降解黄曲霉毒素B_(1)菌株的筛选鉴定及降解条件优化

【目的】从分离源中筛选得到黄曲霉毒素B_(1)(aflatoxin B_(1),AFB_(1))高降解率的菌株并进行鉴定,优化菌株降解AFB 1的条件。【方法】以青贮饲料、泡菜液及腌酸菜为分离源,以香豆素为唯一碳源的培养基进行菌株初筛。采用高效液相色谱法检测AFB_(1)含量,以高AFB_(1)降解率进行复筛,对所得菌株进行鉴定,确定菌株名称。以AFB_(1)降解率为指标,探明发酵时间、初始pH、接种量及AFB_(1)浓度对菌株降解AFB_(1)的影响,通过正交试验进行降解条件优化。【结果】初筛共筛选出16株可以利用香豆素的菌株,复筛时QC7有最高降解率,为86.00%,经鉴定为空气芽孢杆菌(Bacillus aerius)。当AFB_(1)质量浓度为0.2μg/mL时,其最优降解条件为发酵时间72 h、初始pH 6.5、接种量5%。最高降解率为89.41%。【结论】筛选得到了对AFB_(1)有较佳降解能力的菌株,通过条件优化,提高了菌株对AFB_(1)的降解率,为后续降解机制探究提供了基础。

开菲尔中可降解苯并(a)芘菌种筛选及其降解条件的优化

食品在高温加工过程中可以产生苯并(a)芘并通过摄食进入体内,带来食品安全问题,但目前还没有适合食品领域的高效、绿色、健康的苯并(a)芘去除方法。为了缓解食源性苯并芘对人体产生的危害,该文论述了从新疆传统发酵制品开菲尔中筛选出的1株可降解苯并(a)的菌株,并对其降解条件进行了优化。以新疆克孜勒苏柯尔克孜自治州牧民自产开菲尔中微生物作为研究对象,在苯并(a)芘胁迫条件下富集培养,结合不同发酵时间段的开菲尔乳对苯并(a)芘的降解能力,从中对降解菌株进行分离纯化及鉴定得到1株可降解苯并(a)芘的菌株M72-4、该菌株为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis),通过单因素试验及响应面优化试验,确定最优降解范围为:苯并(a)芘初始质量浓度为18.37 mg/L,培养温度为40℃、培养基的pH值为6.92,培养时间为70 h,根据优化后的降解条件测定降解液中苯并(a)芘的残留量,获得Bacillus velezensis M72-4在最优条件下降解率达到65.78%。该研究结果为苯并(a)芘的可食用微生物降解提供一定的数据支持。

响应面法优化聚丙烯酰胺降解复合菌的降解条件

为了解决聚丙烯酰胺造成的环境污染问题,通过富集、驯化从大庆油田含聚丙烯酰胺的污水中分离得到13株聚丙烯酰胺降解细菌,采用淀粉碘化镉分光光度法测定其降解率,从中筛选出3株降解率较高的细菌A1、E1和E4,经形态学和分子生物学鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、黏质沙雷氏菌(Serratia marcescens)和产气克雷伯氏菌(Klebsiella aerogenes)。分别研究了聚丙烯酰胺的初始浓度、接菌量、不同碳氮源和金属离子等条件对复合菌A1E1E4降解聚丙烯酰胺的影响,并采用响应面法优化其降解条件。结果表明:复合菌A1E1E4以接菌量2%接种到聚丙烯酰胺的质量浓度为300.00 mg/L、NH_(4)Cl的质量浓度为569.48 mg/L、葡萄糖的质量浓度为709.16 mg/L、Ca^(2+)的浓度为3.57 mmol/L的基础培养液中,在温度为30℃条件下培养5 d,降解率达到61.45%。将复合菌A1E1E4加入到含聚丙烯酰胺油田污水中,70 d时降解率可达93.72%,比自然降解提高了70.84%。

一株木质素降解细菌的分离、鉴定与降解条件优化

高效降解和转化木质素的微生物资源对于秸秆类生物质资源化利用至关重要。通过梯度稀释和苯胺蓝脱色法从木质素降解复合菌系中筛选出木质素降解细菌,经16S rRNA和生理生化试验将菌株归类为Pseudomonas guguanensis。采用单因素、Plackett-Burman和响应面分析的方法确定菌株最佳培养条件。单因素试验表明:木质素添加量、装液量、pH为显著影响因子;响应面试验确定最佳培养条件:装液量为28mL·100 mL^(-1)、木质素添加量为0.6g·L^(-1) pH为7.4。在此条件下,木质素降解率为29.1%,比优化前提高了16.4%,研究丰富了降解木质素的微生物资源。

一株木质素降解菌的筛选、鉴定及降解条件优化

研究旨在筛选高效木质素降解细菌并优化其降解条件,以提高木质素降解率。以木质素为唯一碳源初筛,通过苯胺蓝脱色圈,木质素过氧化物酶(Lip)、锰过氧化物酶(Mnp)和漆酶(Lac)酶活,以及木质素降解率比较逐步复筛,最终以木质素降解率为指标,通过单因素和响应面法进行发酵降解条件优化。结果显示:试验筛选获得一株木质素高降解菌JG-5-2,可以产生Lip、Mnp和Lac等木质素降解酶,经16S rDNA测序鉴定为Pseudomonas guguanensis。最佳发酵降解条件为温度37℃、培养基初始pH 7.0、接种量2.1%,在此条件下,发酵72 h时木质素降解率达到38%左右。表明菌株JG-5-2在降解木质素方面是优良的备选菌株。

秸秆木质素降解细菌的筛选及其降解条件优化

本试验旨在分离和筛选靶向降解木质素能力强的细菌菌株,并优化其培养条件,应用于秸秆生物质中木质素的降解。利用碱性木质素为唯一碳源的无机盐培养基进行菌株初筛,通过苯胺蓝法进行复筛,对筛选出的菌株进行细菌形态学观察和16S rDNA序列测定,然后以碱性木质素降解率为评价指标,采用单因素和响应面法进行培养条件优化及产酶能力的研究。结果显示:1)筛选出的3株木质素降解细菌BH5、BH8和BJ5经鉴定分别为吉洛氏不动杆菌(Acinetobacter guillouiae)、嗜麦芽窄食单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia)和变栖克雷伯氏菌(Klebsiella variicola)。2)菌株BH5在初始pH 6.8、培养温度30.3℃、接种量6.3%时木质素降解能力最佳,木质素降解率达到16.72%,所产漆酶(Lac)、木质素过氧化物酶(Lip)和锰过氧化物酶(Mnp)活性分别为1.53、15.65和43.85 U/mL;菌株BH8在初始pH 6.3、培养温度28.4℃、接种量4.7%时木质素降解能力最佳,木质素降解率达到18.01%,所产Lac、Lip和Mnp活性分别为4.17、21.66和72.26 U/mL;菌株BJ5在初始pH 6.4、培养温度29.7℃、接种量4.1%时木质素降解能力最佳,木质素降解率达到21.65%,所产Lac、Lip和Mnp活性分别为5.94、34.44和90.81 U/mL。综上所述,本试验筛选出的3株木质素降解细菌具有较高的木质素降解能力,这不仅丰富了木质素降解微生物库,同时也为后续应用微生物菌剂发酵秸秆,促进秸秆饲料化的研究提供了理论依据。

毒死蜱降解菌株的分离、鉴定及降解条件优化

目的:分离筛选出高效降解毒死蜱菌株,明确其生物学分类地位,并优化其降解条件.方法:采取平板划线和摇瓶复筛法从农药厂土壤样品中分离得到高效降解毒死蜱菌株,并通过16S rRNA序列测定和同源性分析对其进行鉴定;运用HPLC法检测降解菌株对毒死蜱的降解效果,研究其在不同培养基、接种量、温度及pH条件下的降解能力.结果:从农药厂土壤样品中筛选得到一株能够以毒死蜱为唯一碳源生长的高效降解菌株OP7,经16S rRNA基因序列聚类分析,将其初步鉴定为粪产碱杆菌(Alcaligenes faecalis).进一步的降解条件优化结果显示,菌株OP7降解毒死蜱的最佳培养基是10%LB、最适接种量为3%(v/v)、最适温度为35℃、最适初始pH为9.0.结论:本研究结果表明菌株OP7有望成为新的菌种资源并应用于环境中毒死蜱污染物的生物修复.

氰戊菊酯降解菌的筛选与鉴定及其降解条件优化

采用富集培养法从喷施拟除虫菊酯类农药的菜园土壤中,分离得到一株能降解氰戊菊酯的细菌BFE-023。经生理生化和16S r DNA序列分析,将菌株BFE-023鉴定为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)。应用Plackett-Burman实验设计确定了影响该菌株降解氰戊菊酯的主要影响因素,利用响应面分析法优化了其降解条件。在优化条件下,研究菌株BFE-023对氰戊菊酯的降解过程及其中间产物3-苯氧基苯甲酸(3-PBA)的生成规律。结果表明,培养时间和降解体系中氰戊菊酯浓度及氯化铁含量是影响其降解的主要因素,优化条件下60 h内对氰戊菊酯降解率可达到88.71%,与所建立的模型预测值(88.78%)相吻合。菌株BEF-023降解氰戊菊酯的过程中,降解中间产物3-PBA的生成量呈现先明显增加后逐渐减少的趋势,说明菌株BEF-023可能具备继续降解中间产物3-PBA的能力。

橡椀单宁降解菌的筛选及降解条件

从自然环境中分离、筛选出了降解橡单宁能力较强的菌株 ,并对该菌株降解单宁的培养条件进行分析。结果表明 ,2 8～ 32℃、pH 4.5培养 8d为橡单宁的最适降解条件。在此条件下 ,对该菌株驯化 ,有效提高了该菌株的耐单宁性及单宁降解率。通过研究外加碳源、氮源及碳氮比对该菌株降解单宁的影响 ,发现这 3个因素均明显影响微生物对单宁的降解。在适宜的培养条件下 ,该降解菌在以葡萄糖为外加碳源 ,以硝酸铵为氮源 ,碳氮比为 1 0∶1的条件下 ,单宁的降解率最高 ,并发现在一定范围内 ,碳氮比高有利于菌株降解单宁 ,而碳氮比低则不利于单宁的降解。

石油降解混合菌剂的筛选及降解条件研究

为了获得石油高效降解混合菌剂及优化的降解条件,从油污土壤、含油废水及原油中经富集驯化分离得到细菌68株、真菌15株,放线菌6株;将所分离的菌株通过初筛、复筛及两两混合拮抗实验,筛选得到Y-4与Y-12及Y-4与Y-37两组石油高效降解混合菌剂,其对石油的降解率均超过60%。同时研究了不同的初始条件对各混合菌剂降解率的影响。结果表明,Y-4与Y-12组合在初始pH8.0、转速160r/min、种子液以1:1接种0.5mL、30～35℃培养7天,Y-4与Y-37组合在初始pH7.5、转速130～160r/min、种子液以1:1接种0.5mL、35℃培养7天,加入的初始原油量越少,基质营养越丰富,其降解率越高。通过实验可知,在适宜的条件下2种混合菌剂的降解率均较高,并且混合菌剂对石油的降解率要高于单菌剂。

石油烃降解混合菌的筛选及其降解条件研究

对采集克拉玛依地区的部分石油污染样品进行了富集分离,得到了5组石油烃高效降解混合菌,其中混合菌KL9-1对温度的耐受范围最宽,并且石油烃的降解效率最高。该混合菌在45℃的条件下,通过7 d的降解,稀油的降解率达到43.27%,稠油的降解率达到20.09%。利用单因素试验考察环境因素对混合菌KL9-1降解石油烃的影响,结果表明混合菌KL9-1的接种量、石油烃仞始浓度、初始pH、摇床转速、表面活性剂的添加都会影响石油烃的降解效果,在35℃的条件下,当接种量6.0%、石油烃初始浓度1.5%、仞始pH 7.5、摇床转速120 r/min及添加200 mg/kg Tween80表面活性剂时,稀油和稠油的降解率都达到最高,其中稀油的降解率可以达到62.49%,稠油的降解率达到40.36%。

一株双酚A降解菌的筛选、鉴定及其生长、降解条件

从沈阳北部污水处理厂曝气池活性污泥中驯化、分离及筛选得到一株以双酚A为唯一碳源的高效降解菌株D-17,通过菌体形态、生理生化反应特性及16S r DNA基因测序分析对其进行了鉴定,并研究了该菌株的生长及双酚A降解条件。菌种鉴定结果表明,该菌为乙酸钙不动杆菌(Acinetobacter calcoaceticus)。实验结果表明:该菌株的生长及降解双酚A的最适条件为溶液pH 7.0,接种量10%,摇床转速150 r/min,降解温度30℃,降解时间5d;当双酚A初始质量浓度为60 mg/L时,双酚A降解率达52.62%;投加蛋白胨后,双酚A降解率提高至57.15%。

黑曲霉YF1菌株对烟嘧磺隆的降解条件研究

黑曲霉(Aspergillus niger)YF1菌株是本实验室筛选得到的对烟嘧磺隆具有较强降解能力的菌株。为优化YF1菌株的降解条件,本试验分别对葡萄糖浓度、培养温度、初始pH和转速进行单因素试验,结果表明,YF1菌株降解烟嘧磺隆的最适条件为:葡萄糖浓度5g/L、培养温度30℃、初始pH值6.50和转速50r/min。本试验在研究其降解条件的同时,发现溶液的pH均出现下降,随后采用高效液相色谱检测草酸、L-苹果酸、α-酮戊二酸、乙酸、柠檬酸、D-苹果酸、琥珀酸的标准品,通过保留时间确定样品中的有机酸为草酸,但未检测出其它6种有机酸,因此,可以确定YF1菌株可以代谢葡萄糖产生草酸。本试验初步明确了黑曲霉YF1菌株对烟嘧磺隆的降解特性,为该菌株的应用奠定了基础。

一株菲降解菌的分离鉴定及其降解条件研究

以菲为研究对象,从克拉玛依稠油污染土壤中筛选到1株对菲具有较好降解效果的菌株JZ3-21。通过形态观察、生理生化指标及16S rDNA序列分析对该菌株进行了鉴定。该株菌的16S rDNA序列与Pseudomonas属的相似性达99%,结合分离菌株的形态、生理生化特征和16S rDNA基因序列的分析结果,初步鉴定该菌株为恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida.)。对其降解条件进行了研究,结果表明:在40℃,pH 8.0,接种量为1.5%的条件下,菌株对初始质量浓度为100 mg.L-1的菲在64 h内的降解率高达94.2%。该菌对高质量浓度菲有较好的耐受性,其最高耐受质量浓度可达2 000 mg.L-1。

一株石油降解菌降解条件的优化

利用Minitab软件,采用PB设计,选择温度、pH、接菌量、转速、初始加油量5个影响因素,对从延安川口受石油污染土壤中分离筛选得到的可降解石油菌株CT-6的降解条件进行筛选优化,结果为:当温度为39.6℃,pH为7.0,转速为198r/min,接菌量为8%,初始加油量为2.9%时,菌株对石油降解率比优化之前提高了28.3%,达到89.4%。

高效氯氰菊酯降解菌CH7的分离鉴定及降解条件的优化

从农药厂活性污泥中,分离到一株能以高效氯氰菊酯为唯一碳源生长的细菌CH7。经生理生化试验和16S rD-NA分析,将菌株CH7鉴定为铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)。采用Box-behnken设计试验、响应面法(response surfacemethodology)优化菌株CH7的降解条件。在最优条件下(29.4°C,pH7.0,接种量0.15g/L),菌株CH7在12d内对100mg/L高效氯氰菊酯的降解率为90%。

氯霉素降解菌的驯化筛选及其降解条件

以污泥为原始菌源,氯霉素为唯一碳源,经过10代驯化,筛选出高效的氯霉素降解混合菌,进一步对其降解条件进行研究.结果表明,经过驯化的氯霉素降解菌耐受高浓度氯霉素,在底物浓度为200mg/L时,72h的降解率为99.69%;降解菌对溶氧的要求不高,静置培养72h,降解率为99.10%;0-35℃为其最佳培养温度,30℃下培养72h,降解率达到99.96%;在PH为7.0-9.0的范围内,降解菌降解效率均达到99%以上.

一株氯嘧磺隆高效降解菌分离鉴定及降解条件优化

采用富集培养方法从氯嘧磺隆生产单位排污口处污泥中分离得到一株能降解氯嘧磺隆细菌,命名为D310-5。通过对该菌株形态特征观察,生理生化特性和16S r DNA序列分析,将菌株D310-5鉴定为肠杆菌属(Enterobacter sp.)。采用响应面分析方法探究底物浓度、温度、p H和培养时间对菌株D310-5降解氯嘧磺隆影响,优化菌株D310-5对氯嘧磺隆降解条件。结果表明,菌株D310-5最佳降解条件为底物浓度101.57 mg·L-1,温度30.25℃,p H 6.63,培养时间5 d。在最佳条件下,菌株D310-5对氯嘧磺隆降解率为87.57%。

氯氰菊酯降解菌DCP016的分离鉴定及其降解条件优化

采用底物定向诱导和梯度驯化的方法从农药厂活性污泥中分离到一株氯氰菊酯降解菌DCP016。通过生理生化及16S rDNA分析,将菌株DCP016鉴定为蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)。建立响应曲面模型,得到氯氰菊酯降解的优化条件为:氯氰菊酯浓度30.58mg/L、培养温度31.80℃、培养基初始pH 6.29。在此优化条件下,蜡样芽孢杆菌DCP016对氯氰菊酯平均降解率为83.47%。

赤霉酸降解菌的筛选及其适宜降解条件的确定

[目的]筛选一株赤霉酸(GA3)降解菌并探讨其适宜的降解条件。[方法]利用仅含赤霉酸为唯一碳源的基础盐培养基,对前期驯化得到的对GA3具有较强耐受性的微生物进行筛选,获得了具有较强降解GA3能力的菌株G-6;采用单因素试验系统考察了不同因素对菌株G-6降解GA3效果的影响,确定了其适宜的降解条件。[结果]在培养时间为120 h、培养温度为30℃、初始pH为7.0、接种量(菌悬液OD600=1.000)为5.0%(V/V)、培养基中赤霉酸浓度为200 mg/L、摇床转速为140 r/min、250 ml锥形瓶培养基装量为40 ml的条件下,GA3降解率达到60.62%。[结论]为深入探讨GA3的生物降解途径提供了参考。