长链非编码RNA淋巴样增强因子1反义RNA 1调控miR-339-5p对骨肉瘤细胞增殖和凋亡作用的研究

背景:长链非编码RNA(lncRNA)淋巴样增强因子1反义RNA 1(LEF1-AS1)在骨肉瘤中的生物学意义及机制尚不清楚。目的:研究LEF1-AS1对微小RNA(miR)-339-5p的靶向调控及对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法:实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测LEF1-AS1、miR-339-5p在人骨肉瘤组织和瘤旁组织中的表达。在细胞U2OS中转染si-LEF1-AS1,细胞计数试剂盒8(CCK-8)和克隆形成测定细胞增殖与克隆能力,流式细胞术检测细胞凋亡,免疫印迹实验检测P21和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)蛋白表达。生物信息学预测和双荧光素酶报告实验分析LEF1-AS1和miR-339-5p的靶向关系。在细胞U2OS中共转染si-LEF1-AS1和anti-miR-339-5p,或共转染siLEF1-AS1和miR-339-5p,观察其在细胞增殖和凋亡中的作用。结果:与瘤旁组织比较,骨肉瘤组织中的LEF1-AS1表达量明显升高,miR-339-5p表达量显著减少(P<0.05)。抑制LEF1-AS1明显降低细胞U2OS的存活率和克隆形成数,显著提高凋亡率、P21和Caspase-3蛋白水平(P<0.05)。LEF1-AS1靶向、调控miR-339-5p的表达。si-LEF1-AS1和anti-miR-339-5p共转染明显减少细胞U2OS中miR-339-5p表达量、P21、Caspase-3蛋白表达量、细胞凋亡率,显著增加细胞U2OS存活率和克隆形成数(P<0.05)。si-LEF1-AS1和miR-339-5p共转染明显提高miR-339-5p表达量、P21、Caspase-3蛋白表达量和细胞凋亡率,显著降低细胞U2OS存活率和克隆形成数(P<0.05)。结论:LEF1-AS1靶向调控miR-339-5p的表达,抑制LEF1-AS1可抑制骨肉瘤细胞的增殖并诱导细胞凋亡。

长链非编码RNA脑源性神经营养因子-反义物和信号素3B-反义物1在胃癌病人中的表达及联合超声检查在胃癌诊断中的应用

目的探究长链非编码RNA(lncRNA)脑源性神经营养因子-反义物(BDNF-AS)和信号素3B-反义物1(SEMA3B-AS1)在胃癌病人中的表达及联合超声检查在胃癌诊断中的应用价值。方法2021年1月~2023年2月收治的118例胃癌病人为胃癌组,同期113例胃部良性病变者为良性病变组。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测血清BDNF-AS和SEMA3B-AS1表达水平,并以平均值分为BDNF-AS高表达组(55例)和BDNF-AS低表达组(63例)、SEMA3B-AS1高表达组(57例)和SEMA3B-AS1低表达组(61例);Kappa检验分析超声诊断与临床病理诊断的一致性;受试者工作特征曲线(ROC)分析血清BDNF-AS和SEMA3B-AS1联合超声对胃癌的诊断价值。结果与良性病变组比较,胃癌组血清BDNF-AS和SEMA3B-AS1水平均明显下降(t=10.205,t=9.590,P<0.05);BDNF-AS和SEMA3B-AS1在肿瘤直径≥3 cm、浸润深度较深、分化程度较低、发生淋巴结转移的胃癌病人中表达水平明显较低(P<0.05);Kappa检验结果显示,超声诊断与临床病理诊断的一致性较高(Kappa值=0.723,P<0.05);ROC结果显示,血清BDNF-AS、SEMA3B-AS1水平和超声诊断胃癌的AUC分别为0.848、0.835、0.861,三者联合诊断的AUC(0.949)显著大于血清BDNF-AS单独诊断的AUC(Z=4.713,P=0.000)、血清SEMA3B-AS1水平单独诊断的AUC(Z=4.112,P=0.0015)和超声诊断的AUC(Z=3.350,P=0.0008),联合诊断的敏感度、特异度优于三者单独诊断。结论血清BDNF-AS和SEMA3B-AS1联合超声检查在胃癌的诊断上具有较高的应用价值。

长链非编码RNA赖氨酰氧化酶样蛋白1反义RNA在结直肠癌中的表达及对结直肠癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响

目的 探究长链非编码RNA(lncRNA)赖氨酰氧化酶样蛋白1反义RNA(LOXL1-AS1)在结直肠癌中的表达及对结直肠癌细胞增殖、侵袭及迁移能力的影响和可能的作用机制。方法 选取2016年1月至2018年12月在河南省人民医院行结直肠癌根治术的56例病人新鲜癌组织,采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测结直肠癌组织样本及结直肠癌细胞系SW480、SW620、HCT116和Lovo细胞中lncRNA LOXL1-AS1的表达水平,以配对癌旁组织及人正常结直肠黏膜细胞FHC作正常对照;构建靶向LOXL1-AS1序列的小干扰RNA(si-LOXL1-AS1)并转染SW480和Lovo细胞,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、平板克隆实验、划痕实验和Transwell小室法检测沉默lncRNA LOXL1-AS1表达对结直肠癌细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响。采用蛋白质印迹法(Western blotting)检测沉默LOXL1-AS1表达后磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路相关蛋白及上皮-间质转化(EMT)相关蛋白的表达情况。结果 LOXL1-AS1在结直肠癌组织中的相对表达水平显著高于癌旁组织(1.37±0.05比0.87±0.05,P<0.05),其表达水平与肿瘤分化程度、TNM分期、肝转移和MSI状态显著相关(均P<0.05);LOXL1-AS1在结直肠癌细胞系(SW480、SW620、HCT116、Lovo)中的表达水平显著高于FHC细胞(1.93±0.10、1.32±0.04、1.50±0.07、1.78±0.09比1.10±0.07,P<0.05),沉默lncRNA LOXL1-AS1表达可抑制SW480细胞和Lovo细胞的增殖、侵袭及迁移能力,E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达含量升高,N-钙黏蛋白(N-cadherin)、磷酸化脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)和磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)表达含量降低(均P<0.05)。结论 LOXL1-AS1在结直肠癌组织中高表达并与临床病理特征相关,沉默LOXL1-AS1可显著降低结直肠癌细胞的增殖、侵袭及迁移能力,该机制可能与PI3K/Akt信号通路及EMT途径有关。

长链非编码RNA肿瘤蛋白翻译调节因子1-反义RNA1在神经胶质瘤细胞中的表达及对其增殖和侵袭的影响

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)肿瘤蛋白翻译调节因子1-反义RNA1(TPT1-AS1)对神经胶质瘤细胞U251增殖、侵袭的影响。方法将U251分为空白对照组、阴性转染组、TPT1-AS1过表达组,空白对照组不做处理,另两组进行相应质粒的转染,转染48 h后比较各组U251细胞中TPT1-AS1表达水平;MTT法测定各组U251细胞的存活率;流式细胞仪测定各组U251细胞的凋亡能力;Transwell小室实验检测各组U251细胞侵袭能力;划痕实验检测各组U251细胞迁移能力;Western blot检测各组U251细胞凋亡[半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、Bax、Bcl-2]及侵袭[基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9]相关蛋白表达情况。结果阴性对照组与空白对照组比较,TPT1-AS1表达、细胞存活率、细胞凋亡率、侵袭细胞数、划痕愈合率及Caspase-3、Bax、Bcl-2、MMP-2、MMP-9蛋白表达,差异无统计学意义(P>0.05)。TPT1-AS1过表达组TPT1-AS1表达水平、细胞凋亡能力、Caspase-3、Bax蛋白表达均高于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05);TPT1-AS1过表达组Bcl-2蛋白表达、细胞存活率、侵袭、迁移能力、侵袭相关蛋白表达均低于空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论TPT1-AS1在U251中呈现低表达,高表达的TPT1-AS1可抑制神经胶质瘤细胞的增殖及侵袭能力。

血清长链非编码RNA生长阻滞特异性基因6反义RNA1与冠状动脉粥样硬化病变程度及稳定性的相关性

目的检测冠状动脉粥样硬化(CAS)患者血清长链非编码RNA生长阻滞特异性基因6反义RNA1(lncRNAGAS6-AS1)的表达水平,分析其与CAS病变程度及稳定性的关系。方法选取2020年2月至2021年8月期间在武汉市汉口医院接收的124例CAS患者为CAS组,同期在我院体检的健康者124例为对照组;检测并比较各组血清中lncRNAGAS6-AS1和白介素-6(IL-6)的表达水平,分析CAS患者血清lncRNA GAS6-AS1与IL-6表达水平、Gensini积分的相关性。结果与对照组相比,CAS组血清lncRNA GAS6-AS1的表达水平降低,IL-6表达水平升高(t=43.614、23.404,P<0.05);稳定性、不稳定性心绞痛和急性心肌梗死患者中lncRNA GAS6-AS1表达水平依次降低,IL-6表达水平依次升高(F=6.821、7.495,P<0.05);单支、双支、多支病变患者血清lncRNAGAS6-AS1表达水平依次降低,IL-6表达水平依次升高(F=12.946、13.023,P<0.05);轻、中、重度病变组血清lncRNA GAS6-AS1表达水平依次降低,IL-6表达水平依次升高(F=15.900、6.224,P<0.05);CAS患者血清lncRNAGAS6-AS1与IL-6表达水平和Gensini积分呈负相关(r=-0.685、-0.699,P<0.05)。结论CAS患者血清lncRNA GAS6-AS1表达水平可能可以作为反映CAS病变严重程度和稳定性的潜在生物标志物。

长链非编码RNA在急性肺损伤中的作用及分子调控机制研究进展

急性肺损伤(ALI)是临床上常见的危重症之一。长链非编码RNA(lncRNA)是一类长度超过200个核苷酸的非蛋白质编码RNA,在染色质形成、转录和转录后翻译等基因表达水平直接或间接参与ALI的发生发展。lncRNA核富集丰富转录物1、lncRNA HOX转录反义基因间RNA及lncRNA牛磺酸上调1等lncRNA可作为竞争性内源RNA,与miR-26a-5p、miR-17-5p及miR-34b-5p等微小RNA结合,调节Wnt1诱导的信号通路蛋白1、Rho关联含卷曲螺旋结合蛋白激酶1蛋白及自噬相关蛋白等下游相关蛋白的表达,参与ALI的发生发展。LncRNA可能通过调控DNA甲基化、组蛋白修饰,在表观遗传水平参与ALI的发生发展;L通过组装转录激活因子和抑制因子,调节白细胞介素6(IL-6)、IL-17、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3/9等蛋白质的转录,在转录水平参与ALI的发生发展;与多种RNA结合蛋白相互作用,在转录后水平调控ALI的发生发展。

长链非编码RNA SBF2-AS1通过miR-372-3p/CDK6轴调控肝癌细胞侵袭及增殖

目的探讨长链非编码RNA SET结合因子2反义RNA1(lnc RNA SBF2-AS1)调控mi R-372-3p/细胞分裂蛋白激酶6(CDK6)轴对肝癌细胞侵袭及增殖的影响。方法以Bel7402和SK-hep1细胞为研究对象,上调或下调SBF2-AS1、miR-372-3p及CDK6表达水平,实时荧光定量PCR及Western blot检测细胞中miR-372-3p及CDK6表达水平。双荧光素酶报告基因实验分别验证SBF2-AS1和miR-372-3p、miR-372-3p和CDK6靶向关系。CCK-8、集落形成实验、Transwell、细胞周期实验及流式细胞术分析细胞增殖、集落形成、迁移/侵袭能力、细胞周期活动及凋亡。结果SBF2-AS1在肝癌细胞中高表达(P<0.05)。敲降SBF2-AS1后,Bel7402和SK-hep1细胞侵袭、增殖能力降低(P<0.05)。敲降miR-372-3p后,Bel7402细胞侵袭、增殖能力升高,同时敲降SBF2-AS1后,可反转上述效应(P<0.05)。miR-372-3p靶向CDK6并抑制后者的表达,过表达SFB2-AS1,可反转上述效应(P<0.05)。过表达CDK6,可以逆转过表达miR-372-3p对Bel7402细胞侵袭及增殖的抑制。结论lncRNA SBF2-AS1通过miR-372-3p正向调控CDK6的表达,改变肝癌细胞的周期活动,影响肝癌细胞的增殖、侵袭能力。

长链非编码RNA ILF3-AS1在临床常见恶性肿瘤中的研究进展

恶性肿瘤起病隐匿,缺乏特异性症状和有效的诊断和治疗手段,确诊时多为晚期且预后不良。高通量测序技术的发展使得针对突变基因的个体化精准治疗成为新的方向。长链非编码RNA(lncRNA)在肿瘤的发生发展过程中发挥重要作用。白细胞介素增强子结合因子3-反义RNA 1(ILF3-AS1)作为一种新近发现的lncRNA在诸多临床常见恶性肿瘤中表达异常。lncRNA ILF3-AS1通过多种调控机制及信号通路促进恶性肿瘤细胞的增殖、迁移、侵袭和上皮-间充质转化过程,其表达水平与患者临床预后密切相关。因此,未来对lncRNA ILF3-AS1进行深入研究有助于相关恶性肿瘤的早期诊断、靶向治疗和预后评估。

抑制lncRNA TUG1下调核苷酸结合寡聚结构域样受体蛋白1炎症小体在延缓阿尔茨海默病进展的作用

目的探讨敲低长链非编码RNA(lncRNA)牛磺酸上调基因1(TUG1)抑制核苷酸结合寡聚结构域样受体蛋白1(NLRP1)炎症小体在缓解阿尔茨海默病进展中的作用。方法选取9~10周龄遗传背景为C57/BL6的野生型小鼠(WT组,10只)或淀粉样前体蛋白(APP)/早老素1(PS1)转基因小鼠(30只)。APP/PS1转基因小鼠随机分为模型(model)组,模型+敲低lncRNA TUG1组[model+lncRNA TUG1短发夹RNA(shRNA)组]和model+shRNA非靶标(NT)组,每组10只。分别采集12周龄第1天(3月龄)和32周龄第1天(8月龄)小鼠外周血和脑皮质组织,并分离皮质中的原代小胶质细胞和原代星形胶质细胞,每个时间点每组5只小鼠。Real-time PCR分别测定3月龄和8月龄上述4个分组小鼠脑皮质组织和原代小胶质细胞中lncRNA TUG1和巨噬细胞移动抑制因子(MIF)mRNA的水平,以及原代星形胶质细胞中补体蛋白C1r和C1s mRNA的水平。ELISA法测定其外周血浆中MIF含量。对3月龄和8月龄小鼠脑皮质原代小胶质细胞和原代星形胶质细胞共培养。CCK-8法测定上述2种细胞的增殖能力。Western blotting分别测定3月龄和8月龄上述4个分组小鼠脑皮质组织中MIF、白细胞介素1β前体(pro-IL-1β)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、Caspase-1(p20)、Caspase-1(full)、NLRP1及NLRP3蛋白的表达水平。采用免疫荧光染色法测定8月龄各分组小鼠脑皮质组织中β淀粉样蛋白(Aβ)表达。结果3月龄和8月龄时,与WT组小鼠相比,model组小鼠脑皮质组织和原代小胶质细胞中lncRNA TUG1和MIF相对表达水平显著上调,原代小胶质细胞和原代星形胶质细胞增殖能力增强(P<0.05)。与model组相比,model+lncRNA TUG1 shRNA组小鼠脑皮质组织和原代小胶质细胞中lncRNA TUG1和MIF的相对表达水平显著降低,原代小胶质细胞和原代星形胶质细胞增殖能力降低(P<0.05)。与WT组相比,model组小鼠外周血浆中MIF含量显著升高;小鼠脑皮质组织中pro-IL-1β、ASC、Caspase-1(p20)、Caspase-1(full)、NLRP1以及NLRP3的蛋白表达水平显著升高;Aβ免疫荧光强度明显增强(P<0.05)。与model组相比,model+lncRNA TUG1 shRNA组小鼠外周血浆中MIF含量显著降低;小鼠脑皮质组织中pro-IL-1β、ASC、Caspase-1(p20)、Caspase-1(full)和NLRP1的蛋白表达水平显著降低,Aβ免疫荧光强度明显降低(P<0.05),而NLRP3蛋白质的表达水平无明显变化(P>0.05)。与model组相比,model+shRNA NT组小鼠上述所有检测指标差异均无显著性(P>0.05)。结论APP/PS1转基因小鼠脑皮质组织和原代小胶质细胞中lncRNA TUG1和MIF因子表达上调与脑皮质内NLRP1炎症小体激活成正相关,敲低lncRNA TUG1可缓解阿尔茨海默病的进展。

难治性肺炎支原体肺炎患儿血清长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录因子1和烟酰胺核苷酸反义转氢酶RNA1检测的临床意义

目的探讨难治性肺炎支原体肺炎(refractory Mycoplasma pneumoniae pneumonia,RMPP)患儿血清长链非编码核糖核酸(long non-coding ribonucleic acid,LncRNA)肺腺癌转移相关转录因子1(metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript 1,MALAT1)、烟酰胺核苷酸反义转氢酶RNA1(nicotinamide nucleotide transhydrogenase-antisense RNA1,NNT-AS1)检测的临床意义。方法选择2018年1月1日~2021年1月1日辽宁省健康产业集团阜新矿总医院收治的200例肺炎支原体肺炎患儿,其中43例为RMPP(RMPP组),157例为普通肺炎支原体肺炎(普通肺炎组),另选择100例健康儿童为对照组。检测血清LncRNA MALAT1和LncRNA NNT-AS1表达水平以及炎性因子[C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、降钙素原(procalcitonin,PCT)、白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)]水平。分析血清LncRNA MALAT1和LncRNA NNT-AS1表达水平与炎性因子水平的相关性。收集临床资料,分析影响RMPP发病的影响因素,比较不同疗效RMPP患儿血清LncRNA MALAT1和LncRNA NNT-AS1表达水平的差异。结果RMPP组、普通肺炎组和对照组血清LncRNA MALAT1(3.26±0.85,1.32±0.41和1.05±0.37)和LncRNA NNT-AS1(3.38±0.92,1.41±0.40和1.06±0.39)水平比较差异均有统计学意义(F=335.693,335.828,均P<0.05),血清CRP(45.24±2.01 mg/L,19.02±3.27 mg/L和3.26±0.77 mg/L),PCT(1.58±0.52μg/L,0.82±0.16μg/L和0.31±0.09μg/L),IL-8(42.77±8.84μg/L,26.35±5.91μg/L和13.02±3.79μg/L)和TNF-α(9.22±2.61μg/L,5.02±1.49μg/L和3.32±0.96μg/L)水平比较差异均有统计学意义(F=4207.164,457.187,410.300,214.875,均P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示血清LncRNA MALAT1,LncRNA NNT-AS1表达水平均与CRP,PCT,IL-8,TNF-α水平呈正相关(r=0.715~0.922,均P<0.05)。Logistic逐步回归分析结果显示肺大片实变影[OR(95%CI)=2.212(1.396~3.506)]、CRP高表达[OR(95%CI)=2.111(1.313~3.392)]、LncRNA MALAT1高表达[OR(95%CI)=1.826(1.189~2.805)]、LncRNA NNT-AS1高表达[OR(95%CI)=1.758(1.149~2.689)]是RMPP发病的危险因素(均P<0.05)。43例RMPP患儿治疗有效38例(有效组),无效5例(无效组),有效组血清LncRNA MALAT1(3.16±0.24)和LncRNA NNT-AS1(3.29±0.20)表达水平低于无效组(4.02±0.09,4.06±0.10),差异有统计学意义(t=7.869,8.406,均P<0.05)。结论LncRNA MALAT1和LncRNA NNT-AS1可能通过调节炎症反应参与RMPP发病,检测LncRNA MALAT1和LncRNA NNT-AS1表达可为RMPP治疗疗效评估提供参考。

长链非编码RNA TPT1-AS1促进肝癌细胞增殖、迁移、侵袭的作用研究

目的研究肿瘤蛋白翻译调节因子1反义-RNA1(TPT1-AS1)在肝细胞和肝癌细胞中表达的差异,及其对肝细胞癌增殖、迁移、侵袭、上皮细胞间质化(EMT)的影响。方法2018年9月—2020年6月于西安交通大学实验室进行细胞实验,使用qRT-PCR分别检测92例经手术切除的肝癌组织与对应癌旁肝组织,肝癌细胞HepG2、SNU-182和人肝永生化细胞THLE-3中TPT1-AS1相对表达量。根据qRT-PCR测得肝癌组织中TPT1-AS1表达量中位数(3.38),将患者分为TPT1-AS1高表达组(n=46)和低表达组(n=46)。使用Kaplan-Meier法分析比较2组患者5年生存率的差异。使用siRNA转染HepG2和SNU-182细胞以沉默TPT1-AS1表达,以阴性对照siRNA(si-NC)转染相同细胞作为对照。比较siRNA和si-NC转染HepG2和SNU-182细胞后的增殖、迁移、侵袭、EMT能力差异。结果与对应癌旁组织比较,肝癌组织中TPT1-AS1相对表达水平升高(t/P=54.065/0.000)。高表达组患者BCLC分期C期比例、淋巴结转移比例更高(χ^(2)/P=15.187/0.001,7.379/0.007)。高表达组患者5年生存率低于低表达组(χ^(2)/P=7.354/0.007)。使用siRNA转染的HepG2和SNU-182细胞较si-NC转染对应细胞的细胞集落数量明显减少,G0/G1期细胞比例升高(P均=0.000),S期细胞比例显著降低(P均=0.000),相对迁移距离降低(t/P=25.153/0.000),穿透基底膜的细胞数量减少,G1/S期转换及EMT相关蛋白CDK4、N-cadherin和Vimentin的相对表达量降低(P均=0.000),而p21和E-cadherin蛋白相对表达量升高(P均=0.000)。结论长链非编码RNA TPT1-AS1促进肝癌细胞增殖、迁移、侵袭和EMT,TPT1-AS1有可能作为肝细胞癌的治疗靶点。

缺血性疾病患者血清lncRNA PVT1和FOXM1表达水平及联合心脏磁共振延迟强化成像与预后的关系

目的 探讨缺血性疾病患者血清长链非编码RNA浆细胞瘤转化迁移基因1(lncRNA PVT1)和叉头框转录因子M1(FOX M1)表达水平及联合心脏钆对比剂延迟增强磁共振成像(LGE-MRI)与预后的关系。方法 选取2021年2月-2022年2月我院收治的缺血性心脏病患者118例即为研究组,随访一年根据随访过程中是否发生主要心脏不良事件(MACE),分为MACE组32例,无MACE组86例。同期选择在我院体检健康的志愿者118例为对照组。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测血清lncRNA PVT1的相对表达量。采用酶联免疫吸附试验(E LISA)检测FOXM1水平。受试者工作特征(ROC)曲线分析LGE-MRI、血清lncRNA PVT1和FOXM1对缺血性心脏病患者预后发生MACE的预测价值。结果 研究组患者DBP、SBP、TG、TC、 LDL-C、GLU水平与对照组相比显著升高,HDL-C水平显著降低(P<0.05)。与对照组相比,研究组的血清中lncRNA PVT1和FOXM1水平显著升高(P<0.05)。与无MACE组相比,MACE组患者DBP、SBP、TC、LDL-C水平显著升高, HDL-C水平显著降低(P<0.05)。与无MACE组相比,MACE组患者血清中lncRNA PVT1和FOXM1水平显著升高(P<0.05)。MACE组的LGE-MRI阳性数量显著高于无MACE组(P<0.)05。与LGE-MRI、血清lncRNA PVT1和FOXM1单独预测相比,三者联合预测MACE发生的AUC更高(Z=7.221,P<0.001;Z=7.737,P<0.001;Z=7.091,P<0.001)。结论 缺血性心脏病预后发生MACE的患者血清lncRNA PVT1和FOXM1水平呈高表达,二者联合LGE-MRI对MACE的发生有一定的预测价值。

全新长链非编码RNA IRAIN在乳腺癌中的表达及意义

目的探讨一种全新的长链非编码RNA IRAIN在正常乳腺组织及各分子亚型乳腺癌组织的表达水平及特点。方法半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)确定IRAIN mRNA是否表达于乳腺癌组织中;应用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)方法检测IRAIN mRNA和胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)mRNA在正常乳腺组织及不同分子亚型乳腺癌组织的表达水平及特点;应用链方向特异性RT-PCR(SSRTPCR)绘制IRAIN转录方向;用DNA测序方法分析冰冻人乳腺癌组织中IRAIN SNP位点(rs8034564)杂合状态及等位基因表达特点,明确该基因是否呈单等位印记表达。结果与正常乳腺组织相比,各分子亚型乳腺癌中IRAIN表达均降低,其中以三阴性乳腺癌降低最为明显,人表皮生长因子2(HER2)阳性型乳腺癌IRAIN表达也明显低于正常乳腺组织(P<0.05)。Luminal型同样低于正常乳腺组织,但无统计学意义(P>0.05)。而对后三者做两两比较,无统计学意义(P>0.05)。IGF-1R在预后最好的Luminal型中表达最高,与正常乳腺组织接近,而在预后差的TNB型和HER2阳性型表达明显低于正常乳腺组织及Luminal型(P<0.05)。对TNB型和HER2阳性型两者做比较,无统计学意义(P>0.05);IRAIN转录方向与IGF-1R mRNA的方向相反,是IGF-1R的反义长链非编码RNA;IRAIN在人乳腺癌组织中呈单等位基因表达,且呈单等位基因不均衡表达。结论 IRAIN是IGF-1R基因的反义长链非编码RNA,在人乳腺癌组织中呈单等位基因不均衡表达,可能作为抑癌基因,调控肿瘤细胞生长。

长链非编码RNA在喉癌中的研究进展

喉癌是较常见的恶性肿瘤之一,目前的治疗手段大多会影响患者的生存质量,如何尽早发现并治疗该疾病是当前面对的重要难题。如长链非编码RNA(LncRNA),广泛存在于细胞间质与细胞器中,其长度为200~1 000 bp,可以在特定的生理状态和生物过程中表达,参与遗传修饰的调控,LncRNA在转录和转录后水平参与了细胞的发生、发展过程,部分LncRNA也可作为喉癌早期诊断指标或评价喉癌预后的标志物。因此,LncRNA可作为肿瘤治疗新的靶点,并有助于为患者预后做出准确判断。

长链非编码RNA ABHD11-AS1对结直肠癌细胞生长和转移的影响及调控机制

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)α/β水解酶域11反义RNA1(ABHD11-AS1)对结直肠癌细胞生长和转移的影响,并基于miR-133a/真核起始因子4A1(EIF4A1)轴分析其可能的调控机制。方法 (1)取人结直肠癌细胞HT-29、SW480、DLD-1、HCT116、LOVO、SW620,以及正常结直肠黏膜细胞FHC,检测细胞中lncRNA ABHD11-AS1的表达情况。(2)分别通过miRcode、TargetScan数据库预测ABHD11-AS1与miR-133a、miR-133a与EIF4A1的靶向关系,并进行双荧光素酶报告基因实验以验证。(3)将HT-29细胞分为NC组(转染Negative Control)、siABHD11-AS1组(转染lncRNA ABHD11-AS1 siRNA)、miR-133a inhibitor组(转染miR-133a inhibitor)、siABHD11-AS1+miR-133a inhibitor组(转染lncRNA ABHD11-AS1 siRNA和miR-133a inhibitor)和siABHD11-AS1+miR-133a inhibitor+siEIF4a1组(转染lncRNA ABHD11-AS1 siRNA、miR-133a inhibitor、EIF4A1 siRNA)。检测转染后除miR-133a inhibitor组以外的其他组细胞增殖、迁移和侵袭能力,NC组、siABHD11-AS1组、miR-133a inhibitor组、siABHD11-AS1+miR-133a inhibitor组细胞的EIF4A1蛋白表达量。结果 (1)ABHD11-AS1均高表达于各种结直肠癌细胞,在HT-29细胞中的表达最高。(2)miR-133a为ABHD11-AS1靶基因,EIF4A1为miR-133a靶基因。(3)siABHD11-AS1组HT-29细胞的增殖、迁移和侵袭能力均低于NC组(均P<0.05),siABHD11-AS1+miR-133a inhibitor组HT-29细胞的增殖、迁移和侵袭能力均高于siABHD11-AS1组(均P<0.05),siABHD11-AS1+miR-133a inhibitor+siEIF4A1组HT-29细胞的增殖、迁移和侵袭能力均低于siABHD11-AS1+miR-133a inhibitor组(均P<0.05)。(4)miR-133a inhibitor组HT-29细胞中EIF4A1蛋白表达量高于NC组(P<0.05);siABHD11-AS1组HT-29细胞中EIF4A1蛋白表达量低于NC组,而siABHD11-AS1+miR-133a inhibitor组HT-29细胞中EIF4A1蛋白表达量高于siABHD11-AS1组(均P<0.05)。结论 ABHD11-AS1在结直肠癌细胞中呈高表达,抑制其表达后结直肠癌细胞的生长和转移能力均下降,其可能通过调控miR-133a/EIF4A1信号轴发挥作用。

血清lncRNA LOXL1-AS1、miR-3614-5p水平对急性心肌梗死后心律失常的预测价值

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)赖氨酰氧化酶样1-反义RNA1(LOXL1-AS1)、微小RNA(miR)-3614-5p在急性心肌梗死患者血清中的表达水平,以及对心律失常的预测价值。方法选择2021年1月—2023年1月西安交通大学第一附属医院心内科住院治疗急性心肌梗死患者148例作为研究对象(急性心肌梗死组),根据患者是否发生心律失常,分为非心律失常亚组(n=96)和心律失常亚组(n=52),另选取同期与急性心肌梗死患者一般资料相匹配的健康体检者148例为健康对照组。比较各组血清lncRNA LOXL1-AS1、miR-3614-5p水平;多因素Logistic回归分析急性心肌梗死后心律失常的影响因素;绘制受试者工作特征曲线(ROC)并计算曲线下面积(AUC)分析血清lncRNA LOXL1-AS1、miR-3614-5p水平对急性心肌梗死后心律失常的预测价值。结果与健康对照组比较,急性心肌梗死组lncRNA LOXL1-AS1水平升高,miR-3614-5p水平降低(t/P=16.248/<0.001、8.397/<0.001);心律失常亚组病变血管支数、lncRNA LOXL1-AS1水平高于非心律失常亚组,左心室射血分数(LVEF)、miR-3614-5p水平低于非心律失常亚组[χ^(2)(t)/P=14.315/<0.001、7.312/<0.001、3.706/<0.001、7.656/<0.001];Target Scan Human网站预测结果显示,lncRNA LOXL1-AS1与miR-3614-5p有结合位点,可能存在靶向关系;多因素Logistic回归分析结果显示,lncRNA LOXL1-AS1高、病变血管支数多是急性心肌梗死后心律失常的危险因素,miR-3614-5p、LVEF高是保护因素[OR(95%CI)=3.542(1.589~7.896)、1.527(1.081~2.156)、0.721(0.601~0.865)、0.789(0.664~0.938)];lncRNA LOXL1-AS1、miR-3614-5p及二者联合预测急性心肌梗死后心律失常的AUC为0.820、0.890、0.932,二者联合优于各自单独预测(Z/P=3.470/0.001、2.293/0.022)。结论急性心肌梗死后心律失常患者血清lncRNA LOXL1-AS1水平显著升高,miR-3614-5p水平显著降低,两者联合对急性心肌梗死后心律失常有较好的预测价值。

术前lncRNA TPT1-AS1和整合素β3水平与结直肠癌根治性切除术后复发转移的相关性

目的探讨术前血清长链非编码RNA肿瘤蛋白翻译调节因子1-反义RNA1(lncRNA TPT1-AS1)、整合素β3(ITGB3)水平与结直肠癌病人根治性切除术后复发转移的相关性。方法选择2019年3月至2020年3月在海南省第二人民医院进行结直肠癌根治性切除术的90例病人为结直肠癌组,选择同期在海南省第二人民医院进行健康体检的人员90例作为对照组,实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测血清lncRNA TPT1-AS1表达水平,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清ITGB3水平,搜集病人资料,Pearson法分析lncRNA TPT1-AS1与ITGB3水平相关性,Cox回归模型分析影响结直肠癌根治性切除术后复发转移的危险因素。结果与对照组比较,结直肠癌组病人术前血清lncRNA TPT1-AS1表达水平(2.62±0.35比1.05±0.12)、ITGB3水平[(236.24±30.62)ng/L比(185.47±25.38)ng/L]显著升高(P<0.05);结直肠癌病人血清lncRNA TPT1-AS1和ITGB3水平呈正相关性(r=0.65,P<0.05);不同分化程度、TNM分期、浸润深度、淋巴结转移及血管侵犯的病人血清lncRNA TPT1-AS1、ITGB3水平比较差异有统计学意义(P<0.05);lncRNA TPT1-AS1、ITGB3高表达组结直肠癌根治术后复发转移率显著高于低表达组(P<0.05);TNM分期、淋巴结转移、血管侵犯、lncRNA TPT1-AS1、ITGB3是影响结直肠癌病人术后复发转移的危险因素(P<0.05)。结论结直肠癌病人根治性切除术前血清lncRNA TPT1-AS1、ITGB3水平升高,与术后复发转移相关,可能成为结直肠癌预后判断的血清标志物。

动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者开颅夹闭术后血清KLF5 mRNA和lncRNA NEAT1表达及其与认知功能的相关性研究

目的探讨动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者开颅夹闭术后血清Kruppel样因子5(KLF5)微小RNA(mRNA)和长链非编码RNA核富含丰富的转录本1(lncRNA NEAT1)表达与认知功能的相关性。方法选取2021年2月至2022年4月在该院进行开颅夹闭术的110例动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者作为研究对象。术后根据认知功能的评分分为认知功能正常(≥26分,对照组)和认知功能障碍(<26分,研究组)。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测血清KLF5 mRNA和lncRNA NEAT1水平;采用简易精神状态量表(MMSE)和蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评分评定患者的认知功能水平;采用Pearson相关分析血清KLF5 mRNA与lncRNA NEAT1的相关性及二者与认知功能障碍的相关性;采用多因素Logistic回归分析动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者认知功能障碍的影响因素;绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清KLF5 mRNA和lncRNA NEAT1水平单独及二者联合对动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者认知功能障碍的诊断价值。结果对照组纳入67例患者,研究组纳入43例患者。术后早期研究组血清KLF5 mRNA和lncRNA NEAT1水平均显著高于对照组,且术后早期血清KLF5 mRNA和lncRNA NEAT1水平均显著高于术前,差异均有统计学意义(P<0.05)。研究组MMSE和MoCA评分均显著低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,血清KLF5 mRNA和lncRNA NEAT1水平呈正相关(P<0.05),且二者均与MMSE和MoCA评分均呈负相关(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,KLF5 mRNA、lncRNA NEAT1高表达均为动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者认知功能障碍的危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,KLF5 mRNA诊断动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者认知功能障碍的曲线下面积(AUC)为0.814,lncRNA NEAT1诊断动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者认知功能障碍的AUC为0.872,二者联合诊断动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者认知功能障碍的AUC为0.950,二者联合诊断优于KLF5和lncRNA NEAT1各自单独诊断(Z联合vs.KLF5mRNA=2.547、Z联合vs.lncRNA NEAT1=3.268,P<0.05)。结论动脉瘤性蛛网膜下腔出血患者开颅夹闭术后血清KLF5 mRNA和lncRNA NEAT1表达升高与认知功能障碍有关,二者联合检测可以更好地预测认知功能障碍的发生。

脑胶质瘤组织lncRNA SOX21-AS1、miR-875-5p表达及其与患者预后的关系

目的探讨脑胶质瘤患者癌组织长链非编码RNA(lncRNA)SRY-box转录因子21反义RNA 1(SOX21-AS1)、miR-875-5p表达及其与患者预后的关系。方法选取2014年7月—2018年8月三门峡市中心医院脑胶质瘤患者77例(胶质瘤组),以颅脑损伤患者50例作为对照组。收集2个组经手术切除的脑胶质瘤组织和正常脑组织,测定组织中lncRNA SOX21-AS1、miR-875-5p相对表达量。采用Pearson相关分析评估lncRNA SOX21-AS1和miR-875-5p的相关性。采用Kaplan-Meier生存曲线分析脑胶质瘤患者的预后情况。采用Cox回归分析评估脑胶质瘤患者预后的影响因素。结果胶质瘤组lncRNA SOX21-AS1相对表达量高于对照组(P<0.001),miR-875-5p相对表达量低于对照组(P<0.001)。不同世界卫生组织(WHO)分级的脑胶质瘤患者lncRNA SOX21-AS1、miR-875-5p相对表达量差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,脑胶质瘤组织中lncRNA SOX21-AS1相对表达量与miR-875-5p相对表达量呈负相关(r=-0.554,P<0.001)。Kaplan-Meier生存曲线分析结果显示,lncRNA SOX21-AS1低表达组、miR-875-5p高表达组累积生存率分别高于lncRNA SOX21-AS1高表达组、miR-875-5p低表达组(P<0.05)。多因素Cox回归分析结果显示,WHO分级和lncRNA SOX21-AS1均是脑胶质瘤患者不良预后的独立危险因素[风险比(HR)值分别为2.266、2.390,95%可信区间(CI)分别为1.452~3.536、1.496~3.818,P<0.001]。结论lncRNA SOX21-AS1和miR-875-5p均与脑胶质瘤患者预后密切相关,或可作为评估脑胶质瘤患者预后的有效指标。

子痫前期患者血清lncRNA HIF1A-AS1,CXCL9水平表达与病情程度及不良妊娠结局的关系分析

目的探讨子痫前期(Preeclanpsia)患者血清长链非编码RNA缺氧诱导因子-1α-反义链1(lncRNA HIF1A-AS1)、CXC趋化因子配体9(CXCL9)表达与病情程度及不良妊娠结局的关系。方法以2021年1月~2022年12月西安高新医院收治的83例子痫前期患者为子痫前期组,根据确诊时间对子痫前期患者进行分组,分为早发型子痫前期组(n=39)和晚发型子痫前期组(n=44);根据病情严重程度将子痫前期患者分为轻度子痫前期组(n=51)和重度子痫前期组(n=32);根据妊娠结局分为正常妊娠结局组(n=56)和不良妊娠结局组(n=27)。收集同期的60例健康妊娠孕妇为对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测血清lncRNA HIF1A-AS1相对表达量,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清CXCL9水平。Spearman秩相关分析血清lncRNA HIF1A-AS1,CXCL9与病情程度的相关性,Logistic回归分析子痫前期患者不良妊娠结局影响因素,绘制受试者工作特征(ROC)曲线评估血清lncRNA HIF1A-AS1,CXCL9对不良妊娠结局预测价值。结果子痫前期组血清lncRNA HIF1A-AS1相对表达量(0.73±0.26)低于对照组(1.15±0.34),CXCL9水平(209.34±45.34 pg/ml)高于对照组(116.80±37.76 pg/ml),差异具有统计学意义(t=8.379,12.903,均P<0.05)。早发型子痫前期组血清lncRNA HIF1A-AS1相对表达量(0.58±0.21)低于晚发型子痫前期组(0.86±0.27),CXCL9水平(236.60±31.02 pg/ml)高于对照组(185.18±23.63 pg/ml),差异具有统计学意义(t=5.226,8.551,均P<0.05)。重度子痫前期组血清lncRNA HIF1A-AS1相对表达量(0.52±0.21)低于轻度子痫前期组(0.97±0.34),血清CXCL9水平(253.38±41.20 pg/ml)高于轻度子痫前期组(159.65±40.79 pg/ml),差异具有统计学意义(t=6.409,10.152,均P<0.05)。血清lncRNA HIF1A-AS1,CXCL9与子痫前期病情具有相关性(r=-0.627,0.651,均P<0.05)。CXCL9[OR(95%CI):1.581(1.098~2.276)]是子痫前期不良妊娠结局独立危险因素(P<0.05),lncRNA HIF1A-AS1[OR(95%CI):0.806(0.673~0.965)]是保护因素(P<0.05);早发型子痫前期[OR(95%CI):1.390(1.088~1.775)]和重度子痫前期[OR(95%CI):1.589(1.222~2.066)]是不良妊娠结局危险因素(均P<0.05)。血清lncRNA HIF1A-AS1,CXCL9及指标联合预测子痫前期不良妊娠结局的AUC分别为0.770,0.767和0.876,指标联合预测价值优于单一指标,差异具有统计学意义(Z=2.455,2.398,均P<0.05)。结论子痫前期患者血清lncRNA HIF1A-AS1表达下调,CXCL9表达上调,两指标与病情严重程度及不良妊娠结局有关,早期联合检测有望成为预测子痫前期患者不良妊娠结局的标志物。