青黄散治疗髓系肿瘤的临床研究进展

髓系肿瘤(Myeloid neoplasms)是一组异质性疾病,肿瘤细胞起源于骨髓中具有多向分化潜能的造血干细胞,并出现克隆性增殖。从20世纪70年代中期开始,诸多经典中药方剂,临床运用效果明显,而青黄散作为代表,通过大量临床数据证实该方治疗髓系肿瘤有效,为古方中药的发掘与研究提供指引,然而如何将中医的研究成果科学化、全球化,是机遇也是挑战。

王树庆教授运用青黄散合健脾补肾方治疗骨髓增生异常综合征验案

王树庆教授认为骨髓增生异常综合征(MDS)的病机为邪毒内蕴,伏于骨髓,因毒致瘀,因毒致虚,最终血液生化异常,致髓枯不能化血,应以祛邪扶正为法,以解毒祛瘀为主,佐以健脾补肾,临床运用青黄散合健脾补肾方治疗MDS,效果良好。

青黄散灌胃对骨髓增生异常综合征小鼠骨髓细胞凋亡、周期的影响及机制

目的探讨青黄散灌胃对骨髓增生异常综合征(MDS)小鼠骨髓细胞凋亡、周期的影响及机制。方法用Tg(Vav1-NUP98/HOX D13)G2Apla/J转基因MDS小鼠模型进行取精扩繁,将40只模型小鼠随机分为模型组和青黄散低、中、高剂量组及阿扎胞苷组,每组8只,取8只C57BL/6J小鼠作为空白组。空白组、模型组给予生理盐水100μL灌胃,均每天1次;青黄散低、中、高剂量组分别给予青黄散36.4、72.8、145.6 mg/kg灌胃,均每天1次;阿扎胞苷组给予1 mg/kg阿扎胞苷注射液100μL于颈部皮下注射,3天1次。干预4周,处死小鼠,采集外周血,并提取骨髓细胞。检测各组血常规[白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)、血小板(PLT)],用流式细胞术检测骨髓细胞凋亡率、周期,用荧光定量PCR法检测骨髓细胞内DNA-甲基转移酶1(DNMT-1)、受体酪氨酸激酶(c-KIT)、GATA结合蛋白1(GATA-1)mRNA,用Western blotting法检测骨髓细胞内DNMT-1、c-KIT、GATA-1蛋白。结果与空白组比较,模型组WBC、RBC、HGB、PLT低(P均<0.05),说明建模成功;与模型组比较,青黄散低、中剂量组及阿扎胞苷组WBC、RBC、HGB、PLT高(P均<0.05);青黄散低、中、高剂量组及阿扎胞苷组WBC、RBC、HGB、PLT比较差异无统计学意义(P均>0.05)。与空白组比较,模型组骨髓细胞凋亡率低(P<0.05);与模型组比较,青黄散低、中、高剂量组及阿扎胞苷组骨髓细胞凋亡率高(P均<0.05)。与空白组比较,模型组骨髓细胞周期变化差异有统计学意义(P均<0.05);与模型组比较,青黄散低、中、高剂量组及阿扎胞苷组S期骨髓细胞少,G1期骨髓细胞多(P均<0.05)。与空白组比较,模型组DNMT-1、c-KIT、GATA-1 mRNA表达低(P均<0.05);与模型组比较,青黄散低、中、高剂量组及阿扎胞苷组DNMT-1、GATA-1 mRNA表达低(P均<0.05),青黄散低、中剂量组c-KIT mRNA表达高(P均<0.05)。与空白组比较,模型组DNMT-1、c-KIT、GATA-1蛋白表达低(P均<0.05);与模型组比较,青黄散低、中、高剂量组及阿扎胞苷组c-KIT蛋白表达低(P均<0.05),GATA-1蛋白表达高(P均<0.05),青黄散低、中、高剂量组DNMT-1蛋白表达低(P均<0.05)。结论青黄散灌胃可促进MDS小鼠骨髓细胞凋亡,阻滞其细胞周期,其作用机制可能与调控DNMT-1、c-KIT、GATA-1表达有关。

青黄散联合地西他滨治疗老年骨髓增生异常综合征的临床疗效观察

目的 评价口服砷剂青黄散与地西他滨治疗老年骨髓增生异常综合征(Myelodysplastic Syndrome, MDS)的临床疗效。方法 选取2016年1月—2020年6月期间中国中医科学院西苑医院收治的MDS患者54例,按随机数字表法分为青黄散组32例和地西他滨组22例。治疗4个疗程后,观察比较两组患者临床疗效、不良反应发生率以及总生存期。结果 疗效方面,青黄散组和地西他滨组的总缓解率与总体改善率分别为12.5%(4/32)、25.0%(8/32),地西他滨组的总缓解率与总体改善率分别为22.7%(5/22)、50.0%(11/22),两组的总缓解率与总体改善率比较,差异无统计学意义(P=0.461;P=0.083);但青黄散组的中位生存期(40个月)较地西他滨组(20个月)明显延长(P=0.037)。不良反应发生率方面,青黄散组未观察到明显的血液系统不良反应及治疗相关感染,地西他滨组≥3级血细胞减少的发生率为86.4%(19/22),≥3级感染的发生率为54.5%(12/22)。结论 与地西他滨比较,口服含砷中药青黄散能使老年MDS患者获得更长的生存期,不良反应发生率明显降低。对于不耐受地西他滨治疗的老年MDS患者,青黄散可作为推荐方案。

基于转录组测序揭示青黄散治疗骨髓增生异常综合征的作用机制

目的 研究青黄散治疗骨髓增生异常综合征(Myelodysplasticsyndrome, MDS)的潜在分子靶点及作用机制。方法 研究纳入15例MDS患者,在治疗前以及青黄散治疗6个月后提取骨髓样本,以转录组测序检测治疗前后骨髓单个核细胞基因的差异表达,并通过基因本体(GO)富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析对差异表达基因进行功能富集分析。利用Cytoscape 3.9.1软件构建差异表达基因蛋白质-蛋白质相互作用网络(PPI);为了验证体内结果,选取MDS细胞株MUTZ-1作为实验对象作体外实验,以青黄散主要有效成分硫化砷为干预手段,使用实时定量PCR验证测序结果。结果 转录组分析证实,与治疗前比较,经青黄散治疗6个月后MDS患者骨髓有核细胞有2841个差异表达基因,包括1892上调基因和949个下调基因,GO功能富集分析发现这些差异表达基因参与了组蛋白修饰这一与MDS高度相关的生物过程。KEGG分析发现,HIF-1、TNF-α及VEGF等信号通路可能是青黄散治疗MDS的潜在通路。根据GO富集分析结果,组蛋白修饰差异表达基因被用于构建PPI蛋白互作网络并进行核心基因的筛选,进一步体外验证实验发现,硫化砷干预MDS细胞株后EP300、HDAC7与SETD2较对照组显著上调,HDAC6显著下调,与测序结果一致。结论 组蛋白修饰是青黄散治疗MDS的重要作用机理,可能涉及EP300、HDAC6、HDAC7与SETD2等分子靶点。

青黄散治疗高危型骨髓增生异常综合征效应与机制研究进展

骨髓增生异常综合征(MDS)是一种克隆性骨髓造血干细胞疾病,其特点是无效和异常造血导致的外周血细胞减少,约1/3的患者转变为急性髓细胞性白血病(AML)。高危型MDS治疗效果差,生存期短,更容易转化为AML。青黄散/复方青黄散属于口服含砷中药制剂,多年来一直是中国中医科学院西苑医院治疗MDS的有效药物,青黄散/复方青黄散治疗高危MDS疗效确切,其疗效与血砷浓度相关,临床应用安全性高。青黄散/复方青黄散治疗高危MDS的效应机制主要集中在抑制细胞增殖、诱导凋亡、促进红细胞分化、调节异常DNA甲基化、调节细胞免疫、调控TP53/p VHL/HIF1A信号通路等方面。青黄散/复方青黄散疗效好、安全性高、口服方便、无需化疗、节约成本、居家服药、提高生活质量,是MDS治疗的理想药物。

青黄散加补肾健脾中药治疗骨髓增生异常综合征的临床观察

目的观察青黄散加补肾健脾中药治疗骨髓增生异常综合征(MDS)的临床疗效。方法55例MDS患者给予青黄散、补肾健睥汤药及雄性激素等治疗。结果55例MDS患者中,完全缓解11例(20.0%),总有效41例(74.5%)。根据FAB分型,RA/RAS型34例,完全缓解9例(26.5%),总有效28例(82.4%);RAEB型21例,完全缓解2例(9.5%),总有效13例(61.9%),两型间疗效比较差异无统计学意义。按国际预后积分系统(IPSS)评定标准,中危Ⅰ组36例,有效25例(其中完全缓解10例),无效11例。中危Ⅱ组7例,完全缓解1例,有效4例,无效2例。高危组6例,完全缓解0例,有效3例,无效3例。3组疗效比较差异无统计学意义。有效者41例,治疗后白细胞、血红蛋白和血小板计数均较治疗前升高(P<0.05);染色体异常组16例,有效11例(68.8%);染色体正常组33例,有效24例(72.7%);染色体异常与否间疗效比较,差异无统计学意义。结论化瘀补肾为主综合治疗MDS具有确切的临床疗效,疗效与FAB分型、IPSS积分及染色体异常与否无明显相关性。

含砷中药复方青黄散治疗骨髓增生异常综合征的克隆选择性与砷体内效应的相关性研究

目的探讨含砷中药复方青黄散治疗骨髓增生异常综合征(MDS)的克隆选择性与砷体内效应的相关性。方法对接受口服青黄散(每日雄黄0.16 g)治疗的MDS患者40例(治疗组)进行疗效评价,分析MDS患者口服青黄散后血砷浓度和线粒体膜电位(△Ψm),并与未服用青黄散或其他砷制剂的MDS患者(未治疗组)以及正常人(健康对照组)进行比较。结果治疗组总有效率为75.0%(30/40)。伴随正常克隆与+8异常克隆患者的疗效明显好于其他异常克隆类型(P<0.05)。治疗组全血和血浆砷浓度均明显高于未治疗组及健康对照组(P<0.05)。治疗组有效患者的全血砷浓度明显高于治疗失败者(P<0.05)。治疗组全血砷浓度明显高于血浆砷浓度(P<0.05)。治疗组正常核型和+8患者与其他异常克隆患者的血砷浓度差异无统计学意义(P>0.05)。治疗组线粒体△Ψm与未治疗组比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗组线粒体△Ψm与全血砷浓度没有相关性(P>0.05)。结论口服青黄散治疗MDS,砷被人体少量吸收,并进入细胞内发挥作用。MDS患者对青黄散的治疗反应与全血砷浓度具有相关性。青黄散治疗MDS的克隆选择性与全血砷浓度以及线粒体△Ψm变化没有相关性。

青黄散联合健脾补肾中药对骨髓增生异常综合征患者活化T细胞的影响

目的探讨青黄散联合健脾补肾中药对骨髓增生异常综合征(MDS)患者活化T细胞的影响。方法 24例MDS患者用青黄散联合健脾补肾中药治疗9个月前后,流式细胞仪检测外周血T细胞CD3+CD28+、CD3+CD28+CD4+CD8-、CD3+CD28+CD8+CD4-、CD3+CD25+、CD3+CD25+CD4+CD8-、CD3+CD25+CD8+CD4-、CD3+DR+、CD3+DR+CD4+CD8-、CD3+DR+CD8+CD4-的百分数与绝对值,分析有效组及无效组上述指标治疗前后的差异变化。结果有效组(13例)治疗后CD3+CD28+、CD3+CD28+CD4+CD8-、CD3+CD28+CD8+CD4-绝对值较治疗前明显下降(P<0.05),无效组(11例)此3项指标百分数也明显下降(P<0.05)。有效组治疗后CD3+CD25+、CD3+CD25+CD4+CD8-百分数与绝对值较治疗前明显下降(P<0.05),无效组此2项指标治疗前后比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论青黄散联合健脾补肾中药可通过降低MDS患者体内共刺激分子的表达引起T细胞第二信号缺失使T细胞处于失能状态,减少T细胞(特别是Th)细胞的活化,使MDS亢进的免疫状态得以抑制,避免正常造血细胞受到免疫攻击而致凋亡。

青黄散治疗骨髓增生异常综合征31例临床观察

目的:系统观察中药青黄散治疗骨髓增生异常综合征(MDS)的临床疗效。方法:采用随机对照方法。61例MDS患者随机分为治疗组(青黄散组)31例和对照组(维甲酸组)30例。3个月为1个疗程。结果:青黄散组总缓解率与总有效率分别为9.7%和74.1%,维甲酸组总缓解率与总有效率分别为0与46.7%,青黄散组疗效优于维甲酸组。青黄散毒副作用主要为皮肤色素沉着、角化过度及消化道症状。结论:中药青黄散治疗MDS有确切的临床疗效,能够明显改善红系造血,提高血红蛋白含量,提高白细胞数量,明显提高患者的生活质量,且患者耐受性好,对西药无效的患者仍然有效。

青黄散加解毒化瘀方治疗骨髓增生异常综合征疗效及对患者血清可溶性细胞间黏附分子-1、转化生长因子-β_(1)的影响

目的:探究青黄散加解毒化瘀方对毒瘀阻滞证骨髓增生异常综合征(MDS)的疗效及血清可溶性细胞间黏附分子(sICAM-1)、转化生长因子β_(1)(TGF-β_(1))水平的影响。方法:选取76例MDS患者作为研究对象,随机分为试验组和对照组,各38例,对照组予以西医基础治疗,试验组在对照组基础上联合青黄散加解毒化瘀方治疗。两组患者均于给药4个月后评估临床疗效、中医证候积分、血常规指标水平、血清学免疫因子水平,并记录两组患者不良反应发生率。结果:治疗后两组患者的主症及次症评分均低于治疗前,且试验组均低于对照组(P<0.05)。试验组临床疗效优于对照组(P<0.05)。两组不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,两组患者的血清sICAM-1水平均低于治疗前,且试验组低于对照组(P<0.05);两组治疗后TGF-β_(1)水平较治疗前升高,试验组高于对照组(P<0.05)。治疗后,两组PLT、Hb、WBC水平较治疗前升高,试验组PLT、Hb水平均高于对照组(P<0.05)。结论:青黄散加解毒化瘀方应用于毒瘀阻滞证MDS患者治疗中,有助于促进患者症状恢复,改善血常规指标水平,调节血清免疫因子水平,且安全性良好。

含砷中药青黄散对骨髓增生异常综合征患者线粒体DNA拷贝数的影响

目的探讨含砷中药青黄散治疗前后骨髓增生异常综合征(Myelodysplastic Syndromes,MDS)患者的线粒体DNA(Mitochondrial DNA,mtDNA)拷贝数的变化,并对其作用机理进行初步研究。方法收集2016年4月至2018年7月中国中医科学院西苑医院血液科门诊的MDS患者40例为治疗组,以青黄散为主联合补肾健脾方治疗6个月。以RT-PCR方法检测青黄散治疗前后MDS患者骨髓单个核细胞的mtDNA拷贝数,同时以9例健康体检者的外周血有核细胞mtDNA拷贝数为正常对照组;以试剂盒检测青黄散治疗前后MDS患者骨髓上清液中超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)、谷胱甘肽(Glutathione,GSH)和丙二醛(Malondialdehyde,MDA)的变化。结果与正常对照组比较,治疗组治疗前MDS患者的mtDNA拷贝数明显增高(P<0.05);治疗组经青黄散治疗后mtDNA拷贝数与治疗前比较明显减低(P<0.05)。治疗组MDS患者经青黄散治疗后MDA的表达增加与治疗前比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论含砷中药青黄散治疗MDS的机理之一是改变mtDNA的拷贝数,而这种拷贝数的改变可能与砷制剂引起的氧化应激有关。

含砷古方青黄散治疗恶性血液系统疾病

含砷古方青黄散用于急、慢性白血病及骨髓增生异常综合征等恶性血液系统疾病的探索性治疗50余年,取得了较好的阶段性疗效,在临床总结及机制研究方面也完成了部分工作。本文旨在通过对古方挖掘研究的过程总结,为青黄散的下一步研究提供依据及方向,也希望为中医药挖掘古方的研究提供参考。

青黄散治疗骨髓增生异常综合征DNA磷硫酰化探析

目的:研究硫化砷制剂青黄散对骨髓增生异常综合征(Myelodysplastic Syndromes,MDS)患者DNA双链结构的影响,硫元素是否可加入DNA骨架,是否有DNA结构的硫酰化修饰。方法:以持续服用青黄散6个月以上并有血液学改善的MDS患者骨髓DNA样本10例,以琼脂糖包埋,应用脉冲场凝胶电泳(PFGE)检测骨髓细胞DNA降解表型。利用BIO-RAD CHEF-DRⅢSystem脉冲电泳进行分析。结果:经过硫修饰后DNA构象发生变化,这种硫修饰结构对电泳过程阳极积累的Tris过酸衍生物敏感而遭到位点特异性攻击,引发DNA的双链切割反应出现DNA降解现象。电泳后标本DNA结构完好,在Tris缓冲液下未出现DNA降解现象。结论:青黄散治疗有效的患者骨髓细胞DNA骨架中没有磷硫酰化修饰现象,说明青黄散疗效机制不通过硫修饰系统。

青黄散治疗慢性粒细胞性白血病的临床和超微结构研究

为探讨青黄散治疗慢性粒细胞性白血病(慢粒)的疗效原理,我们采用单纯青黄散治疗18例慢粒,取得完全缓解11例,部分缓解6例,无效1例。总缓解率94.44%,对其中10例初治患者的治疗前、中、后其骨髓细胞进行了超微结构观察。结果发现在白细胞骤降时期幼稚细胞发生大量变性坏死,主要发生以核溶解、核固缩、核破碎及混合性为特征的变性坏死。观察表明:青黄散治疗慢粒的疗效与其能使慢粒白血病细胞变性坏死的药理作用有关,即通过核的变性,最终导致白血病细胞死亡。

骨髓增生异常综合征患者应用青黄散临床疗效及对QOL评分的影响

目的:探讨骨髓增生异常综合征患者应用青黄散临床疗效及对生活质量(QOL)评分的影响。方法:选取2016年1月-2018年1月本院收治的52例骨髓增生异常综合征患者,按随机数字表法分为对照组与研究组,各26例。对照组进行常规治疗,研究组进行青黄散治疗。比较两组治疗效果、外周血象、免疫功能及QOL评分。结果:研究组治疗总有效率高于对照组(χ^2=5.421,P<0.05);治疗前,两组血小板、血红蛋白与骨髓原始细胞百分比比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗后,研究组血小板、血红蛋白均高于对照组(P<0.05)。治疗后,两组骨髓原始细胞百分比比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,研究组免疫功能各相关指标均优于对照组(P<0.05);研究组各项QOL评分均高于对照组(P<0.05)。结论:对骨髓增生异常综合征患者进行青黄散治疗,可有效改善临床症状,改善免疫功能和外血象,有利于病情恢复,提高生活质量,具有非常高的临床应用价值,应进一步推广和应用。

青黄散为主治疗慢性粒细胞白血病存活10年以上6例报告

青黄散为主治疗慢性粒细胞白血病存活１０年以上６例报告王展翔周霭祥杨留杨经敏胡乃平王忠芬刘锋麻柔我科自７０年代末期开始以青黄散为主治疗慢性粒细胞白血病８０余例，近期疗效满意，其中可随访６例存活１０ａ以上，现报告如下。作者单位：中国中医研究院西苑医院（１...

仿生条件下青黄散中可溶性砷含量变化的研究

目的测定不同比例(9∶1,8∶2,7∶3)的青黄散在仿生条件下水溶性砷含量的动态变化,为后续青黄散的深入研究提供理论基础。方法建立人工胃液、人工肠液的仿生条件,采用原子荧光吸收法,测定不同比例的青黄散水溶性砷的质量浓度变化。结果随着时间的延长,水溶性砷的质量浓度逐渐上升,但在后期会有一定的下降,相同比例的青黄散在人工胃液中的水溶性砷含量比人工肠液中砷含量高;7∶3的青黄散水溶性砷质量浓度相对较高。结论可溶性砷含量大小与青黄散中雄黄的含量成正比。