蛋白A20可能参与系统性红斑狼疮(SLE)的发病机制。本文从TNFAIP3基因特征、TNFAIP3基因及其表达蛋白A20与SLE的相关性、TNFAIP3/A20参与SLE可能的发病机制,以及TNFAIP3/A20作为治疗靶点的潜在可能性进行了综述。

锌指蛋白ZBTB20敲低的血管平滑肌细胞稳转株的构建及鉴定

目的构建并鉴定锌指蛋白ZBTB20敲低的血管平滑肌细胞稳转株。方法本实验时间为2022-04-18至2022-11-29。设计合成针对ZBTB20基因的短发夹RNA(shRNA),构建ZBTB20干扰慢病毒载体——pHBLVZBTB20 shRNA,包装ZBTB20干扰慢病毒。将人肺动脉平滑肌细胞(HPASMCs)接种于6 cm培养皿中,分别加入含8μg/ml polybrene和0.5 ml ZBTB20干扰慢病毒上清液的无血清培养液3 ml(实验组)和含8μg/ml polybrene和0.5 ml含无意义干扰序列的慢病毒的无血清培养液3 ml(阴性对照组)进行转染,48 h后加入嘌呤霉素(优化剂量为1.5μg/ml)以筛选转染成功的HPASMCs。采用荧光定量PCR检测两组ZBTB20 mRNA相对表达量,采用Western blot法检测两组ZBTB20,采用免疫组化试验检测两组ZBTB20表达情况,并进行细胞增殖实验和细胞迁移实验。结果实验组ZBTB20 mRNA相对表达量、ZBTB20均低于阴性对照组(P<0.05)。免疫组化试验结果显示,ZBTB20在阴性对照组的细胞核内高度表达,而在实验组的细胞核内无明显表达,表明ZBTB20敲低的血管平滑肌细胞稳转株构建成功。感染后第2~5天,实验组细胞计数少于对照组,OD值低于阴性对照组(P<0.05)。感染后48 h,实验组划痕愈合面积百分比低于阴性对照组(P<0.05)。结论本实验成功构建了锌指蛋白ZBTB20敲低的血管平滑肌细胞稳转株,且ZBTB20敲低后HPASMCs的增殖和迁移能力明显受到抑制。

慢性乙型肝炎合并肝细胞癌患者乙型肝炎病毒X基因整合对锌指蛋白ZBTB20表达的影响

目的探讨慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)合并肝细胞癌患者乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)X基因整合对锌指蛋白ZBTB20表达的影响。方法选择2015年7月至2017年6月在台州恩泽医疗中心(集团)恩泽医院、台州市中心医院行手术治疗的18例CHB合并肝细胞癌患者,收集每例患者手术切除的标本,包括肝癌组织、癌旁组织和相对正常的肝组织。提取3种组织标本DNA,以HBVX和Alu为特殊引物,采用HBV-Alu-PCR扩增整合的HBVX片段和两侧的人类基因组DNA片段,扩增产物测序,计算目的片段整合情况。采用蛋白质印迹法检测锌指蛋白ZBTB20表达水平。统计学处理采用t检验、方差分析和χ^2检验。结果18例CHB合并肝细胞癌患者的癌组织、癌旁组织、正常组织中检测到HBVX基因整合例数分别为13、16和9例,差异有统计学意义(χ^2=6.353,P=0.037)。18例患者癌组织、癌旁组织、正常组织中锌指蛋白ZBTB20的表达分别为(50.14±11.25)%、(40.71±7.17)%和(39.06±5.17)%,差异有统计学意义(F=9.420,P<0.01)。5例患者的ZBTB20位点检测到HBVX基因整合,这5例患者癌组织、癌旁组织、正常组织中锌指蛋白ZBTB20的表达分别为(37.37±10.30)%、(32.06±2.61)%和(34.66±5.59)%;13例患者的ZBTB20位点未检测到HBVX基因整合,13例患者癌组织、癌旁组织、正常组织中锌指蛋白ZBTB20的表达分别为(55.06±7.06)%、(44.04±5.24)%和(40.76±4.04)%,有HBVX整合患者的ZBTB20表达水平均低于无整合患者,差异均有统计学意义(t=4.205、4.821、2.589,均P<0.05)。结论CHB合并肝细胞癌患者的HBVX基因整合率在癌旁组织中高于肝癌组织,肝癌组织锌指蛋白ZBTB20表达水平高于癌旁组织,HBVX基因在ZBTB20位点上的整合可能导致ZBTB20表达下降。

缺氧诱导锌指蛋白A20表达抑制髓核细胞凋亡和炎症

目的探讨在缺氧条件下锌指蛋白A20对椎间盘髓核细胞的作用及其可能机制。方法分别在常氧(21%O_(2))和缺氧(1%O_(2))细胞培养箱培养大鼠椎间盘,并使用二甲基乙二酰基甘氨酸(dimethyloxalylglycine,DMOG)处理后分为常氧组、常氧+DMOG组、缺氧组和缺氧+DMOG组。通过组织切片染色和Western blot实验检测各组髓核组织形态学改变以及HIF-1α和A20蛋白表达差异;利用A20干扰腺病毒,分别在缺氧和常氧条件下处理人髓核细胞后分为缺氧+空载病毒组、缺氧+A20干扰腺病毒组、常氧+空载病毒组、常氧+A20干扰腺病毒组。分别通过流式细胞学、JC-1检测、EdU检测和蛋白免疫印迹实验检测各组髓核细胞凋亡、线粒体膜电位、增殖、细胞外基质以及炎性细胞因子表达差异。结果相比于常氧组,其余3组形态学上退变程度较轻,HIF-1α和A20蛋白表达量增加(P<0.05);相较于缺氧+空载病毒组,缺氧+A20干扰腺病毒组髓核细胞TNF-α和P-p65表达量增加(P<0.05),细胞凋亡增加(P<0.05),细胞增殖下降(P<0.05),细胞外基质蛋白表达量减少(P<0.05)。而在常氧+空载病毒组与常氧+A20干扰腺病毒组中,上述指标差异无统计学意义。结论缺氧可通过诱导A20蛋白表达,抑制髓核细胞的凋亡、炎症,促进髓核细胞增殖和细胞外基质合成。

高血压病人血清锌指蛋白A20、p53表达及与冠状动脉病变的关系

目的:分析高血压病人血清锌指蛋白A20、p53表达及与冠状动脉病变的关系。方法:选取住院行冠状动脉造影检查的高血压病人120例,根据冠状动脉造影结果分为冠状动脉病变组(病变组)70例和冠状动脉正常组(正常组)50例。根据Gensini评分,将病变组病人分为轻度组40例、中度组20例和重度组10例。采用酶联免疫吸附法检测各组血清p53表达水平,实时荧光定量PCR法检测血清锌指蛋白A20 mRNA表达,并分析二者相关性。采用ROC曲线分析血清锌指蛋白A20 mRNA、p53表达水平对高血压病人发生冠状动脉病变的诊断效能。结果:病变组病人血清A20 mRNA、p53表达和低密度脂蛋白胆固醇水平均明显高于正常组(P<0.01)。病变组中,重度组病人A20 mRNA明显高于轻度组和中度组,中度组亦明显高于轻度组(P<0.01);重度组病人p53高于轻度组(P<0.05)。病变组血清A20 mRNA表达与p53表达水平呈正相关关系(r=0.702,P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清A20 mRNA、p53表达水平联合诊断高血压病人发生冠状动脉病变的曲线下面积为0.799,敏感度76.80%,特异度为78.40%。结论:高血压合并冠状动脉病变病人血清锌指蛋白A20 mRNA、p53表达水平随冠状动脉病变的加重有逐渐升高趋势,且二者呈正相关关系,对诊断高血压病人发生冠状动脉病变具有一定临床价值。

锌指蛋白A20对人单核细胞LPS应答的影响

目的调查锌指蛋白A20表达对人单核细胞LPS应答的影响,探讨A20可能的炎症调控作用与机制及其潜在的临床应用价值。方法采用细胞转染技术制备锌指蛋白A20人单核细胞转基因细胞模型和基因沉默细胞模型,以LPS攻击细胞,用适时荧光定量PCR技术测定锌指蛋白A20表达水平,用ELISA技术分析细胞核转录因子NF-κB活性及其依赖性炎性细胞因子TNF-α水平。结果锌指蛋白A20过表达组细胞遭受LPS攻击后其NF-κB活性和TNF-α水平明显低于LPS对照组(P<0.01),锌指蛋白A20基因表达抑制组细胞其NF-κB活性和TNF-α水平明显高于LPS对照组(P<0.01)。结论锌指蛋白A20对人单核细胞LPS应答具有明显的调节作用,可以明显降低炎症重要核转录因子活性和降低促炎细胞因子的表达。对脓毒症过度炎症反应实施干预具有潜在的临床应用价值。

锌指蛋白A20及其相关炎症因子在椎间盘髓核细胞退变前后的表达变化

目的检测椎间盘髓核细胞退变前后锌指蛋白A20及其相关炎症因子的表达变化。方法获取我院骨科患者术中切除的椎间盘组织,分为正常组和退变组,采用阿辛蓝染色观察人椎间盘髓核细胞的退变情况,免疫组化观察人椎间盘髓核细胞A20、TNF-α、IL-1β及NF-κB p65蛋白的表达。体外培养胚胎小鼠髓核细胞,分为对照组(只加入等量的PBS)、内毒素(LPS)刺激组和NF-κB抑制组,分别以Real-time PCR检测LPS刺激细胞和加入NF-κB抑制剂后,A20、TNF-α、IL-1β、I型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶-4(ADAMST-4)、Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶-5(ADAMST-5)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)的表达变化;Western blot检测A20、TNF-α、IL-1β、ADAMTS-4、ADAMTS-5、MMP-13、p65、磷酸化p65(p-p65)的表达变化。结果退变组髓核细胞数量显著少于正常组,并有明显的聚集现象;退变组髓核细胞中A20、TNF-α、IL-1β、p65蛋白表达明显高于正常组;LPS刺激胚胎小鼠髓核细胞后,LPS刺激组A20、TNF-α、IL-1β、ADAMST-4、ADAMST-5、MMP-13mRNA与蛋白的表达均高于NF-κB抑制组与对照组(P<0.05),A20、TNF-α、IL-1β、ADAMTS-4、ADAMTS-5、MMP-13、p65、p-p65蛋白含量也较NF-κB抑制组与对照组显著增高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论髓核细胞炎症反应与椎间盘退变的发生、发展密切相关,A20可能通过NF-κB信号通路对抑制髓核细胞退变时炎症反应起到关键作用。

锌指蛋白A20对小鼠内毒素性肝损伤的保护作用研究

目的探讨锌指蛋白A20对小鼠实验性内毒素性肝损伤的保护作用。方法以内毒素血症小鼠为动物模型,采用尾静脉注射A20表达质粒的方法,观察A20转基因处理对内毒素血症小鼠肝组织内TNF-αI、L-1β水平以及肝脏病理损伤的保护。结果A20组LPS注射24h后肝组织匀浆TNF-α表达水平为(923.2±11.97)pg/ml、IL-1β为(996.43±15.32)pg/ml,与LPS对照组比较,t检验显示P值均<0.05,A20组与LPS对照组之间TNF-α和IL-1β水平差异有统计学意义。病理分析提示A20组24h后小鼠肝脏病理损伤明显较LPS对照组轻。结论A20能够明显抑制内毒素血症小鼠肝组织的炎症反应,减轻肝组织炎症损伤。

植物A20/AN1型锌指蛋白基因功能研究进展

在植物中,锌指蛋白是一类庞大的转录调控因子家族,可以通过与核酸或蛋白质结合来行使功能,参与多个生理过程。近年来研究发现,植物A20/AN1型锌指蛋白与植物的非生物逆境应答密切相关。介绍植物A20/AN1型锌指蛋白基因功能和作用机制的最新研究进展,并对植物A20/AN1锌指蛋白基因家族未来的研究趋势作出分析。

沙冬青A20/AN1锌指蛋白基因序列及表达分析

A20/AN1锌指蛋白普遍存在于真核生物中,在胁迫响应引起的信号传导过程中发挥着重要作用。本文利用生物信息学和RT-PCR方法从低温干旱胁迫的沙冬青叶片组织中分离锌指蛋白基因AmSTZF,该基因编码一条含172个氨基酸残基的多肽,含A20和AN1两个锌指蛋白保守结构域,属A20/AN1锌指蛋白。生物信息学分析显示该蛋白定位于细胞质中,具有磷酸化位点,参与细胞转录调控。RT-PCR分析表明:低温和干旱胁迫处理的沙冬青叶片中,AmSTZF的表达增强,初步推测该基因与沙冬青低温、干旱胁迫响应相关。

锌指蛋白A20在内毒素所致人脐静脉内皮细胞损伤中的作用

目的 探讨外源性锌指蛋白A2 0对内毒素 (LPS)诱导的内皮细胞同型半胱氨酸蛋白酶caspase 3表达和凋亡的影响。 方法 RT PCR检测A2 0基因在内毒素诱导内皮细胞中的表达。DOTAP脂质体转染pCDNA3 1EHA2 0于脐静脉内皮细胞 ,经G4 18筛选 ,A2 0表达经免疫荧光鉴定。Tunnel原位末端标记法、原位杂交检测转染前后内毒素诱导内皮细胞凋亡情况及caspase 3的表达情况。 结果 A2 0基因在内毒素诱导的内皮细胞中能表达。正常对照组及转染A2 0基因组人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)凋亡为 (5± 1) %、(6± 1) % ,LPS作用后对照组与转染A2 0基因组凋亡分别为 (36± 3) %、(10± 1) % ,两者相差显著 (P <0 0 5 )。A2 0基因能显著抑制内毒素诱导的内皮细胞caspase 3的表达。 结论 A2 0基因在创伤的治疗中可能有一定作用。

十字花科植物C2H2型锌指蛋白新基因BcMF20同源序列克隆与进化分析

为获取C2H2型锌指蛋白基因在物种间的分类和进化关系,分析其在基因结构上的保守性,更好地研究该基因在植物花粉发育中的功能,根据白菜花粉发育相关基因BcMF20 DNA序列设计引物,运用PCR技术分别从十字花科芸薹属和萝卜属18种材料中克隆了C2H2型锌指蛋白基因BcMF20的同源序列。经序列比对分析,BcMF20同源基因在DNA序列上的相似性为86.9%～100%,所推导的氨基酸序列相似性为77.6%～100%,在锌指的保守区域,氨基酸序列完全相同。这些结果表明该基因具有较好的保守性,可能在十字花科植物的花粉发育中行使重要的功能。

急性脑梗死患者外周血单核细胞锌指蛋白A20表达及其与TNF-α和IL-6的相关性

目的调查急性脑梗死患者外周血单核细胞锌指蛋白A20的表达及其与血液TNF-α和IL-6水平的相关性,初步探讨锌指蛋白A20在急性脑梗死缺血性炎症损伤中的作用。方法采用流式细胞学分析技术和适时荧光定量PCR技术分别测定42例急性脑梗死患者外周血单核细胞锌指蛋白A20的表达,并用ELISA技术测定血液TNF-α和IL-6浓度,与50例同期健康对照组进行比较。结果急性脑梗死组患者外周血单核细胞锌指蛋白A20表达水平较健康对照组明显增高,且以发病后第1天锌指蛋白A20表达水平最高(P<0.01),之后快速降低,与血液TNF-α和IL-6浓度呈现正相关关系。结论锌指蛋白A20可能参与了急性脑梗死缺血性炎症损伤的自我保护过程,其机制可能是抑制核转录因子NF-κB和NF-IL-6,进而下调促炎细胞因子的表达干预脑组织的炎症损伤。