ALL患儿诱导缓解期长春新碱联合应用三唑类抗真菌药物发生毒副作用单中心分析

目的研究急性淋巴细胞白血病(ALL)儿童诱导缓解期联合应用长春新碱与三唑类药物出现的毒副作用。方法回顾性分析2010年1月1日—2013年12月31日北京儿童医院诊断为ALL患儿在诱导缓解治疗过程中长春新碱和三唑类药物联合应用出现毒副作用。将患儿分为无联合用药组、长春新碱+伊曲康唑联合组,长春新碱+伏立康唑联合组,长春新碱+氟康唑联合组,分析4组患儿相关毒副作用的发生率及治疗预后。结果共纳入ALL患儿708例,发病中位年龄为8(1~16)岁。存在长春新碱与三唑类抗真菌药物联合应用组共215例,其中联合伊曲康唑组79例,联合伏立康唑组36例,联合氟康唑组100例。无联合用药组493例。联合用药组患儿相关并发症发生率:高血压37例(17.2%),趾端麻木39例(18.1%),腱反射迟钝4例(1.8%),腹痛腹胀42例(19.5%),肠梗阻5例(2.3%),低血钠43例(20%)。联合用药组相关并发症发生率均高于无联合用药物组(P<0.05)。联合用药组中,高血压发生率、腱反射迟钝发生率及低血钠发生率:伊曲康唑组与伏立康唑组无差别(P>0.05),但大于氟康唑组(P<0.05);趾端麻木、腹痛腹胀发生率:伊曲康唑组大于伏立康唑组大于氟康唑组(P<0.05);肠梗阻发生率:伏立康唑组大于伊曲康唑组大于氟康唑组(P<0.05)。对于发生的毒副作用,给予相关的对症处理及调整药物后,相关并发症均可以得到缓解及消失。结论在ALL患儿诱导缓解治疗过程中,三唑类药物联合长春新碱用药可能加重毒副作用发生,伊曲康唑和伏立康唑相比氟康唑可能更容易加重长春新碱毒性,故建议治疗过程中避免同时使用三唑类抗真菌药物及长春新碱。

碳酸锂联合长春新碱促进儿童急性T淋巴细胞白血病细胞增殖抑制和凋亡

儿童急性T淋巴细胞白血病(T-cell acute lymphoblastic leukemia,T-ALL)是T系前体细胞发生恶性转化的一种侵袭性肿瘤,化疗药物的毒副作用及耐药性问题仍然是阻碍其治疗成功的难题。长春新碱(vincristine,VCR)是治疗儿童T-ALL疗效显著的传统化疗药物,但其副作用明显。碳酸锂(Li_(2)CO_(3))可增强其它化疗药物的疗效,但其联合VCR的研究未见报道。该研究旨在探讨Li_(2)CO_(3)联合VCR对2种儿童T-ALL细胞系CCRF-CEM和Jurkat细胞增殖、凋亡及细胞周期的作用。噻唑蓝(thiazolyl blue tetrazolium bromide,MTT)比色法结果显示,与对照组比较,单用VCR或Li_(2)CO_(3),随着其浓度的增加,2种细胞存活率均逐渐降低(P<0.05)。2种细胞在相同Li_(2)CO_(3)浓度下存活率不同(P<0.01)。Li_(2)CO_(3)联合VCR处理细胞存活率与单独VCR组处理相比,2种细胞的细胞存活率和VCR的半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC_(50))值降低,Li_(2)CO_(3)与VCR的2药相互作用指数(coefficient of drug interaction,CDI)均小于1。流式细胞仪检测结果发现,对照组、Li_(2)CO_(3)组、VCR组和Li_(2)CO_(3)联合VCR组,2种细胞Li_(2)CO_(3)联合VCR组的G_(2)/M期和凋亡细胞占比最高,Li_(2)CO_(3)联合VCR组和VCR组比,均存在显著性差异(P<0.05)。总之,我们的研究结果提示,Li_(2)CO_(3)与VCR联合促进T-ALL细胞增殖抑制,使细胞周期阻滞于G_(2)/M期,且促进细胞凋亡,结果为儿童T-ALL临床治疗及减少VCR毒副作用提供了新的实验依据,也为其药物研发提供新的思路。

长春新碱致婴儿双侧眼睑下垂1例

长春新碱是一种长春花生物碱,用于治疗儿童的急性淋巴细胞白血病、实体瘤和淋巴瘤。长春新碱的神经毒性于1967年首次被报道[1]。长春新碱的中枢神经系统穿透能力较差,其周围神经毒性较多见,所致眼部不良反应较少见。目前,国外已有儿童长春新碱所致单、双眼睑下垂的病例报道,但未见婴儿双眼睑下垂的相关案例。现报道1例7月龄长春新碱治疗肾母细胞瘤患儿致双眼睑下垂病例。

口服L-苏糖酸镁预防长春新碱诱导的大鼠记忆和情感障碍

目的:观察L-苏糖酸镁(magnesium-L-threonate,L-TAMS)对长春新碱(vincristine,VCR)诱导的大鼠记忆和情感障碍的影响并探讨其机制。方法:采用随机数表法将SD大鼠随机分为三组:Control组(饮用正常水并注射等量生理盐水)、VCR组(大鼠腹腔注射长春新碱并饮用正常水)、L-TAMS+VCR组(VCR注射前7天起至实验结束在饮用水中加入L-TAMS),每组5~7只。采用新颖物体识别测试(novel object recognition test,NORT)检测大鼠记忆能力;高架十字迷宫实验(elevated plus-maze test,EPMT)检测大鼠焦虑行为;强迫游泳实验(forced swimming test,FST)检测大鼠抑郁行为。使用在体电生理实验技术记录海马CA3-CA1突触后诱发场电位的幅度;Western blot检测海马内N-甲基-D-天冬氨酸受体(N-Methyl-D-Aspartate-Receptors,NMDARs)亚基NR2B表达的情况;免疫荧光检测海马CA1与前扣带回皮质(anterior cingulate cortex,ACC)内小胶质细胞的表达情况。结果:与Control组比较,VCR组认知系数降低,静止不动时间延长,进入高架十字迷宫开放臂的时间和次数减少,海马CA3-CA1突触后场电位幅度降低,海马内NR2B含量显著降低,海马CA1和ACC内小胶质细胞的表达增多,腹腔注射VCR之前,提前7天直至实验结束口服L-TAMS可预防VCR所引起的上述变化。结论:L-TAMS可通过上调海马突触后膜NMDARs亚基NR2B,逆转VCR引起的CA3-CA1突触后场电位幅度显著降低,改善海马突触传递受损,同时,降低大鼠海马CA1和前扣带回皮质的小胶质细胞表达,减轻神经炎症,进一步预防VCR诱导的记忆和情感功能障碍。

长春新碱导致抗利尿激素分泌异常综合征1例

抗利尿激素分泌异常综合征(SIADH)是由抗利尿激素(antidiuretic hormone,ADH)分泌异常所致的一种水排泄受损的疾病,以体内水潴留、尿钠大量排出、稀释性低钠血症等为主要表现的综合征[1]。目前药物导致的SIADH近年来逐渐引起临床重视,但国内少见有长春新碱相关的SIADH病例报道。

lncRNA HIF1A-AS1对长春新碱耐药视网膜母细胞瘤细胞化疗敏感性的影响

目的:探讨长链非编码RNA-HIF1A-AS1(lncRNA HIF1A-AS1)调节缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达对长春新碱(VCR)耐药视网膜母细胞瘤(RB)细胞化疗敏感性的影响。方法:建立人RB VCR耐药细胞株SO-RB50/VCR,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测SO-RB50与SO-RB50/VCR细胞lncRNA HIF1A-AS1表达;在SO-RB50/VCR细胞中抑制lncRNA HIF1A-AS1表达或同时过表达HIF-1α,检测SO-RB50/VCR细胞对VCR的半数抑制浓度(IC_(50))及细胞增殖、凋亡情况;Western blot检测HIF-1α、多药耐药相关蛋白(MRP)、P-糖蛋白(P-gp)蛋白表达。结果:与SO-RB50细胞相比,SO-RB50/VCR细胞中lncRNA HIF1A-AS1与HIF-1α蛋白表达水平升高(P<0.05);在SO-RB50/VCR细胞中抑制lncRNA HIF1A-AS1表达后,细胞凋亡率显著升高(P<0.05),细胞吸光度(OD_(450))值显著降低,VCR对细胞的IC_(50)值及HIF-1α、MRP、P-gp蛋白表达水平显著降低(P<0.05);过表达HIF-1α可减弱下调lncRNA HIF1A-AS1表达对SO-RB50/VCR细胞耐药性的抑制作用。结论:lncRNA HIF1A-AS1在SO-RB50/VCR细胞中高表达,抑制lncRNA HIF1A-AS1表达可通过下调HIF-1α表达,降低SO-RB50/VCR细胞对VCR的耐药性。

靶向载长春新碱超声微泡的制备及体外寻靶实验研究

目的 制备载长春新碱(VCR)且靶向结合外周神经髓鞘细胞的超声脂质微泡,观察其体外寻靶情况。方法 采用薄膜水化-机械振荡法制作载药超声微泡(VCR-MBs),生物素-亲和素桥接法制作靶向载药超声微泡(VCR-TMBs),观察VCR-TMBs形态、粒径、稳定性、体外显影、包封率及靶向性等理化性质。流式细胞仪检测VCR-TMBs对细胞的损伤及凋亡作用,体外通过VCR-TMBs联合超声(US)对大鼠肾动脉处理,HE染色观察脱髓鞘改变。结果 MBs、VCR-MBs及VCR-TMBs光镜下均成圆形,分布均匀。MBs、VCR-MBs及VCR-TMBs粒径分别为(3.22±1.07)、(3.48±1.06)及(3.22±0.79)μm,差异无统计学意义(P>0.05);与MBs、VCR-MBs相比,VCR-TMBs保存3 d时浓度明显下降(P<0.05);采用高效液相色谱法测定VCR-TMBs的包封率及载药率分别为(82.90±9.98)%、(2.07±0.25)%;免疫荧光法测定VCR-TMBs可靶向聚集在Schwann细胞膜上;流式细胞仪检测示VCR-TMBs+US促细胞凋亡作用优于单纯VCR+US及VCR-MBs+US(P<0.05);组织HE染色示VCR-TMBs联合US可有效使体外大鼠肾动脉神经脱髓鞘及变性坏死。结论 成功制备VCR-TMBs,其可靶向识别Schwann细胞,促进细胞凋亡,使大鼠肾动脉神经脱髓鞘改变,可为后期体内VCR-TMBs实现肾动脉周围神经去交感化做前期准备。

基于案例分析和FAERS数据库挖掘的长春新碱/强的松药品不良反应风险信号研究

目的探讨长春新碱/强的松与肝损伤、脂代谢异常发生风险的相关性。方法基于案例与FAERS数据库,采用关联性分级评价标准及Logistics回归法分析。结果强的松、长春新碱联合用药增加儿童患者肝损伤(ROR=2.109,P=0.000)风险信号、单用长春新碱的患者发生脂代谢异常的风险信号较强的松低(ROR=0.347,P=0.000)。结论强的松联合长春新碱增加儿童患者肝损伤风险信号。

长春新碱纳米缓释新剂型的制备及性能研究

采用非离子表面活性剂在亲水介质中进行自组装,成功制备了双分子层硫酸长春新碱囊泡,并对其制备条件、粒径分布、囊泡形态、包封率及体外释放进行了探究。实验结果表明,通过电子显微镜观察分析,制备的双分子层硫酸长春新碱囊泡呈现规则的球形形态,并具有较为均匀的尺寸分布。紫外分光光度计测定结果显示,囊泡具有较高包封率,能够有效封装药物。体外释放实验显示,双分子层硫酸长春新碱囊泡具有良好的药物缓释性能,释放速率稳定且符合预期缓释效果。研究结果为双分子层硫酸长春新碱囊泡作为药物递送系统的应用提供了有力支持。

汉防己甲素对阿霉素或长春新碱耐药株人癌细胞的逆转抗药性作用

在敏感株和阿霉素耐药株ＭＣＦ－７和ＭＣＦ－７／Ａｄ以及敏感株和长春新碱耐药株ＫＢ和ＫＢｖ２００两种人癌细胞的体外试验中，发现汉防己甲素对耐药细胞株的ＭＣＦ－７／Ａｄ具有明显的选择性作用。

一株产长春新碱内生真菌的初步研究

目的 通过长春花叶内生真菌的分离 ,筛选产生长春新碱的菌株。方法 从长春花叶中分离内生真菌 ,对其发酵提取物进行 TL C和 HPL C分析。结果 从长春花叶中分离筛选到一株无孢菌群菌株 :97CY3。它能产生长春新碱 ,HPL C测定其长春新碱含量约为 0 .2 0 5 μg/ L。结论 长春花内生真菌中 ,有的菌株可产生与宿主所产相同的抗癌物质长春新碱。

积雪草甙诱导肿瘤细胞凋亡及增强长春新碱的抗肿瘤作用

背景与目的:中药积雪草的三萜类成分积雪草甙(asiaticoside,ATS)具有促进胶原蛋白合成作用,对创伤愈合有较好的疗效。近年有文献报道积雪草甙有一定的抗肿瘤活性。本文研究积雪草甙诱导肿瘤细胞凋亡及其与长春新碱(vincristine,VCR)的协同作用。方法:采用MTT法检测积雪草甙单用或合用VCR对KB、KBv200、MCF-7和MCF-7/ADM细胞的增殖抑制作用,流式细胞术分析KB细胞周期和凋亡率的变化,琼脂糖凝胶电泳、荧光显微镜和Westernblot方法观察KB细胞凋亡和细胞周期相关性质改变。结果:积雪草甙对KB、KBv200、MCF-7和MCF-7/ADM细胞的IC50分别为(1.11±0.13)、(1.82±0.08)、(1.58±0.15)mg/ml和(3.25±0.46)mg/ml,且KBv200和MCF-7/ADM细胞对积雪草甙表现出与相应的亲本细胞相近的药物敏感性。经积雪草甙处理后的KB细胞表现出凋亡细胞特征性的改变。积雪草甙与VCR合用对多种肿瘤细胞均有显著协同作用,合并用药组KB细胞凋亡率、Bcl-2蛋白磷酸化水平明显高于单用组,且仅有合用组检测到活化后的caspase-3蛋白。积雪草甙与VCR合用组KB细胞阻滞于S-G2/M期的比率和CyclinB1蛋白的表达水平高于单用组,P34cdc2蛋白表达略有降低。结论:积雪草甙可诱导肿瘤细胞凋亡并与长春新碱显示协同作用,有可能作为生化调节剂应用于肿瘤化?

主动载药法制备硫酸长春新碱脂质体及其包封率的测定

目的制备硫酸长春新碱脂质体,建立包封率测定方法。方法采用pH梯度法制备硫酸长春新碱脂质体;以阳离子交换树脂分离脂质体和游离药物;用RP-HPLC测定脂质体的包封率。结果硫酸长春新碱脂质体包封率大于85%;在所建立的色谱条件下硫酸长春新碱与辅料及溶剂峰分离良好;硫酸长春新碱在1.0～12.5mg·L^(-1)内线性关系良好(r=0.9999);精密度和回收率均合格。结论pH梯度法适于制备硫酸长春新碱脂质体,所建立的分析方法准确可靠,简单快速,可以用于硫酸长春新碱脂质体包封率的测定。

长春新碱载药红细胞制备及其生物学特性研究

目的探讨红细胞作为长春新碱(vincristine,VCR)载体的可行性及其载药参数和生物学特性,为其应用提供实验依据。方法改良低渗预膨胀法制备VCR载体红细胞,高效液相色谱法分析载体红细胞内、外液VCR含量,自动血液分析仪测定红细胞生理指标,考察红细胞VCR载药量、载药率和载体细胞回收率等参数。采用4℃保存定时提取上清液比较VCR含量并观测上清液溶血情况、渗透脆性检测,以显微镜观察等方法考察载体红细胞的载药释放、贮存稳定、渗透脆性和形态等生物学特性。结果预膨胀红细胞与VCR的0.6%盐水溶液作用后,单位数量(1×109/ml)红细胞载药量最高,达49.59μg;预膨胀红细胞与上述VCR溶液作用20min后载药达到稳定;VCR浓度在50～2000μg/ml范围内时,单位数量红细胞的载药量(y,μg)可按y=0.0982x-2.4658计算,线性相关系数r=0.9961。红细胞总载药率为(61.42±3.69)%,载体红细胞回收率为(90.61±4.95)%。载体红细胞渗透脆性减低,形态无明显变化,体积略有增大与载药量成正比(r=0.9880),药物释放缓慢,4h连续释放率(11.35±1.65)%,可稳定贮存5d。结论红细胞可作为VCR载药,载药参数良好,生物学特性无明显改变。

肿瘤细胞中长春新碱的高效液相色谱法测定

长春新碱（ＶＣＲ）为重要和常用抗肿瘤药物之一。肿瘤细胞耐药性是导致化疗失败的主要原因。为了筛选耐药细胞的逆转剂，建立了测定肿瘤细胞内ＶＣＲ浓度的高效液相色谱法，色谱条件为：Ｚｏｒｂａｘ－ＯＤＳ反相柱２５ｃｍ×４．６ｍｍｉ．ｄ．，流动相：０．０２ｍｏｌ／ＬＫ２ＨＰＯ４（ｐＨ６．６）∶ＣＨ３ＯＨ（２０∶８０，Ｖ／Ｖ），流速：１．０ｍＬ／ｍｉｎ，检测波长：２６７ｎｍ。方法简单、快速、选择性好，在１０～２００ｍｇ／Ｌ范围内ＶＣＲ浓度－峰高呈良好的线性关系（ｒ＝０．９９９８），仪器灵敏度为４ｎｇ。所建立的方法适合于ＶＣＲ的血药浓度测定及ＶＣＲ在肿瘤细胞、组织中的代谢、分布、排泄、蓄积等研究。

长春新碱与人血清白蛋白的相互作用研究

利用荧光和圆二色光谱研究了长春新碱(VCR)与人血清白蛋白(HSA)之间的相互作用.通过荧光猝灭测得在288,298和308K时,VCR与HSA的结合常数K分别为2.14×104,1.73×104和1.35×104L·mol-1,表明VCR与HSA间具有较强的结合作用,属于静态猝灭.计算出焓变(△H)为-17.38kJ·mol-1,熵变(△S)为22.62J·mol-1·K-1,结合分子模型理论计算的结果,表明VCR与HSA相互作用时在色氨酸(Trp)214残基和VCR分子中吲哚基间作用力以疏水作用力为主,但在VCR和HSA分子间以静电引力为主.圆二色光谱(CD)的数据表明相互作用后HSA的二级结构发生了改变:HSA的α-螺旋的含量从51.7%下降到32.9%,β-折叠的含量增加了9.2%.

长春花抗癌成分长春新碱研究的进展

长春新碱是从抗癌中药长春花叶中提出的二聚吲哚类生物碱 ,临床上用于治疗急性淋巴细胞白血病、何杰金及非何杰金淋巴瘤有确切疗效 ,但由于具有较大的神经系统毒性和局部刺激性 ,限制了其在临床上的应用。本文在简述其理化、药理、药动学特性基础上 ,综述了为解决长春新碱副作用 ,临床上主要采用联合用药方式的研究进展 ,及制剂学上 ,采用与抗体结合、脂质体包裹以及控释膜等制剂新技术。

长春新碱神经毒性的探索研究

目的:用蟾蜍的坐骨神经模型对长春新碱是否存在神经毒性进行观察。方法:分离蟾蜍的坐骨神经干(24根),分两组,用含不同浓度长春新碱的任氏药液浸泡60 min,取出放到屏蔽盒中,测定阈值后,用其正常状态下测出的最大刺激检测传导速度、正负相峰值。结果:长春新碱在3μg·mL^(-1)浓度下,可造成坐骨神经干的兴奋阈值显著升高(P<0.001),同时传导信号的峰值也有显著下降(峰峰值)(P<0.05),本实验中发现主要是对正相峰有显著的抑制作用。结论:长春新碱可造成神经干损伤,使下肢无力或无法控制。

硫酸长春新碱传递体的制备及其离体透皮研究

目的:筛选制备硫酸长春新碱传递体(VCR-T)的最佳工艺,预测其作为VCR新制剂的可行性。方法:采用干膜超声法通过正交试验优化制备工艺;激光散射粒径分析仪测量粒径及其分布,透射电镜观察形态,HPLC测定包封率;改良的Franz扩散池进行体外透皮试验。结果:最优处方及工艺:卵磷脂:去氧胆酸钠为70:20,载体:VCR为45:10;pH7.3,水合30min;制备的硫酸长春新碱传递体为淡黄色透明胶体溶液,平均粒径94nm,外形圆整光滑,分布均匀,包封率为90%;以零级速率透过皮肤,24h累积透皮吸收率为63.8%。结论:VCR-T有望成为VCR临床给药的一种新给药系统。

长春新碱载体红细胞的体外抗肿瘤作用

目的探讨长春新碱(VCR)载体红细胞的体外抗肿瘤活性。方法采用改良低渗预膨胀技术制备VCR载体红细胞,并将VCR载体红细胞与人红白血病细胞株K562共培养,MTT法检测K562细胞增殖,PI/Rhodamin123染色,流式细胞分析K562细胞周期和细胞凋亡情况,Hoechest33258细胞核染色观察凋亡K562细胞核形态。结果VCR载体红细胞可明显抑制K562细胞增殖并促其凋亡,且该作用随剂量增高而加强。与载体红细胞混合培养24h后,S+G2/M期K562细胞明显增多,G0/G1期细胞减少,与VCR原药作用一致,与未载药红细胞的作用相比差异显著(P<0.01)。结论经红细胞载药并释放出来的VCR在体外具有与原药相同的抗肿瘤活性。