血清长链非编码RNA癌易感性候选基因2表达水平对脓毒症并发急性肾损伤病儿预后的预测价值

目的 探究血清长链非编码RNA(lncRNA)癌易感性候选基因2(CASC2)表达水平对脓毒症并发急性肾损伤(AKI)病儿预后的预测价值。方法 以2019年2月至2021年2月中国人民解放军总医院第八医学中心收治的83例脓毒症并发AKI的病儿为研究对象,根据其28 d生存情况分为生存组57例,死亡组26例。收集病儿的一般临床资料,包括尿量、动脉血二氧化碳分压(PaCO_(2))、急性生理和慢性健康系统Ⅱ(APACHE Ⅱ)评分、胱抑素C(CysC)、C反应蛋白(CRP)、降钙素原、血肌酐等指标水平,并比较。利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测血清lncRNA CASC2水平。采用多因素logistic回归分析影响脓毒症并发AKI病儿预后的危险因素。受试者操作特征(ROC)曲线分析血清lncRNA CASC2、血肌酐对脓毒症并发AKI病儿死亡的预测价值。并利用Pearson相关性分析血清lncRNA CASC2与临床资料的关系。结果 病儿一般临床资料来看,生存组尿量为(0.98±0.21)mL·kg^(-1)·h^(-1)、PaCO_(2)为(45.38±4.37)mmHg、APACHE Ⅱ评分为(17.38±4.09)分、CysC为(17.38±4.09)mg/L、CRP为(43.61±5.19)mg/L、降钙素原为(29.34±3.15)μg/L、血肌酐为(258.19±32.71)μmol/L,死亡组尿量为(0.86±0.18)mL·kg^(-1)·h^(-1)、PaCO_(2)为(38.41±4.11)mmHg、APACHE Ⅱ评分为(23.26±4.87)分、CysC为(2.23±0.37)mg/L、CRP为(46.28±5.28)mg/L、降钙素原为(38.46±4.21)μg/L、血肌酐为(328.34±44.52)μmol/L,组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。与生存组相比,死亡组血清lncRNA CASC2水平显著降低(P<0.05)。多因素logistic回归分析显示,lncRNA CASC2低表达、血肌酐高水平是影响脓毒症并发AKI病儿预后的危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析显示,血清lncRNA CASC2、血肌酐联合预测脓毒症并发AKI病儿死亡的灵敏度为96.2%,特异度为78.9%,曲线下面积(AUC)值显著高于其单一指标检测(Z=2.25,P=0.024;Z=2.05,P=0.040)。Pearson相关性分析结果显示,血清lncRNA CASC2与病儿尿量、PaCO_(2)呈正相关(P<0.05),与APACHE Ⅱ评分、CysC、CRP、降钙素原、血肌酐呈显著负相关(P<0.05)。结论 脓毒症并发AKI预后不良病儿血清lncRNA CASC2水平较预后良好病儿显著下调,其是影响脓毒症并发AKI病儿预后的危险因素,lncRNA CASC2联合血肌酐对脓毒症并发AKI病儿的预后有一定的预测价值。

长链非编码RNA癌易感性候选基因2在卵巢癌中的表达及其对SKOV3细胞恶性表型的影响

目的探讨长链非编码RNA癌易感性候选基因2(LnCRNA CASC2)在卵巢癌中的表达及对卵巢癌SKOV3细胞恶性表型的影响。方法 q RT-PCR检测18例卵巢癌及正常癌旁组织;5株人卵巢癌细胞株A2780、Caov3、HO8910、SKOV3、OVCAR3和人正常卵巢上皮HOEpiC细胞LnCRNA CASC2的相对表达量;通过重组质粒在人卵巢癌SKOV3细胞中过表达LnCRNA CASC2,采用MTT法、流式细胞术、侵袭实验、Western blot检测过表达LnCRNA CASC2后SKOV3细胞增殖、凋亡、侵袭及Bcl-2、Bax蛋白表达情况。结果 LnCRNA CASC2在卵巢癌组织、卵巢癌细胞中表达水平低于对应的癌旁组织及卵巢上皮细胞(P <0.01)。LnCRNA CASC2重组质粒转染SKOV3细胞后可显著抑制细胞的增殖能力、侵袭能力,促进细胞凋亡(P <0.05)。过表达LnCRNA CASC2后,SKOV3细胞Bcl-2表达显著降低、Bax蛋白表达显著增加(P <0.05)。结论 LnCRNA CASC2在卵巢癌组织中表达降低,卵巢癌细胞中过表达LnCRNA CASC2后细胞恶性能力降低,其在卵巢癌中可能发挥抑癌基因的作用,值得进一步研究。

信号转导和转录激活因子3和长链非编码RNA肿瘤易感候选基因11在子痫前期胎盘中的表达及与胎盘螺旋动脉重铸的关系

目的 探究子痫前期(PE)病人胎盘组织中信号转导及转录活化因子3(STAT3)、长链非编码RNA肿瘤易感候选基因11(lncRNA CASC11)表达水平与胎盘螺旋动脉重铸的关系。方法 选取2019年1月至2022年4月于沧州市人民医院行剖宫产分娩的68例PE病人为PE组,并选取同期该院行剖宫产分娩的68例健康孕妇为健康组。比较PE组、健康组一般资料及胎盘组织中STAT3 mRNA、lncRNA CASC11表达水平;分析PE病人胎盘组织中STAT3 mRNA表达水平与lncRNA CASC11的相关性;比较健康组与PE组胎盘螺旋动脉管壁厚度、管腔面积;分析PE病人胎盘组织中STAT3 mRNA、lncRNA CASC11表达水平与胎盘螺旋动脉管壁厚度、管腔面积的相关性。结果 PE组病人舒张压、收缩压高于健康组(P<0.05),胎盘组织中STAT3mRNA、lncRNA CASC11表达水平分别为0.40±0.14、0.46±0.15,低于健康组的1.04±0.35、1.01±0.34(P<0.05),胎盘螺旋动脉管壁厚度高于健康组(P<0.05),管腔面积小于健康组(P<0.05);PE病人胎盘组织中STAT3 mRNA表达水平与lncRNA CASC11,及STAT3 mRNA、lncRNA CASC11表达水平与胎盘螺旋动脉管腔面积均呈正相关(P<0.05),STAT3 mRNA、lncRNA CASC11表达水平与胎盘螺旋动脉管壁厚度呈负相关(P<0.05)。结论 PE病人胎盘组织中STAT3 mRNA、lncRNA CASC11表达水平均较低,二者均与胎盘螺旋动脉重铸关系密切,可能为临床诊治PE提供新方向。

长链非编码RNA癌症易感性候选物2与印记基因H19在肝外胆管癌中差异表达的分析

目的探讨肝外胆管癌(ECC)中长链非编码RNA(lncRNA)癌症易感性候选物2(CASC2)和印记基因H19表达及其潜在的功能作用。方法收集ECC患者样本4例,基于高通量测序技术进行转录组测序,分析lncRNA CASC2和H19的表达模式,并基于生物信息学方法预测潜在功能。另取22例ECC组织样本和不同分化程度的胆管癌细胞株(RBE、QBC939、HuH-28、HuCCT1)进行验证,分别以癌旁组织和正常胆管上皮细胞(HIBEC)作为对照,应用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法分别检测癌组织、癌旁组织与细胞系中lncRNA CASC2和H19的表达水平。汇总患者临床指标并结合目标基因的差异表达进行相关性分析。结果4对ECC癌组织与癌旁组织中lncRNA CASC2和H19的表达差异有统计学意义(P均<0.05)。qRT-PCR结果显示,lncRNA CASC2在ECC癌组织中表达水平明显高于癌旁组织(t=1.262,P=0.025),而lncRNA H19在ECC癌组织中表达水平明显低于癌旁组织(t=1.285,P=0.005);细胞系QBC939(t=8.114,P=0.015)和HuH-28(t=9.202,P=0.012)中CASC2的表达水平显著高于对照组,而RBE(t=-10.244,P<0.001)、QBC939(t=-10.476,P<0.001)、HuH-28(t=-19.798,P<0.001)和HuCCT1(t=-16.193,P=0.004)中H19的表达水平均显著低于对照组。生物信息分析结果显示,CASC2主要参与代谢过程,而H19参与多细胞生物发展等过程,两者均与催化活性功能相关。相关性分析结果显示,lncRNA CASC2表达水平与病理中分化(χ^(2)=6.222,P=0.022)、淋巴结转移(χ^(2)=5.455,P=0.020)显著相关;而lncRNA H19表达水平与病理中分化(χ^(2)=1.174,P=0.029)、肿物大小(χ^(2)=-0.507,P=0.037)显著相关。结论ECC中lncRNA CASC2和H19均出现转录失调,其中lncRNA CASC2在癌组织中呈上调趋势,H19呈下调趋势,两者具有成为ECC新的分子标志物的潜力。

长链非编码RNA CASC8在食管癌组织中的表达及临床意义

目的分析长链非编码RNA癌易感性候选基因8(cancer susceptibility candidate 8,CASC8)在食管癌组织中的表达及临床意义。方法结合癌症基因组图谱(the cancer genome atlas,TCGA)数据库分析结果和回顾郑州大学第一附属医院2018年2月至2019年2月行手术治疗的38例食管癌患者临床资料,采用qRT-PCR检测食管癌和癌旁组织CASC8表达水平。以患者性别、年龄、TNM分期、分化程度、淋巴结转移作为观察指标,分析CASC8与上述临床资料的关系。结果CASC8在TCGA数据库的食管癌样本中显示出高表达,高表达CASC8的食管癌患者生存率降低(P<0.05),但与肿瘤的TNM分期相关性并不明显(P>0.05)。在临床上所收集的食管癌患者肿瘤样本中,与低表达CASC8组比,高表达组食管癌患者3 a生存率明显降低。临床资料分析显示CASC8表达越高,与患者分化程度、淋巴结转移和TNM分期有显著相关性(P<0.05)。结论CASC8在食管癌组织中的表达水平高于癌旁组织,且CASC8表达与患者分化程度、淋巴结转移、TNM分期及预后显著相关。CASC8可以作为食管癌诊断及预后评价的指标之一。

长链非编码RNA肿瘤易感候选基因11在卵巢癌组织中的表达及意义

目的观察长链非编码RNA(lncRNA)肿瘤易感候选基因11(CASC11)在卵巢癌组织中的表达情况,探讨抑制该基因对卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移和侵袭力的影响。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测卵巢癌组织和癌旁组织中CASC11表达情况。将SKOV3细胞分为si-CASC11组、阴性对照组和空白组,分别转染CASC11的干扰物序列、阴性对照序列和加入转染试剂,采用实时荧光定量PCR法检测细胞中CASC11表达情况,采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活力,采用划痕实验检测细胞迁移能力,采用Transwell小室检测细胞侵袭能力。结果卵巢癌组织中CASC11相对表达量高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.001)。不同分化程度、国际妇产科联盟(FIGO)分期和淋巴结转移情况下,卵巢癌组织中CASC11相对表达量差异有统计学意义(P<0.05)。与阴性对照组和空白组比较,si-CASC11组细胞中CASC11相对表达量降低,细胞增殖活力、迁移能力、侵袭能力降低,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论卵巢癌组织中CASC11呈高表达,且与恶性进展临床病理指标相关,抑制CASC11表达能够显著抑制SKOV3细胞增殖、迁移和侵袭能力。

长链非编码RNA膀胱癌相关转录本1、癌症易感性候选物9在恶性胸腔积液中的表达及诊断价值

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)膀胱癌相关转录本1(BLACAT1)、癌症易感性候选物9(CASC9)在恶性胸腔积液中的表达及诊断价值。方法选取96例胸腔积液患者,其中良、恶性胸腔积液患者各48例。采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测良恶性胸腔积液中BLACAT1和CASC9的相对表达量,比较不同临床特征肿瘤患者恶性胸腔积液中BLACAT1、CASC9的相对表达量。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,计算曲线下面积(AUC),评估癌胚抗原(CEA)、细胞角质蛋白19片段抗原21-1(CYFRA21-1)、BLACAT1、CASC9单独及联合检测对恶性胸腔积液的诊断效能。结果恶性胸腔积液中BLACAT1、CASC9的相对表达量均明显高于良性胸腔积液(P﹤0.01)。年龄﹥65岁肿瘤患者恶性胸腔积液中CASC9的相对表达量高于年龄≤65岁患者(P﹤0.05)。CEA单独检测诊断恶性胸腔积液的AUC为0.918(95%CI:0.863~0.974),高于BLACAT1、CASC9、CYFRA21-1,此时的灵敏度、特异度分别为87.2%、81.2%。BLACAT1+CASC9+CEA联合检测诊断恶性胸腔积液的AUC为0.938(95%CI:0.888~0.989),高于BLACAT1+CASC9、BLACAT1+CASC9+CYFRA21-1联合检测的AUC,此时的灵敏度、特异度分别为91.5%、81.2%。结论BLACAT1、CASC9在恶性胸腔积液中表达明显上调,对恶性胸腔积液具有较好的诊断效能,BLACAT1+CASC9与CEA联合检测能够进一步提高诊断效能。

长链非编码RNA淋巴细胞白血病缺失基因2对舌鳞癌细胞增殖和侵袭的调控作用

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)淋巴细胞白血病缺失基因2(DLEU2)在舌鳞癌中的表达及其对癌细胞增殖和侵袭的影响。方法2018年5月至2019年7月收集在邯郸市第三医院进行手术治疗并经病理确诊的22例舌鳞癌组织及对应的癌旁组织标本。采用实时荧光定量PCR检测DLEU2在舌鳞癌组织和细胞中的表达情况。将体外培养的舌鳞癌细胞株CAL27细胞分为对照组(未转染)、空载体组(空载体)和DLEU2组(转染DLEU2),采用实时荧光定量PCR检测细胞中DLEU2表达,MTT法检测细胞增殖,Transwell检测细胞侵袭。结果与癌旁组织(1.00±0.00)相比,舌鳞癌组织中DLEU2表达水平(0.30±0.02)明显降低(P<0.05);3种舌鳞癌SCC-15(0.35±0.04)、SCC-4(0.48±0.04)和CAL-27(0.26±0.03)细胞中DLEU2的表达水平较人正常口腔黏膜HOK细胞(1.00±0.00)均明显降低(P<0.05)。与对照组相比,DLEU2组细胞中DLEU2表达水平明显升高,且细胞增殖和侵袭能力明显减弱(P<0.05)。结论lncRNA DLEU2在舌鳞癌组织和细胞中低表达,上调其表达可抑制舌鳞癌CAL-27细胞增殖和侵袭。

乳腺癌组织lncRNA CASC2、miR-532-3p表达水平与患者术后5年内生存的相关性

目的探究乳腺癌(BC)组织长链非编码RNA癌易感性候选基因2(lncRNA CASC2)、微小RNA-532-3p(miR-532-3p)表达与患者术后5年内生存的相关性。方法选择2015年1月—2018年6月大同市第五人民医院普通外科收治BC患者127例,术中收集BC组织及癌旁正常组织,荧光定量PCR法检测BC组织和癌旁正常组织中lncRNA CASC2、miR-532-3p表达;对BC患者术后进行为期5年的随访,记录患者5年内生存和死亡情况。比较癌旁正常组织和BC组织lncRNA CASC2及miR-532-3p表达,BC组织中lncRNA CASC2和miR-532-3p表达在不同临床病理特征中的差异,生存组和死亡组临床病理特征和BC组织中lncRNA CASC2及miR-532-3p表达的差异。分析BC组织lncRNA CASC2、miR-532-3p表达的相关性;BC组织中lncRNA CASC2和miR-532-3p表达与术后5年内生存的关系;影响BC患者术后5年内生存的因素;lncRNA CASC2、miR-532-3p对BC患者术后5年内生存的预测价值。结果BC组织中lncRNA CASC2表达水平低于癌旁正常组织,miR-532-3p表达水平高于癌旁正常组织(t/P=38.239/<0.001,49.406/<0.001);肿瘤直径≥2 cm、TNM分期Ⅲ期、肿瘤低分化、淋巴结转移者比例lncRNA CASC2低表达组高于高表达组,而miR-532-3p低表达组低于高表达组(lncRNA CASC2:χ^(2)/P=17.361/<0.001、17.052/<0.001、14.694/<0.001、13.173/<0.001;miR-532-3p:χ^(2)/P=10.733/0.001、9.813/0.002、10.134/0.001、7.444/0.006);127例BC患者术后随访5年,生存99例(生存组),死亡28例(死亡组),肿瘤直径≥2 cm、TNM分期Ⅲ期、肿瘤低分化、淋巴结转移者比例及miR-532-3p表达水平死亡组高于生存组,而lncRNA CASC2表达水平死亡组低于生存组[χ^(2)(t)/P=5.211/0.022、27.149/<0.001、27.990/<0.001、4.590/0.032、19.155/<0.001、10.818/<0.001];BC组织中lncRNA CASC2与miR-532-3p表达呈负相关(r/P=-0.561/<0.001);lncRNA CASC2高表达组BC患者术后5年内总生存率为89.23%(58/65),高于lncRNA CASC2低表达组66.13%(41/62)(χ^(2)/P=9.854/0.002);miR-532-3p高表达组BC患者术后5年内总生存率为65.57%(40/61),低于miR-532-3p低表达组89.39%(59/66)(χ^(2)/P=10.466/0.001);肿瘤直径≥2 cm、TNM分期Ⅲ期、肿瘤低分化、有淋巴结转移、lncRNA CASC2低表达、miR-532-3p高表达均是影响BC患者术后5年内生存的独立危险因素[HR(95%CI)=2.255(1.192~4.263)、2.143(1.252~3.666)、3.089(1.386~6.887)、2.219(1.223~4.026)、2.606(1.174~5.788)、2.855(1.592~5.120)];lncRNA CASC2、miR-532-3p及二者联合预测BC患者术后5年内生存的AUC分别为0.840、0.852、0.908,二者联合预测的AUC大于lncRNA CASC2、miR-532-3p各自单独预测的AUC(Z/P=2.246/0.025、2.033/0.042)。结论BC组织中lncRNA CASC2表达下调,miR-532-3p表达上调,且术后5年内死亡的BC患者较存活患者变化更显著,二者表达与临床病理特征相关,对预测BC患者术后5年内生存情况价值较高。

长链非编码RNA CCAT2对肝癌细胞增殖和侵袭迁移能力的影响及其机制探讨

目的观察长链非编码RNA CCAT2(lncRNA CCAT2)对肝细胞癌(HCC)细胞增殖和侵袭迁移能力的影响,并探讨其机制。方法将对数生长期的HCC细胞Hep G2随机分为A、B、C组,采用Lipofectamine3000分别瞬时转染对照质粒、小干扰RNA质粒(si-CCAT2)、si-CCAT2+多梳蛋白EZH2过表达质粒。采用Real-time PCR法检测细胞中的lncRNA CCAT2、EZH2 mRNA,Western blotting法检测细胞中的EZH2蛋白,MTT法观察培养24、48、72、96 h细胞增殖能力(OD490),细胞划痕及Transwell实验分别观察细胞的迁移、侵袭能力。结果与A组比较,B组细胞中lncRNA CCAT2和EZH2的mRNA和蛋白表达水平均下降(P均<0.05);与B组比较,C组胞中EZH2的mRNA和蛋白表达水平均增加(P均<0.05)。与A组同时点比较,B组细胞增殖的OD490值降低(P均<0.05);与B组同时点比较,C组细胞增殖的OD490值升高(P均<0.05)。与A组比较,B组细胞划痕愈合百分比、穿膜细胞数均下降(P均<0.05);与B组比较,C组细胞划痕愈合百分比、穿膜细胞数均增加(P均<0.05)。结论 lncRNA CCAT2可通过上调EZH2的表达促进HCC细胞的增殖、侵袭和迁移,进而促进HCC的发生发展。

长链非编码RNA——NeST调控小鼠对病原体的易感性和IFN-γ基因的活化

表观遗传学通常指基因表达通过有丝分裂或减数分裂发生了可遗传的改变,而DNA序列不发生改变。表观遗传学的机制主要包括DNA甲基化、组蛋白修饰及非编码RNA（non-coding RNA,ncRNA）调控。ncRNA是指不能翻译为蛋白质的功能性RNA,分为看家ncRNA和调控ncRNA,其中具有调控作用的ncRNA按大小主要分为两类：短链ncRNA（包括siRNA、miRNA、piRNA）和长链ncRNA（long non-coding RNA,lncRNA）。

长链非编码RNA ITGβ2-AS1对胰腺癌MAPK信号通路的作用及机制

目的:探讨长链非编码RNA整合素β2(ITGβ2)-AS1在胰腺癌(PC)丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路中的作用及机制。方法:选择癌症基因组图谱(TCGA)中胰腺导管腺癌数据库PAAD的mRNA表达谱类型,根据TCGA数据库分析结果,选取与ITGβ2-AS1相关的基因中相关系数较大(Person系数>0.6)的基因进行GO富集分析,筛选出与ITGβ2-AS1的表达显著相关的基因及信号通路;采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)及Westernblot验证人PC细胞株PANC-1中相关mRNA及蛋白的表达。结果:GO分析显示,ITGβ2-AS1与PC的增殖及相关肿瘤信号通路转导密切相关;qRT-PCR及Westernblot结果显示,与正常PANC-1细胞比较,干扰ITGβ2-AS1后,PANC-1细胞中BCL2、MMP9、MYC及磷酸化的ERK1/2的mRNA及蛋白表达水平下降(P<0.05)。结论:ITGβ2-AS1可能通过正向调控MAPK信号通路上靶基因的表达,促进PC细胞的增殖、侵袭及迁移。

长链非编码RNA CASC9在结直肠癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨长链非编码RNA癌症易感性候选基因9(lncRNA CASC9)在结直肠癌组织中的表达及其临床意义。方法:收集结直肠癌患者癌组织和癌旁组织87例,采用实时荧光定量PCR(qPCR)法检测lncRNA CASC9的表达情况,分析lncRNA CASC9在结直肠癌组织和相应癌旁组织中的表达水平及其与临床病理指标的相关性,采用Kaplan-Meier法进行生存分析,Log-rank法检验lncRNA CASC9表达量与结直肠癌患者临床预后的关系。结果:lncRNA CASC9在结直肠癌组织较癌旁组织中表达明显升高(P<0.01)。结直肠癌组织中lncRNA CASC9的表达水平与癌组织的不同分化程度(χ^(2)=6.877,P=0.032)、TNM分期(χ^(2)=7.660,P=0.022)以及是否发生淋巴结转移(χ^(2)=9.901,P=0.002)相关,而与性别、年龄、肿瘤直径、肿瘤位置均无明显相关关系(均为P>0.05)。Kaplan-Meier生存分析发现,lncRNA CASC9高表达患者总生存期和无进展生存时间均较lncRNA CASC9低表达患者明显缩短(χ^(2)=17.91,P<0.01;χ^(2)=11.23,P=0.001)。结论:lncRNA CASC9在结直肠癌组织中的表达明显升高,与结直肠癌的分化程度、TNM分期、淋巴结转移有关,其有可能成为判断结直肠癌患者预后的潜在生物标志物。

EHD2、miR-let-7c和lncRNA FOXD2-AS1在人喉鳞状细胞癌组织中的表达及其关联性分析

目的:探讨Eps15同源结构域蛋白2 (EHD2)、微小RNA let-7c (miR-let-7c)和长链非编码RNA (lncRNA)FOXD2-AS1在喉鳞状细胞癌(LSCC)组织中的表达水平,阐明EHD2/miRlet-7c/FOXD2-AS1信号轴与LSCC发生的关联性。方法:收集40例LSCC患者的癌组织标本,按照病理类型分为低级别组(中或高分化,32例)和高级别组(低分化,8例),按照肿瘤淋巴结转移(TNM)临床分期分为TNM早期组(Ⅰ-Ⅱ期,13例)和TNM晚期组(Ⅲ-Ⅳ期,27例),按照有无淋巴结转移分为转移组(21例)和无转移组(19例)。另取40例对应癌旁正常组织标本作为对照组。采用免疫组织化学法检测各组标本中EHD2表达情况,分析其与LSCC患者临床病理参数之间的关系,采用生物信息学方法筛选出miR-let-7c作为候选微小RNA (miRNA),与其启动子区域存在结合位点的FOXD2-AS1作为候选lncRNA。取10对新鲜的LSCC组织标本和癌旁正常组织标本,采用实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法检测2组样本中EHD2 mRNA、miRNA-let-7c和FOXD2-AS1表达水平,并验证其关联性。结果:与癌旁正常组织比较,LSCC组织中EHD2表达水平明显降低(P<0.01),且TNM早期组患者LSCC组织中EHD2阳性表达率明显高于TNM晚期组(P<0.05),病理类别和有无淋巴结转移与EHD2表达无明显关联(P>0.05)。与癌旁正常组织比较,LSCC组织中miR-let-7c表达水平明显降低(P<0.01),FOXD2-AS1表达水平明显升高(P<0.05)。LSCC组织中FOXD2-AS1与miR-let-7c表达水平呈负相关关系(r=-0.67,P<0.05),miR-let-7c与EHD2 mRNA表达水平呈负相关关系(r=-0.83,P<0.01)。结论:EHD2和miR-let-7c在LSCC组织中呈低表达,可能是新的抑癌基因;FOXD2-AS1在LSCC组织中高表达,可能是新的原癌基因;FOXD2-AS1/miR-let-7c/EHD2信号轴可能参与了LSCC的发生发展。

直肠癌组织中YTHDF2、lncRNA TUSC7表达与上皮间质转化的关系及预后意义

目的研究直肠癌组织中YTH结构域N6-甲基腺嘌呤RNA结合蛋白2(YTHDF2)、长链非编码RNA抑癌候选基因7(lncRNA TUSC7)表达与上皮间质转化(EMT)的关系及临床预后意义。方法选取该院自2018年5月至2020年5月诊治的98例直肠癌患者。采用实时荧光定量PCR检测直肠癌组织和癌旁组织中YTHDF2、lncRNA TUSC7表达及EMT相关指标β-连环素(β-catenin)、E-钙黏蛋白(E-cad)、N-钙黏蛋白(N-cad)mRNA的表达。采用Pearson法分析YTHDF2 mRNA、lncRNA TUSC7与EMT相关指标的相关性。采用Kaplan-Meier曲线分析YTHDF2、lncRNA TUSC7表达对直肠癌无瘤生存预后的影响。采用多因素COX回归分析直肠癌无瘤生存预后的影响因素。结果直肠癌组织中YTHDF2、β-catenin、N-cad mRNA相对表达水平高于癌旁组织,而lncRNA TUSC7、E-cad mRNA相对表达水平低于癌旁组织(均P<0.05)。直肠癌组织中YTHDF2 mRNA与β-catenin、N-cad mRNA表达呈正相关(均P<0.05),与E-cad mRNA表达呈负相关(均P<0.05);lncRNA TUSC7与β-catenin、N-cad mRNA表达呈负相关(均P<0.05),与E-cad mRNA表达呈正相关(均P<0.05)。直肠癌组织中YTHDF2 mRNA与lncRNA TUSC7表达呈负相关(P<0.05)。直肠癌组织中YTHDF2 mRNA、lncRNA TUSC7与TNM分期Ⅲ期、肿瘤分化程度及淋巴结转移有关(均P<0.05)。YTHDF2高、低表达组3年无瘤生存率分别为59.57%(28/47)、88.24%(45/51)。lncRNA TUSC7高、低表达组3年无瘤生存率分别为88.00%(44/50)、60.42%(29/48)。YTHDF2高表达组3年累积无瘤生存率低于YTHDF2低表达组(Log Rankχ^(2)=11.370,P=0.001)。lncRNA TUSC7高表达组3年累积无瘤生存率高于lncRNA TUSC7低表达组(Log Rankχ^(2)=11.880,P=0.001)。TNM分期Ⅲ期、低分化程度、合并淋巴结转移、YTHDF2高表达、lncRNA TUSC7低表达是直肠癌患者无瘤生存预后的独立危险因素(均P<0.05)。结论直肠癌组织中YTHDF2表达上调,lncRNA TUSC7表达下调,二者与不良临床病理特征及EMT有关,是新的评估直肠癌患者预后的标志物。

口腔鳞状细胞癌组织中LncRNA CASC9、miR-125a-3p表达变化及临床意义

目的探讨口腔鳞状细胞癌(OSCC)组织中长链非编码核糖核酸(LncRNA)癌症易感性候选基因9(CASC9)、微小核糖核酸-125a-3p(miR-125a-3p)的表达变化及临床意义。方法选取OSCC患者80例,术中收集OSCC组织及对应癌旁组织,实时荧光定量PCR法检测组织中LncRNA CASC9、miR-125a-3p。用Pearson相关法分析OSCC组织中LncRNA CASC9与miR-125a-3p表达的相关性,并分析LncRNA CASC9、miR-125a-3p表达与OSCC患者临床病理参数的关系。术后随访3年,比较LncRNA CASC9、miR-125a-3p高/低表达者总生存率;Cox回归模型分析LncRNA CASC9、miR-125a-3p对OSCC患者预后的影响。结果与癌旁组织比较,OSCC组织中LncRNA CASC9表达高,miR-125a-3p表达低(P均<0.05)。Pearson相关法分析显示,OSCC组织中LncRNA CASC9与miR-125a-3p表达呈负相关(r=-0.754,P<0.05)。不同分化程度、TNM分期及是否有淋巴结转移的OSCC组织中LncRNA CASC9、miR-125a-3p表达比较差异有统计学意义(P均<0.05)。随访3年,患者死亡24例,总生存率为70.00%(56/80)。LncRNA CASC9高表达者(≥1.20,42例)3年总生存率59.52%(25/42)低于LncRNA CASC9低表达者(<1.20,38例)81.58%(31/38),miR-125a-3p高表达者(≥1.04,39例)3年总生存率79.49%(31/39)高于miR-125a-3p低表达者(<1.04,41例)60.98%(25/41),比较差异有统计学意义(P均<0.05)。低分化、TNM分期Ⅲ期、淋巴结转移和LncRNA CASC9≥1.20为OSCC患者预后的独立危险因素(P均<0.05),miR-125a-3p≥1.04为OSCC患者预后的独立保护因素(P<0.05)。结论LncRNA CASC9高表达、miR-125a-3p低表达与OSCC患者组织分化程度、TNM分期、淋巴结转移和预后有关。

癌易感性候选基因2通过NF-κB信号通路对甲状腺乳头状癌细胞增殖及迁移的影响

目的在甲状腺乳头状癌细胞中lncRNA癌易感性候选基因2(CASC2)与NF-κB信号通路的关系研究较少。文中旨在探讨lncRNA CASC2a通过NF-κB信号通路对甲状腺乳头状癌细胞TPC-1增殖、迁移的影响。方法选取TPC-1,构建lncRNA CASC2a过表达质粒,分为质粒组[转染过表达质粒pcDNA3.1(+)-CASC2a]、空载组[转染等量pcDNA3.1(+)空载质粒]、空白组(未做任何处理)。检测过表达lncRNA CASC2a对各组TPC-1细胞中CASC2a表达的影响。选取转染后的质粒组细胞,随机分为转染组[只转染过表达质粒pcDNA3.1(+)-CASC2a]、转染+PMA组[转染过表达质粒pcDNA3.1(+)-CASC2a+丙二醇甲醚醋酸酯(PMA)刺激]、对照组(未做任何处理)、PMA组(只增加PMA刺激),通过CCK-8、细胞划痕实验验证24、48、72、96 h时lncRNA CASC2a对细胞增殖、迁移能力的影响。Western blot检测NF-κB信号通路相关抗体蛋白p105/p50、p65的表达,并通过给与NF-κB信号通路激动剂PMA观察NF-κB信号通路相关抗体蛋白p105/p50、p65的表达情况。结果转染过表达质粒pcDNA3.1(+)-CASC2a后,质粒组细胞中CASC2a的表达量明显高于空载组(P<0.05)。转染+PMA组24 h时细胞增殖能力(0.191±0.005)明显低于转染组(0.217±0.013)、PMA组(0.247±0.009)、对照组(0.260±0.004),差异有统计学意义(P<0.01);转染组亦明显低于PMA组和对照组(P<0.01)。转染+PMA组的细胞迁移能力([0.208±0.109)%]低于转染组([1.775±0.061)%]、PMA组([1.622±0.519)%]、对照组([2.927±0.136)%],差异有统计学意义(P<0.05),转染组、PMA组低于对照组(P<0.05)。质粒组p105/p50、p65蛋白相对表达量明显低于空白组(P<0.05)。转染+PMA组p105/p50、p65蛋白表达量([0.674±0.007)、(0.713±0.014)]较转染组([0.581±0.003)、(0.570±0.012)]明显增加(P<0.05)。结论lncRNA CASC2a可能通过NF-κB信号通路抑制甲状腺乳头状癌细胞的增殖和迁移能力。

癌易感性候选基因2表达与恶性肿瘤预后相关性的系统评价

目的系统评价癌易感性候选基因2(CASC2)表达水平与癌症患者临床特征及预后价值的关系。方法计算机检索PubMed、Web of Science、Embase、Cochrane Library、OVID、中国知网、万方和维普等数据库中有关CASC2表达与癌症预后相关的病例-对照研究,截止时间为2018年5月9日。结果共纳入了13个病例-对照研究,包括923例患者。Meta分析结果显示:CASC2的低表达与患者淋巴结转移(OR=0.76,95%CI=0.48～1.20)和远处转移(OR=0.74,95%CI=0.42～1.32)均无关,但CASC2低表达与TNM分期(OR=0.31,95%CI=0.23～0.41)和总生存期(HR=0.46,95%CI=0.37～0.58)显著相关。结论 CASC2的低表达是癌症患者不良预后的危险因素;CASC2可作为评价恶性肿瘤患者预后的潜在生物标志物。

LncRNA CASC2、miR-155-5p与上皮性卵巢癌病人化疗敏感性及预后的相关性研究

目的:分析长链非编码RNA(LncRNA)癌易感性候选基因2(CASC2)、miR-155-5p与上皮性卵巢癌病人化疗敏感性及预后的相关性关系。方法:采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测87例上皮性卵巢癌病人(上皮性卵巢癌组)及72例卵巢良性肿瘤病人(对照组)LncRNA CASC2、miR-155-5p表达水平,比较2组LncRNA CASC2、miR-155-5p表达水平,分析上皮性卵巢癌组LncRNA CASC2、miR-155-5p表达水平与临床病理特征的相关性关系。根据上皮性卵巢癌组病人术后化疗是否出现继发耐药分为化疗耐药组(n=32例)和化疗敏感组(n=55例),分析LncRNA CASC2、miR-155-5p表达水平与化疗敏感性的关系。同时采用Pearson法分析上皮性卵巢癌组织中LncRNA CASC2与miR-155-5p的相关性关系,采用Kaplan-Meier法分析两者与上皮性卵巢癌病人5年生存情况的关系。结果:上皮性卵巢癌组LncRNA CASC2表达水平低于对照组,而miR-155-5p表达水平高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.01);上皮性卵巢癌组LncRNA CASC2、miR-155-5p表达水平与腹腔转移、FIGO分期、分化程度及淋巴结转移有关(P<0.05~P<0.01),而与年龄、肿瘤大小、腹水及组织学类型无关(P>0.05);化疗敏感组miR-155-5p表达水平低于化疗耐药组,而LncRNA CASC2表达水平高于化疗耐药组,差异均有统计学意义(P<0.01);上皮性卵巢癌组LncRNA CASC2与miR-155-5p呈负相关关系(r=-0.637,P<0.05);miR-155-5p高表达者5年内总生存率及中位生存时间均低于miR-155-5p低表达者(P<0.05),而LncRNA CASC2高表达者5年内总生存率及中位生存时间均高于LncRNA CASC2低表达者(P<0.05)。结论:上皮性卵巢癌病人癌组织LncRNA CASC2、miR-155-5p表达水平与化疗敏感性及预后存在密切相关性,可作为有效的预测指标。

LncRNA CASC9靶向调节miR-195-5p/VEGFA轴对口腔鳞状细胞癌细胞增殖、凋亡和迁移的影响

目的探讨长链非编码RNA癌易感性候选基因(LncRNA CASC)9对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖、凋亡和迁移的影响及作用机制。方法实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测人OSCC组织与细胞中LncRNA CASC9表达,筛选最佳细胞系。体外培养OSCC细胞SCC15,将细胞分为空白对照(Control)组、si-CASC9组、si-NC组、miR-195-5p mimic组、miR-NC组、si-CASC9+NC inhibitor组、si-CASC9+miR-195-5p inhibitor组、miR-195-5p mimics+pcDNA组、miR-195-5p mimics+VEGFA组,qRT-PCR检测LncRNA CASC9、miR-195-5p表达,CCK-8法检测SCC15细胞增殖,流式细胞仪检测SCC15细胞凋亡,Transwell实验检测SCC15细胞迁移;Western印迹法检测SCC15细胞中血管内皮生长因子(VEGF)A、增殖细胞核抗原(PCNA)、半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-3、基质金属蛋白酶(MMP)-9蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验验证miR-195-5p与LncRNA CASC9、VEGFA的靶向关系。结果LncRNA CASC9在OSCC组织与细胞中表达较癌旁组织显著上调(P<0.05);抑制LncRNA CASC9表达或过表达miR-195-5p可显著抑制SCC15细胞增殖及迁移,促进细胞凋亡(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验显示,LncRNA CASC9、VEGFA与miR-195-5p存在靶向关系(P<0.05);抑制miR-195-5p表达可显著逆转抑制LncRNA CASC9表达对SCC15细胞增殖、凋亡及迁移的作用(P<0.05);上调VEGFA表达可显著逆转过表达miR-195-5p对SCC15细胞增殖、凋亡及迁移的作用(P<0.05)。结论LncRNA CASC9在OSCC组织与细胞中上调表达,抑制LncRNA CASC9表达可通过调节miR-195-5p/VEGFA轴抑制OSCC细胞增殖与迁移,促进细胞凋亡。