金蓉颗粒通过雌二醇/活性氧簇/核转录因子E2相关因子2通路抑制乳腺癌进程的机制研究

【目的】观察金蓉颗粒(原名消癖颗粒,由淫羊藿、肉苁蓉、郁金等组成)对MMTV-PyMT小鼠乳腺癌发生与转移的影响及对雌二醇(E2)/活性氧簇(ROS)/转录因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路的调控作用。【方法】选取MMTV-PyMT自发乳腺癌转基因小鼠模型,分为模型组(生理盐水灌胃)、金蓉颗粒组(0.5 mg/kg金蓉颗粒混悬液灌胃),共给药12周。给药结束后,观察2组小鼠原发肿瘤大小及肺转移情况,检测血清中E2、8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、总抗氧化能力(T-AOC)、ROS的水平,苏木素-伊红(HE)染色法观察乳腺肿瘤组织病理学改变,免疫组织化学法检测乳腺肿瘤组织中层黏连蛋白(Laminin)、Nrf2、血红素加氧酶1(HO-1)、NAD(P)H:醌氧化还原酶1(NQO1)蛋白表达水平,聚合酶链反应(PCR)法检测乳腺肿瘤组织中Nrf2、HO-1、NQO1 mRNA表达水平。【结果】与模型组比较,金蓉颗粒组小鼠乳腺肿瘤生长及肺转移被明显抑制,血清E2、ROS和8-OHdG水平明显降低,SOD、CAT、GSH-PX、T-AOC水平明显升高(均P<0.05),乳腺肿瘤组织中Laminin表达水平显著降低,Nrf2及下游NQO1、HO-1的蛋白和mRNA表达水平升高(均P<0.05)。【结论】金蓉颗粒可抑制小鼠乳腺癌生长及肺转移,其机制可能与激活E2/ROS/Nrf2通路有关。

自拟“消癖散结汤”对乳腺增生患者肿块情况、血清雌二醇(E2)及孕酮(P)的影响

目的:分析自拟"消癖散结汤"对乳腺增生患者肿块情况、血清雌二醇(E2)及孕酮(P)的影响。方法:随机纳入2019年3月—2020年3月于本院妇科门诊就诊的96例乳腺增生患者作为研究对象,实施奇偶数法分组模式分为对照组和实验组,各48例。对照组采取三苯氧胺进行治疗,实验组在此基础上结合自拟"消癖散结汤"进行治疗,分析对比两组临床疗效、血清雌二醇(E2)及孕酮(P)水平以及不良反应发生情况。结果:治疗前两组肿块总积分比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后两组肿块总积分均下降,且实验组肿块总积分明显低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗前两组血清雌二醇(E2)及孕酮(P)水平差异无统计学意义(P>0.05);治疗后两组血清雌激素水平均下降,孕酮水平均上升,且实验组雌激素、孕酮值下降、上升水平程度均高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);实验组不良反应总发生率显著低于对照组(P<0.05)。结论:自拟"消癖散结汤"对乳腺增生患者肿块情况、血清雌二醇(E2)及孕酮(P)具有积极影响,安全性较高,临床值得推广。

卵形鲳鲹促性腺激素β亚基的克隆鉴定及其受雌二醇的调控

促性腺激素(GtH,gonadotropin hormone)是垂体合成和分泌的一类重要糖蛋白激素,包括促卵泡生成素(Fsh,follicle stimulating hormone)和促黄体生成素(Lh,luteinizing hormone),在促进性腺发育和成熟过程中发挥重要作用。本研究成功克隆了卵形鲳鲹(Trachinotus ovatus)fshβ和lhβ基因的开放阅读框(ORF,open reading frame)序列,fshβORF长度为363 bp,lhβORF长度为447 bp。通过荧光定量PCR技术(qPCR,quantitative realtime PCR)检测,发现fshβ和lhβ基因在卵形鲳鲹的下丘脑-垂体-性腺轴(HPG,hypothalamus-pituitary-gonadal axis)显著表达,在垂体中的表达水平最高,其次是下丘脑和性腺。此外,通过体外实验评估17β-雌二醇(E2,17β-estradiol)对卵形鲳鲹垂体组织中fshβ和lhβ基因表达的影响。结果显示,10μmol/L E2处理6 h后,GtHβ亚基基因的表达被极显著抑制。最后,使用雌激素受体(ER,estrogen receptor)拮抗剂体外孵育卵形鲳鲹垂体组织,发现广谱性拮抗剂Fulvestrant、ERβ拮抗剂Cyclofenil和ERα拮抗剂MPP(MPP dihydrochloride)均能够消除E2对GtHβ亚基基因表达的抑制作用。综上所述,研究结果表明E2对卵形鲳鲹GtH的分泌具有负反馈调节作用,为卵形鲳鲹生殖调控机制提供了有价值的见解。

非繁殖季节中国美利奴羊血清E_2、P4、FSH、LH激素变化规律研究

为了在非繁殖季节判断绵羊的发情状况,试验以新疆高海拔地区中国美利奴羊为研究对象,采用酶联免疫测定(ELISA)法测定绵羊血清中雌二醇(E2)、孕酮(P4)、促卵泡素(FSH)、促黄体生成素(LH)的含量,研究激素诱导发情羊、发情症状不明显羊、不发情羊体内激素分泌规律的差异。结果表明:激素诱导发情羊的E2含量比不发情羊高,差异显著(P<0.05);但是在P4、FSH、LH水平上,激素诱导发情羊要低于不发情羊,差异不显著(P>0.05)。发情羊与发情不明显羊在4种激素含量上差异不显著(P>0.05),说明公羊试情存在一定缺陷,而通过测定E2含量判定绵羊发情状态将成为未来研究的重点。

类-Fenton体系对水中17β-雌二醇的光降解

以250W照明金属卤化物灯为光源研究了水中17β雌二醇(E2)在类Fenton体系中的光降解。结果表明,Fe(Ⅲ)/H2O2体系能有效地光降解E2。pH3～6范围内,E2光降解率及反应初始速率随酸度的增大而增大;H2O2初始浓度越大,E2降解率及反应初始速率越大;E2初始浓度越低,E2降解率越高,反应初始速率越低。

活血化瘀法对子宫内膜异位症模型大鼠E_2、P、VEGF的影响

目的:探讨活血化瘀法治疗子宫内膜异位症的作用机理。方法:采用大鼠自体子宫内膜移植建立实验性子宫内膜异位症模型,分别观察活血化瘀方药和达那唑对模型大鼠外周血清E2、P含量及VEGF在大鼠异位内膜组织中的表达的影响。结果:活血化瘀方药对上述指标均有不同的降调或抑制作用,与模型组比较有显著性差异(P<0.05),活血化瘀法高剂量组与达那唑相比无显著性差异(P>0.05)。结论:活血化瘀法具有调节内分泌及血管内皮细胞生长因子作用,能够有效抑制异位子宫内膜的种植。

巴美肉羊发情期外周血E_2和P_4浓度变化规律与排卵数关系研究

绵羊在发情周期中各生殖激素浓度变化与卵泡发育、成熟和排卵有着密切的关系。为了研究巴美肉羊血清生殖激素的动态变化及其与排卵数关系,试验采用电化学法,测定了12只成年母羊发情期血清中2种类固醇激素(E2和P4)的浓度水平,分析其动态变化规律,并用SAS 9.0的方差分析程序分析激素浓度与排卵数的关系。结果表明,两种激素在排单卵组和排双卵组绵羊间变化规律不同,E2在排单卵组表现为先下降后升高的变化趋势,在排双卵组表现为持续下降趋势;P4在排单卵组表现为持续上升的趋势,在排双卵组为先上升后下降的变化趋势。排单卵和排双卵组绵羊在各时间点的E2和P4激素浓度差异均不显著(P>0.05)。

生发灵对实验大鼠血清T、E2、T/E2调节及对毛发的影响

目的:证实生发灵对大鼠体内血清睾丸酮(T)、血清雌二醇(E2)的影响。方法:将60只大鼠分为空白组,阳性对照组,模型组,生发灵冲剂高、中、低剂量组6组,同时对大鼠进行脂溢性脱发造模与治疗给药,4周后统计其染色区脱毛数量,并检测血清睾丸酮(T)、血清雌二醇(E2)的含量。结果:模型大鼠存在明显的性激素水平失衡,中药生发灵与阳性对照组均可降低其升高的睾丸酮,而对其雌二醇的影响不明显,且中药组与阳性对照组均能减少大鼠脱毛数量,但各中药组间比较无差异。结论:中药生发灵可改善实验大鼠失衡的性激素水平,对脂溢性脱发具有较好的治疗作用。

血清E2、P及LIF在异位妊娠早期诊断中的作用

目的探讨血清白血病抑制因子(LIF)、雌二醇(E2)、孕酮(P)在异位妊娠早期诊断中的作用。方法采用微粒子酶免疫分析技术、酶免疫技术和放射免疫分析(RIA)分别检测异位妊娠(EP组)80例、先兆流产(TA组)105例,正常宫内早孕(NIUP组)130例血清E2、P及LIF含量。结果三组患者血清中E2、P、LIF在NIUP组最高,TA组次之,EP组最低,三组两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论血清E2、P、LIF均有助于鉴别正常妊娠与异位妊娠,可作为临床早期诊断异位妊娠的辅助指标。

雌二醇、CA125与先兆流产保胎效果的关联性分析

目的监测妊娠不同时期血清雌二醇(E_2)、糖类抗原125(CA125)水平与先兆流产效保胎效果的关联性。方法回顾性分析我院妇产科门诊2014年8月至2015年9月收治的128例妊娠孕妇的临床资料,其中78例孕妇出现先兆流产症状,给予保胎治疗,48例保胎成功(保胎成功组),30例保胎失败(保胎失败组)。另选取同期50例健康正常妊娠孕妇作为正常对照组。三组孕妇均于孕第5~6周、8~9周、11~12周监测血清E_2及CA125水平。结果孕第5~6周、8~9周、11~12周,正常对照组的血清E_2、CA125水平与保胎成功组比较,均无显著差异(P>0.05);但保胎失败组的血清E_2、CA125水平与保胎成功组及正常对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05),保胎失败组的血清CA125水平显著高于正常对照组及保胎成功组(P<0.05),保胎失败组的血清E_2水平显著低于正常对照组及保胎成功组(P<0.05);且保胎成功组及正常对照组的血清E_2水平随孕周时间的延长而逐渐增高。结论动态检测妊娠早期孕妇血清CA125、E_2水平可预测早期先兆流产患者的妊娠结局,并有助于判断先兆流产的保胎效果,对指导临床治疗具有重要意义。

卵泡液对不同大小牛腔前卵泡体外培养过程中E_2分泌的影响

Φ60～150μm牛腔前卵泡在有、无促性腺激素存在下，分别添加0、10%、15%、20%牛卵泡液（BFF）的McCoy＇s 5 a无血清系统体外培养15 d，测定其雌二醇（E2）分泌量。结果显示：各添加卵泡液组在培养3、6、9、12 d的E2分泌量均显著高于对照组（0组）（P〈0.01）。当培养液中有促性腺激素（FSH、LH）存在下，各添加卵泡液组的E2分泌量更高，其中添加10%牛卵泡液组中Φ〉100μm腔前卵泡在培养6 d时E2分泌量达最高，为48.96±11.54 pg/mL。表明培养液中添加一定比例牛卵泡液（BFF）可显著刺激体外培养腔前卵泡E2的分泌，促性腺激素存在下更加强了卵泡液对E2分泌的刺激作用。

口服普萘洛尔对婴幼儿血管瘤患者E_2的影响和临床疗效观察

目的：观察口服普萘洛尔治疗婴幼儿血管瘤（Infantile Hemangioma，IH）患者的疗效，分析普萘洛尔对雌二醇（Estradiol，E2）、血糖、血压、心率、血管瘤B超参数的影响，考察普萘洛尔治疗IH的可能机理。方法：收集2011年10月～2013年1月在新疆医科大学第一附属医院颌面肿瘤外科收治的IH增生期患儿46例，给予口服普萘洛尔治疗，比较治疗前后E2、血糖、心率、血压和B超的变化。结果：IH患儿治疗前男婴和女婴各个指标无显著差异（P〉0．05）。男婴：治疗前与治疗后相比，IH患儿血清的E2（35．9±10．1pg／mLVS．6．3±2．2pg／mL）、PSV（59．3±12．1cm／SVS．34．2±8．1cm／S）显著降低（P〈0．05），RI（0．6±0．1VS．0．9±0．2）显著升高（P〈0．05）；空腹血糖（5．3±1．2mm01／Lvs．5．2±1．3mm01／L）、心率（128±9次／minvs．125±8次／min）、收缩压（70±4mmHgVS．70±3mmHg）和舒张压（55±3mmHgVS．55±4mmHg）无显著变化（P〉0．05）；女婴：治疗前与治疗后相比，IH患儿血清的E2（36．7±12．8pg／mLVS．7．4±1．8pg／mL）、PSV（56．4±10．6cm／SVS．35．1±7．5cm／S）显著降低（P〈0．05），RI（O．6±O．2vs．0．8士0．3）显著升高（P〈0．05）、空腹血糖（5．2±0．9mmol／LVS．5．1±0．8mmol／L）、心率（126土3次／minVS．124±5次／min）、收缩压（70±5mmHgVS．70±6mmHg）和舒张压（55士5mmHgVS．55±6mmHg）无显著变化（P〉0．05）。患儿疗效评定I级4例（8．70％），II级10例（21．7％），III级23例（50．0％），IV级9例（19．6％）。结论：普萘洛尔治疗婴幼儿血管瘤安全、有效，对空腹血糖、心率和血压无显著影响。婴幼儿血管瘤E：水平降低，普萘洛尔治疗婴幼儿血管瘤的机理可能与间接降低E：水平有关。

男性肝病患者血清E_2 RIA

我们观察了50例男性原发性肝癌(PHC)及肝硬化病人雌二醇(E2)的含量变化，现报告如下。

肝癌患者血清T、E_2、PRL含量的变化

肝硬化患者血清睾酮(T)水平下降，雌二醇(E2)和垂体泌乳素(PRL)水平升高已有较多报道，但对肝癌患者血清内上述三种激素水平的变化则报道较少。本文对伴有肝硬化的原发性肝癌患者血清T、E2和PRL检测结果报告如下，并就三者与肝癌发生的关系加以讨论。

针刺对更年期脑缺血大鼠E_2水平及Bcl-2表达的影响

目的:研究针刺对更年期脑缺血大鼠E_2水平及Bcl-2表达的影响。方法:选用自然更年期雌性SD大鼠,采用右侧大脑中动脉阻塞(MCAO)模型建立不同时间点脑缺血动物模型,电针刺治疗后,用放免法检测血清E_2水平,免疫组化检测脑组织Bcl-2表达。结果:针刺可以提高不同时间点更年期脑缺血模型大鼠血清E_2水平,上调Bcl-2表达。结论:针刺可能通过提高更年期脑缺血模型大鼠血清E_2水平,影响Bcl-2表达。

男性Graves’病患者血清性激素与Th1/Th2细胞因子相关性研究

目的:观察男性Graves’病(GD)患者治疗前后血清性激素及干扰素γ(IFN-γ)、白介素-4(IL-4)的动态变化,探讨男性GD患者血清性激素与Th1/Th2细胞因子的相关性。方法:选取初发未治的男性Graves’病患者42例为治疗组,经抗甲状腺药物治疗12周后均临床缓解。治疗前后分别应用放免法(RIA)检测血清雌二醇(E2)、睾酮(T)、黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)水平,应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清干扰素γ(IFN-γ)、白介素-4(IL-4)水平。健康男性体检合格者40例作为正常对照组。结果:男性GD患者治疗前血清E2、T、LH、FSH水平均较正常对照组明显升高(P<0.05),治疗后均接近正常对照组。治疗前血清IL-4、IFN-γ水平较正常对照组均升高(P<0.05),治疗后IL-4水平下降,接近正常对照组,而IFN-γ水平仍较高。经多元逐步回归分析,血清E2水平是影响IL-4水平的独立因素,呈正相关;血清T水平是影响IFN-γ水平的独立因素,呈正相关;IL-4与IFN-γ水平是相互的独立因素,呈负相关。结论:初发未治的男性GD患者存在性激素水平的变化及Th1/Th2细胞因子失衡,性激素在男性Graves’病患者Th1/Th2平衡方面起着一定的作用。

卵泡液中LH E2 P与女性年龄的相关性分析

目的:通过检测不同年龄组不孕症患者卵泡液促黄体生成素(luteotropic hormone,LH)、雌二醇(Estradial,E2)、孕激素(Progesterone,P)水平,分析卵泡液LH、E2、P与女性年龄的相关性。方法:选择我院2017年7月至2018年6月期间收治的140例接受IVF-ET/ICSI助孕的患者作为研究对象,按照年龄分为A、B、C3个组,A组(<35岁,n=55),B组(35~39岁,n=55),C组(>39岁,n=30),利用ELISA检测取卵日卵泡液LH、E2、P水平,分析3组不孕症患者的一般资料和取卵日卵泡液LH、E2、P水平差异,比较不同年龄组间获卵数、受精率、可用胚胎率、优质胚胎率、临床妊娠率。结果:A组、B组、C组的一般资料中,BMI差异无统计学意义(P>0.05),但年龄、基础血清卵泡刺激素(bFSH)及窦卵泡(AFC)差异均有统计学意义(P均<0.05);A组、B组、C组的取卵日的卵泡液LH水平、E2水平差异均有统计学意义(P均<0.05),但3组取卵日的卵泡液P水平差异无统计学意义(P>0.05);经Spearman相关分析,取卵日的卵泡液LH水平与女性年龄呈正相关(r=0.335,P<0.05),E2水平与女性年龄呈负相关(r=-0.418,P<0.05),P水平与女性年龄无相关性(r=0.045,P=0.523);A组、B组、C组的获卵数、受精率、多PN受精率差异有统计学意义(P<0.05),但可用胚胎率、优质胚胎率、临床妊娠率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:卵泡液LH、E2水平与年龄相关;卵巢的储备功能与年龄、bFsh及AFC有关,35~39岁为卵巢储备功能开始下降阶段,且卵巢反应性(通过获卵数反映)亦随之下降,尤其是39岁以上的妇女,卵巢储备功能减退明显,卵巢反应性也出现急剧下降。

17-β-雌二醇对凝血酶诱导血管平滑肌细胞增生和c-fos、bcl-2蛋白表达影响

目的通过建立凝血酶(T)诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)增生模型,观察17-β-雌二醇(E_2)对 T 诱导的VSMC 增生的影响,并进一步观察其对 c-fos 蛋白和 bcl-2蛋白的表达有何作用,旨在认识 E_2作用的分子机制。方法以细胞计数法和流式细胞仪 DNA 含量测定,细胞周期分析的方法观察 T 及 E_2对 VSMC 增生和 DNA 合成的影响。免疫印迹法(Western blot)观察 T 及 E_2等各处理因素作用1小时及3天后,c-fos 蛋白和 bcl-2蛋白的变化情况。结果 10^(-9)～10^(-7)M 的E_2呈浓度依赖性地抑制2u/ml T 诱导的细胞增生和 DNA 合成作用(P<0.01)。各处理因素作用1小时后,T 能显著促进 c-fos蛋白的增加。各浓度的 E_2能显著抑制 T 的促 c-fos 蛋白增加作用,作用3天后,c-fos 蛋白含量各组差异无显著性。各处理因素作用1小时后,bcl-2蛋白无显著变化,作用3天后,T 能显著促进 bcl-2蛋白的增加。各浓度的 E_2能显著抑制这种增加。上述各项指标中,雌激素受体(ER)拮抗剂 tamoxifen(TAM)(10^(-6)M)能部分阻断10^(-7)M E_2的作用,差异有显著性。结论 E_2能抑制 T 诱导的 VSMC 增生,这可能与其抑制 c-fos 蛋白和 bcl-2蛋白表达有关,且该作用至少部分通过 ER 介导。

黄芪主要成分对TGF-β1诱导大鼠睾丸Leydig细胞系合成雌二醇的影响

目的探讨黄芪主要成分对TGF-β1诱导下大鼠睾丸Leydig细胞及该细胞合成雌二醇(E2)、P450芳香化酶(P450arom)的影响。方法将体外培养的Leydig细胞分为对照组、模型组(5 ng/mL TGF-β1造模)和中药干预3组,在造模后分别用终浓度为10和50 mg/L黄芪总黄酮、终浓度为10和50 mg/L黄芪总多糖、终浓度20和100 mg/L的黄芪总皂苷干预。48 h后进行细胞爬片,用ELISA检测细胞中E2、P450arom蛋白含量;Imagej-win64软件计数细胞;用SPSS 20.0、GraphPad Prism 6.0对数据进行统计分析。结果模型组Leydig细胞和对照组相比,形态异常,数量减少(P<0.01);明显抑制Leydig细胞合成E2和P450arom(P<0.05)。黄芪总黄酮、黄芪总皂苷和黄芪总多糖均能够改善TGF-β1诱导下Leydig细胞病变,细胞数量明显增多(P<0.01),三者均能缓解TGF-β1抑制细胞合成E2的作用,20 mg/L黄芪总皂苷的效果最显著。结论黄芪总皂苷是黄芪中减轻TGF-β1抑制睾丸Leydig细胞合成E2作用效果最佳的成分。

2型糖尿病男性患者血清睾酮、雌二醇、性激素结合蛋白变化

正常男性37例,T2DM男性46例,采用放射免疫法测定血清胰岛素、总T、总E2、SHBG浓度测定。结果男性T2DM患者较正常对照总T降低,总E2、SHBG升高。男性T2DM患者总T、总E2、SHBG与空腹、120分胰岛素无相关性。结论男性T2DM患者存在性激素分泌功能紊乱,其改变对并发症的发生发展起重要作用。